寒喘宁口服液对实验性哮喘豚鼠血清炎性介质的影响

目的观察寒喘宁口服液对支气管哮喘豚鼠血清中神经源性气道炎性介质P物质(SP)、血栓素B2(TXB2)、白三烯B4(LTB4)、6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)的影响,探讨其平喘机理。方法选50只体重为250-300 g的雄性幼龄豚鼠,通过随机数字表法分成正常对照组、地塞米松组、哮喘模型组、中药大剂量组、中药小剂量组,每组各10只。造模后各组按要求用药,测定血清中SP、TXB2、LTB4、6-keto-PGF1α的含量。结果哮喘模型组与正常对照组比较,SP、TXB2、LTB4均显著升高(P<0.01),6-keto-PGF1α显著降低(P<0.01);与哮喘模型组比较,各治疗组SP、TXB2、LTB4均降低或显著降低(P<0.05或P<0.01),6-keto-PGF1α升高或显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论寒喘宁口服液平喘的机制之一可能是影响实验性哮喘豚鼠血清中炎性介质的含量,使SP、TXB2、LTB4均降低,使6-keto-PGF1α升高。     

太子健Ⅱ煎剂对哮喘模型豚鼠IL-8及TNF—α的影响

目的观察太子健Ⅱ煎剂对哮喘模型豚鼠哮喘发作情况及支气管肺泡灌洗液（BALF）中自细胞介素-8（IL-8）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的影响,探讨其抗小儿哮喘复发的作用机制。方法将50只豚鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、地塞米松组、高、低剂量太子健II煎剂组,各10只。卵白蛋白致敏并成功诱发哮喘,分别灌服O．9％氯化钠注射液、地塞米松（DxM）、高、低剂量太子健Ⅱ煎剂,连续15d。观察其体质量的变化：测定其末次诱喘引喘潜伏期：检测BALF中IL-8及TNF-α含量。结果模型组豚鼠出现典型的哮喘发作症状,体质量增长缓慢,BALF中IL-8及TNF-α含量明显升高（P〈O．01）。与模型组比较,太子健Ⅱ高剂量组能减轻哮喘症状,体质量增长显著,延长引喘潜伏期（P〈0．05）;能降低BALF中IL-8及TNF-α的水平（均P〈0．05）。结论太子健Ⅱ煎剂可能通过对哮喘豚鼠整体免疫功能调整,降低气道炎性细胞囚子,从而一定程度上减轻气道的慢性变应性炎症。     

白细胞介素10在支气管哮喘发病机制中的作用研究

目的研究白细胞介素10在支气管哮喘发病机制中的作用。方法哮喘组用卵白蛋白OVA敏原复制C57小鼠哮喘模型;IL-10抗体干预组与哮喘组均在激发后24、48和96 h及第8天行支气管肺泡灌洗(BAL),酶联免疫吸附法(ELISA)测定BALF中IL-10、IL-12、TNF-α及血清中IgE、一氧化氮(NO)浓度。结果哮喘模型组IL-10抗体干预组BALF中TNF-α和血清中IgE、NO含量显著高于对照组,BALF中IL-10、IL-12含量显著低于对照组。哮喘组和IL-10抗体干预组内IL-10与IL-12均呈正相关;哮喘组IL-10与TNF-α、IgE呈负相关;IL-10抗体干预组内IL-10浓度与相应时相TNF-α、IgE、NO浓度做直线回归分析,显示负相关关系。结论 IL-10可能参与支气管哮喘发病的整个过程,随着IL-10含量的减少,支气管哮喘进行性加重。因此在支气管哮喘不同时期检测IL-10水平具有重要的临床意义。     

寒喘平,热喘平口服液平喘作用研究

目的:观察寒喘平、热喘平口服液对支气管哮喘发作期的平喘作用。方法:以引喘潜伏期为指标,观察寒喘平、热喘平口服液对豚鼠“乙酰胆碱-组胺”性哮喘模型、以及以肺溢流量为指标,观察对组胺所致豚鼠及卵白蛋白所致大鼠支气管痉挛的作用。结果:寒喘平、热喘平口服液均能明显延长豚鼠哮喘潜伏期,减少豚鼠和大鼠的肺溢流量。结论:该2药能对抗支气管平滑肌痉挛,具有平喘作用。     

苏黄止咳胶囊对咳嗽变异性哮喘豚鼠模型疗效的实验研究

【目的】观察苏黄止咳胶囊对咳嗽变异性哮喘(cough variant asthma,CVA)豚鼠模型的疗效,探讨苏黄止咳胶囊的作用机制。【方法】将50只豚鼠随机分成正常对照组、模型对照组、醋酸泼尼松组及苏黄止咳胶囊高、低剂量组,复制CVA豚鼠模型,检测各组豚鼠咳嗽反应、肺组织病理学、支气管肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸粒细胞百分率及血清中白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、Ig E的水平变化。【结果】与正常对照组比较,模型对照组豚鼠咳嗽次数显著增多(P0.05);与模型对照组比较,苏黄高剂量组咳嗽次数显著减少(P0.05)。与正常对照组比较,模型对照组BALF中嗜酸性粒细胞百分率显著上升(P0.05);3个治疗组嗜酸性粒细胞百分率均较模型组显著降低(P0.05)。治疗组肺组织病理改变较模型对照组减轻。与正常对照组比较,模型对照组血清中IL-4、TNF-α、Ig E水平显著升高(P0.05);与模型对照组比较,醋酸泼尼松组血清中IL-4、TNF-α水平显著下降,苏黄高剂量组血清中TNF-α、Ig E水平显著下降(P0.05)。【结论】苏黄止咳胶囊可能通过降低血清中TNF-α和Ig E的水平,改善CVA豚鼠的咳嗽症状、气道炎症及肺组织病理变化,从而达到治疗CVA的目的。     

寒喘舒和安喘舒对过敏性支气管哮喘豚鼠细胞因子的影响

目的通过对豚鼠整体行为表现、病理组织切片的观察,炎性细胞(嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞)、炎性细胞因子(IL-1β、TNF-α、IL-4、IL-8、IL-13)和抗炎细胞因子(IL-10)在豚鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中含量的变化,初步探讨寒喘舒和安喘舒治疗过敏性支气管哮喘模型豚鼠的作用机制。方法将188只豚鼠按随机数字表法分为6组,应用鸡卵白蛋白雾化吸入法建立稳定的豚鼠过敏性支气管哮喘模型。正常对照组(予生理盐水模拟抗原攻击,A组,n=20);过敏性支气管哮喘模型组(予生理盐水模拟治疗,B组,n=40);寒喘舒组(C组)予低剂量(C1组,n=32)、高剂量(C2组,n=32)寒喘舒治疗;安喘舒组(D组)予低剂量(D1组,n=32)、高剂量(D2组,n=32)安喘舒治疗。肉眼观察各组动物饮食、活动、抓鼻、咳嗽、喷嚏等过敏行为变化;各组于治疗后1、2、8、24h处死动物,观察肺色泽、大小等;用生理盐水行支气管肺泡灌洗,收集BALF,离心后取沉淀细胞作细胞涂片,计数细胞;用Lowrys法测量BALF上清液中总蛋白含量,用双抗夹心ELISA法测定上清液中TNF-α、IL-1β、IL-4、IL-8、IL-10、IL-13的含量,计算各时间点各组细胞因子含量与总蛋白、抗炎因子与致炎因子(IL-10/TNF-α、IL-10/IL-1β)的比值。结果光镜下可见:A组肺泡管和肺泡壁结构完整;B组肺泡管和肺泡壁结构受损,肺泡腔内充满渗出液,可见坏死脱落的肺泡上皮细胞和渗出的白细胞,肺间质水肿,炎性细胞浸润;C1、C2组肺泡管和肺泡壁结构受损程度轻于B组,肺泡腔内见极少量炎症细胞游于其中,支气管管腔及肺泡周围少见炎性细胞浸润。D1、D2组组织结构基本正常,未见明显损害。BALF中细胞学变化:与B组相比,C1、C2、D1、D2组嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞数量显著下降(P<0.05),巨噬细胞显著上升(P<0.05)。BALF中细胞因子含量变化:C1、C2、D1、D2组BALF炎性因子IL-1β、TNF-α、IL-4、IL-8、IL-13含量随时间增加有所下降或趋于正常,而抗炎因子IL-10随时间增加逐渐增加,C2和D2组在治疗后24h仍维持高水平(P<0.05)。C2、D1、D2组IL-10/TNF-α、IL-10/IL-1β的比值较B组差异有统计学意义(P<0.05)。结论提前应用安喘舒对过敏性支气管哮喘豚鼠有良好的保护效果,提示安喘舒对哮喘的发生有一定的预防作用。     

消喘膏贴敷对哮喘豚鼠气道炎症的影响

目的 :探讨消喘膏对哮喘豚鼠气道炎症的影响。方法 :将 3 0只豚鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组和消喘膏组 ,通过吸入卵蛋白建立豚鼠哮喘模型。消喘膏组豚鼠用消喘膏贴敷 ,疗程结束后分别观察哮喘模型组和消喘膏组豚鼠用药前后引喘潜伏期的变化以及三组豚鼠支气管管壁和支气管肺泡灌洗液 (BAL F)中嗜酸粒细胞(EOS)数量的变化。结果 :给药前消喘膏组和哮喘模型组豚鼠引喘潜伏期无显著差异 (P>0 .0 5 ) ,给药后消喘膏组豚鼠引喘潜伏期与哮喘模型组相比明显延长 (P<0 .0 1)。消喘膏组支气管管壁和 BAL F中 EOS数量低于哮喘模型组 (P<0 .0 1) ,但仍高于正常对照组 (P<0 .0 1)。结论 :消喘膏具有减轻哮喘豚鼠气道炎症的作用     

还原型谷胱甘肽对哮喘豚鼠气道上皮细胞的保护作用

目的:评价还原性谷胱甘肽(GSH)对哮喘豚鼠气道上皮细胞的保护作用。方法:采用随机数字表法将48只豚鼠分为对照组、模型组、地塞米松组和GSH组4组,每组各12只动物。后3组利用鸡卵白蛋白致敏并激发大鼠建立哮喘模型,分别给予相应的干预后,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞学检查;取右肺制作组织匀浆测定GSH;左肺常规制片,行病理观察,免疫组化法测γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)。结果:与模型组相比,GSH组BALF中嗜酸性粒细胞和上皮细胞计数降低(F=69.639和62.360,P<0.001),支气管周围炎性细胞浸润相对较轻,上皮细胞较完整,基底膜破坏相对较轻;肺组织GSH水平接近对照组,高于模型组(F=113.047,P<0.001),肺组织γ-GCS和TNF-α在支气管壁和支气管旁均有表达,但低于模型组(F=64.444和89.895,P<0.001)。结论:GSH对哮喘豚鼠上皮细胞气道起保护作用。     

射干麻黄汤对哮喘大鼠模型血清及支气管肺泡灌洗液中NO的影响

目的:探讨射干麻黄汤化裁方对哮喘大鼠模型的作用机理。方法:分正常对照组、病理模型组、射干麻黄汤治疗组、强的松治疗组。测定各组于致敏原激发后30分钟,血清及支气管肺泡灌洗液(BALF)中一氧化氮(NO)的含量。结果:病理组血清及BALF中NO含量明显升高,射干麻黄汤和强的松均有降低血清及BALF中NO含量的作用,且疗效接近。结论:射干麻黄汤能够降低血清及BALF中NO的含量,不仅能够有效缓解哮喘症状,改善肺通气功能且有减轻气道炎症,降低气道高反应性的作用,达到控制哮喘症状,减少哮喘发作的双重治疗目的。     

哮喘小鼠模型肺组织、肺泡灌洗液中TNF-α及 IL-12水平比较

目的：观察支气管哮喘小鼠模型肺泡灌洗液（ BALF）中TNF-α,IL-12水平,了解两者的水平及诊断价值。方法40只雌性Balb/C小鼠,随机分成2组：A正常对照组、B支气管哮喘模型组,每组各20只。采用卵蛋白（ OVA）等致敏支气管哮喘模型组;第21天后,哮喘模型组1％卵蛋白溶液雾化吸入,雾化时间共5周,对照组用生理盐水雾化吸入。分别观察两组哮喘发作症状、ELISA检测肺泡灌洗液中TNF-α,IL-12的水平。结果支气管哮喘模型组肺泡灌洗液中TNF-α显著升高,IL-12降低,且IL-12与TNF-α呈密切负相关（ r＝-0．964,P＜0．01）。结论哮喘的发生发展不仅与炎症介质TNF-α的异常释放增多有关,还与内源性的抗炎介质IL-12的释放不足有关,而且IL-12能够抑制TNF-α的合成。     

平喘宁对哮喘豚鼠IL-4、TXB2、6-Keto-PGF1α的影响

目的:探讨平喘宁治疗哮喘的作用机制。方法:用放射性免疫法(RIA)测定豚鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-4、血浆中TXB2、6-Keto-PGF1α在平喘宁治疗哮喘前后的变化。结果:平喘宁能显著降低豚鼠BALF中IL-4、血浆TXB2水平,提高血浆6-Keto-PGF1α的水平。结论:平喘宁通过降低豚鼠BALF中IL-4、血浆中TXB2水平,提高血浆6-Keto-PGF1α的水平,从而减轻气道炎症反应,缓解气道平滑肌痉挛而发挥治疗哮喘的作用。     

平喘宁对哮喘豚鼠GM-CSF和PAF的影响

目的：探讨平喘宁治疗哮喘的作用机制。方法：采用卵蛋白法诱导豚鼠哮喘模型,诱导哮喘同时用平喘宁对模型豚鼠进行预防,实验结束后用酶联免疫吸附法测定各组豚鼠支气管肺泡灌洗液（bronchoalveo larlavage fluid,BALF）中粒一巨细胞集落刺激因子（granule macrophagecolony stimulating factor,GM—CSF）、血清血小板活化因子（platelet activatingfactor,PAF）含量。结果：平喘宁能显著降低BALF中GM—CSF、血清PAF含量。结论：平喘宁可通过降低BALF中GM—CSF、血清PAF含量而发挥治疗哮喘的作用。     

平喘宁对哮喘豚鼠IL-4、TXB2、6-Keto-PGF1α的影响

目的：探讨平喘宁治疗哮喘的作用机制。方法：用放射性免疫法（RIA）测定豚鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中IL-4、血浆中TXB2、6-Keto-PGF1α在平喘宁治疗哮喘前后的变化。结果：平喘宁能显著降低豚鼠BALF中IL-4、血浆TXB2水平,提高血浆6-Keto-PGF1α的水平。结论：平喘宁通过降低豚鼠BALF中IL-4、血浆中TXB2水平,提高血浆6-Keto-PGF1α的水平,从而减轻气道炎症反应,缓解气道平滑肌痉挛而发挥治疗哮喘的作用。     

健儿强身膏治疗豚鼠哮喘模型的实验观察

目的:观察健儿强身膏对支气管哮喘豚鼠模型的治疗作用.方法:采用卵蛋白(OVA)致敏法制备豚鼠哮喘模型,将豚鼠随机分为6组,即空白对照组、模型组、阳性对照组、健儿强身膏(高、中、低)3个剂量组,分别观察引喘潜伏期(T)、支气管肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸细胞(EOS)数目和脾肺脏器系数.结果:健儿强身膏3个剂量组均能延长豚鼠哮喘诱发潜伏期,与模型组比较差异显著(P<0.05);模型组BALF细胞计数及EOS量显著增高,健儿强身膏各剂量组BALF中EOS数均少于哮喘组(P<0.05);模型组脾脏系数低于正常,健儿强身膏可恢复脾脏系数(高剂量组P<0.05).结论:健儿强身膏对支气管哮喘具有较好的治疗效果,其作用与促进机体的免疫力有关.     

神经生长因子对哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液中IL-1β及IL-4的影响

目的探讨神经生长因子(nerve growth factor,NGF)对哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-1β、IL-4的影响。方法将30只豚鼠随机分为3组,哮喘组豚鼠采用卵清蛋白(OVA)致敏和雾化吸入激发的方法制成哮喘模型;anti-NGF抗体组豚鼠致敏和激发方法同哮喘组,但在激发前3h腹腔注射anti-NGF抗体;正常对照组豚鼠用PBS腹腔注射和雾化吸入。最后一次OVA激发后24h内,行支气管肺泡灌洗,观察BALF中炎性细胞的变化,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测BALF上清中IL-1β、IL-4的水平。结果anti-NGF抗体组BALF中炎性细胞总数、嗜酸粒细胞、巨噬细胞和淋巴细胞计数与正常对照组及哮喘组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);哮喘组BALF上清中IL-1β、IL-4水平与哮喘组及正常对照组比较,差异亦均有统计学意义(P<0.05)。结论NGF对IL-1β、IL-4有调节作用,参与了哮喘发病的免疫炎症过程。     

健儿强身膏对哮喘豚鼠血清IL-10、IL-6、TNF-α表达的影响

目的观察健儿强身膏对哮喘豚鼠血清IL-10、IL-6、TNF-α表达的影响。方法采用卵蛋白（OVA）致敏法制备豚鼠哮喘模型,将48只豚鼠随机分为6组,即空白对照组、模型组、阳性对照组、健儿强身膏（高、中、低）3个剂量组,观察各组引喘潜伏期（T）及肺组织的病理变化,应用酶联免疫吸附试验法测定血清IL-10、IL-6、TNF-α的表达水平。结果各治疗组均可延长引喘潜伏期,与模型组相比差异有统计学意义（P〈0.05）。与空白对照组相比,模型组的IL-6、IL-10表达显著增加（P〈0.01）,TNF-α的表达无显著差异;各治疗组与模型组相比IL-6、IL-10表达显著下降（P〈0.01）,TNF-α的表达无显著差异。结论健儿强身膏能下调哮喘豚鼠IL-6、IL-10的表达,可能为其抑制哮喘呼吸道炎症的重要作用机制之一。     

平喘方对支气管哮喘模型小鼠气道重建的影响

目的：通过研究平喘方对支气管哮喘模型小鼠外周血和支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）巨噬细胞炎性蛋白-1α（macrophage inflammatory protein-1α,MIP-1α）和免疫球蛋白E（immunoglobulinE,IgE）含量及CD86分子表达的影响,探索平喘方对小鼠支气管哮喘模型气道重建的作用机制。方法：采用卵清白蛋白腹腔注射和雾化吸入致敏,建立BALB／c小鼠支气管哮喘模型。50只雄性BALB／c小鼠随机分为空白对照组、哮喘模型组、地塞米松组和平喘方小剂量、常规剂量组,每组10只。造模后4周,予相应药物灌胃治疗8周。用亲和素-生物素复合物酶联免疫吸附测定法检测外周血和BALF中MIP-1α水平;用酶联免疫吸附测定法检测血清和BALF中IgE水平;直接免疫荧光流式细胞术检测外周血和BALF中CD86＋、CD3-CD86＋细胞百分率;利用普通光学显微镜观察支气管哮喘模型小鼠肺组织病理学改变。结果：模型组外周血和BALF中MIP-1α、IgE含量及CD86＋、CD3-CD86＋细胞百分率均明显高于空白对照组（P〈0．01）;治疗8周后,各治疗组外周血和BALF中MIP-1α、IgE含量和CD86＋、CD3-CD86＋细胞百分率均明显低于模型组（P〈0．01）;各治疗组之间两两比较,外周血和BALF中MIP-1α和IgE含量差异无统计学意义（P〉0．05）,平喘方小剂量组外周血中CD3-CD86＋细胞百分率高于地塞米松组（P〈0．05）。肺组织病理显示,各治疗组细支气管壁上胶原纤维较模型组明显减少。结论：平喘方能降低支气管哮喘模型小鼠MIP-1α和IgE水平,下调CD86分子表达,这可能是平喘方减轻支气管哮喘模型小鼠的症状,改善支气管哮喘气道炎症的作用机制之一。     

布地奈德对哮喘豚鼠气道重塑和BALF中PCⅢ、LN及HA含量的影响

目的 探讨布地奈德对哮喘豚鼠气道重塑和支气管肺泡灌洗液(BALF)中Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、透明质酸(HA)及层粘蛋白(LN)的影响,为糖皮质激素在哮喘中的应用提供理论依据.方法 健康雄性豚鼠24只,按体质量随机分为3组,正常对照组、哮喘组和哮喘模型布地奈德雾化吸入治疗组(布地奈德组),每组8只.利用计算机图像分析仪测定支气管管腔的内周长(Pi)、支气管管壁厚度(WAt/Pi)、支气管平滑肌厚度(WAm/Pi)、支气管平滑肌细胞计数(N/Pi);放射免疫法检测BALF中细胞外基质(ECM)成分PCⅢ、HA、LN的改变.结果 与正常对照组比,哮喘组WAt、WAm及N明显升高(P＜0.05),BALF中PCⅢ、LN及HA含量均明显增加(P＜0.05);与哮喘组比,布地奈德组气道壁结构明显改善,WAt、WAm及N明显下降(P＜0.05),BALF中PCⅢ、LN及HA明显减少(P＜0.05).结论 布地奈德可延缓哮喘豚鼠气道重塑的发生,这可能与其抑制ECM成分PCⅢ、LN及HA在气道中的沉积有关.     

补肾健脾固本法治疗支气管哮喘的实验研究

为探讨补肾健脾固本法治疗哮喘的作用机理,将72只雄性SD大鼠,随机分为正常对照组（A）、哮喘模型组（B）、止喘胶囊小剂量组（C）、止喘胶囊大剂量组（D）、西药对照组（E）和中西药结合组（F）6组,每组12只。除A组外,采用腹腔注射卵白蛋白和灭活百日咳杆菌的方法,制成大鼠哮喘模型。在此基础上,各组模型鼠分别给予不同的药物“治疗”,两周后处死测定各组大鼠血浆及支气管肺泡灌洗液（BALF）中NO、ET－1和IL－5含量。结果：B组BALF中NO浓度、ET－1含量明显高于A组;与B组相比,D、E组显下降,后两组之间无统计学差异,F组BALF中NO浓度显低于D组、E组,接近A组。B组血浆和BALF中IL－5含量均明显高于A组;与B组相比,除C组外,其余各治疗组均明显下降;其中F组显低于D组、E组,接近A组。提示：通过下调血浆和BALF中IL－5,抑制BALF中NO、ET－1的合成和释放,从而减轻哮喘气道炎症及气道上皮重建,降低气道高反应性,可能是补肾健脾固本法治疗哮喘的机制之一。     

平哮合剂对哮喘豚鼠气道T淋巴细胞凋亡的影响

目的 :通过动物实验观察平哮合剂的疗效并探讨其作用的分子机制。方法 :采用卵蛋白诱导的豚鼠哮喘模型以平哮合剂治疗 ,治疗 1周后 ,观察其对哮喘潜伏期的影响 ,并与氨茶碱治疗组进行比较。采用流式细胞仪分析豚鼠支气管肺泡灌洗液 (BALF)中T淋巴细胞的凋亡率。结果 :平哮合剂能显著延长哮喘豚鼠的诱喘潜伏期 ,作用与氨茶碱相当 (P >0 0 5 )。哮喘豚鼠BALF中T淋巴细胞的凋亡率与正常组比较有显著性差异 (P <0 0 1 ) ,平哮合剂可显著提高哮喘豚鼠BALF中T淋巴细胞凋亡率。结论 :平哮合剂有明确的平喘作用 ,其途径之一可能是通过促进气道粘膜中淋巴细胞的凋亡而实现的。