嘌呤受体亚型（P2Y2）在肛门直肠畸形动物模型直肠末端的表达

目的检测嘌呤受体亚型（P2Y2）在肛门直肠畸形（ARM）胎鼠直肠末端的表达情况,探讨其可能对肠壁神经系统发育的影响。方法 SD孕鼠随机分正常组和乙烯硫脲（ETU）实验组,两组孕鼠在孕20d取出宫内胎鼠直肠末端,应用HE染色观察直肠末端组织结构变化,Western blot和qRT-PCR方法检测P2Y2在直肠末端的表达情况。结果正常组胎鼠直肠末端组织结构分界清楚,黏膜下和肌间神经元细胞数目多,胞浆丰富,轴突清晰;ETU组中患ARM的胎鼠各层组织结构分层不清,可见较多空腔,神经元细胞数目较少。Western blot和qRT-PCR结果显示ARM组胎鼠直肠末端蛋白含量及mRNA量明显低于正常组（0.23±0.06比0.42±0.05;49.40±26.49比98.53±52.25,P〈0.05）。结论 P2Y2可能参与ARM胎鼠直肠末端肠神经系统的发育。     

海马细胞胞浆RARα表达对大鼠学习记忆功能的影响

目的 探讨海马细胞胞浆视黄酸受体(retinoic acid receptor,RAR)α蛋白表达对大鼠空间学习记忆功能的影响.方法 SD大鼠采用完全随机化分组方法分为Morrs水迷宫(Morris watermaze,MWM)训练组(n=6)和未训练组(n=6),检测海马组织RARα和GluR1表达水平.分别将AAV-control shRNA和AAV-RARα shRNAs海马定位注射SD大鼠后,检测其学习记忆功能及海马组织RARα和GluR1表达水平变化.体外利用神经生长因子(neuron growth factor,NGF)诱导PC12细胞成熟分化,检测RARα和GluR1表达水平、胞内钙活性及静息膜电位.结果 水迷宫训练组大鼠海马组织RARα和GluR1总蛋白和胞浆蛋白表达水平均较未训练组显著增加(P＜0.01).海马定位注射2周后,Morris水迷宫检测发现AAV-RARαshRNAs组大鼠学习记忆功能较对照组明显减弱(P＜0.05),同时海马RARα和GluR1总蛋白和胞浆蛋白表达水平也明显下降(P＜0.01).经NGF诱导后的PC12细胞静息膜电位更接近于神经元静息膜电位(P＜0.01),RARα和GluR1总蛋白和胞浆蛋白表达水平较对照组明显增高(P＜0.01),胞内钙活性明显增强(P＜0.05).结论 海马细胞胞浆RARα蛋白表达与学习记忆能力呈正相关,在调节突触可塑性中发挥重要作用.     

9-顺维甲酸对人肺癌组织RARα、RARβ及 RXRα转录的影响

目的:观察经9-顺维甲酸(9-cis-RA)处理前后肺癌组织和对照肺组织维甲酸受体α?β及维甲酸类受体α转录水平的变化,以进一步探讨维甲酸抑瘤的分子机制?方法:用组织块法培养肺癌组织和对照肺组织,用RT-PCR技术检测RARα?RARβ及RXRα的mRNA水平?结果:肺癌组织的RARα和RXRα基础转录水平高于对照肺组织,而RARβ基础转录水平低于对照肺组织;应用9-cis-RA 24 h后对照肺组织RARα转录水平升高;肺癌组织RARβ转录水平升高(P<0.01),与对照肺组织基础转录水平相近?结论:肺癌组织中RARβ受体表达异常可能与肺癌发生有关;9-cis-RA可诱导肺癌组织RARβ的表达显著升高,达对照肺组织mRNA相同表达水平?     

肛门直肠畸形直肠末端肠壁组织蛋白酶D及外周蛋白的表达

目的:研究肛门直肠畸形患儿直肠末端肠壁内神经节细胞的发育情况,探讨术后排便障碍的病理机制.方法:肛门直肠畸形患儿直肠末端标本72例,其中高位无肛12例,中间位无肛36例,低位无肛24例,分别对应为高位组、中间位组和低位组;选择非肠神经相关疾病行结肠手术的患儿10例,取其结肠壁作为对照标本.采用免疫组织化学法检测直肠末端...     

Notch-1及Jagged-2基因在肛门直肠畸形大鼠直肠发育过程中的表达及意义

目的 检测Notch-1及Jagged-2基因在肛门直肠畸形(ARM)胎鼠直肠肠壁的胚胎发育过程中的表达变化,探讨其与肠壁神经肌肉发育的关系.方法 应用免疫组化和Western blot方法检测正常与乙烯硫脲致畸的ARM胎鼠直肠末端组织Notch-1及Jagged-2蛋白的定位及定量表达,应用RT-PCR方法检测Notch-1及Jagged-2基因mRNA的表达差异.结果 Notch1/Jagged-2在正常大鼠胚胎直肠发育过程中,在肠壁肌间神经丛(MP)、肠壁平滑肌及黏膜层均有表达,随着胚胎发育,表达强度逐渐增强,胚胎晚期主要集中在肠壁平滑肌及神经丛处;ARM组E17～E21表达均较正常组减弱,E19-E21表达与正常组差异更为显著.正常胎鼠直肠末端壁内中Notch-1及Jagged-2总蛋白量及mRNA明显高于畸形组(P＜0.05).结论 Notch-1/Jagged-2基因在肛门直肠畸形的神经肌肉发育过程中表达下调,可能与其发育不良有一定关系.     

横结肠袢式造口术在先天性肛门直肠畸形分期手术中应用的临床研究

目的 探讨并总结横结肠袢式造口术在先天性肛门直肠畸形患儿分期治疗中的优缺点.方法 回顾性分析62例先天性肛门直肠畸形患儿行预防性横结肠袢式造瘘术后的临床表现及相关重要辅助检查;综合分析该造口手术对先天性肛门直肠畸形患儿整个治疗过程的影响,并分析原因.结果 ①62例患儿二期和三期术前血常规结果显示分别有21例(33.9％) vs 22例(35.5％)发生轻度贫血;无重度及极重度贫血发生.②62例患儿二期和三期术前分别有5例(8.1％)vs1例(1.6％)出现轻度低蛋白血症.③62例患儿二期术前外周血电解质检查显示,7例(11.3％)出现轻度电解质紊乱,其中6例在三期术前完全恢复,无高氯血症发生.④62例患儿尿常规结果显示,二期和三期术前分别有19例(30.7％)vs4例(6.4％)尿液白细胞数目异常,数目为(124.42±106.33) vs (74.75±52.89)个/μL,仅有1例出现明显尿路感染症状.⑤57例患儿在二期术前经横结肠造口行远端造影均能明确异常瘘管位置,与术中发现完全一致(100％),并将造影测得直肠盲端与肛隐窝间距离(34.63±6.01)mm,与术中实际测得距离(37.33 ±6.17)mm比较,差异无统计学意义(t=0.066,P＞0.05).⑥62例患儿造口随访观察结果显示无严重肠管回缩及脱垂.结论 横结肠袢式造口术应用于先天性肛门直肠畸形患儿分期治疗,具有操作简单,并发症少,且对患儿营养状况及生长发育无严重不良影响.     

EGF在新生儿坏死性小肠结肠炎中肠道定位和表达特征

目的观察表皮生长因子(EGF)在新生儿坏死性小肠结肠炎(NEC)患儿肠组织中的动态表达情况,探讨EGF在NEC病程中起到的保护作用。方法选取15例NEC患儿行一期回肠造瘘手术治疗的回肠组织为实验组(NEC组),将以上15例NEC患儿行二期回肠封瘘手术治疗的回肠组织为对照组(封瘘组),采用免疫组织化学技术检测,通过光密度测算软件(IPP)分析回肠组织中的EGF表达。结果 EGF主要表达于肠壁黏膜层,少量表达于黏膜下层、肌层。EGF在NEC组各层表达平均光密度值为:黏膜层(0.241±0.075),黏膜下层(0.213±0.061),肌层(0.1397±0.026),差异有统计学意义(P<0.05);在封瘘组各层表达情况为:黏膜层(0.211±0.028),黏膜下层(0.119±0.022),肌层(0.097±0.007),差异有统计学意义(P<0.05)。EGF在NEC组总体表达平均光密度值为(0.198±0.071),明显高于封瘘组(0.146±0.058),差异有统计学意义(P<0.05)。结论表皮生长因子(EGF)在新生儿坏死性小肠结肠炎(NEC)肠组织中的表达较封瘘组显著上调,推测EGF可能与NEC炎症相关,可能在NEC炎症过程中起到了一定的保护作用。     

miRNAs在不同亚型胃癌组织中的表达差异分析

目的 选取4种在胃癌组织中异常表达的miRNAs,探讨它们在不同亚型胃癌组织中的表达差异.方法 采用Real-time PCR检测29例肠型胃癌与21例弥漫型胃癌组织及其相应正常胃黏膜组织中miR-27a、miR-494、miR-145和miR-886-3p的表达水平.结果 miR-27a在弥漫型胃癌组织中的表达水平增加2.87倍,在肠型胃癌组织中增加4.64倍,均为高水平表达(P＜0.01),与弥漫型胃癌相比,在肠型胃癌组织中miR-27a的表达更高,差异具有统计学意义(P＜0.01).miR-494在弥漫型胃癌组织中的表达下降了4.39倍,在肠型胃癌组织中则只下降了2.50倍,两者之间差异也有统计学意义(P＜0.01).miR-145在肠型胃癌组织中下调3.28倍(P＜0.01),在弥漫型胃癌组织中只下调2.02倍(P＜0.01).miR-886-3p在肠型胃癌组织中异常高表达,且与弥漫型胃癌组织中表达水平相似.结论 在不同亚型胃癌组织中miRNA表达水平与表达模式存在显著性差异,可能导致胃癌亚型间基因表达水平的不同.     

己酮可可碱对脓毒症大鼠肠HSP 70、NF-κB和细胞凋亡的影响

目的 探讨己酮可可碱(pentoxifylline,PTX)对脓毒症大鼠肠热休克蛋白70(HSP 70)、核因子-κB(NF-κB)和细胞凋亡的影响.方法 盲肠结扎穿孔(CLP)制备脓毒症大鼠模型,实验动物随机分成3组:假手术组(S)、脓毒症组(CLP)、治疗组(PTX,CLP术后经颈外静脉注射PTX).ELISA测定血浆TNF-α水平,原位末端缺口标记法(TUNEL)检测肠上皮细胞凋亡,Western blot法检测肠组织内HSP 70和NF-κB蛋白表达,黄嘌呤氧化酶法测肠组织内SOD活性.结果 脓毒症时,血浆TNF-α、肠上皮细胞凋亡和肠组织内HSP 70、NF-κB水平明显增加,而肠组织内SOD活性降低(均P＜0.01).经过PTX处理后,肠组织内HSP 70水平进一步增加(P＜0.01),血浆TNF-α、肠上皮细胞凋亡和肠组织内NF-κB水平明显降低,肠组织内SOD活性增加(均P＜0.01).结论 PTX可以通过增加肠组织内HSP 70水平,发挥其内源性保护作用,进而抑制NF-κB,减轻肠上皮细胞凋亡,保护肠组织.     

结、直肠肿瘤组织中CD66c表达水平检测及其临床意义

目的 探讨肿瘤组织CD66c的表达水平对结、直肠癌的诊断价值.方法 用流式细胞术(FCM)检测患者肿瘤组织CD66c水平,同时用化学发光法(CLEIA)测定患者血清CEA水平.结果 结、直肠癌组织CD66c的表达[(11.82±11.11)%]显著高于正常组织[(1.65±1.05)%](P＜0.001).当血清CEA阴性时CD66c与血清CEA阳性时CD66c的表达差异无统计学意义(P＞0.05).结、直肠腺瘤性息肉CD66c的表达[(5.43±2.39)%]也高于正常组织[(1.65±1.05)%],但低于结、直肠癌组织,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 CD66c在结、直肠肿瘤组织中的表达高于正常组织;CD66c可做为结、直肠肿瘤的辅助诊断指标.     

磷酸肌酸钠对新生儿缺氧缺血性脑病氧化应激的影响及心肌损伤的保护作用

目的 探讨磷酸肌酸钠治疗新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)心肌损伤的疗效及可能作用机制。 方法 选择HIE合并心肌损伤患儿共92例,按数字表法将所有患儿随机分为对照组46例和治疗组46例;所有患儿均给予低流量吸氧等对症支持治疗;对照组给予单唾液酸四己糖神经节苷酯钠液静脉滴注,20 mg/次,1次/d;治疗组在对照组基础上加用注射用磷酸肌酸钠,0.5～1.0 g加入5%葡萄糖10 ml中微泵,1次/d;2组均给予2周治疗。比较2组患儿血清肌酸激酶(CK),肌钙蛋白I(cTnI)和肌酸激酶同工酶(CK-MB);免疫印迹法检测2组血清烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶2(NOX2)表达,检测2组患儿血清活性氧(ROS)、一氧化氮(NO)、核因子-κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素(IL)-6含量。 结果 治疗组患儿治疗后血清CK、cTnI和CK-MB水平均明显低于对照组(P＜0.01);治疗组患儿治疗后LVEF和E/A均明显高于对照组(P＜0.01);治疗后,治疗组患儿血清中NOX2、ROS、NO、NF-κB、TNF-α和IL-6含量均明显低于对照组,比较差异有统计学意义(P＜0.01)。 结论 磷酸肌酸钠治疗新生儿HIE可有效降低心肌损伤标志物,改善心功能,抑制NOX2/ROS氧化应激通路从而减缓下游炎症损伤是其可能机制之一。      

乳腺癌组织中平滑肌22α的表达与淋巴结转移的关系

目的 分析平滑肌(SM)22α在乳腺癌组织中的表达与淋巴结转移的关系,探讨SM22α参与乳腺癌淋巴结转移的分子机制.方法 应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测了27例乳腺癌组织及癌旁正常乳腺组织中SM22α表达水平;同时用Western印迹分析检测了12例乳腺纤维腺瘤组织、15例乳腺癌未转移组织、12例乳腺癌淋巴结转移组织中SM22α mRNA和蛋白表达水平;利用RT-PCR和明胶酶图检测乳腺纤维腺瘤、乳腺癌未转移、乳腺癌淋巴结转移组织中基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9表达和活性及组织金属蛋白酶抑制剂(TIMP)1表达水平.结果 RT-PCR检测结果显示,乳腺癌组织中SM22α mRNA表达水平(5.1%±2.4%)显著低于癌旁正常乳腺组织(30.1%±5.1%)(P＜0.01),淋巴结转移组乳腺癌组织中SM22α表达水平(6.2%±3.1%)显著低于无淋巴结转移组(10.1%±4.1%)及乳腺纤维腺瘤组织(15.1%±5.3%)(均P＜0.01).Western印迹分析结果表明,SM22α蛋白在无淋巴结转移组(14.5%±2.1%)及伴淋巴结转移组乳腺癌组织中(6.2%±3.1%)表达水平均显著低于乳腺纤维腺瘤组(26.8%±5.5%)(均P＜0.01).MMP2、MMP9表达水平及活性均显著高于未转移组(P＜0.01),乳腺癌组织中SM22α表达水平与MMP2(r=-0.848;n=27;P＜0.01)、MMP9(r=-0.916;n=27;P＜0.01)活性呈负相关.结论 SM22α在乳腺癌组织中表达下调与淋巴结转移有关,SM22α可能通过负性调节MMP2、MMP9表达抑制乳腺癌淋巴结转移.     

三七对酒精性肝病大鼠肝组织NF-κB/IκB表达的影响

目的 观察三七时酒精性大鼠肝组织的防治及时NF-κB/IκB表达的影响.方法 SD雄性大鼠随机分为正常组,模型组、三七高、低剂量组和硫普罗宁组,连续14周建立酒精性肝病模型.在模型制备同时,每天下午分别灌服给药,连续14周.ELISA法检测肿瘤坏死因子(TNF-α).常规HE及Masson染色,光镜观察肝组织的脂肪变、炎症及纤维化程度;免疫组化法检测肝组织中NF-κBp65/IκBα蛋白的表达.结果 酒精性肝病模型组大鼠肝组织脂肪变及炎症程度计分、血清TNF-α水平明显增高(P＜0.01).三七高、低剂量组,硫普罗宁组大鼠肝组织脂肪变及炎症程度、血清TNF-α水平较模型组明显减轻(P＜0.01,P＜0.05).酒精性肝病模型组大鼠肝组织NF-κBp65和IκBα均较正常组明显升高(P＜0.01);三七高、低剂量组大鼠肝组织NF-κBp65/IκBα表达较模型组明显降低(P＜0.01,P＜0.05).相关分析显示,肝组织NF-κBp65表达与肝组织炎症程度计分呈正相关(r=0.63,P＜0.01),与血清TNF-α水平呈正相关(r=0.43,P＜0.01);肝组织IκBα表达与肝组织炎症程度计分呈正相关(r=0.36,P＜0.05),与血清TNF-α水平呈正相关(r=0.44,P＜0.01);血清TNF-α水平与与肝组织炎症程度计分呈正相关(r=0.60,P＜0.01).结论 用白酒-玉米油-吡唑混合液灌服大鼠14周可成功制作ALD模型.三七可明显减轻酒精性肝病大鼠肝组织脂肪变和炎症程度.三七能显著抑制肝组织中NF-κBp65/IκBα的过度表达,降低血清TNF-α水平,这可能是其有效防治酒精性肝病的发生发展的重要机制之一.     

益气活血通络方对糖尿病周围神经病变小鼠JNK信号通路蛋白及炎性因子的影响

目的研究益气活血通络方对糖尿病周围神经病变模型小鼠(db/db小鼠)JNK信号通路蛋白及炎性因子的影响,探讨其对db/db小鼠周围神经的保护作用机制。方法 40只db/db小鼠随机分为5组:模型组、硫辛酸组和益气活血通络方高、中、低剂量(6.4、3.2、1.6 g/kg)组,另设8只db/m小鼠作为正常组。灌胃给药,1次/d,连续8周。末次给药后,测定小鼠足底热敏反应时间和运动神经传导速度(MNCV);酶联免疫吸附法(ELISA法)检测血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;Western blot法检测背根神经节中c-jun氨基末端激酶(JNK)和磷酸化的c-jun氨基末端激酶(p-JNK)的蛋白表达。结果与正常组比较,模型组小鼠MNCV减慢,足底热敏反应时间延长,血清中IL-1β、TNF-α水平升高,背根神经节中JNK、p-JNK蛋白的表达增强,差异具有统计学意义(P0.01或P0.05)。与模型组比较,益气活血通络方能提高小鼠MNCV,缩短足底热敏反应时间,降低血清中IL-1β、TNF-α水平,一定程度下调背根神经节中JNK、p-JNK的蛋白表达(P0.01或P0.05)。结论益气活血通络方能抑制JNK信号转导通路的异常激活,减轻db/db小鼠炎症反应,从而保护周围神经的功能。     

全反式维甲酸诱导大鼠肠神经系统发育异常的实验研究

目的利用全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)制作大鼠肠神经系统发育异常的动物模型,检测蛋白基因产物9.5(protein gene product 9.5,PGP9.5)及突触素(synaptophysin,SY)在胎鼠直肠肠壁胚胎发育过程中的分布,了解视黄酸(retinoie acid,RA)信号系统在鼠肠神经系统发育中的作用。方法妊娠SD母鼠共16只,随机分为两组,实验组在孕10d予ATRA一次性灌胃,对照组仅给等量橄榄油。孕20 d剖宫取出胎鼠,进行形态学观察和伴发畸形统计,HE染色和以PGP9.5、SY为肠神经系统(enteric nervous system,ENS)发育标志物的免疫组化SP法。结果对照组获胚胎70只,未见畸形,末端结肠及直肠壁内有神经节细胞,肠壁肌层及黏膜肌层PGP9.5及SY大量阳性表达,沿肠壁呈棕黄色颗粒分布;实验组获胚胎98只,可见先天性肛门直肠畸形及伴发畸形,直肠末端PGP9.5及SY阳性表达分布均比对照组减少。用QWIN3000生物图像分析软件测定随机选定切片视野内的平均阳性面积百分比,所有数据经秩和检验得出PGP 9.5及SY在对照组的表达高于实验组(PGP 9.5:W=1035.00,Z=-8.386,P=0.000<0.01;SY:W=820,Z=-8.121,P值=0.000<0.01),差异有统计学意义。结论 ATRA可成功诱导大鼠肠神经系统发育异常,提示视黄酸信号系统在消化道和神经嵴源性器官胚胎发育中起重要作用。     

全身炎症反应综合征新生儿血清脂联素和肿瘤坏死因子-α水平变化及临床意义

目的探讨全身炎症反应综合征(SIRS)新生儿血清脂联素和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的变化及其临床意义。方法选择2007年1月至2011年3月驻马店市第一人民医院收治的SIRS新生儿87例(SIRS组),并选择同期健康新生儿30例作为对照组,采用酶联免疫吸附测定法检测2组患儿血清脂联素和TNF-α水平。结果 SIRS组患儿血清脂联素水平显著低于对照组(P<0.01),TNF-α水平显著高于对照组(P<0.01);SIRS并发多器官功能障碍综合征(MODS)患儿血清脂联素水平显著低于未并发MODS患儿(P<0.01),血清TNF-α水平显著高于未并发MODS患儿(P<0.01);SIRS患儿血清脂联素水平与TNF-α水平呈显著负相关(r=-0.68,P<0.01)。结论检测血清脂联素和TNF-α水平有助于判断SIRS新生儿病情程度和预后。     

预防性横结肠双腔造瘘对直肠癌术后CPR及IL-6表达的影响

目的观察预防性横结肠双腔造瘘对直肠癌术后CPR及IL-6表达的影响。方法回顾性分析我院2007年1月～2012年1月104例直肠癌保肛手术患者病历资料,将其分为预防性横结肠双腔造瘘组（A组,22例）与未行造瘘组（B组,82例）,对比分析预防性横结肠双腔造瘘对CPR及IL-6表达的影响。结果术后12、24 h时,A组CPR水平与B组比较差异无统计学意义（P〉0.05）,从48 h开始,A组CPR水平与B组比较即有所降低,差异有统计学意义（P〈0.05）。96 h后,与B组比较,A组CPR水平降低显著,差异有高度统计学意义（P〈0.01）。在术后12 h时,A组IL-6水平与B组比较差异无统计学差异（P〉0.05）,从24 h开始,A组IL-6水平与B组比较即所降低,差异有统计学意义（P〈0.05）。48 h后,与B组比较,A组IL-6水平降低显著,差异有高度统计学意义（P〈0.01）。结论直肠癌患者保肛手术后行预防性横结肠双腔造瘘可减轻术后炎症反应。     

Cajal间质细胞及突触素在肛门直肠畸形动物模型末端直肠壁的表达及意义

目的 检测Cajal间质细胞(ICCs)及突触素(SY)在肛门直肠畸形胎鼠直肠肠壁的胚胎发育过程,探讨其表达的意义.方法 应用免疫组化、免疫荧光和Western blot方法检测正常与肛门直肠畸形胎鼠直肠末端组织c-kit、SY的表达情况.结果 正常组结肠及直肠壁内肠壁肌层及黏膜肌层c-kit、SY大量表达;畸形组胎鼠直肠末端壁内的分布均比对照组明显减少,发育延迟,但随着远离盲端,c-kit、SY出现并逐渐增多.正常胎鼠直肠末端壁内c-kit、SY总蛋白量明显高于畸形组(P<0.05).结论 Cajal间质细胞及突触素的分布异常是肛门直肠畸形动物模型直肠末端壁的重要病理改变之一.     

PML/RARα抑制GADD45A的转录表达

目的 研究异常转录因子PML/RARα对GADD45A的转录调控机制,为进一步阐释PML/RARα在急性早幼粒细胞白血病(APL)发病中的作用机制提供线索.方法 运用ChIP-PCR技术研究PML/RARα与GADD45A的结合情况;采用Real-TimePCR技术检测PR9细胞中GADD45A mRNA的表达水平,并分析其与PML/RARα融合蛋白表达的相关性;利用真核细胞表达载体在H1299细胞中过表达PML/RARα和p53蛋白,研究PML/RARα与p53对GADD45A的共调控关系.结果 PML/RARαChIP-qPCR结果显示:PML/RARα特异性抗体能够富集GADD45A基因功能区第3个内含子区的DNA片段,而非特异性IgG不能够富集;在PR9细胞中发现GADD45A mRNA表达水平与PML/RARα蛋白的表达呈负相关,说明在PR9细胞中PML/RARα融合蛋白能够抑制GADD45A的表达;在H1299细胞中单独转染野生型p53表达质粒后,GADD45A在mRNA水平显著上调,而共转染PML/RARα和野生型p53表达质粒后,PML/RARα能够显著抑制p53对GA DD45A在mRNA水平的上调作用(P＜0.01).结论 PML/RARα能够结合在GADD45A第3个内含子区域并抑制其转录表达.GADD45A同时也是p53的靶基因,PML/RARα与p53对GADD45A有共调控关系.PML/RARα能够抑制p53对GADD45A的转录激活效应.     

急性坏死性胰腺炎时肠道Toll样受体4的表达及其意义

目的:探讨急性坏死性胰腺炎(ANP)末端回肠组织中Toll样受体4(TLR4)的表达及其意义.方法:采用逆行胰胆管注射5%牛磺胆酸钠制作大鼠ANP模型(设为ANP组,40只),假手术组(20只)仅轻轻翻动胰腺3次后关腹.应用实时定量PCR检测不同组、不同时点末端回肠组织TLR4 mRNA表达变化,应用Western blot和免疫组化分析各组TLR4蛋白表达变化及组织学定位.结果:ANP组末端回肠组织TLR4 mRNA的表达为2.470±0.275,而假手术组为1.264±0.219,ANP时明显升高(P＜0.05).与假手术组相比,ANP组蛋白表达水平也显著升高(P＜0.05).TLR4 mRNA表达水平与肠黏膜通透性呈正相关(r=0.38,P＜0.05),也和肠黏膜的病理学评分相关(r=0.47,P＜0.01).ANP组回肠黏膜表面,黏膜固有层的T淋巴细胞、B淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞、嗜酸粒细胞,黏膜下层的动静脉、纵形和环形肌层等处都有较强的TLR4的表达.结论:ANP时,末端回肠组织内TLR4 mRNA和蛋白表达上调,可能与ANP肠黏膜的病理改变及肠源性感染的发生、发展有关.