沉默VEGF对人鼻咽癌放射抗拒细胞株CNE-2R侵袭迁移的影响

目的 探讨沉默血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）对人鼻咽癌放射抗拒细胞株CNE-2R迁移和侵袭能力的影响。方法 制备含VEGF-shRNA的慢病毒载体（VEGF-LV1、VEGF-LV2、VEGF-LV3）和对照shRNA重组慢病毒（VEGF-NC），并转染人鼻咽癌放射抗拒细胞株CNE-2R，建立稳定沉默VEGF细胞（CNE-LV1、CNE-LV2和CNE-LV3）和阴性对照细胞（CNE-NC）。采用RT-qPCR和Western blot法检测细胞转染效果，划痕实验和Transwell小室实验检测VEGF沉默后细胞的迁移和侵袭能力。结果 成功构建VEGF-shRNA重组慢病毒并建立了稳定沉默VEGF细胞CNE-LV3。划痕实验和Transwell小室迁移实验显示，与空白对照组和CNE-NC组相比，CNE-LV3组细胞迁移率明显降低［（50.17±1.76）% vs （37.97±1.56）%，P＝0.001；（50.63±1.52）% vs （37.97±1.56）%，P＝0.001］，穿膜细胞数亦明显下降［（95.3±3.8） 个 vs （41.3±1.5） 个，P＜0.001；（94.3±4.0） 个 vs （41.3±1.5） 个，P＜0.001］；Transwell小室侵袭实验结果亦显示，CNE-LV3组细胞穿膜细胞数较空白对照组和CNE-NC组明显下降［（46.3±2.1） 个 vs（105.3±1.5） 个，P＜1.001；（46.3±2.1） 个 vs （93.3±2.5） 个，P＜0.001］。结论 沉默VEGF表达可抑制人鼻咽癌放射抗拒细胞株CNE-2R的迁移和侵袭能力。     

自然腔道取出标本手术对直肠癌患者术后康复及免疫功能的影响分析

目的:探讨经自然腔道取出标本手术(NOSES)对直肠癌患者术后康复及免疫功能的影响。方法:回顾性分析2015年2月—2016年12月收治的98例直肠癌患者的临床资料,其中49例接受NOSES直肠癌根治术(观察组),49例采用传统腹腔镜直肠癌根治术(对照组),分析两组患者的相关临床指标以及手术前后应激因子与免疫功能指标的变化。结果:观察组患者术后排气时间短于对照组(2.62 d vs. 3.31 d,P0.05);手术时间、术中出血量、淋巴结清扫数目与对照组无统计学差异(均P0.05)。两组患者术前E-选择素、内皮素(ET)、可溶性血管细胞黏附分子1(sVCAM-1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、免疫球蛋白水平均无统计学差异(均P0.05),观察组患者术后E-选择素、ET、sVCAM-1、MMP-9水平明显低于对照组,而免疫球蛋白水平明显高于对照组(均P0.05)。观察组患者并发症发生率低于对照组(8.16%vs. 18.37%),但差异无统计学意义(P0.05)。结论:NOSES直肠癌根治术可达到与传统手术相同的肿瘤学根治目的,且可减少应激因子的表达,对机体免疫功能影响较小,安全性高,患者恢复快。     

疼痛性疾病不妨尝试中药透皮疗法

<正>随着当今社会的发展,人们的生活方式发生了很大的变化,疼痛性疾病受到越来越多的关注。颈椎病、腰椎间盘突出、骨质增生、肩周炎、网球肘、扭伤、坐骨神经痛等,成为当下的常见病症,临床上有逐渐增多的趋势。笔者运用中药透皮技术治疗241例痛症患者,其中腰椎间盘突出62人,腰部扭伤17人,肩周炎及网球肘55人,颈椎病36人,关节扭伤18人,关节炎31人,     

天山堇菜总黄酮抗流感病毒作用及机制研究

目的?研究天山堇菜总黄酮（TFVM）的体内外抗流感病毒作用及其机制。方法?体外实验采用细胞病变效应（CPE）法观察TFVM对流感病毒A/FM/1/1947（H1N1）致犬肾细胞（MDCK）病变的影响；设置细胞对照组，病毒感染组，阳性药金刚烷胺（AH）对照药组（10 μmol/L），TFVM 100、50、25 μg/mL 3 个浓度组，以H1N1分别感染MDCK和人髓系白血病单核细胞（THP-1），Western Blot法检测基质蛋白2（M2）、非结构蛋白（NS1）蛋白表达，检测THP-1细胞中p65蛋白表达及核转位；鸡血球细胞凝集实验检测TFVM对血凝素（HA）的抑制作用，荧光法检测神经氨酸酶（NA）活性。体内实验将小鼠随机分为病毒感染对照组，阳性药达菲（11.375 mg/kg）组，TFVM高、低剂量（0.4、0.2 g/kg）组，以流感病毒鼠肺适应株FM1感染小鼠建立病毒性肺炎模型，取小鼠肺组织研磨液接种MDCK细胞，CPE法观察对小鼠肺组织病毒增殖量的影响；qRT-PCR检测M2蛋白及肺组织中炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10、干扰素诱导蛋白10 （IP-10） mRNA表达水平。结果?TFVM明显抑制流感病毒致MDCK细胞病变，其IC50为79.1 μg/mL；其100 μg/mL浓度对MDCK和THP-1细胞中流感病毒M2、NS1蛋白表达均有明显抑制作用；TFVM还可抑制THP-1细胞内p65蛋白表达及其核转位。TFVM对流感病毒的两个膜蛋白NA和HA功能无明显影响；TFVM以0.2、0.4 g/kg剂量给药可明显降低流感病毒感染小鼠肺组织内病毒载量（P<0.05，P<0.01），并降低炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10、IP-10 mRNA表达水平（P<0.05，P<0.01），在一定程度上能降低M2 mRNA表达水平（P>0.05）。结论?TFVM在体内外均有明显的抗流感病毒作用，其机制可能是通过抑制M2蛋白和NS1蛋白表达而直接抑制流感病毒的复制；还可能通过抑制宿主细胞内p65蛋白表达及其核转位，从而干预NF-κB信号通路下游炎症因子的表达，发挥间接抗病毒作用。