不同浓度的续断总皂甙对成骨细胞增殖、分化和细胞周期的影响

目的通过续断总皂甙对成骨细胞的体外培养,探寻不同浓度的续断总皂甙对成骨细胞增殖、分化和细胞周期的影响及可能存在的量效关系。方法 (1)分离、培养小鼠的原代成骨细胞。(2)将续断总皂甙配制成不同浓度的培养基(10-6g/ml、10-5 g/ml和10-4g/ml 3组),并分别培养成骨细胞,采用四氮唑蓝法(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)检测细胞增殖能力;细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)检测细胞的分化;流式细胞分析细胞周期。结果与空白对照组比较,续断总皂甙能够促进成骨细胞的增殖,增加碱性磷酸酶的表达及显著提高细胞增殖率、S期细胞比率和细胞增殖指数,其中10-5g/ml浓度组比10-6g/ml和10-4g/ml浓度组更加显著。结论在一定浓度范围内续断总皂甙可促进成骨细胞增殖、分化和提高细胞增殖指数,可能是该药促进骨折愈合、防治骨质疏松的机制之一。     

不同浓度淫羊藿苷对大鼠成骨细胞增殖、分化的影响

目的：观察不同浓度淫羊藿苷对体外培养大鼠成骨细胞增殖、分化及功能的影响。方法：利用酶消化法从新生小鼠颅盖骨中分离和培养成骨细胞;用组织化学染色和矿化结节法进行细胞鉴定;用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测不同淫羊藿苷浓度对大鼠成骨细胞的增殖、分化作用;同时通过检测成骨细胞碱性磷酸酶的活性,以观察淫羊藿苷对成骨细胞功能的影响。结果：与各浓度组比较,10μg/L淫羊藿苷对成骨细胞的生长增殖、分化均有促进作用,且作用最强,最为持久。结论：浓度为10μg/L的淫羊藿苷能显著促进成骨细胞增殖,并增强其成骨活性。     

川续断总皂苷对大鼠成骨细胞增殖、分化及OPG/RANKL mRNA表达的影响

目的研究川续断总皂苷对大鼠成骨细胞增殖、分化及护骨素/核因子κB受体活化因子配体(OPG/RANKL)mRNA表达的影响。方法不同浓度的川续断总皂苷作用于体外培养的大鼠成骨细胞不同时间,采用MTT法检测成骨细胞增殖功能,PNPP法检测成骨细胞中ALP活性,半定量RT-PCR法检测成骨细胞中OPG/RANKL mRNA。结果 20、50μg/mL川续断总皂苷可显著促进成骨细胞的增殖(P0.05或P0.01);20、50μg/mL川续断总皂苷可显著促进成骨细胞的分化(P0.05或P0.01);10、20、50μg/mL川续断总皂苷可显著上调成骨细胞中OPG/RANKL mRNA的比值,抑制破骨细胞的分化(P0.01)。结论川续断总皂苷对体外培养的大鼠成骨细胞的增殖、分化及破骨细胞的分化有显著影响。     

神经生长因子对人牙周膜细胞增殖与分化作用的研究

目的 研究神经生长因子对体外培养的人牙周膜细胞增殖和分化作用的影响.方法 采用四唑盐比色法(MTT)和碱性磷酸酶(ALP)活性检测法,测定不同浓度(0.1 U/ml、1 U/ml、10 U/ml、100 U/ml)的神经生长因子对体外培养的第5-6代人牙周膜细胞增殖及碱性磷酸酶活性的作用.结果 与对照组(2?S的DMEM培养液)相比,1,10,100 U/ml的神经生长因子都可促进人牙周膜细胞的增殖,但10 U/ml作用最显著;100 U/ml的神经生长因子可显著促进碱性磷酸酶的活性(P＜0.01).结论 不同浓度的神经生长因子可显著促进人牙周膜细胞的增殖与分化.     

护骨胶囊对成骨细胞增殖、分化影响

目的：探讨护骨胶囊对体外培养的大鼠成骨细胞增殖、分化的影响。方法：采用多次酶消化法分离出大鼠颅盖骨的成骨细胞,采用MTT法和碱性磷酸酶法分别检测护骨胶囊对成骨细胞增殖和分化的作用;采用SYBRgreenI嵌合的RT-PCR方法检测Runx2mRNA表达水平。结果：护骨胶囊在浓度0.025~2.5μg/mL对成骨细胞有促增殖的作用,护骨胶囊在浓度0.025~25μg/mL对碱性磷酸酶的活性均有提高的作用,护骨胶囊在浓度25μg/mL下,对Runx2mRNA水平有上调的作用。结论：护骨胶囊对成骨细胞有促增殖、促分化的作用,可能与上调Runx2mRNA水平有关。     

依普拉芬对新生大鼠颅盖骨成骨细胞增殖和分化的影响

目的 研究依普拉芬对体外培养的原代大鼠成骨细胞增殖和分化功能的影响.方法 体外分离培养新生大鼠颅盖骨成骨细胞,将不同浓度的依普拉芬加入培养液,测定细胞增殖情况、碱性磷酸酶(ALP)活性及钙化结节.结果 与阴性对照组相比, 各浓度组的依普拉芬均可增加成骨细胞数量(P＜0.01),提高细胞的ALP活性和促进钙化结节形成(P＜0.01),其中10-8～10-5 mol/L作用更为显著.结论 依普拉芬具有促进体外培养成骨细胞增殖、分化的作用.     

大豆异黄酮对体外原代大鼠成骨细胞增殖、分化的影响

目的 :研究大豆异黄酮对体外培养原代大鼠成骨细胞增殖与分化的影响。方法 :采用新生大鼠颅骨分离培养成骨细胞 ,培养液中加入不同浓度的大豆异黄酮 ,以17- β 雌二醇 (E2)作为阳性对照组 ,测定细胞增殖情况、碱性磷酸酶 (ALP)活性及骨钙素 (BGP)含量。结果 :与正常对照组相比 ,大豆异黄酮可增加成骨细胞数量(P<0.01) ,提高细胞的ALP活性和BGP含量(P<0.01)。除ALP外 ,这些作用均低于E2(P<0.01)。结论 :大豆异黄酮可促进体外培养成骨细胞的增殖、分化 ,其作用与雌激素相似 ,但低于雌激素     

碱性成纤维细胞生长因子对体外培养的兔骨髓基质细胞生长特性的影响

目的：研究骨髓基质细胞（BMSC）在体外培养条件下分化为成骨细胞的能力，及碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对其贴附、增殖、分化的影响。方法：将各组BMSC传代后加入bFGF，其浓度分别为0、5、10、50、100、200?ng/ml，用倒置相差显微镜、电镜、四唑盐比色法、碱性磷酸酶（ALP）染色、钙染色和电子探针等方法观察其形态、贴附、生长增殖活性、分化成熟和体外钙化的状况。结果：经10?ng/ml bFGF诱导后，BMSC贴附细胞数量明显增加。当100?ng/ml时，bFGF对BMSC的促增殖作用达到最大值。当加入bFGF时，ALP染色阳性率降低，当bFGF浓度为100?μg/L时阳性率最低（P<0.01）。传代细胞连续培养30?d后钙染色结果呈阳性，电子探针检测矿化区的Ca/P值与羟基磷灰石结晶中Ca/P值相符。电镜观察可见培养的细胞具有典型的成骨细胞形态特征，并能产生胶原纤维。结论：BMSC在体外培养条件下具有分化为成骨细胞的能力，bFGF能够促进细胞的贴壁和增殖，但对其分化成熟具有抑制作用。     

β2肾上腺素受体阻滞剂对雌激素刺激大鼠成骨细胞分化与增殖的影响

目的:研究β2肾上腺素受体阻滞剂对雌激素刺激大鼠成骨细胞分化与增殖的影响.方法:将不同浓度的β2肾上腺素受体阻滞剂(ICI118551)加入含雌激素(17β-E2)培养的第2代大鼠成骨细胞中,分别于培养3、6、9、12天时,使用PNPP法和放免方法检测成骨细胞培养基中的碱性磷酸酶(ALP)活性和骨钙素含量,并用MTT法检测成骨细胞的增殖率.结果:ICI118551可提高雌激素刺激成骨细胞培养上清中碱性磷酸酶浓度促进细胞增殖,尤其当其浓度为10-5及10-6mol/L时,但对成骨细胞培养上清中骨钙素水平的影响不显著.结论:β2肾上腺素受体阻滞剂能够显著促进雌激素刺激大鼠成骨细胞的释放和增殖作用.     

rhBMP-4对大鼠成骨细胞增殖及分化能力的影响

目的 探讨rhBMP-4对大鼠成骨细胞生长增殖及分化的影响.方法 取大鼠颅盖骨组织块,采用改良组织块混合酶消化法培养成骨细胞,将不同浓度的rhBMP-4加入第4代成骨细胞的培养基继续进行细胞培养,用MTT法测定细胞在第1,3,5 天的增殖情况,用碱性磷酸酶试剂盒检测成骨细胞碱性磷酸酶的活性.结果 第1,3,5 天,5～40 ng/ml的rhBMP-4对成骨细胞的生长增殖能力的影响与对照组比较差异均有显著性(P＜0.05);第1,3 天,5～40 ng/ml的rhBMP-4对成骨细胞碱性磷酸酶活性的影响与对照组比较差异均有显著性(P＜0.05),第5天,rhMP-4各浓度组与对照组比较无统计学意义.结论 在一定时间范围内,rhBMP-4对成骨细胞生长增殖及分化有促进作用.