17-β雌二醇对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能、一氧化氮产生和诱导型一氧化氮合酶表达的影响

目的研究17-β雌二醇(E2)在体外对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能、一氧化氮(NO)生成及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响。方法取小鼠腹腔巨噬细胞,Griess反应检测不同浓度E2对小鼠腹腔巨噬细胞NO生成时间和剂量依赖性影响,中性红吞噬试验检测小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能,逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法检测iNOSmRNA的表达。结果低浓度E2组(10-9mol.L-1、10-8mol.L-1、10-7mol.L-1)巨噬细胞吞噬能力、NO产生及iNOS表达从4 h开始均较对照组增高(P<0.05),其中10-7mol.L-1E2作用最为明显;高浓度E2组(10-6mol.L-1、10-5mol.L-1)巨噬细胞吞噬能力、NO产生及iNOS表达则有明显的降低(P<0.05),且浓度越高降低越明显。结论E2对小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能、NO产生及iNOS表达有显著的调节作用,且呈现剂量相关性。     

牛磺酸对小鼠腹腔巨噬细胞功能调节作用的体外研究

目的 研究牛磺酸对小鼠腹腔巨噬细胞功能的调节作用。方法 收集小鼠腹腔巨噬细胞,调整细胞浓度为2×10⁵/mL,分为5组,即正常对照组,LPS对照组(LPS终浓度为1 μg/mL)和低、中、高牛磺酸剂量组(牛磺酸的终浓度分别为5、50和500 μg/mL),培养24 h后ELISA法检测细胞上清中IL-12、TNF-α、IL-1、IL-6含量;瑞氏染色法检测并计算巨噬细胞对白色葡萄球菌的吞噬率和吞噬指数、Griess法检测吞噬葡萄球菌后细胞上清中NO的含量。结果 各剂量牛磺酸组的腹腔巨噬细胞TNF-α和IL-6含量均高于正常对照组(P<0.05),高剂量牛磺酸组IL-12的含量高于对照组(P<0.05),各剂量的牛磺酸组IL-1含量与对照组比较没有统计学意义;中、高剂量的牛磺酸组巨噬细胞对葡萄球菌的吞噬率、吞噬指数和上清中NO 的含量均高于正常对照组(P<0.05)。结论 牛磺酸可调节小鼠腹腔巨噬细胞IL-12、TNF-α、IL-6的分泌,但对IL-1的分泌没有调节作用,牛磺酸可促进巨噬细胞对葡萄球菌的吞噬和杀伤功能。     

芦荟多糖对小鼠腹腔巨噬细胞NO生成和iNOS酶活性的影响

目的探讨芦荟多糖(AloePolysaccharides,AP)对体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞一氧化氮(nitricox-ide,NO)生成和诱导型一氧化氮合酶(induciblenitricoxidesynthase,iNOS)酶活性的影响。方法体外培养小鼠腹腔巨噬细胞,分别用0～400mg/L浓度的AP刺激24h,采用Griess反应测定NO生成量,荧光法检测iNOS活性。结果AP在25～400mg/L浓度范围内作用于小鼠腹腔巨噬细胞24h后,NO生成量增加、iNOS活性增高,除低浓度AP组(25mg/L)外,其余各浓度组差别均具有非常显著性意义(P<0.01),并呈显著正相关(r=0.7523,P<0.01);转录抑制剂放线菌素D、蛋白质合成抑制剂放线菌酮和NOS竞争性抑制剂L-NMA,均能有效抑制AP所诱导的巨噬细胞NO生成和细胞内iNOS活性(P<0.01)。结论AP能促进细胞内iNOS基因表达,以从头合成方式促进细胞NO合成和释放,所释放的NO可能参与AP的免疫调节过程。     

15d-PGJ2抑制LPS对巨噬细胞的毒性作用

目的探讨15-脱氧前列腺素J2(15d-PGJ2)作用下脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对巨噬细胞毒性作用的影响.方法体外培养Wistar大鼠腹腔巨噬细胞,加入LPS(终浓度为10 μg/ml)的同时加入终浓度为2μg/ml的15d-PGJ2,用MTT法检测巨噬细胞活力;用硝酸还原酶法测一氧化氮(NO)的浓度.结果巨噬细胞经LPS(10μg/ml)处理后,于24 h开始MTT值明显下降,与对照组、15d-PGJ2组相比,差异有显著性(P＜0.05),LPS+15d-PGJ2组与其他3组相比,MTT值在48 h后表现出显著性差异(P＜0.05),LPS组NO在前24 h内释放明显增多,高于对照组、15 d-PGJ2组和LPS+15d-PGJ2组(P＜0.05),24h后NO释放减少.LPS+15d-PGJ2组NO的释放在24h后均高于对照组和15d-PGJ2组,差异有显著性(P＜0.05).结论15d-PGJ2能部分拮抗10μg/ml LPS对巨噬细胞的毒性作用,可能与NO的产生有关.提示15d-PGJ2可作为维持巨噬细胞活性药物,以防止内毒素诱导的免疫损伤.     

牡蛎糖胺聚糖对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的影响

目的:探讨牡蛎糖胺聚糖(O-GAG)对Ⅰ-型单纯疱疹病毒感染小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的影响。方法:采用巨噬细胞体外培养的方法,观察每组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力、胸腺指数和脾指数。结果:随O-GAG浓度的增加,腹腔巨噬细胞吞噬能力显著增强,与病毒组比较,差异有显著意义(P<0.05或0.01)。胸腺指数ACV和O-GAG低、中、高剂量组与正常对照组比较,差异有显著意义(P<0.05或0.01),O-GAG高剂量组与病毒组比较,差异有显著意义(P<0.01)。脾脏指数O-GAG中、高剂量组与正常对照组比较,差异有显著意义(P<0.05或0.01),O-GAG高剂量组与病毒组比较,差异有显著意义(P<0.01)。结论:牡蛎糖胺聚糖能显著提高Ⅰ-型单纯疱疹病毒感染小鼠胸腺指数和脾脏指数,增强腹腔巨噬细胞吞噬能力,具有免疫增强作用。     

海洋真菌多糖YCP对巨噬细胞免疫功能的影响

目的:研究海洋真菌多糖(YCP)促进巨噬细胞的免疫调节作用,探讨其抗肿瘤作用的机理.方法:在体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞中加入不同浓度的YCP后,观察其对巨噬细胞一氧化氮(NO)、IL-1的合成及吞噬功能的影响.结果:YCP多糖能促进巨噬细胞NO、IL-1的合成,并能显著增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红的作用.结论:YCP能增强小鼠腹腔巨噬细胞的免疫作用,这可能是其抗肿瘤作用的机理之一.     

双歧杆菌脂磷壁酸对刀豆蛋白A活化小鼠肝细胞肿瘤坏死因子-α和一氧化氮水平的影响

目的研究双歧杆菌脂磷壁酸(LTA)对刀豆蛋白A(Con A)活化小鼠肝细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和一氧化氮(NO)水平的影响,探讨临床应用LTA治疗免疫性肝损伤的可能性。方法将用胶原酶灌注法获取的小鼠肝细胞分为对照组(达尔伯克改良伊格尔培养基完全培养液)、LTA+Con A处理组(LTA终浓度分别为1.0、2.0、4.0μg.L-1,Con A终浓度为10 mg.L-1)和Con A组(Con A终浓度为10mg.L-1);细胞处理24 h后,采用酶联免疫吸附法测定肝细胞上清液中TNF-α和NO水平,反转录-聚合酶链反应检测肝细胞TNF-αmRNA水平。结果 ConA组肝细胞上清液中TNF-α和NO水平及肝细胞TNF-αmRNA水平均显著高于对照组(P<0.05),不同浓度的LTA处理后上述各指标均较Con A组显著降低(P<0.05),且LTA的作用与其浓度呈一定的梯度关系。结论 LTA可能通过抑制Con A活化的小鼠肝细胞体外TNF-α和NO的生成发挥对免疫性肝损伤的保护作用。     

β-肾上腺素能受体对BALB/C小鼠腹腔巨噬细胞分泌TNF-α和IL-10及吞噬功能的双向调节作用

目的通过观察异丙肾上腺素和普萘洛尔分别对BALB/C小鼠腹腔巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子(TNF-α)和白介素-10(IL-10)以及吞噬功能的影响,分析β肾上腺素能受体对巨噬细胞细胞功能的调节作用。方法将培养的BALB/C小鼠腹腔巨噬细胞细胞分为4组:空白组用生理盐水处理作为空白对照组;脂多糖组以10μg/ml脂多糖刺激;普萘洛尔组分别以不同浓度的普萘洛尔(0.1、1、10μmol/L)预处理后,再以10μg/ml脂多糖刺激;异丙肾上腺素组分别以不同浓度的异丙肾上腺素(10、100、300μmol/L)预处理后,再以10μg/ml LPS刺激。加入不同浓度药物培养6 h后,采用酶联免疫法测定各培养瓶上清液中TNF-α的浓度,24 h后测定IL-10的浓度,并用中性红吞噬试验检测巨噬细胞吞噬功能。结果在用脂多糖刺激的情况下,普萘洛尔呈浓度依赖性的增加TNF-α分泌,减少IL-10分泌,并使巨噬细胞吞噬功能下降,而异丙肾上腺素(ISO)作用却正好相反。结论对BALB/C小鼠,可以通过腹腔巨噬细胞膜上的β肾上腺素能受体,实现对炎症介质的释放和细胞吞噬能力的双向调节作用。     

黄伞多糖的提取及对小鼠腹腔巨噬细胞的激活效应研究

目的　探讨黄伞多糖的提取方法及对小鼠腹腔巨噬细胞的激活作用。方法　采用水提醇沉的方法提取黄伞多糖 ,体外诱导培养小鼠腹腔巨噬细胞。用ELISA法检测培养上清中的细胞因子 ,Griess试剂检测其NO的含量 ;FACS检测巨噬细胞吞噬功能 ;MTT间接法观察巨噬细胞体外杀伤活性的变化。结果　黄伞多糖组巨噬细胞产生IL 1β及NO的水平明显高于PBS对照组 ,黄伞多糖组巨噬细胞吞噬功能、杀伤活性明显高于PBS对照组 ,两组间各项指标比较均有显著性差异 (均 P <0 0 5 )。结论　黄伞多糖能激活小鼠巨噬细胞 ,可增强巨噬细胞IL 1β及NO产生的水平 ,增强其吞噬功能及体外杀伤活性。     

冬虫夏草对IgA肾病小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响

目的探讨冬虫夏草对IgA肾病小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响。方法将30只BALB／c小鼠按体重随机分为正常对照组,模型组与虫草组,采用半体内法测定小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力,以吞噬百分率和吞噬指数作为腹腔巨噬细胞吞噬功能的指标。结果虫草组腹腔巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数均高于模型组(P＜0.05),血清循环免疫复合物(CIC)低于模型组(P＜0.05)。结论冬虫夏草可以改善IgA肾病小鼠巨噬细胞吞噬功能,降低CIC。     

三七总苷对佐剂性关节炎大鼠腹腔巨噬细胞释放一氧化氮的影响

[目的]研究三七总苷（PNS）对佐剂性关节炎（AA）大鼠腹腔巨噬细胞释放一氧化氮（NO）的影响。[方法]大鼠右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂诱发大鼠AA模型，采用硝酸还原酶法检测AA大鼠腹腔巨噬细胞释放的NO。[结果]体外给药PNS0．4mg／ml，作用4h时，增加AA大鼠NO释放（P〈0．05）；体外给药PNS0．2mg／ml及0．4mg／ml，作用8h时，抑制AA大鼠NO释放（P〈0．05，P〈0．01）；体外给药PNS0．8mg／ml及PNS1．6mg／ml，作用24h时，增加AA大鼠NO释放（P〈0．01，P〈0．05）。[结论]PNS体外给药随浓度及作用的时间变化，对AA大鼠释放NO有双向调节作用，PNS抑制AA大鼠腹腔巨噬细胞释放NO可能在AA治疗中起一定的作用。     

创伤对小鼠抗感染能力及腹腔巨噬细胞吞噬作用的影响

以截肢小鼠作为手术创伤动物模型,观察了创伤对小鼠抗感染能力及腹腔巨噬细胞吞噬作用的影响.实验表明,创伤后机体对细菌感染的敏感性明显高于对照组(p<0.05),腹腔巨噬细胞的吞噬能力受到抑制(P<0.01).提示创伤所致的巨噬细胞吞噬功能抑制可能与创伤后感染有关.     

子宫内膜异位症患者腹腔液一氧化氮对人精子活力的影响

目的了解子宫内膜异位症(EMS)患者腹腔液一氧化氮(NO)对人精子活力的影响,探讨NO与EMS妇女低妊娠率之间的关系。方法通过腹腔镜抽取EMS组、EMS合并不孕组及对照组腹腔液,分离、培养腹腔液中的巨噬细胞,检测细胞培养液中NO代谢物(硝酸盐和亚硝酸盐)浓度,将细胞培养液与精液共同孵育后检测精子的活力。结果EMS组和EMS合并不孕组细胞培养液NO代谢物水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);EMS合并不孕组患者细胞培养液与精液孵育后精子运动指标低于对照组与EMS组(P<0.05),对照组与EMS组之间精子运动指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论EMS合并不孕患者腹腔液巨噬细胞培养液对精子活力有抑制作用,但未能证实与腹腔液中NO水平有关。     

聚酰胺-胺对大鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响

目的 研究聚酰胺-胺(poly-amidoamine,PAMAM)对大鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响.方法 采用CCK-8试剂盒检测PAMAM对巨噬细胞的细胞毒性.通过巨噬细胞吞噬印度墨汁实验和吞噬鸡红细胞实验,观察PAMAM对巨噬细胞吞噬功能的影响.采用扫描电子显微镜(SEM)观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的形貌.结果 0.1-10 mg/mL的G5 PAMAM-NH2和10 mg/mL的G4.5 PAMAM-COOH对巨噬细胞有毒性(P<0.05).0.01 mg/mL的G5 PAMAM-NH2、G4.5 PAMAM-COOH、G5 PAMAM-OH对巨噬细胞均无毒性(P>0.05).0.01 mg/mL的PAMAM对巨噬细胞吞噬鸡红细胞形貌、吞噬率和吞噬指数均无影响(P>0.05).结论 PAMAM的浓度在0.01 mg/mL范围内,未观察到其对大鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能有影响.     

Maresin 1通过调控miR-340增强巨噬细胞吞噬功能

目的：研究促消退介质Maresin 1（MaR1）在脓毒症模型中促进巨噬细胞吞噬功能的机制。方法：通过检测F4/80表达情况评估小鼠原代巨噬细胞纯度。体内外脓毒症模型验证脂多糖（LPS）和/或MaR1对miR-340表达的影响。骨髓巨噬细胞转染miR-340模拟物（mimic）或抑制剂（inhibitor）后,qRT-PCR检测miR-340的表达量,评估转染效率。荧光显微镜及流式细胞仪检测小鼠原代巨噬细胞转染miR-340 mimic后巨噬细胞吞噬荧光微球能力的变化。最后收集临床样本检测脓毒症患者血浆中miR-340的表达与健康志愿者的区别。结果：经荧光显微镜和流式细胞仪鉴定小鼠原代巨噬细胞纯度达90%以上。体内外脓毒症模型均显示miR-340的表达明显升高（P＜0.05）。脓毒症患者与健康志愿者相比血液中miR-340的表达也显著增强（P＜0.05）。荧光显微镜及流式细胞仪检测小鼠原代巨噬细胞转染miR-340 mimic后,巨噬细胞吞噬荧光微球的能力降低（P＜0.05）。在体内外脓毒症模型中,MaR1均明显降低miR-340的表达水平（P＜0.05）。结论：MaR1通过抑制miR-340的表达,增强巨噬细胞吞噬功能,在脓毒症病理生理过程中发挥抗炎促消退作用。     

海藻多糖对小鼠巨噬细胞的免疫调节作用

目的：探讨海藻多糖对小鼠巨噬细胞吞噬功能、产生IL-1以及海藻多糖对小鼠淋巴细胞增殖作用和细胞因子IFN-γ的影响。方法：将不同浓度的海藻多糖加入体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞中,采用中性红法、胸腺增殖法分别检测海藻多糖对小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能及其产生IL-1;用MTT法检测细胞增殖;酶联免疫法测定脾细胞培养上清IFN-γ的浓度。结果：海藻多糖对小鼠巨噬细胞吞噬功能具有一定的促进作用,并能促进巨噬细胞IL-1的合成,并通过诱生IFN-γ而发挥免疫调节作用。结论：海藻多糖能够增强小鼠巨噬细胞的免疫作用。