Cmyc反义核酸对内皮素诱导的人肺动脉平滑肌细胞增殖抑制 …

应用不同浓度的Ｃ－ｍｙｃ反义寡核苷酸处理体外培养的经１０＾－８ｍｏｌ／Ｌ内皮素－１（ＥＴ－１）诱导的人肺动脉平滑肌细胞,通过细胞计数和＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入值观察该反义核酸对细胞增殖及ＮＤＡ合成的抑制作用,应用斑点杂交法检测平滑肌细胞Ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ的表达水平。结果表明,１０、２０、５０μｇ／ｍｌ反义寡核苷酸对细胞计数和＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入值与对照组相比抑制率分别为１１．９％和１２．３％     

c-myc反义寡核苷酸对低氧内皮细胞条件培养液诱导的肺血管周细胞增殖的影响

应用细胞培养、核酸斑点杂交、~３Ｈ－胸腺嘧啶核苷（~３Ｈ－ＴｄＲ）掺入、免疫细胞化学、图像分析等技术观察ｃ－ｍｙｃ反义寡核苷酸（ＯＤＮｓ）对低氧内皮细胞条件培养液（ＨＥＣＣＭ）诱导的大鼠肺血管周细胞ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ表达、增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达及~３Ｈ－ＴｄＲ掺入量的影响。结果表明,ＨＥＣＣＭ显著促进周细胞 ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ表达、ＰＣＮＡ表达（Ｐ＜０．０１）及~３Ｈ－ＴｄＲ掺入量增加（Ｐ＜０．０１）,反义ＯＤＮｓ显著阻抑 ＨＥＣＣＭ诱导的周细胞ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ表达、ＰＣＮＡ表达（Ｐ＜０．０１）及~３Ｈ－ＴｄＲ掺入量增加（Ｐ＜０．０５）,而同义ＯＤＮｓ无上述作用（Ｐ＞０．０５）。结果提示,ＨＥＣＣＭ可通过上调ｃ－ｍｙｃ基因表达促进肺血管周细胞增殖,反义ＯＤＮｓ通过下凋ｃ－ｍｙｃ基因表达,抑制ＨＥＣＣＭ诱导的肺血管周细胞增殖。     

c—myc反义寡核苷酸对低氧内皮细胞条件培养液诱导的肺血管？…

应用细胞培养、核酸斑点杂交、Ｈ＾３－胸腺嘧啶核苷（＾３Ｈ－ＴｄＲ）掺入、免疫细胞化学、图像分析等技术观察ｃ－ｍｙｃ反义寡核苷酸（ＯＤＮｓ）对低氧内皮细胞条件培养液（ＨＥＣＣＭ）诱导的大鼠肺血管周细胞ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ表达、增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达及＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入量的影响。结果表明,ＨＥＣＣＭ显著促进周细胞ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ表达、ＰＣＮＡ表达（Ｐ〈０．０１）及＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入量增加（     

卡托普利抑制自发性高血压大鼠左心室肥厚与血管紧张素Ⅱ及原癌基因c－myc，c－fos表达的关系

目的高血压左心室肥厚是心肌细胞肥大、间质细胞（主要是成纤维细胞）增生和胶原堆积的结果，这一病理改变与心脏局部肾素－血管紧张素系统和某些癌基因的表达密切相关。本文探讨自发性高血压大鼠左心室肥厚与心肌细胞及成纤维细胞的局部血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）及原癌基因ｃ－ｍｙｃ，ｃ－ｆｏｓ表达的关系，以及卡托普利逆转左心室肥厚的可能机理。方法雄性ＳＨＲ大鼠（ｎ＝４３）从宫内期开始给予卡托普利治疗（１００ｍｇ／ｋｇ·ｄ－１），到１６周停药，处死。性别、年龄配对的未治疗ＳＨＲ（ｎ＝３１）和ＷＫＹ大鼠（ｎ＝３２）作对照。测定收缩压（ＳＢＰ）、心率（ＨＲ）、左室重（ＬＶＭ）与体重（ＢＷ）比、左心室ｃ－ｍｙｃ，ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ表达（ＮｏｒｔｈｅｒｎＢｌｏｔ）、右心室心肌细胞与成纤维细胞的ｃ－ｍｙｃ蛋白、ｃ－ｆｏｓ蛋白、ＡｎｇⅡ表达（ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ，免疫组化）。结果卡托普利早期治疗显著降低ＳＨＲ１６周时的ＳＢＰ（１３８．４１±１８．０１ｍｍＨｇｖｓ１９３．２２±１９．０２ｍｍＨｇ，Ｐ＜０．０５），抑制左心室肥厚形成［ＬＶＷ／ＢＷ（ｍｇ／ｇ），２．６１±０．２０ｖｓ３．５９±０．３５，Ｐ＜０．０５］，ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达（随     

钩吻碱类提取物对小鼠脾细胞增殖反应的影响

钩吻碱类提取物在浓度大于１．２５μｇ／ｍｌ以上时对混合淋巴细胞培养反应（ＭＬＲ）均有不同程度的抑制作用，具有统计学意义（Ｐ＜０．０５）的最低抑制浓度为２．５μｇ／ｍｌ，抑制率为１８．３％。单独采用Ｃ５７ＢＬ／６ｊ小鼠脾细胞进行实验，促有丝分裂剂为细菌脂多糟（ＬＰＳ５μｇ／ｍｌ），在钩吻碱类提取物浓度为４０μｇ／ｍｌ才出现抑制作用（Ｐ＜０．０５），抑制率为１８％，改用刀豆蛋白Ａ（ＣｏｎＡ２μｇ／ｍｌ）刺激，钩吻碱类提取物最低抑制浓度为２０μｇ／ｍｌ，抑制率为１２．４％（Ｐ＜０．０５）．脾细胞先经ＣｏｎＡ活化．后用白细胞介素２（５ｕ／ｍｌ）维持培养，此时钩吻碱类提取物的最低抑制浓度为４０μｇ／ｍｌ．抑制率为１７．１％（Ｐ＜０．０５）。     

甲状腺功能亢进症的骨代谢和骨密度改变

目的　研究甲亢病人的钙磷代谢、骨代谢和骨密度改变及机理。方法　对３８ 例甲亢病人治疗前后用单能 Ｃ Ｔ（ Ｓ Ｅ Ｑ Ｃ Ｔ） 测定骨密度（ Ｂ Ｍ Ｄ） 变化,用双抗体法测定血Ⅰ型胶原羧基端前肽（ Ｃ Ｉ Ｃ Ｐ） ,骨钙素（ Ｂ Ｇ Ｐ） 和尿脱氧吡啶酚（ Ｄ Ｐ Ｄ） 排泄率的变化。结果　治疗前 Ｂ Ｍ Ｄ 明显降低［ 男（１２０±８） ｍｇ／ｃｍ ３ Ｈ Ａ,女（１１４ ±７ ．２） ｍ ｇ／ｃｍ ３ Ｈ Ａ］ 治疗后都恢复正常。血 Ｂ Ｇ Ｐ 男性从（１５ ．２ ±７ ．９）μｇ／ Ｌ 下降到（７ ．５ ±２ ．８）μｇ／ Ｌ（ Ｐ＜ ０ ．０５） ,女性从（１６ ．４ ±７ ．１）μｇ／ Ｌ 下降到（６ ．８ ±２ ．１） μｇ／ Ｌ（ Ｐ＜ ０ ．０１） 。血 Ｃ Ｉ Ｃ Ｐ 男性从（１８５ ±２３ ．５）ｎｇ／ ｍｌ 下降到（７０ ±１０ ．４）ｎｇ／ ｍｌ（ Ｐ＜ ０ ．０５） ,女性从（１６４ ±１６ ．２）ｎｇ／ ｍｌ 下降到（６９ ±９ ．２）ｎｇ／ ｍｌ（ Ｐ＜ ０ ．０５） 。尿 Ｄ． Ｐ． Ｄ 男性从（１３ ．７ ±２ ．５）ｎ Ｍ／ ｍ Ｍ 下降到（３ ．４ ±１ ．０） ｎ Ｍ／ ｍ Ｍ（ Ｐ＜ ０ ．０１） ,女性从（１４ ．６ ±２ ．３）ｎ Ｍ／ ｍ Ｍ 下降到（４ ．５ ±１ ．２     

肾上腺素能受体激动剂与阻断剂对血管平滑肌细胞增殖和c－fos，c－myc原癌基因表达的影响

目的：研究肾上腺素能受体激动剂与阻断剂对血管平滑肌细胞增殖、ＤＮＡ合成和ｃ－ｆｏｓ，ｃ－ｍｙｃ原癌基因表达的影响．方法：应用细胞培养、￣３Ｈ－胸腺嘧啶核苷掺入和斑点杂交的方法．结果：１～１０μｍｏｌ／Ｌ去甲肾上腺素（ＮＥ）和０．１～１０μｍｏｌ／Ｌ异丙基肾上腺素（ＩＳＯ）可明显促进离体培养的ＳＤ大鼠的主动脉平滑肌细胞增殖、￣３Ｈ－ＴｄＲ掺入和ｃ－ｆｏｓ，ｃ－ｍｙｃ原癌基因表达，并呈剂量依赖效应．该效应可为相应的受体阻断剂Ｐｈｅｎｔｏｌａｍｉｎｅ（１０μｍｏｌ／Ｌ）和Ｐｒｏｐｒａｎｏｌｏｌ（１０μｍｏｌ／Ｌ）所抑制（Ｐ＜０．０５）．结论：肾上腺素能受体激动剂可促进离体培养的大鼠主动脉平滑肌细胞的增殖、ＤＮＡ合成和原癌基因的表达，该效应可被其相应的阻断剂所抑制．     

绞股蓝总皂甙及与化疗药合用对体外培养慢粒急性变病人癌细胞增殖的影响

目的：观察绞股蓝总皂甙（ＧＰ）及ＧＰ与化疗药合用对体外培养慢性粒细胞性白血病急性变病人癌细胞增殖的影响。方法：用ＭＴＴ比色分析法测定ＧＰ及ＧＰ与阿糖胞苷（Ａｒａ－Ｃ）、高三尖杉酯碱ＨＨＲＴ分别合用对慢粒急变细胞的相对抑制率。结果：ＧＰ（１２．５～５０．０μｇ·ｍｌ－１）对体外培养慢性粒细胞性白血病急性变病人癌细胞具有明显抑制作用（Ｐ＜０．０５～０．０１）。ＧＰ（３．１２５μｇ·ｍｌ－１）同Ａｒａ－Ｃ（５．０μｇ·ｍｌ－１）、ＨＨＲＴ（６．７５μｇ·ｍｌ－１）分别合用相对抑制率（７７．０％，８６％）较单用Ａｒａ－Ｃ（１５．０μｇ·ｍｌ－１）或ＨＨＲＴ（２０．０μｇ·ｍｌ－１）的相对抑制率（４７％、４１％）高（Ｐ＜０．０５）。结论：１．ＧＰ对慢性粒细胞性白血病急性变病人癌细胞生长增殖具有抑制作用，呈剂量相关性。２．ＧＰ能增强阿糖胞苷、高三尖杉酯碱抑制增殖作用。     

自发性高血压大鼠主动脉血管平滑肌细胞异常增殖和自身肾素－血管紧张素系统的关系

目的以２０周龄自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）和正常血压大鼠（ＷＫＹ）胸主动脉平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）为模型，探讨ＳＨＲＡＳＭＣ异常增殖和自身肾素－血管紧张素系统（ＲＡＳ）的关系。方法用３Ｈ－ＴｄＲ参入量和倍增时间（ＤＴ）反映ＡＳＭＣ的增殖能力，放射免疫法测定血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）浓度，紫外分光光度法测定血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）活性。结果（１）ＳＨＲＡＳＭＣ３Ｈ－ＴｄＲ参入量显著高于ＷＫＹ，ＤＴ显著短于ＷＫＹ（Ｐ＜０．０１）。基础状态下，ＳＨＲＡＳＭＣ合成ＡｎｇⅡ、ＡＣＥ以及分泌ＡｎｇⅡ的量显著高于ＷＫＹ（Ｐ＜０．０１）。（２）在含２％ＦＣＳ的培养基中，１０－６ｍｏｌ／ＬＡｎｇⅡ使ＳＨＲ、ＷＫＹ的３Ｈ－ＴｄＲ参入量分别提高到对照组的３．３倍、２．２倍（Ｐ＜０．０１），ＳＨＲＡＳＭＣ在不同浓度ＡｎｇⅡ刺激时的３Ｈ－ＴｄＲ参入量显著高于ＷＫＹ（Ｐ＜０．０１），１０－６ｍｏｌ／ＬＡｎｇⅡ使ＳＨＲＡＳＭＣ细胞数增加７２．５±２３．１％（Ｐ＜０．０１），ＷＫＹＡＳＭＣ细胞数无显著增加，１０倍浓度ＡｎｇⅡ的Ｓａｒａｌａｓｉｎ对ＳＨＲ、ＷＫＹ３Ｈ－ＴｄＲ参入的抑制率分别为６６．７±３．３％，４４．７±９．９％（Ｐ＜０．０１）     

癌基因及抗癌基因在实验性动脉粥样硬化斑块中的转录表达

本研究以高胆固醇膳食饲养家兔建立了主动脉粥样硬化模型，选用ｖ－ｓｉｓ等６种癌基因和Ｒｂ抗癌基因片段为探针，分别与硬化斑块动脉壁及正常动脉壁总ＲＮＡ进行斑点杂交分析。结果表明，ｖ－ｓｉｓ、ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｍｙｃ癌基因表达与正常对照比较增加３倍以上（Ｐ＜０．０１），ｃ－ｊｕｎ和Ｈ－ｒａｓ表达增加２倍（Ｐ＜０．０１），ｖ－ｅｒｂ－Ｂ表达无改变，Ｒｂ抗癌基因表达显著减少（Ｐ＜０．０５）。这些结果提示，动脉粥样硬化斑块的形成及动脉平滑肌细胞的增殖可能与ｖ－ｓｉｓ，ｃ－ｆｏｓ，ｃ－ｍｙｃ，ｃ－ｊｕｎ，Ｈ－ｒａｓ等癌基因的表达增强及Ｒｂ抗癌基因表达减弱有关。     

结直肠癌组织抑癌基因PTEN和癌基因C-myc蛋白表达及其相关性

目的：探讨抑癌基因PTEN和癌基因C-myc在结直肠癌发生、发展中的作用及其相关性。 方法：采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶法（S-P法）,检测60例结直肠癌组织、10例癌旁组织及8例正常结直肠黏膜中PTEN和C-myc蛋白表达。 结果：结直肠癌组织中,C-myc蛋白表达阳性率为76.70%（46/60）,显著高于正常（0）及邻近结直肠(癌旁)组织（10%）,组间比较差异均有显著性（P<0.01）;C-myc蛋白过度表达与结直肠癌肝转移呈正相关关系（r＝5.540,P<0.05）,与TNM分期无相关性（r＝0.013,P>0.05）;结直肠癌组织中,PTEN蛋白表达阳性率为25.00%(15/60),显著低于正常（100%）及邻近结直肠(癌旁)组织（90%）（P<0.01）;PTEN蛋白表达与肿瘤分化程度呈正相关（r＝0.869,P<0.05）,与TNM分期、淋巴结转移和肝转移均呈负相关（r＝－0.791,r＝－0.741,r＝－0.634,P<0.05）;C-myc蛋白表达与PTEN蛋白表达水平呈负相关（r＝－0.322,P<0.001）。 结论：癌基因C-myc蛋白过度表达不能作为判断结直肠癌肿瘤状态的单独指标;抑癌基因PTEN蛋白的表达缺失在结直肠癌的发生、发展及转移过程中起促进作用,有望成为结直肠癌诊断和预后判断的标记物。     

Effect of C-myc antisense oligodeoxynucleotides on hypoxia-induced proliferation of pulmonary vascular pericytes

Muscularization of non- muscular arterioles ofintra- acinar pulmonary arteries is an important mor-phological feature of pulmonary vascular structuralremodeling( PVSR) during the development of hy-poxic pulmonary hypertension.Recent studies sug-gest that hypoxia could induce pericytes proliferationand differentiation into smooth muscle cell- like cells,which results in muscularization of non- muscular ar-terioles of the lung[1,2 ] . However,the mechanism ofhypoxia- induced proliferation of pe…     

丹参酮Ⅱ-A硫酸钠对低氧诱导肺血管平滑肌细胞增殖的影响

应用免疫细胞化学、流式细胞术和核酸原位杂交技术观测丹参酮Ⅱ-A硫酸钠(DS201)对肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增殖的影响.结果发现DS201能明显地阻抑PASMC由G0/G1期进入S期(P<0.05);使PASMC增殖细胞核抗原(PCNA)的表达及PDGF-A和B链mRNA的表达均显著降低(P<0.01).提示DS201可能通过下调PDGFmRNA基因表达而有效抑制HECCM诱导的PASMC增殖.     

Growth inhibiting effects of antisense eukaryotic expression vector of proliferating cell nuclear antigen gene on human bladder cancer cells

Objective To explore the growth inhibiting effects on human bladder cancer by antisense RNA targeting the proliferating cell nuclear antigen (PCNA) gene. Methods The eukaryotic expression vector for antisense PCNA cDNA was constructed and transferred into a bladder cancer EJ cell line. The PCNA expression in the cancer cells was detected by RT-PCR and Western blotting assays. The in vitro proliferation activities of the transferred cells were observed by growth curve, tetrazolium bromide (MTT) colorimetry, tritiated thymidine （3H-TdR）incorporation, flow cytometry and clone formation testing, while its in vivo anti-tumor effects were detected on nude mice allograft models.Results After the antisense vector, pLAPSN, was transferred, cellular PCNA expression was inhibited at both protein and mRNA levels. The growth rates of EJ cells were reduced from 27.91% to 62.07% (P&lt;0.01), with an inhibition of DNA synthesis rate by 52.31% (P&lt;0.01). Transferred cells were blocked at G0/G1 phases in cell-cycle assay, with the clone formation ability decreased by 50.81% (P&lt;0.01). The in vivo carcinogenic abilities of the transferred cancer cells were decreased by 54.23% (P&lt;0.05). Conclusions Antisense PCNA gene transfer could inhibit the growth of bladder cancer cells in vitro and in vivo, which provided an ideal strategy for gene therapy of human cancers.     

C5a反义肽对实验性脓毒症小鼠肺损伤的作用研究

目的研究C5 a反义肽(NH2-EARLQRVFLYVNPS-COOH)对盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)致脓毒症小鼠发生肺损伤的保护性作用。方法实验组小鼠CLP后即经尾静脉注射反义肽R4 1、2、4、8 mg/kg,浓度0.5mg/m l),观察不同剂量R4对小鼠96 h生存率的影响,并对肺组织进行病理观察,检测肺髓过氧化物酶(MPO)活性,检测动脉血氧分压、肺湿干比。结果相较于对照组,治疗组小鼠在R4使用浓度2 mg/kg时96 h生存率明显提高(P<0.05),动脉氧分压升高(P<0.01)、MPO和肺湿/干比降低(P<0.01)、病理改变减轻。结论反义肽R4在小鼠体内有良好的拮抗C5 a作用,对脓毒症小鼠肺的急性损伤有保护作用。     

右美托咪啶对开胸手术术后芬太尼自控静脉镇痛效果的影响

目的:探讨右美托咪啶对开胸手术患者术后芬太尼自控静脉镇痛效果的影响。方法:ASAⅠ~Ⅲ级择期行开胸手术患者40例,随机分成2组,术后均行静脉自控镇痛(PCIA),镇痛药配方为芬太尼20 μg/kg(C组),芬太尼20 μg/kg+右美托咪啶10 μg/kg(D组),用0.9%氯化钠注射液稀释至100 ml。初始负荷剂量2 ml,持续剂量2 ml/h,单次静脉快注(Bolus)剂量0.5 ml,锁定时间15 min。记录各组患者术后24 h内Bolus总按压次数及芬太尼用量,术后4、8、24、48 h的镇痛视觉模拟评分和Ramsay镇静评分,术后各组患者呼吸抑制、恶心呕吐、心率<50次/分,收缩压<90 mmHg等不良反应的发生情况,于麻醉前、术后4、8、24 h测定血清皮质醇浓度;于术后48 h评价患者满意度。结果:与C组比较,D组术后24 h内Bolus总按压次数减少,芬太尼用量降低(P<0.01);D组各时点Ramsay镇静评分均较C组明显升高(P<0.01),D组术后4 h和8 h的镇痛视觉模拟评分均较C组降低(P<0.01和P<0.05);2组患者呼吸抑制、恶心呕吐发生率及术后4～48 h皮质醇水平差异均无统计学意义(P>0.05),D组患者满意度高于C组(P<0.05)。结论:右美托咪啶复合芬太尼用于开胸手术后PCIA的效果优于单独应用芬太尼。     

反义寡脱氧核苷酸及卵泡刺激素对卵巢黏液性囊腺癌细胞增殖细胞核抗原表达的影响

目的 观察卵泡刺激素受体（FSHR）反义寡脱氧核苷酸（antisense ODN）及卵泡刺激素（FSH）对体外培养人卵巢黏液性囊腺癌（OMC）细胞增殖细胞核抗原（PCNA）表达的影响。方法 OMC细胞与不同浓度的FSH、antisense ODN和无义ODN（onnsensc ODN）共培育48、72h后．采用免疫细胞化学SP法检测细胞核内PCNA的表达。结果FSH明显增强PCNA的表达，而antiscnse ODN则显著降低PCNA的表达．与对照组比较．差异均有显著性意义（均P＜0．05或P＜0．01）；应用nonsensc,ODN未观察到其对PCNA表达的影响。同时．antisense ODN可明显拮抗FSH促PCNA表达增加的作用，差异有极显著性意义（P＜0．01）。结论 在OMC发展过程中，FSH具有一定的促进作用．antisense ODN可有效抑制癌细胞的增殖以及FSH的促增殖作用。     

Effects of Antisense Oligodeoxynucleotide to Follicle-stimulating Hormone Receptor on the Cell Proliferation and Apoptosis in Cells Derived from Human Ovarian Mucinous Cystadenocarcinoma in Vitro

The human ovarian mucinous cystadenocarcinoma (hOMC) cells were co-cultured with antisense oligodeoxynucleotide (antisense ODN), nonsense ODN, and follicle-stimulating hormone (FSH) at different concentrations for the purpose of observing the effects of antisense ODN to FSH receptor (FSHR) on the proliferation and apoptosis of cultured hOMC cells in vitro. The inhibitory rates of growth were measured by using MTT method on the 2nd, 4th, 6th, 8th and 10th days after the interference of antisense ODN, nonsense ODN, and FSH, respectively. The apoptotic rates and the cell cycles were determined by means of flow cytometry, the apoptosis indexes were detected by us-ing TUNEL, and the expression of caspase-3 was measured by using SP immunohistochemistry. Compared with that in the control group, the proliferative activity of hOMC cells was increased ob-viously in FSH groups (P<0.05 or P<0.01), decreased distinctly in antisense ODN groups (P<0.05 or P<0.01), and unchanged in nonsense ODN groups, respectively. Meanwhile, antisense ODN could significantly antagonize the FSH-promoted cell proliferative activity (P<0.01). Compared with those in the control group, the apoptotic rates and the expression of caspase-3 were dramatically increased in the mid- and high-dose antisense ODN groups (P<0.05 or P<0.01), while the number of cells in G1/G0 phase was significantly decreased and that in S phase distinctly increased (P<0.01). There was no change in nonsense ODN groups (P>0.05). It was suggested that FSH may improve the develop-ment of hOMC cells. However, antisense ODN could inhibit proliferative activity and the FSH-promoted proliferative activity in hOMC cells, at the same time, antisense ODN could inhibit hOMC cell growth by inducing apoptosis.     

Calcineurin/NFAT信号通路上调5型磷酸二酯酶的表达及介导内皮素-1诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖

目的探讨Calcineurin/NFAT 信号通路是否介导内皮素-1（ET-1）诱导的5 型磷酸二酯酶（PDE5）的表达及肺动脉平滑肌
细胞（PASMCs）的增殖;同时验证Calcineurin 抑制剂环孢素A及PDE5 抑制剂西地那非能否抑制ET-1 刺激的PASMCs增殖。
方法以ET-1 刺激PASMCs 增殖,分别于ET-1 刺激前给予环孢素A 或西地那非抑制Calcineurin 或PDE5 的活性。采用
Calcineurin活性检测试剂盒检测其活性,免疫印迹法检测PDE5的表达,酶联免疫吸附法检测cGMP的含量,3H-TdR渗入法检
测PASMCs 的增殖。结果ET-1 可激活原代培养的PASMCs 中Calcineurin 的活性,上调PDE5 表达,降低cGMP 的水平。
Calcineurin特异性抑制剂环孢素A可阻断ET-1的上述作用;抑制PDE5的活性可逆转ET-1导致的cGMP含量减少。而环孢素
A及西地那非可分别抑制ET-1 刺激的PASMCs增殖。结论ET-1 可通过激活Calcineurin/NFAT 信号通路介导ET-1 诱发的
PDE5 表达,进而降低cGMP 含量,引起PASMCs 增殖;而抑制Calcineurin 或PDE5 可提高cGMP 水平,抑制ET-1 诱导的
PASMCs增殖。
     

Effect of antisense oligonucleotides of telomerase on the growth of RCZ cells derived from renal cell carcinoma in culture

目的 :研究端粒酶反义抑制剂对肿瘤细胞的影响。方法 :以端粒酶 RNA模板区为靶点 ,序列为 TAGGGTTAGACAA的硫代磷酸修饰的反义寡核苷酸 ( PS- ASON)及 1 3个寡核苷酸的随机引物与肾癌细胞株 RCZ细胞共同孵育 ,计数 1～ 43d细胞数 ,计算细胞倍增时间 ,通过 MTT法测定 ASON对细胞生长的抑制率。结果 :ASON实验组与随机引物对照组比较能明显减少细胞增殖数目 ( P<0 .0 1 )、增加抑制率 ( P<0 .0 1 )及延长倍增时间 ( P<0 .0 0 5) ;并且其抑制效果显示出剂量的依赖性 ( P<0 .0 5) ,具有序列选择特异性。结论 :以端粒酶 RNA模板区为靶点的反义寡核苷酸抑制肾癌 RCZ细胞增殖 ,可能对肿瘤治疗有潜在的意义