宫颈癌与癌前病变组织中HPV-16的整合感染状态

目的探讨宫颈癌及宫颈癌前病变中人类乳头瘤病毒16型（HPV-16）整合人宿主基因组的发生情况。方法选取252例宫
颈病变组织,其中宫颈癌48例,宫颈上皮内瘤样病变（CIN）204例,包括CINⅠ125例、CINⅡ46例、CINⅢ33例,另取因子宫肌
瘤行全子宫切除术的正常宫颈上皮20例为对照,采用重叠定量PCR检测HPV-16感染标本中病毒整合状态。结果宫颈癌中
HPV-16阳性感染31例,占宫颈癌患者总数的65.6%（31/ 48）,其中HPV-16整合感染18例,占HPV-16阳性宫颈癌患者的58.1%
（18/31）;在CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ中,HPV-16阳性感染率分别为19.2%（24/125）、34.8%（16/46）、42.4%（14/33）,整合感染率分别
为16.7%（4/24）、18.8%（3/16）、35.7%（5/14）;与不同级别CIN病变相比,宫颈癌患者的HPV-16整合感染率明显增加,差异具有
统计学意义。结论HPV-16整合感染状态与宫颈病变严重程度呈正相关,在HPV DNA检测基础上联合应用高危HPV感染状
态的检测有利于提高宫颈癌筛查的靶向性并早期预测宫颈病变的转归。
     

宫颈癌及癌前病变中的HPV-16整合人宿主基因组的发生情况及其在宫颈癌筛查中的应用

目的:探讨人类乳头瘤病毒16型(HP V-16)在宫颈癌及宫颈癌前病变患者中与宿主基因组的整合情况.方法:选取宫颈癌变组织252例,其中48例为宫颈癌组织,204例为宫颈上皮内瘤样病变组织(CIN),其中包括125例CINⅠ,46例CINⅡ,33例CINⅢ作为研究组;另外选取20例因子宫肌瘤行全子宫切除术的正常宫颈上皮组织作为对照组.对各标本采用定量PCR检测法检测HPV-16病毒的整合状态.结果:与正常的宫颈上皮组织相比,宫颈病变组织均发生了HP V-16病毒感染且与宿主基因整合的情况.其中宫颈癌组织的整合率最高,而CIN组织中随着病变程度的加重HPV-16病毒的整合率也增高,差异有统计学意义(χ2=49.7359、12.6033,P均<0.01).结论:宫颈病变的严重程度可能与HP V-16的整合感染有关,在HP V DNA检测的基础上联合对高危HP V整合感染状态进行检测有利于提高宫颈癌筛查准确率并在早期预测宫颈病变的转归.     

HPV16/18型表达和细胞病理学检查与宫颈癌及癌前病变的相关性研究

目的 探讨细胞病理学和原位杂交技术(ISH)检测宫颈组织高危型HPV(16/18型)感染与宫颈癌及癌前病变发生的相关性.方法 运用细胞病理学和原位杂交技术检测218例宫颈组织HPV16/18型的表达水平及病变情况,判定HPV16/18型感染对宫颈癌及癌前病变的筛查价值.结果 218例低度鳞状上皮内瘤变(LSIL)以上患者HPV16/18检出率分别为:鳞状上皮轻度非典型增生(CIN)Ⅰ 16.67%(15/90例)、鳞状上皮中度非典型增生(CIN)Ⅱ48.43%(31/64例)、鳞状上皮重度非典型增生(CIN)Ⅲ91.11%(41/45例),鳞状细胞癌(SCC)84.21%(16/19例).CIN Ⅲ和SCC组与CIN Ⅰ、Ⅱ组间比较有非常显著性差异(P<0.01);CIN Ⅲ与SCC组间比较差异无显著性(P>0.01).结论 原位杂交技术检测HPV16/18型对诊断宫颈癌及癌前病变具有敏感度、特异度高的特点;若原位杂交技术与细胞病理学诊断协同检测,可更早发现宫颈癌和癌前病变,并对宫颈病变干预和治疗具有重要的指导意义.     

宫颈癌癌前病变中人乳头状瘤病毒16整合状态的检测

目的　探讨宫颈癌癌前病变中人乳头状瘤病毒(HPV)16DNA整合入宿主基因组的发生情况。方法　选取 108例细胞学为宫颈癌癌前病变的患者,应用多重聚合酶链反应 (PCR)同时检测液基细胞标本中的HPV16L1、E_2和E_6基因。采用通用引物GP_(5+) /GP_(6+)扩增HPVL1基因保守区的一个长 150bp的片断,以检测HPV的存在。E_2PCR引物目标是HPV整合时最常缺失的E_2开放阅读框(ORF)的特殊区域,E_6引物目标是E6ORF。在游离型中,E_2、E_6拷贝数比例相等;在整合型中,E_2缺失;在游离、整合的混合型中,E2的拷贝数少于E_6。对E_2、E_6的PCR产物凝胶电泳条带的面积灰度值进行半定量分析,从而确定HPV16的整合状态。结果　HPV感染者 62例 (57. 41% );HPV16感染者 32例 ( 29. 63% ),其中 15例 ( 46 .88% )为纯游离型; 13例 ( 40 .62% )为混合型; 4例(12. 50% )为纯整合型。HPV16DNA整合和 /或混合型的比例随宫颈病变级别升高而增加,不同病变之间差异有统计学意义(P<0 .01)。结论　HPV16整合入宿主基因组在部分宫颈上皮内瘤变中即已发生。多重PCR同时检测HPVL1、HPV16E_2、E_6基因以及E_2 /E_6比值,是一种在宫颈细胞学标本中同时检测HPV感染、HPV16感染和HPV16整合状态的简便方法。它可以作为细胞学筛查的一种补充手段,以发现向宫颈高     

HPV-DNA分型检测在ASCUS患者分流管理中的价值

目的:评价人乳头瘤病毒(HPV)DNA分型检测在未明确诊断意义的宫颈非典型鳞状上皮细胞(atypicalsquamous cells of undetermined significance,ASCUS)患者中的应用价值。方法:对薄层液基细胞学检查结果为AS-CUS的患者进行阴道镜检查及组织病理学检查,并同时行HPV-DNA分型检测。结果:⑴165例ASCUS患者中,组织学诊断为慢性宫颈炎、湿疣、CINI、CINII中HPV-DNA的检出率分别为9.0%、66.7%、76.7%、90.0%;⑵组织学诊断为CINIII和侵袭性子宫颈癌(invasive cervical cancer,ICC)的患者HPV-DNA检出率均为100%,与CINI和CI-NII相比,差异有统计学意义(P<0.05);⑶HPV检测CIN和ICC的灵敏度为94.7%,特异度70.1%,阳性预测值27.4%,阴性预测值99.0%。结论:HPV-DNA分型检测可有效检出宫颈细胞学ASCUS中CIN及宫颈癌患者,可对患者进行有效分流管理。     

西安交通大学第一附属医院8581名妇女生殖道人乳头瘤病毒感染筛查

目的 调查陕西地区妇女生殖道人乳头瘤病毒(HPV)感染情况,了解本地区妇女生殖道HPV感染特征。方法 采用PCR+导流杂交技术检测2009年2月至2012年12月在西安交通大学第一附属医院妇科就诊的8581名陕西地区妇女生殖道HPV-DNA,必要时进行宫颈细胞学或组织学检查。结果 8581名陕西地区妇女中,生殖道HPV感染率为33.06%,高危型HPV(HR-HPV)感染率为30.08％,复合型别感染者占27.18%;最常见感染型别依次为HPV-16、HPV-52、HPV-58、HPV-6和HPV-18。HPV感染存在年龄差异,感染高峰年龄为25岁以下和51岁以上。HR-HPV感染者中宫颈组织学正常、轻度上皮内瘤变(CINⅠ)、中度上皮内瘤变(CINⅡ)、重度上皮内瘤变(CINⅢ)和宫颈癌(CC)组中,感染率分别为88.72%、97.48%、97.35%、95.88%和99.23%;常见致癌型别依次为HPV-16、HPV-18、HPV-58、HPV-52和HPV-33。HPV-16、18和58共同引起94.62%的宫颈癌。结论 陕西地区妇女生殖道HPV感染比较普遍,最常见的感染型别是HPV-16、HPV-52、HPV-58、HPV-6和HPV-18,常见致癌型别依次为HPV-16、HPV-18、HPV-58、HPV-52和HPV-33。HPV-16、18和58引起94.62%的宫颈癌。高危型HPV感染和宫颈病变显著相关,HR-HPV复合感染不是宫颈病变的危险因素。     

7199例宫颈疾病筛查分析

目的了解余姚地区高危型人乳头瘤病毒（HPV）亚型分布及宫颈疾病发病情况。方法对2006年10月至2008年12月在浙江省余姚市人民医院就诊的7 199例宫颈疾病患者进行HPV基因分型检测联合宫颈疾病“三阶梯程序”诊断。结果7199例患者HPV感染2 443例,感染率33.94%（2443/7199）,高危型HPV亚型分布依次为HPV-16,58,18,33,31;感染高峰年龄为21~30岁;农民、自由职业者、低文化水平者为高危人群。确诊慢性宫颈炎6 944例,占96.46%（6944/7199）;宫颈上皮内瘤变（CIN）206例,占2.86%（206/7199）;宫颈癌49例,占0.68%（49/7 199）。慢性宫颈炎与CIN之间HPV感染率及亚型分布比较,差异有统计学意义（P〈0.001）;不同级别CIN的HPV感染率及HPV-16亚型的感染率比较,差异有统计学意义（P〈0.001）。CIN的发病年龄集中在31-50岁,以31-40岁为最高峰;性生活年限≥16年者,CINⅢ发病率高于CINⅠ、Ⅱ,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论本研究结果表明,本院就诊患者高危型HPV亚型分布依次为HPV-16,58,18,33,31;随着宫颈疾病的加重,HPV感染率提高,以HPV-16亚型致病力最强;从HPV感染至CIN病变的潜伏期约为10年。     

宫颈癌及宫颈上皮内瘤变MGMT基因甲基化及其相关性研究

目的：探讨宫颈癌和宫颈上皮内瘤变（CIN）患者宫颈脱落细胞中O6-甲基鸟嘌呤- DNA甲基转移酶（MGMT）基因启动子区甲基化状态在宫颈癌临床早期诊断和筛查中的作用。方法选取对照组20例,CINI、CINII、CINIII期患者各50例和宫颈癌患者50例,采用甲基化特异性PCR检测宫颈脱落细胞中MGMT基因启动子区甲基化状态并进行比较。结果宫颈癌和CINI、II、III期患者MGMT基因启动子区甲基化阳性率分别为82.0%（41/50）、24.0%（12/50）、50.0%（25/50）和80.0%（40/50）,而对照组未检测到MGMT基因启动子区甲基化。与对照组比,宫颈癌组和CINI、II、III期组MGMT基因启动子区甲基化阳性率的差异均有统计学意义（均P＜0.05）。宫颈癌组中MGMT基因启动子甲基化与其临床分期及组织分化程度有显著相关性（均P＜0.05）。结论 MGMT基因启动子区甲基化可能参与宫颈癌的发生、发展,有助于宫颈癌的早期辅助诊断和筛查。     

新疆维吾尔族宫颈癌组织中HPV—DNA表达及存在状态的研究

目的 探讨高危型人乳头瘤病毒（HR—HPV）在新疆维吾尔族宫颈癌患者中的表达、存在状态及其与宫颈癌的相关性。方法 选择第2代杂交捕获（Hybrid capture,HC2）检测HR—HPV阳性的30例维吾尔族宫颈鳞癌（SCC）患者,利用巢式PCR检测其组织标本中的HPV16-DNA的表达,多重Taqman探针荧光定量PCR检测HPV16～DNA在组织中的存在状态。结果 巢式PCR检测结果 显示宫颈鳞癌患者HPV16-DNA检出率为96．7％,与HC2法的HPV—DNA检出率差异无统计学意义（P〉0．05）;HPV16-DNA在宫颈癌组织中以整合态存在,其整合率为89．7％;HPV16-DNA的表达水平与宫颈癌患者的年龄、有无淋巴结转移无关（P〉0．05）,但其在病理分级高的患者中表达高于病理分级低的患者（P〈0．05）,在临床分期高的患者中表达高于低分期患者（P〈0．05）。结论 HR—HPV感染是导致宫颈癌的主要因素,而HPV16是新疆维吾尔族宫颈癌主要的病毒类型,其在组织中多以整合态存在,在宫颈癌发病中起主要作用,HPV—DNA整合状态与宫颈细胞的恶性转化密切相关。     

RELATIONSHIP BETWEEN CYCLIN G1 AND HUMAN PAPILLOMA VIRUS INFECTION IN CERVICAL INTRAEPITHELIAL NEOPLASIA AND CERVICAL CARCINOMA

CERVICAL carcinoma has a long time or a rever-sal precursor period: cervical intraepithelial ne-oplasia (CIN)·CIN presents a biological con-tinuum·It is believed that CIN may progress to an invasivedisease, remain steady, or even reverse·1It is very im…     

宫颈病变患者人乳头瘤病毒16亚型E2基因多态性检测

目的分析宫颈病变中人乳头瘤病毒（HPV）16亚型E2基因的多态与宫颈病变的关系,了解E2基因变异情况及其与宫颈
病变的相关性。方法应用PCR和高分辨率熔解曲线方法针对379例HPV高危亚型阳性宫颈脱落细胞样本进行HPV16感染
情况及HPV16亚型E2基因68位点和133位点多态分布情况进行检测。结果379例HPV高危亚型阳性宫颈标本共检出78例
HPV16亚型阳性,其在宫颈癌、CINⅡ~Ⅲ、CINⅠ、炎症患者中的检出率分别为44.8%、31.5%、24.1%和9.6%;HPV16E2基因
68C和133G的频率在中重度宫颈内瘤样病变和宫颈癌中明显高于轻度上皮内瘤样病变和炎症患者（P<0.05）。结论HPV16是
导致宫颈恶性病变的重要致病因素;随着病理类型的进展,HPV16感染率也逐渐增加;同时基因位点改变说明HPV16E2基因
单核苷酸变异可能使致癌能力发生改变。
     

HLA-DR抗原及HPV16/18E6蛋白在宫颈癌组织的表达及意义

目的:通过检测HLA-DR抗原及HPV16/18E6蛋白在宫颈癌组织中的表达情况,探讨由HLA-DR抗原介导的免疫应答在感染高危型人乳头瘤病毒(HPV)至发展为宫颈癌过程中的作用机制。方法:采用免疫组织化学SP法检测正常宫颈、宫颈上皮内瘤病变(CIN)及宫颈癌组织中HLA-DR抗原及HPV16/18E6的表达情况。结果:HLA-DR抗原的阳性表达率在正常宫颈、CIN、宫颈癌组织中分别为37.5%、73.3%、81.8%,而HPV16/18E6蛋白的阳性表达率则分别为37.5%、60.0%、75.8%,两者在3组的表达差异显著,P均<0.05。HLA-DR抗原及HPV16/18E6蛋白在宫颈癌组织中的阳性表达率随临床分期、分化程度及淋巴结是否转移而不同,但无显著性差异,P均>0.05。结论:HLA-DR抗原递呈病毒抗原给T细胞引起的免疫应答可能在宫颈癌的发生发展过程中起重要的作用。     

宫颈病变检测人乳头瘤病毒感染的意义

目的 探讨人乳头瘤病毒（HPV）感染与宫颈病变的关系.方法 用荧光定量PCR法检测15例正常宫颈,57例宫颈尖锐湿疣,78例宫颈上皮内瘤变（CIN）,43例宫颈尖锐湿疣合并CIN,13例宫颈癌的HPV感染情况.结果 本组宫颈病变中HPV感染率92.72％,单一型HPV感染率89.52％,高危型HPV感染率98.25％;宫颈尖锐湿疣以HPV52感染为主（41.18％）;CIN以HPV16感染为主（41.67％）;尖锐湿疣合并CIN感染HPV58者占25.00％,感染HPV16和HPV52的各占15.00％; 60.00％宫颈癌感染HPV16;多重型HPV感染以HPV亚型双重感染为主.结论 HPV检测对于宫颈病变的筛查及临床分流监测有重要价值.     

Detection of human papillomavirus DNA sequences in cervical lesions by in situ hybridization using biotinylated DNA probes.

Ninety-six biopsy specimens were collected for studying the association of specific sequences of HPV DNA with genital warts, precancerous lesions and invasive cervical cancer. Using DNA probes labeled with biotin, 17 of the 22 (77.27%) specimens showing condyloma and 1 of the 14 (7.14%) specimens displaying subclinical papillomavirus infection (SPI) of cervix were found to be positive for HPV 6/11; 4 of 23 (17.39%) specimens of squamous epithelial cervical cancer and 2 of the 23 (8.70%) specimens of cervical intraepithelial neoplasia (CIN) were positive for HPV 16/18. All the 14 specimens of cervicitis were negative for both probes. The HPV 6/11 positive hybridization products were present mainly in the superficial and intermediate epithelium of condyloma and SPI. In invasive cancer, HPV 16/18 were shown more often in cancer cells of infiltrative nests and were focally distributed.

     

HPV感染及负荷量对宫颈癌前病变及宫颈癌的作用研究

目的探讨人乳头瘤病毒感染（HPV）及负荷量对宫颈癌前病变及宫颈癌的作用。方法选择2009年3月-2012年3月在新疆医科大学附属肿瘤医院经病理检查确诊的宫颈病变患者1326例为研究对象,其中慢性宫颈炎1000例,CINI52例,CINⅡ40例,CINII142例,宫颈癌92例,采用杂交捕获二代（HC-Ⅱ）方法定量检测宫颈HPV-DNA的含量。结果（1）慢性宫颈炎组、CIN组、宫颈癌组HPV～DNA阳性率分别为13．5％、67．9％、94．5％,各组阳性率随着宫颈病变的程度加重而增加（P〈0．001）。（2）CINI组、CINⅡ组、CNIII组中HPV-DNA阳性率分别为46．2％、57．5％、78．8％,各组阳性率随着CIN级别增高而增高（P〈0．001）。（3）在HPV—DNA负荷量〉500时,HPV—DNA病毒负荷量随着宫颈病变程度的加重而增加,组间比较差异有统计学意义（P〈0．001）。结论HPV-DNA病毒感染及其负荷量与宫颈癌前病变及宫颈癌发生有关;HC-Ⅱ检测对预测CIN、宫颈癌发展有重要意义。     

Relationship between the Expression of Telomerase and Human Papillomavirus Infection in Invasive Uterine Cervical Carcinoma

Telomerase activity was examined in invasive cervical carcinoma to assess whether it is activated during cervical malignant transformation and to look for its possible association with hu-man papillomavirus(HPV) infection.Histologically confirmed invasive cervical carcinomas and be-nign cervices were assayed for telomerase activity by using a modified telomere repeat amplification protocol(TRAP).The same cases were subjected to polymerase chain reaction(PCR) detection of HPV by using consensus primers and type-specific(HPV types 16 and 18) primers.Telomerase activ-ity was detected in 40 of 45(88.9%) invasive cervical carcinomas and 2(all chronic cervicitis) of 50(4%) benign cervical lesions.HPV was detected in 36(24 HPV-16 and 4 HPV-18 cases) of 45(80%) invasive cervical carcinomas and 20(11 HPV-16 and 1 HPV-18 cases) of 50(40%) benign cervical changes.There was a significant correlation between the expression of telomerase with histological grade(φ=0.44,P<0.005),but no correlation was found between telomerase expression and HPV-18(P>0.05).Although larger sample studies are needed,there seems to be a clear association between telomerase upregulation and HPV status,mainly HPV-16 infection.     

宫颈上皮内瘤变LEEP术后HPV病毒感染的消退情况分析

目的检测术后HPV病毒感染的消退情况。方法应用LEEP术对77例宫颈上皮内瘤变患者、35例宫颈炎患者进行治疗,分析术前宫颈活检与及术后宫颈病理的符合情况,于术后1个月随访创面修复、阴道流血及分泌物情况,术后3、6、12个月复查宫颈修复情况、液基细胞学检查、HPV病毒检测、阴道镜检查,必要时取宫颈活检。结果1）宫颈LEEP术前及术后1、3、6、9个月阴道分泌物HPV阳性表达率依次下降（X2 1月与术前=7．12,X2 3月自1月=4．78,X2 6月与3月=22．22,X2 12月与6月=6．51,P均〈0．05）,差别均有显著性。2）术前HPV感染阳性组与HPV感染阴性组比较,术后病变残留率和复发率间比较均无显著性差异（P均〉0．05）,但是术后6个月HPV仍然持续感染阳性组较HPV感染阴性组残留和复发率均明显增高,有显著性差异（P均〈0．05）。结论LEEP治疗宫颈上皮内瘤变是一种安全而且有效的方法,在治疗的同时不仅可以明确诊断,而且有利于HR—HPV感染的清除。但是LEEP治疗术后有一定的病变残留和复发率。术后HPV持续阳性患者复发风险高,应密切随访。HPV病毒检测预示治疗后病变残留和复发有较高的灵敏度,是一种有效的随诊方法。对于HPV感染、TCT阴性的不满意的阴道镜患者,即使阴道镜下活检为炎症,也应高度重视,对持续感染的高危患者行LEEP术既可达到诊断目的又可达到治疗作用,防止宫颈癌前病变及癌变的漏检。     

人乳头瘤病毒16型E5基因在宫颈癌发生进程中的动态研究

  目的  观察人乳头瘤病毒(HPV)16型E5基因在宫颈癌发生发展过程中的动态变化情况,探讨E5 mRNA在宫颈癌早期筛查中的临床意义。  方法  收集2015年9月至2017年12月在四川省妇幼保健院宫颈门诊就诊或行宫颈癌机会性筛查人群的宫颈病变组织石蜡标本49例(HPV阳性),按照FIGO标准将收集的宫颈病变标本进行分期:宫颈炎13例,宫颈上皮内瘤样病变(CIN)Ⅰ 5例,CIN Ⅱ 18例,CIN Ⅲ 5例,宫颈癌8例。利用实时荧光定量PCR检测不同病理分级宫颈组织中E5基因的完整度及E5、E6、E7 mRNA的表达水平。  结果  在49例HPV16阳性感染患者中,CINⅠ宫颈病变组织中E5基因的完整度比宫颈炎、CINⅡ及宫颈癌组织更高(P＜0.05);CINⅠ宫颈病变组织中E5基因完整度虽高于CINⅢ组织,但差异无统计学意义。不同病理级别标本中E5、E6、E7 mRNA的表达水平均在CINⅢ组织最高。与E6、E7 mRNA相比,E5 mRNA在宫颈病变的全过程中均呈现出优势表达状态(P＜0.05),而E6、E7 mRNA的表达水平只在病变后期(CINⅢ和宫颈癌)有升高趋势。  结论  在HPV16阳性感染患者的病变组织中,E5基因的完整度可能与宫颈疾病的发生、发展有关。E5基因有望成为宫颈癌早期筛查的靶基因。     

宫颈癌组织端粒酶表达与人乳头瘤病毒感染的相关性

目的 探讨宫颈癌组织中端粒酶活性表达与人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）感染的关系。方法 采用端粒重复序列扩增（telomere repeat amplification protocal，TRAP）-银染法对45例宫颈癌、30例慢性宫颈炎及20例正常宫颈组织的端粒酶活性进行检测。同时，采用多聚酶链反应（PCR）技术测定上述组织HPV、HPV-16型及HPV-18型的感染情况。结果 宫颈癌组织端粒酶阳性率、HPV和HPV-16检出率高于慢性宫颈炎和正常宫颈组织（P〈0．05）；宫颈癌组端粒酶表达与HPV感染（φ=0．44，P〈0．01）、HPV-16型感染（φ=0．36，P〈0．05）有关联性，与HPV-18型感染未发现关联性（P〉0．OS）。结论 端粒酶的表达、HPV感染包括HPV-16型感染与宫颈癌发生密切相关。     

应用E2基因缺失的检测评价宫颈病变中HPV16感染状态

目的:应用E2基因缺失的检测了解宫颈病变中HPV16病毒染色体的存在状态,探讨其与宫颈癌的关系.方法:应用多重聚合酶链反应(PCR)对HPV16感染标本将其E2基因的C端、N端、铰链区分别与E6基因同时进行扩增,应用Scion Image 4.0软件对E2基因、E6基因电泳条带面积灰度值进行半定量分析,判定HPV16是...