成人型多囊肾病儿童期发病机理初探

本文利用α-珠蛋白基因3-HVR探针对一个存在儿童期发病的成人型囊肾病(adult polycystic kidney disease,APKD)家系进行研究,发现该家系中APKD的发生是由于AP-KD1基因突变所致。但是APKD1基因突变本身并不足以导致该病的早发。结果提示APKD在儿童期的早发可能是其它遗传因素或环境因素共同作用的结果,或是基因组印记对APKD突变基因表达的修饰作用所致。     

改良二温式PCR法SM7微小卫星标记快速多态分析对多囊肾病家系的基因诊断

常染色体显性遗传多囊肾病（ＡＤＰＫＤ）是终末期肾衰的主要原因,发病率高达１／１０００［１］。其基因突变定位在第１６号染色体短臂１区３带的ＰＫＤ１位点［２］,后来发现ＡＤＰＫＤ存在遗传异质性,定位了ＰＫＤ２、ＰＫＤ３位点［３］。国际上常用的ＰＫＤ１位点相邻的微小卫星体ＤＮＡＳＭ７为遗传标记［４］。本研究采用改良二温式ＰＣＲ扩增法结合聚丙烯酰胺凝胶电泳与银染色对１０个ＡＤＰＫＤ家系成员进行基因连锁分析,结果表明这是一种快速、简便、有效的ＡＤＰＫＤＩ基因诊断方法。介绍如下。１　材料和方法１．１　染色体…     

改良二温式PCR法快速SM7微卫星标志多态分析对多囊肾病的诊断

成人型多囊肾病（ＡＰＫＤ）是一种常染色体显性遗传病,其基因突变定位在第１６染色体短臂１区３带的ＰＫＤ１位点［１］,后来发现ＡＰＫＤ存在遗传异质性,定位了ＰＫＤ２、ＰＫＤ３位点［２、３］。国际上常用的ＰＫＤ１位点相邻的微小卫星体 ＤＮＡ ＳＭ７为遗传标记本研究采用改良二温式ＰＣＲ扩增法结合聚丙烯酰胺凝胶电泳与银染色对１０个ＡＤＰＫＤ家系成员进行基因连锁分析［５、６、］,并证实是有效的ＡＰ ＫＤ基因诊断方法。１材料和方法１．１染色体ＤＮＡ分离纯化：取静脉血１０ｍｌ,ＥＤＴＡ（１ｍｐ／ｍｌ）抗凝,分离白…     

应用PCR技术进行常染色体显性遗传多囊肾病家系的基因诊断

目的：用ＰＣＲ方法对中国的常染色体显性遗传多囊肾病（ＡＤＰＫＤ）家系进行基因诊断。方法：提取基因组ＤＮＡ，用ＰＣＲ方法扩增与ＰＫＤ１位点连锁的高度多态性的微小卫星体ＤＮＡ（ＳＭ７，ＡＣ２．５，ＳＭ６，ＫＧ８）为遗传标记，进行家系分析。对２２个ＡＤＰＫＤ家系的１５６个成员（包括６８个患者）找出染色体上与疾病连锁的单体型，进行了连锁分析。结果：２１个被测家系提供了基因诊断信息；另一个家系显示重组或不连锁。结论：能够采用ＰＣＲ方法对中国的ＡＤＰＫＤ家系进行基因诊断。     

3‘HVR与24—1探针在成人型多囊肾病基因诊断中的应用

应用ＰＫＤ１两侧探针（３’ＨＶＲ和２４－１），采用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交方法，通过ＲＦＬＰ连锁分析，对７个成人型多囊肾病家系共４１个成员进行了基因单体型分析。１６个ＡＰＫＤ患者的ＲＦＬＰ单体型被证明与ＰＫＤ１基因相连锁，发现２个重组体，并检测出６个症状前个体。结果证明，ＡＰＫＤ家系成员的ＰＫＤ１基因与３’ＨＶＲ之间存在着紧密连锁关系，进一步肯定了３’ＨＶＲ探针同样可用于我国成人型多囊肾病患者的症     

成人多囊肾PCR─核苷酸重复序列的多态分析

成人多囊肾ＰＣＲ─核苷酸重复序列的多态分析温州医学院附属一院潘景业，徐玉兰，俞康，吴建波，沈志坚，胡晓霞成人型多囊肾病（Ａｄｕｌｔｐｏｌｙｃｙｓｔｉｃｋｉｄｎｅｙｄｉｓｅａｓｅ，ＡＰＫＤ）是一种常染色体显性遗传病。发病率高达１／１０００［１］。主要特...     

p42／p44^MAPK和cyclin D1蛋白在霍奇金病中的表达及其相互关系

利用ＳＰ免疫组织化学方法检测了４０例不同类型霍奇金病９ＨＤ）ＲＨ／Ｓ细胞及１３例反应性增生淋巴结（ＲＨ）的ｐ４２／ｐ４４＾ＭＡＰＫ和ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１蛋白的表达。结果显示；ｐ４２／ｐ４４＾ＭＡＰＫ及ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１蛋白在ＨＤ之ＲＳ／Ｈ细胞中均呈过度表达，且两者阳性率呈明显的正相关，提示ＭＡＰＫ级联信号转导在ＨＤ发生中起重要作用，并通过诱导ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１蛋白高表达使ＲＳ／Ｈ细胞持续增殖及演进。     

nm23基因在涎腺腺样囊性癌中的表达及其与肺转移的关系

为探讨肿瘤转移抑制基因ｎｍ２３与涎腺腺样囊性癌（ａｄｅｎｏｉｄｃｙｓｔｉｃｃａｒｃｉｎｏｍａ，ＡＣＣ）的关系，应用ＬＳＡＢ免疫组化染色方法，研究ｎｍ２３表达产物二磷酸核苷激酶（ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｄｉｐｈｏｓｐｈａｔｅｋｉｎａｓｅ，ＮＤＰＫ）在ＡＣＣ中的表达。结果：ＮＤＰＫ／ｎｍ２３在ＡＣＣ中有较高表达，阳性率为６４．０％（１６／２５）；其中，有肺转移者阳性率为１２．５％（１／８），无转移者阳性率为８８．２（１５／１７），差异有极显著性（Ｐ＜０．０１）；ＮＤＰＫ表达与临床分期有关，分期越高，阳性率越低，差异有显著性（Ｐ＜０．０５），与病理分型差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。结论：ｎｍ基因在人ＡＣＣ肺转移过程中起到抑制转移的作用，可作为临床预测ＡＣＣ患者转移和预后的指标。     

应用微小卫星体DNA多态性进行成人型多囊肾病的基因诊断

基因诊断是控制成人型多囊肾病（ＡＰＫＤ）的有效措施，作者利用ＳＭ＿７（一种在１６号染色体上与成人型多囊肾病基因紧密连锁的微小卫星体ＤＮＡ），根据其聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增片段长度多态性，结合聚丙烯酰胺凝胶电泳及Ａｇ￣＋染色方法，进行了１４个ＡＰＫＤ家系１０１名个体染色体ＤＮＡ的家系基因连锁分析，其中８个家系得到了明确结果，ＰＣＲ扩增片断条带清晰，ＡＰＫＤ家系中患者致病基因连锁关系自确。对结果不明确的家系分析了其可能原因。本方法是一种快速、简单，灵敏的非同位素ＡＰＫＤ基因诊断方法。     

6例成年型多囊肾的遗传研究

成年型多囊肾（ａｄｕｌｔｐｏｌｙｃｙｓｔｉｃｋｉｄｎｅｙｄｉｓｅａｓｅ，ＡＰＫＤ），是一种较为常见的肾脏系统异常疾病，它的发病率较高，人群中发病率约１／１０００［１］。在美国估计有４０００００患者。成年型多囊肾是一种潜在进行性疾病，其起病隐袭，早期无...     

三个Rb基因突变嵌合体家系分子遗传学分析

三个Ｒｂ基因突变嵌合体家系分子遗传学分析黄倩，ＴｈａｄｄｅｕｓＰ．Ｄｒｙｊａ，ＤａｖｉｄＷ．ｙａｎｄｅｌ．华西医科大学第一临床医学院眼科。中华眼底病杂志１９９６；１２（１）∶３７目的：遗传型ＲＢ是一种单基因疾病，由定位在１３ｑ１４的Ｒｂ基因突变所致。...     

P53,P21ras,PCNA,c—erbB—2,nm23／NDPK在胃癌,大肠癌中表达的比较研究

目的：对胃肠癌Ｐ５３、Ｐ２１ｒａｓ、ｃ－ｅｒｂＢ－２、ｎｍ２３／ＮＤＰＫ，ＰＣＮＡ过表达进行对比分析，探讨胃肠癌中多种基因单独、共同表达及肿瘤发生、发展的关系。方法：采用免疫组织化学Ｓ－Ｐ法，同时检测５５例胃癌和６０例大肠癌中Ｐ５３、Ｐ２１ｒａｓ、ｃ－ｅｒｂＢ－２、ｎｍ２３／ＮＤＰＫ、ＰＣＮＡ的表达。结果：Ｐ５３、Ｐ２１ｒａｓ、ｃ－ｅｒｂＢ－２、ＰＣＮＡ过表达及ｎｍ２３／ＮＤＰＫ低表达与胃肠癌浸润     

吗啡长时程作用对SH-SY5Y细胞cAMP系统及c-Fos磷酸化的影响

目的　探讨吗啡长时作用下分化的人成神经瘤ＳＨＳＹ５Ｙ细胞中ｃＡＭＰ系统变化以及ＰＫＡ对转录因子ｃＦｏｓ的磷酸化调节。方法　采用蛋白竞争结合法、酶活性测定法及同位素掺入法分别观察ｃＡＭＰ、ＰＫＡ 及ｃＦｏｓ 的变化。结果　（１） １００μｍ ｏｌ／Ｌ吗啡作用２ ｍ ｉｎ～３６ ｈ 可使ＳＨＳＹ５Ｙ细胞ｃＡＭＰ水平呈双相变化：短时作用下ｃＡＭＰ水平降低,随着吗啡作用时间的延长,ｃＡＭＰ水平逐渐回升,至３６ ｈ 时明显高于对照,这时加入１００ μｍ ｏｌ／Ｌ纳洛酮可诱发ｃＡＭＰ水平的反弹性超高现象。表明吗啡作用３６ ｈ 可使分化的ＳＨＳＹ５Ｙ细胞产生类吗啡依赖样变化;（２） 吗啡长时作用下,胞质可溶相ＰＫＡ活性也呈双相变化,而膜相ＰＫＡ 活性未见明显变化;（３）吗啡作用３６ ｈ 时,细胞ｃＦｏｓ磷酸化水平显著降低,ＰＫＡ抑制剂可抑制此作用;（４）纳洛酮可抑制上述ＰＫＡ 活性及ｃＦｏｓ 磷酸化水平的改变。结论　ＳＨＳＹ５Ｙ 细胞ｃＡＭＰＰＫＡ 系统的上调可能与吗啡依赖的形成有关,而且在吗啡依赖样细胞中ＰＫＡ可能通过磷酸酶而使细胞ｃＦｏｓ 发生去磷酸化,从而激活某些基因的转录,这可能是吗啡依赖时细胞产生适应性变化的重要机     

丝裂素活化蛋白激酶在大鼠心脏缺血预处理中的作用

目的 探讨丝裂素活化蛋白激酶家系（ＭＡＰＫｓ）在大鼠心脏缺血预处理（ＩＰＣ）保护中的作用。方法 在离体灌注的ＳＤ大鼠心脏缺血／再灌注（Ｉ／Ｒ）模型上，观察ＩＣＰ对于Ｉ／Ｒ后损伤的影响，并观察ＭＡＰＫｓ中三种激酶（细胞外信号调节激酶（ＥＲＫｓ）、蛋白激酶Ｐ３８（Ｐ３８）、应激活化蛋白激酶（ＳＡＰＫ））活性的变化及其佤保护作用的关系。结果 ＩＰＣ明显改善大鼠Ｉ／Ｒ后的心脏功能，减少Ｉ／Ｒ造成的心肌肌酸     

转移力不同的肺癌克隆细胞中nm23—H1基因产物NDPK的表达

目的 比较转移抑制基因ｎｍ２３－Ｈ１表达产物核苷酸二磷酸激酶（ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ ｄｉｐｈｓｏｐｈａｔｅ ｋｉｎａｓｅ,ＮＤＰＫ）在转移力不同的肺癌克隆株中的表达。方法 通过单细胞克隆技术及裸鼠接种筛选出高转移及低转移的人肺巨细胞克隆细胞株及高思考多的人肺腺癌克隆细胞株,用ＬＳＡＢ免疫组化法检测ｎｍ２３－Ｈ１基因产物ＮＤＰＫ的表达。结果 ＮＤＰＫ在高转移及低转移的人肺巨细胞癌克隆细胞移植瘤及转移     

细胞外信号调节激酶与血管平滑肌细胞的增生、肥厚

哺乳动物细胞丝裂原活化的蛋白激酶家族（ｍｉｔｏｇｅｎ－ａｃｔｉｖａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅ／ＭＡＰＫ）至少包括细胞外信号调节激酶（ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｓｉｇｎａｌ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄｋｉｎａｓｅ／ＥＲＫ）、ｃ－ｊｕｎＮ末端蛋白激酶（ｃ－ｊｕｎＮ－ｔｅｒｍｉｎａｌｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅ／ＪＮＫ）和ｐ３８三个亚族［１］。ＥＲＫ是最主要的ＭＡＰＫ,也是研究得最透彻的一部分。活化的ＥＲＫ有两种形式：ＥＲＫ１（ｐ４２ＭＡＰＫ）和ＥＲＫ２（ｐ４４ＭＡＰＫ）,能催化激活蛋白－１（ＡＰ－１）等…     

异质性成人型多囊肾基因定位研究

目的：对国内首次发现的异质性成人型多囊肾家系进行基因定位的研究。方法：采用家系分析、核型分析、聚合酶链－限制性片段长度多态Ｒ，连锁分析和Ｌｏｄ Ｓｃｏｒｅ值计算等分子生物学及细胞生物学的技术和方法。结果：排除了Ｄ２Ｓ４４、ＡｐｏＢ、Ｄ１０Ｓ２８，Ｄ１７Ｓ２５４位点上不存在异质性ＡＰＫＤ的致病基因。结论：此结果为进一步深入研究此基因提供了有价值的资料。     

nm23在子宫体癌中表达的研究

转移抑制基因ｎｍ２３表达产物为二磷酸核苷激酶（ｎｕ－ｃｌｅｏｓｉｄｅｄｉｐｈｏｓｐｈａｔｅｋｉｎａｓｅ，ＮＤＰＫ）。本文研究ｎｍ２３／ＮＤＰＫ在子宫体癌中的表达及与临床病理的关系。１　材料与方法１．１　临床资料本院１９９０～１９９５年手术治疗的子宫体...     

多巴胺自身受体通过抑制依赖cAMP的磷酸化调控TH活性

应用ＨＰＬＣ－ＥＣＤ法测定大鼠纹状体突触体ＴＨ的活性，研究ＤＡ自身受体介导的ＤＡ生物合成负反馈调控的机理。研究发现，ＡＣ激活剂ＦＳＫ和ＰＫＡ激活剂ｄｂｃＡＭＰ均以浓度依赖的方式激活突触体ＴＨ的活性，增加ｌ－ｄｐｏａ的生成。ＤＡ自身受体激动剂ＬＹ１７１５５５能抑制ＦＳＫ对ＴＨ的激活效应，但不影响ｄｂｃＡＭＰ对ＴＨ的激活。实验结果表明，ＤＡ自身受体介导的负反馈调控的机理是通过抑制依赖ｃＡＭＰ的ＰＫＡ对ＴＨ的磷酸化激活，其作用环节在于抑制ＡＣ，而不是对ＰＫＡ的直接抑制。     

一氧化氮及一氧化碳对碱性成纤维细胞生长因子促血管平滑肌细胞增殖作用的影响

目的：研究一氧化氮（ＮＯ） 及一氧化碳（ＣＯ） 对碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃ ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ,ｂＦＧＦ） 促平滑肌细胞（ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈ ｍｕｓｃｌｅ ｃｅｌｌｓ, ＶＳＭＣ）增殖作用的影响及其机制。方法：以３ＨＴｄＲ参入法测定平滑肌细胞增殖程度,放射活性法测定ＶＳＭＣ内蛋白磷酸化程度、蛋白激酶Ｃ（ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ Ｃ,ＰＫＣ） 及丝裂素活化蛋白激酶（ｍｉｔｏｇｅｎａｃｔｉｖａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ, ＭＡＰＫ）活性。结果：孵育２４ ｈ 后,ｂＦＧＦ刺激的ＶＳＭＣ增殖较对照组增加１．１ 倍（Ｐ＜ ０．０１）,细胞内蛋白磷酸化程度增加３８．２％ （Ｐ＜ ０．０１）,ＰＫＣ 及ＭＡＰＫ 活性分别增加１．５ 和２ ．５倍（ Ｐ＜ ０．０１）;ＣＯ 前体ｈｅｍｅＬｌｙｓｉｎａｔｅ（ＨＬＬｙｓ） 及ＮＯ 前体ＬＡｒｇｉｎｉｎｅ（ ＬＡｒｇ） 对静止期ＶＳＭＣ 生长无显著影响,亦未引起细胞内蛋白磷酸化、ＰＫＣ及ＭＡＰＫ 活性发生显著改变;５、１０ 、２０ μｍｏｌ·Ｌ－１ ＨＬＬｙｓ 使ｂＦＧＦ刺激的ＶＳＭＣ增殖分别减少４３．４ ％ 、４６．６％ 和４７ ．６％