颐脑解郁方对脑出血后抑郁大鼠脑内bFGF、GFAP表达的影响

目的观察脑出血后抑郁模型大鼠脑内碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,研究补肾调气中药颐脑解郁方的抗脑出血后抑郁的机理。方法运用中药颐脑解郁方干预脑出血后抑郁大鼠模型,灌胃给药,采用免疫组织化学方法观察脑内bFGF、GFAP的表达变化。结果脑出血后抑郁模型bFGF的表达下降,GFAP表达上升。颐脑解郁方、盐酸氟西汀能增加脑出血后抑郁模型大鼠海马CA3区、扣带皮质bFGF的表达,减少海马CA3区、扣带皮质GFAP的表达。结论通过调节脑内bFGF、GFAP的表达,中药颐脑解郁方可能存在促进神经元的修复与再生作用,从而改善抑郁症状,达到治疗目的。     

水通道蛋白1、4在培养大鼠星形胶质细胞、BT325细胞及人脑胶质瘤组织中的表达

目的 水通道蛋白作为细胞膜特异性水转运蛋白在脑内分布广泛,参与脑内水平衡调节,与脑肿瘤、脑创伤等多种疾病导致的脑水肿有关.本实验主要研究水通道蛋白1、4在培养大鼠星形胶质细胞、人多形性胶质母细胞瘤系BT325细胞及人脑胶质瘤组织中的表达情况.方法 应用胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫细胞化学染色鉴定培养大鼠星形胶质细胞及BT325细胞.应用反转录PCR法检测GFAP、AQP1及AQP4在不同组织细胞中的表达.结果 实验中培养大鼠星形胶质细胞及BT325细胞GFAP免疫细胞化学染色阳性.体外培养大鼠星形胶质细胞、人胶质母细胞瘤组织及对照组标本均有GFAP表达,同时也有AQP1及AQP4表达.BT325细胞只有GFAP表达,无AQP1及AQP4表达.结论 AQP1、4在培养大鼠星形胶质细胞及胶质瘤组织中均有表达,可能对脑功能的维持及肿瘤性脑水肿的发生、消散有重要影响.     

促红细胞生成素对脑出血大鼠血肿周围胶质原纤维酸性蛋白表达的影响

目的探讨促红细胞生成素(EPO)对大鼠脑出血后脑水肿和胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响。方法将60只SD大鼠随机分为EPO组、对照组和假手术组。EPO组及对照组用注射胶原酶及肝素的方法制作SD大鼠苍白球脑出血模型,EPO组向腹腔内注射EPO,治疗剂量为3000U/(kg.d),对照组不注射药物。采用干湿比重法测定各组脑含水量,应用免疫组织化学方法检测各组脑组织GFAP的表达与变化。结果对照组和EPO组在脑出血后出现脑含水量的增高,至第3天达高峰,随后逐渐减少,对照组含水量高于EPO组(P<0.01或0.05);对照组和EPO组在出血后第1天即可见出血灶周围GFAP的高表达,至第3天达高峰,随后逐渐下降,至第7天时仍高于假手术组,对照组GFAP的表达高于EPO组(P<0.01);血肿周围GFAP的表达水平与水肿体积呈正相关(r=0.861,P<0.01)。结论 EPO可能通过抑制胶质细胞足突上GFAP的表达减轻脑出血后的脑水肿。     

黄芪注射液对大鼠脑出血灶周围区内胶质细胞纤维酸性蛋白表达的影响

目的:为了探讨黄芪对脑出血后星形胶质细胞反应的影响. 方法:大鼠纹状体内注入胶原酶造模,采用免疫组织化学ABC法观察黄芪治疗组和生理盐水对照组出血区胶质细胞纤维酸性蛋白(GFAP)在出血后不同时间点的表达. 结果:脑出血后12 h出血灶周围区GFAP免疫阳性反应很强(398±6)/mm2,黄芪可使GFAP免疫阳性反应减轻[(368±3)/mm2, P<0.05];至脑出血后72 h GFAP表达减弱(342±5)/mm2,黄芪可使其增强[(352±4)/mm2, P<0.05]. 结论:黄芪对脑出血后星形胶质细胞的调节作用可能与脑出血损伤后神经功能的恢复有关.     

大鼠脑出血灶周围细胞凋亡与胶质纤维酸性蛋白的表达

目的：观察大鼠实验性脑出血后神经细胞的凋亡及胶质纤维酸性蛋白（glial fibfillary acidic protein,GFAP）的表达。方法：将成年SD大鼠随机分为正常组、假手术组和脑出血组。脑出血组大鼠通过立体定向术向脑内注入自体动脉血制成脑尾壳核出血模型,并按不同的再喂养时间（1、3、7、14及30d）分为5个亚组。采用Hoechst和免疫组织化学染色分别观察各组大鼠出血灶周边区神经细胞凋亡和GFAP的表达。结果：与正常组和假手术组相比,脑出血组大鼠的细胞凋亡数显著增高（1-30d时P〈0．05）,并在3d时达高峰;脑出血1dGFAP表达开始增加,7d达高峰,以后逐渐下降,但30d时仍明显高于正常组和假手术组。结论：脑出血可诱导神经细胞凋亡,同时也促进出血灶周边区星形胶质细胞增生,这可能是脑出血后神经组织重塑的重要方式。     

颐脑解郁方对脑卒中后抑郁状态模型大鼠脑内GFAP、BDNF、bFGF的影响

目的研究颐脑解郁方对脑卒中后抑郁模型大鼠脑内胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)、脑源性神经营养因子(BDNF)及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响.方法采用去脑皮层血管结合孤养法及慢性应激造成脑卒中后抑郁大鼠模型,灌胃给药,取脑,进行免疫组化测试.结果颐脑解郁方能够明显增强模型大鼠脑皮层及海马内的GFAP、BDNF及bFGF的表达.结论颐脑解郁方通过增强模型大鼠脑内GFAP、BDNF及bFGF的表达,促进5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)的功能,从而改善抑郁症状.     

硫酸软骨素酶ABC对大鼠脊髓损伤后硫酸软骨素蛋白多糖与胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的探讨硫酸软骨素酶ABC对严重脊髓损伤(SCI)大鼠硫酸软骨素蛋白多糖(CSPGs)及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响。方法制作大鼠脊髓横断伤模型,60只大鼠随机分为对照组10只、损伤组25只和治疗组25只。治疗组给予硫酸软骨素酶ABC髓鞘浸润治疗。用免疫荧光组织化学观察脊髓CSPGs的表达;用免疫荧光组织化学及Western-blot方法观察脊髓GFAP的表达。结果 SCI后星形胶质细胞明显活化增殖,CSPGs和GFAP的表达明显增加(P<0.05);治疗组脊髓CSPGs和GFAP的表达均较损伤组减少,差别均有统计学意义(P<0.05)。结论硫酸软骨素酶ABC能够裂解CSPGs,改善SCI区的微环境,改善GFAP蛋白的表达,是修复SCI,促进神经再生的机制之一。     

成年大鼠缺氧性脑损伤后亚临床发作及胶质原纤维酸性蛋白的表达

目的:探讨缺氧性脑损伤后亚临床癫痫发作及其与胶质原纤维酸性蛋白的关系.方法:成年雄性SD大鼠,随机分为对照组与缺氧组,以8%氧氮混合气体缺氧,通过监测大鼠脑电活动,又将缺氧大鼠分成亚临床发作组与非亚临床发作组、分别用Nissle染色、免疫组织化学和免疫蛋白印迹等技术观察皮层、海马的神经病理学改变以及检测海马组织胶质原纤维酸性蛋白(Glial fibrillary acidic protein,GFAP)表达.结果:大鼠缺氧损伤后部分大鼠出现尖波、尖慢波和棘波,痫样放电的发生率为19.67%.较非亚临床发作组,亚临床发作组海马CA1、CA3区、颞叶皮质神经元脱失明显(P＜0.05).亚临床发作组GFAP表达明显增强,以海马为著,与非亚临床发作组比较差异有显著性(P＜0.05).结论:成年大鼠缺氧性脑损害后可出现痫样放电,并与脑内GFAP表达增加和神经元脱失有关.     

胰岛素对拟老年痴呆大鼠脑内GFAP的影响

目的 探讨胰岛素对拟老年痴呆(AD)大鼠学习记忆能力及脑内胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的影响.方法 大鼠海马背侧微量注射甲基软海绵酸(大田酸),胰岛素侧脑室注射;水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力;免疫组化观察大鼠脑内GFAP的表达.结果 与对照组比较,模型组大鼠学习记忆能力下降,GFAP表达增多;与模型组相比,胰岛素组大鼠学习记忆能力明显提高,GFAP表达减少.结论 胰岛素提高拟AD大鼠的学习记忆能力可能与其促进中枢神经系统生长发育,抑制GSK-3β和OA对tau蛋白的磷酸化作用,以及改善星形胶质细胞的功能有关.     

微创血肿清除术对脑出血患者血清胶质纤维酸性蛋白的影响

目的探讨微创血肿清除术对脑出血患者血清胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的影响。方法采用酶联免疫吸附法测定脑出血微创术患者74例、脑出血非手术患者80例发病后1（手术组术前）、3、7、14?d血清胶质纤维酸性蛋白含量,取60名健康查体者作为正常对照组,分析微创术对脑出血患者GFAP水平动态变化的影响。结果脑出血患者发病后各时间点血浆GFAP水平显著高于正常对照组(P均＜0.001), 手术组在第7、14天显著低于非手术组但仍明显高于对照组(P均＜0.001);两组脑出血患者第1、3、7、14天血清GFAP含量均与当天神经功能缺损评分（NDS）成正相关。结论微创术后血清GFAP 含量显著降低,可作为评价高血压性脑出血微创术治疗效果的生物学指标。     

针刺任脉和督脉对脑缺血大鼠海马星形胶质细胞的影响

目的：研究针刺任脉和督脉经穴对局灶性脑缺血大鼠缺血海马星形胶质细胞的调节作用。方法：100只成年健康雄性wistar大鼠，随机分为假手术（sham）组、模型组、针刺督脉组及针刺任脉和督脉组，sham组10只，其余3组又分别随机分为7d组、14d组和28d组3个亚组，每亚组10只。Wistar大鼠以线栓法制作大鼠大脑中动脉栓塞（MCAO）模型。通过免疫荧光双标法研究各组胶质纤维酸性蛋白（GFAP）阳性细胞和胶质纤维酸性蛋白／神经元特异性烯醇化酶（GFAP／NSE）双标细胞的表达。结果：针刺督脉治疗可以下调脑缺血后海马齿状回的GFAP阳性细胞数，同时使GFAP/NSE双标细胞增多；针刺任脉和督脉治疗的GFAP阳性细胞增殖幅度小于针刺督脉组，而GFAP／NSE双标细胞的增殖幅度则大于针刺督脉组。结论：针刺任脉和督脉可抑制脑缺血后海马星形胶质细胞的过度增殖并可促进细胞分化。     

蛇毒激肽原酶对大鼠脑缺血再灌注的作用及机制

目的：探讨蛇毒激肽原酶对脑缺血再灌注大鼠的缺血区脑组织的保护作用及机制．方法：将实验动物随机分为假手术组、生理盐水对照组和治疗组．治疗组在大鼠脑缺血再灌注后8h,腹腔注射蛇毒激肽原酶17．5U／（kg·d）,连续注射3d．于术后第3日行神经功能缺失评分（NSS）,然后处死大鼠行梗死体积（TTC染色）的计算、缺血区的病理改变（HE染色）的检查以及缺血区神经细胞情况（尼氏染色）的检查,同时检测缺血区NSE,GFAP及vWF的免疫组化情况．结果：在大鼠脑缺血再灌注后8h,给予蛇毒激肽原酶治疗能明显降低大鼠的神经功能缺损,使大鼠的梗死体积变小,病理改变明显减轻,缺血区的尼氏染色结果得到明显的改善．治疗组脑缺血区的NSE,GFAP及vWF免疫组化的阳性细胞增多,与生理盐水对照组比较有明显差异（P〈0．05）．结论：蛇毒激肽原酶对脑缺血再灌注大鼠的缺血区脑组织有保护作用;促进缺血区神经细胞的再生以及神经胶质细胞、血管内皮细胞增生为其重要机制之一．     

缺血预处理对鼠神经细胞HSP70、GFAP表达的影响

目的通过缺血预处理后大鼠局灶脑缺血模型观察神经细胞HSP70、GFAP变化。方法成年健康SD大鼠72只,随机分为预处理组、缺血组、假手术组,用大脑中动脉栓塞法制作脑缺血动物模型,每组在造模成功后24h、48 h、72 h取出大鼠脑组织。免疫组化（Immunohistochemistry,IHC）方法观察各个时间观察点HSP70蛋白和GFAP蛋白的表达。结果免疫组化结果显示,HSP70蛋白和GFAP蛋白大脑皮质等部位的细胞上呈阳性表达,其表达程度随时间延长存在明显差异。结论脑缺血预处理可上调大鼠神经细胞HSP70和GFAP的表达。     

重组人粒细胞集落刺激因子对大鼠海马慢性持续性低血流灌注后的修复作用

目的通过对大鼠海马的持续性低血流灌注，观察大鼠海马CA1区锥体细胞、胶质细胞对粒细胞集落刺激因子（G-CSF）动员骨髓干细胞向中枢神经系统迁移的反应，探讨G-CSF对大鼠持续性低血流灌注状态下海马CA1区的病理学修复机制。方法建立大鼠持续性低血流灌注模型（2VO术），术后20周给予重组人粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）动员骨髓干细胞，应用免疫组织化学SP技术和图像分析技术，分析海马CA1区CD34阳性细胞、锥体细胞的数量及其分布状况、以及胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）阳性细胞的数量和胞质突起的长度变化。结果连续给予rhG-CSF后大鼠海马CA1区可见CD34阳性细胞存在，提示其动员了骨髓干细胞向中枢神经系统迁移。相对于对照组（生理盐水治疗组），在持续性大脑低灌流状态下，大鼠海马CA1区锥体细胞数量明显增多，GFAP阳性细胞数量明显增多、其胞质突起分支增加、长度明显缩短。结论大鼠海马经持续性低血流灌注后，rhG-CSF可通过动员骨髓细胞向中枢神经系统的迁移，促进海马区锥体细胞、胶质细胞的增生或（和）激活，增强修复能力，为慢性持续性低血流灌注脑损伤的治疗提供了新的思路。     

原花青素对脑出血后脑水肿及继发性脑损伤炎症的作用研究

目的 探讨原花青素对脑出血后脑水肿及继发性脑损伤炎症的作用.方法 48只C57BL6小鼠分为4组:Sham+生理盐水组,Sham+原花青素(100 mg/kg)组,ICH+生理盐水组,ICH+原花青素(100mg/kg)组.采用Bederson法检测术后小鼠神经功能评分,干湿比重法检测小鼠脑组织含水量,苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠脑组织细胞形态改变,Western blot法观察小鼠脑组织胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及离子钙结合蛋白受体1 (Iba1)的表达,TUNEL及Western blot法观察小鼠脑组织细胞凋亡情况.结果 12 h后与ICH+生理盐水组相比,ICH+原花青素组的神经功能障碍症状评分明显降低(P＜0.05),脑组织含水量明显降低(P＜0.05).HE染色结果显示,原花青素能减少脑出血小鼠神经细胞病变数量,降低脑组织出血量.Western blot结果显示,原花青素能促进脑出血组织B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的表达,降低Bcl-2相关X蛋白、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3、GFAP和Iba-1的表达量.TUNEL结果显示,原花青素能抑制脑出血小鼠脑组织神经细胞的凋亡.结论 原花青素可能通过降低GFAP和Iba-1的表达抑制神经毒性物质的产生,防治脑出血后继发性脑损伤.     

胎儿宫内窘迫动物模型的建立

目的：建立经济实用的胎儿宫内窘迫动物模型。方法：利用35只20天胎龄的胎鼠，钳夹进入每个胎盘的分支血管，共15分钟，然后松开血管夹，恢复血流，对胎鼠断头处死后进行显微镜检查和测定脑细胞内外钙、钠、钾含量。结果：再灌注15分钟后处死而进行显微镜检查的全部25只胎鼠脑组织均显示结构紊乱，间质和星形细胞水肿，以及神经细胞变性，6／25只（24％）出现神经细胞坏死，7／25只（28％）脑出血。另10只胎鼠在再灌注30分钟后处死进行Fura－2AM法检测，结果显示脑细胞内出现钙超载。结论：此模型可以较好地用于胎儿宫内窘迫脑损害的进一步研究。     

Differentiation of rat neural stem cells and its relationship with environment

Objective To explore the differentiation fates of rat neural stem cells (NSCs) in different environmental conditions. Methods NSCs derived from 16-day-old rat embryo were proliferated in vitro and implanted into the brain of rats with intra-cerebral hemorrhage. At the same time some NSCs were co-cultured in vitro with Schwann cells derived from newborn rats. MAP-2, GFAP and GalC (which are the specific markers of neural cells, astrocytes and oligodendrocytes respectively),BrdU and β-tubulin were detected by immunohistochemical and immunofluorescent methods.Results BrdU positive cells that were implanted into the brain distributed around the hemorrhagic area.The majority of them were GFAP positive astrocytes while a few of them were β-tubulin positive neural cells or GalC positive oligodendrocytes. After being co-cultured with Schwann cells in vitro,NSCs are predominately shown β-tubulin and MAP-2 positive,and only a minority of them were GFAP or GalC positive.Condusions The hemorrhagic environment in vivo induces NSCs to differentiate mainly into astrocytes while co-culture with Schwann cells in vitro induce the majority of NSCs to differentiate into neural cells.     

重组人粒细胞集落刺激因子对大鼠实验性脑出血急性期保护作用的研究

目的:通过观察重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对脑出血后血肿周围组织胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达及脑组织含水量变化的影响,探讨rhG-CSF在脑出血后继发性损伤中的保护作用。方法:实验动物随机分为假手术组、脑出血组、治疗组。利用鼠脑立体定向仪、采用断尾取自体血法制模,治疗组于制模后1h腹腔注射rhG-CSF60μg/kg。在各时间点将大鼠处死,免疫组化观察各组GFAP在出血后不同时间点的表达;干湿比重法定量测定脑组织含水量。结果:脑出血后脑组织含水量逐渐增加,72h达高峰,各时间点与假手术组相比差异显著;GFAP在脑出血6h后即已开始表达,随后持续增加,72h达高峰。治疗组较相同时间点脑出血组血肿周围组织脑组织含水量降低;GFAP表达有所下降。直线相关分析表明脑出血后1周内GFAP的变化与脑组织含水量变化呈正相关关系。结论:rhG-CSF能够抑制GFAP过度表达、减轻脑出血后脑水肿,对出血后脑组织具有保护作用。     

雄激素对脑损伤后星形胶质细胞反应的影响

目的：研究雄激素对脑穿刺损伤后星形胶质细胞（Ａｓｔ）反应性胶质化的影响。方法：通过免疫组化、免疫荧光染色及流式细胞仪计数等方法,观察切除睾丸及补充睾丸酮后脑穿刺损伤鼠伤灶周围ＧＦＡＰ－ＩＲ阳性细胞的形态、数量与比例变化。结果：切除睾丸鼠脑损伤后,伤灶周围反应性胶质比较单纯损伤鼠明显,表现为胞体肥大,突起增粗、延长,ＧＦＡＰ免疫组化染色显著增强。睾丸酮治疗后,Ａｓｔ反应程度虽有减弱,但未能恢复到正常