回阳生肌方不同拆方对巨噬细胞表型转化的调节作用

目的观察回阳生肌方的拆方(益气温阳方、活血通络方)对巨噬细胞表型转化的影响。方法人单核细胞株(THP-1)细胞用佛波醇酯类多克隆刺激剂(PMA)刺激成巨噬细胞后,加入脂多糖(LPS)、γ-干扰素(INF-γ)刺激48 h,转化为M1型巨噬细胞。洛伐他汀(40.50 mg/L)作为阳性对照药物;采用CCK-8方法观察益气温阳方、活血通络方对巨噬细胞活性的影响;以中性红法检测其对巨噬细胞吞噬功能的影响。M1型巨噬细胞加入洛伐他汀、益气温阳方、活血通络方24 h后,PCR法检测诱导型一氧化氮合酶(i NOS)mRNA、精氨酸酶1(Arg-1)mRNA的表达;CBA法检测上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-12(IL-12)、白细胞介素-10(IL-10)和生长因子(VEGF)的含量;ELISA法检测上清液中转化生长因子β(TGF-β)的含量。结果益气温阳方在浓度4、0.8、0.16 mg/L时、活血通络方在浓度32、6.4、1.28 mg/L时对巨噬细胞增殖无影响,但可促进巨噬细胞对中性红的吞噬,分别作为益气温阳方、活血通络方的高、中、低浓度。加入LPS、INF-γ后,M1型巨噬细胞标志物i NOS mRNA显著升高,而加入洛伐他汀、益气温阳方及活血通络方后显著降低(P0.01);M2型巨噬细胞标志物Arg-1 mRNA表达相对于正常组显著降低,而洛伐他汀、益气温阳方和活血通络方都明显促进Arg-1 mRNA表达(P0.01),但益气温阳方、活血通络方与洛伐他汀相比,Arg-1 mRNA表达显著降低。以上药物作用M1型巨噬细胞细胞24 h后,TNF-α、IL-6、IL-1含量显著降低,VEGF、TGF-β含量显著升高,益气温阳方高浓度使IL-10含量显著升高(P0.05)。与洛伐他汀相比,活血通络方和益气温阳方高浓度组VEGF、TGF-β差异有统计学意义(P0.05)。结论益气温阳方和活血通络方均在一定程度上抑制M1型巨噬细胞标志物i NOS mRNA表达和诱导M2型巨噬细胞标志物Arg-1 mRNA的表达,并且可抑制M1型巨噬细胞因子的分泌,促进M2型巨噬细胞因子的分泌。     

通络止痛方对人膝骨关节炎滑膜炎性细胞TLR的影响

[目的] 观察通络止痛方对人膝骨关节炎滑膜炎性细胞Toll样受体（TLR）的影响。[方法] 取院内行全膝关节置换术患者术中废弃滑膜组织,进行原代培养,取3~4代成纤维细胞进行不同浓度浓度通络止痛方干预,具体分为：高浓度组（2.5 mg/mL）、中浓度组（0.25 mg/mL）、低浓度组（0.025 mg/mL）、对照组（0 mg/mL）。应用real-time PCR检测细胞内TLR4 mRNA表达情况,应用流式细胞术（FCM）检测细胞中TLR2、TLR4表达情况。[结果] 与对照组比较,高、中浓度组通络止痛方人膝骨关节炎滑膜炎症细胞TLR4 mRNA的表达水平显著降低（P<0.05）。低浓度组通络止痛方对滑膜炎症细胞TLR4 mRNA抑制作用与对照组相近,差异无统计学意义。中、高浓度组抑制作用与浓度呈正比。高、中、低浓度通络止痛方组TLR4表达率与对照组比较都有明显的降低（P<0.05）,且随着浓度升高,TLR4的表达率逐渐降低;高、中、低浓度通络止痛方组TLR2表达率与对照组比较差异无统计学意义（P>0.05）。[结论] 高、中、低浓度通络止痛方均可以显著抑制Toll样受体的表达,提示通络止痛方可能通过Toll样受体通路影响或抑制人膝骨关节炎滑膜炎症反应。     

异槲皮苷对db/db小鼠肝脏脂肪酸代谢及相关基因表达的影响

[目的] 研究异槲皮苷对自发性糖尿病小鼠肝脏脂肪酸代谢相关基因表达的调控作用。[方法] 8周龄雄性db/db小鼠随机分为模型组、异槲皮苷组，雄性C57BL/6J小鼠为正常对照组，药物干预4周后，检测小鼠体质量、空腹血糖（FBG）、总胆固醇（CHO）、甘油三酯（TG）、游离脂肪酸（FFA），肝质量和肝质量/体质量；肝组织苏木精-伊红（HE）染色观察肝细胞脂质蓄积；逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）基因表达。[结果] 与模型组比较，异槲皮苷组小鼠体质量、FBG、CHO、TG、FFA、肝质量、肝质量/体质量显著降低（P<0.05或P<0.01）；苏木精-伊红（HE）染色肝细胞脂肪变性减轻，肝脏SREBP1c、FAS mRNA表达降低（P<0.05；P<0.01），PGC1α、PPARαmRNA表达显著升高（P<0.05）。[结论] 异槲皮苷可以改善db/db小鼠肝脏脂肪酸代谢紊乱，可能是通过下调肝脏SREBP1c、FASmRNA表达，上调肝脏PGC1α、PPARα表达实现的。     

补肾活血方保护FSGS小鼠足细胞的实验研究

[目的] 观察补肾活血方对局灶性节段性肾小球硬化（FSGS）小鼠足细胞骨架蛋白desmin,足细胞裂孔膜蛋白nephrin及肾母细胞瘤wt1的影响,探讨此组方保护足细胞的作用机制。[方法] 以阿霉素诱导方式完成FSGS肾病模型制备,在1周之后以补肾活血方开展治疗（设为治疗组）,时间持续6周。然后再设空白对照组与模型组。针对3组的尿、血及肾组织等进行收集,并检测体质量、血清白蛋白（ALB）、24 h尿白蛋白排泄率（UAER）以及尿白蛋白/尿肌酐比值（UACR）等。通过光镜针对肾组织形态变化情况进行观察分析,以免疫荧光完成小鼠的肾组织nephrin荧光强度测定工作;采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测3组肾组织当中的desmin、wt1表达水平。[结果] 模型组UAER、UACR显著高于空白对照组与治疗组（P<0.01）,模型组体质量和ALB显著低于空白对照组和治疗组（P<0.01）。空白对照组nephrin免疫荧光表达具有连续性特征,而模型组则是具有少量点状或者片状特征,较空白对照组和治疗组表达明显减少。模型组当中的wt1 mRNA表达水平明显低于治疗组、空白对照组（P<0.01）,而desmin mRNA表达水平明显超过空白对照组、治疗组（P<0.01）。[结论] 采用补肾活血组方可以降低FSGS小鼠蛋白尿,同时有可能和wt1、nephrin表达水平上调,以及desmin表达水平下调存在关系。     

基于“通肾络、益脾肾”治法研究足细胞凋亡及自噬

[目的] 基于中医"通肾络、益脾肾"治法，探讨通络益肾方对体外高糖培养的小鼠肾小球足细胞自噬和凋亡蛋白SIRT1、BNIP3、P62、Bax表达的调控影响。[方法] 成熟无特定病原体（SPF）级SD雄性大鼠40只，随机分为正常组、中药高、中、低剂量组各10只。按照人与大鼠体表面积折算方法计算出大鼠所需中药灌胃浓度：高剂量浓度4.76 g/mL、中剂量浓度2.38 g/mL、低剂量浓度1.19 g/mL，灌胃10 d取含药血清备用。足细胞分6组，正常组5.6 mmol/L葡萄糖+10%正常大鼠血清、高糖组30mmol/L葡萄糖+10%正常大鼠血清、通络益肾方含药血清高、中、低干预组30 mmol/L葡萄糖+10%高、中、低剂量大鼠血清、高渗组甘露醇24.5 mmol/L+10%正常大鼠血清。细胞培养48 h后收集，Hoechst33342荧光染色，观察各组足细胞凋亡状况及形态变化；流式细胞仪检测足细胞凋亡率；Western Blot检测细胞内自噬标志蛋白SIRT1、P62及促凋亡蛋白BNIP3、Bax表达水平。[结果] 流式细胞仪检测结果显示通络益肾方中、低剂量组可降低高糖诱导的足细胞凋亡率（P<0.01或P<0.05），高剂量组不能改善凋亡情况（P>0.05）；Hoechst33342荧光染色观察结果也证实通络益肾方中、低剂量组可降低高糖诱导的足细胞凋亡率；蛋白印迹结果显示，与高糖组相比，通络益肾方中、低剂量组自噬标志蛋白SIRT1表达升高，自噬标志蛋白P62及促凋亡蛋白BNIP3、Bax蛋白表达下降（P<0.05或P<0.01），高剂量组SIRT1、BNIP3、P62、Bax蛋白表达未见明显改变（P>0.05）。[结论] 中剂量、低剂量通络益肾方能够启动细胞自噬减少高糖刺激下体外培养足细胞凋亡，降低细胞凋亡率及凋亡蛋白的表达。     

糖肾1号方含药血清对高糖环境下培养的HK-2细胞中TGF-β1、α-SMA、FN mRNA和蛋白水平的影响

[目的]观察糖肾1号方含药血清干预高糖环境下培养的人肾小管上皮细胞（HK-2）中转化生长因子-β1（TGF-β1）、α-平滑肌蛋白（α-SMA）、纤维连接蛋白（FN）mRNA和蛋白水平,初步探索糖肾1号方治疗糖尿病肾病可能的作用机制。[方法]选用HK-2细胞,分为空白组、高糖组、空白血清组、糖肾1号方含药血清低剂量组、糖肾1号方含药血清高剂量组。高糖环境下培养24 h后,进行血清干预24 h,培养48 h后收集细胞,通过逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白免疫印迹（Western Blot）法检测HK-2细胞中TGF-β1、α-SMA、FN mRNA和蛋白表达水平。[结果]1）与空白组相比,高糖组的TGF-β1、α-SMA、FN mRNA和蛋白表达水平明显增多,差异具有统计学意义（P<0.05）。2）与高糖组相比,糖肾1号方低剂量组、糖肾1号方高剂量组TGF-β1、α-SMA、FN mRNA表达水平减少,差异具有统计学意义（P<0.05）。3）与高糖组相比,糖肾1号方低剂量组FN蛋白表达水平减少,差异具有统计学意义（P<0.05）,糖肾1号方高剂量组α-SMA、FN蛋白表达水平减少,差异具有统计学意义（P<0.05）。4）与糖肾1号方低剂量组相比,糖肾1号方高剂量组TGF-β1、FN mRNA降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。[结论]糖肾1号方含药血清可抑制TGF-β1、α-SMA、FN mRNA和α-SMA、FN蛋白表达水平,糖肾1号方高剂量组效果优于糖肾1号方低剂量组。     

清润方对糖尿病大鼠肝脏PI3K/AKT/mTOR信号的影响

目的 研究清润方对2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠PI₃K/AKT/mTOR信号通路的影响。方法 采用脂肪乳灌胃和腹腔注射链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）建立2型糖尿病胰岛素抵抗模型。将大鼠随机分成空白对照组、模型组、清润方大剂量组[11.2g/（kg·d）]、清润方中剂量组[5.6g/（kg·d）]、清润方小剂量组[2.8g/（kg·d）]、二甲双胍组[250mg/（kg·d）]。各组均灌胃给药。每天1次,连续8周。干预后检测血清中血清总胆固醇（total cholesterol,TC）、甘油三酯（triglyceride,TG）、低密度脂蛋白（low density lipoprotein,LDL-C）和高密度脂蛋白（high density lipoprotein,HDL-C）,检测肝组织中p-AKT、p-PTEN及p70S6K的mRNA以及蛋白表达水平。结果 与模型组比较,清润方大剂量组和二甲双胍组的TC、TG和LDL-C降低,HDL-C升高（P<0.05）。清润方大剂量组的AKT和PTEN的mRNA表达升高（P<0.05）,p70S6K的mRNA表达下降（P<0.05）,与模型组比较,清润方大剂量组的p-AKT和p-PTEN的蛋白表达升高（P<0.05）,p-p70S6K的蛋白表达下降（P<0.05）。结论 清润方可能通过PI₃K/AKT/mTOR信号通路来改善胰岛素抵抗。     

左归降糖舒心方对高脂饮食MKR小鼠糖脂代谢及炎症反应的影响

目的 探讨左归降糖舒心方对高脂饮食转基因2型糖尿病MKR小鼠糖脂代谢及炎症反应的影响。方法 用左归降糖舒心方干预治疗高脂饮食转基因2型糖尿病MKR小鼠,采用电化学法测定空腹血糖浓度,采用全自动生化分析仪检测血脂和炎症因子超敏C反应蛋白（hs-CRP）,采用ELISA法检测血清胰岛素与肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平。结果 高脂饲料喂养的MKR小鼠空腹血糖高于MKR组,但无统计学意义（P＞0.05）;血清胰岛素、血脂（TC、LDL-C、HDL-C）、血清hs-CRP和TNF-α水平高于MKR组（P＜0.01）,而三酰甘油（TG）下降,低于MKR组（P＜0.01）。经左归降糖舒心方或文迪雅干预治疗后,除左归降糖舒心方低剂量组血糖和hs-CRP下降不显著（P＞0.05）,其他各组MKR小鼠血糖、血清胰岛素、TG、血清hs-CRP和TNF-α水平显著下降（P＜0.05、0.01）,TC和LDL-C下降无统计学意义（P＞0.05）;左归降糖舒心方高剂量组HDL-C显著上升（P＜0.01）,而文迪雅组升高不显著（P＞0.05）。左归降糖舒心方作用呈剂量依赖性。结论 左归降糖舒心方能调节高脂饮食MKR小鼠糖脂代谢、减少炎症因子的产生、保护血管、降低糖尿病并发血管病变的风险。     

益气温阳法治疗慢性心力衰竭的临床疗效观察

[目的]观察益气温阳法治疗慢性心力衰竭的临床疗效。[方法]将60例患者随机分为对照组30例、治疗组30例。对照组予西医常规强心、利尿、扩血管治疗;治疗组在对照组的基础上加服中药益气温阳法。[结果]治疗组中医疗效、心功能疗效改善均优于对照组(P<0.05,P<0.01)。[结论]益气温阳法治疗慢性心力衰竭疗效较好,可明显改善症状,改善左室舒缩功能,提高患者生活质量,降低再住院率,减少病死率。     

补肾解毒通络方对类风湿关节炎患者血清中血管新生相关因子的影响

[目的]观察补肾解毒通络方对活动期类风湿关节炎（RA）患者临床疗效及血清中血管新生相关因子的影响。[方法]将78例活动期RA患者随机分为治疗组（n=38）和对照组（n=40）。治疗组予补肾解毒通络方联合甲氨蝶呤治疗,对照组予单药甲氨蝶呤治疗。记录治疗前后患者VAS评分、28处关节疾病活动度评分（DAS28）、中医证候疗效评估、C反应蛋白（CRP）、血沉（ESR）的变化,同时检测血清中VEGF、bFGF、TGF-β1的数值变化,并观察治疗过程中出现的不良反应。[结果]治疗6个月后,两组在中医症状评分、VAS、DAS28评分、CRP较治疗前均值均下降（P<0.05）;治疗组患者血清VEGF、bFGF水平较治疗前降低（P<0.05）,TGF-β1水平较治疗前升高（P<0.05）;对照组患者仅血清VEGF、bFGF水平较治疗前降低（P<0.05）。两组相比,治疗组中医症状评分、VAS、DAS28评分、CRP均值低于对照组（P<0.05）;治疗组患者血清VEGF、bFGF水平较对照组明显降低（P<0.05）,而TGF-β1水平较对照组明显升高（P<0.05）。[结论]补肾解毒通络方能有效缓解活动期RA临床症状,同时可通过下调RA患者血清中VEGF、bFGF,并上调TGF-β1的表达水平从而抑制新生血管增生,表明该方临床疗效可,且在对RA血管翳的形成可能具有一定的抑制作用。     

APPLICATION OF LORNOXICAM TO PATIENT-CONTROLLED ANALGESIA IN PATIENTS UNDERGOING ABDOMINAL SURGERIES

FOR anesthesiologis s ,treatingpostoperativepainhas alwaysbeen a problem.Althoughopioidshave been provedtobe effective,theirsideeffectscouldnotbeignored.With thedevelopmentofscienceand pharmacology,many drugs with aspectsof satisfactoryanalgesicefficacyand couldbe welltoleratedby patientshave been developed.And lornoxicamisone of them, which isa non-steroidalanti-inflammatorydrug (NSAID ), with analgesic, anti-infl-ammatory,andantipyreticproperties.Itseliminationhalf-time(3 to 5 hours) isle…     

Dr.Zhang Ren''''s Experience in the Acupuncture Treatment of Different Diseases with the Same Therapeutic Principle

Dr.Zhang Ren,the chief physician,is the chairman of Shanghai Acupuncture and Moxibustion Association.Having been engaged in medicine for about 40 years,he is experienced in treating various intractable diseases.In his long years of clinical practice,he advocates taking the TCM differentiation as the basis to seek for the acupuncture method for treatment of modern intractable diseases.The author of this essay had the fortune to follow Dr.Zhang in study.The following is a summary of Dr.Zhang's experience in the acupuncture treatment for different intractable diseases with the same therapeutic principle.     

Luo Lingjie''''s Experience in Treating Chronic Nephropathy

In treating chronic nephropathy,Luo Lingjie,a chief physician,pays attention to regulating the balance between yin and yang,treating infection if present,and removing pathogenic factors.He prescribes gentle drugs and uses carefully strongly warming-tonifying ones,emphasizes the importance of persuading the patient to persist in treatment with medication and nurse one's health for recuperation,and is good at combined use of TCM and western medicine therapy and brings the merits of various therapies into full play,with obvious theraoeutic effects.     

Acupuncture Combined with Spinal Tui Na for Treatment of Primary Dysmenorrhea in 30 Cases

Objective: To observe the therapeutic effects in acupunture treatment of primary dysmenorrhea combined with spinal Tui Na, and study its mechanism. Methods: Thirty cases of the treatment group were treated by acupuncture combined with spinal Tui Na, and thirty cases in the control group were treated by routine acupuncture. Results: The total effective rate was 93.3% in the treatment group, and 73.3% in the control group, with a significant difference between the two groups (P<0.05). Conclusions: Acupuncture combined with spinal Tui Na has good prospects for treatment of primary dysmenorrhea.     

猪肺磷脂注射液联合经鼻持续气道正压通气对呼吸衰竭早产儿的临床疗效及肌酸激酶同工酶活性的影响

目的 探讨猪肺磷脂注射液联合经鼻持续气道正压通气(NCPAP)对呼吸衰竭早产儿的临床疗效及肌酸激酶同工酶活性(CK-MB)的影响.方法 选取呼吸衰竭早产儿80例,分为观察组和对照组各40例.对照组采用NCPAP给氧治疗,观察组给予NCPAP给氧联合猪肺磷脂气管内给药.观察两组患儿治疗前及治疗12h、24 h后PaO2、PaCO2、血氧饱和度(SaO2)、pH的变化情况,检测治疗前及治疗5d后血清CK-MB水平;评估两组患儿的临床治疗效果.结果 两组患儿PaO2、PaCO2、SaO2、pH比较,差异均有统计学意义(P＜0.05),其中观察组治疗后的PaO2、SaO2、pH均高于对照组,PaCO2则低于对照组.两组的PaO2、SaO2、pH均随观察时间延长而升高(P＜0.05),PaCO2均随观察时间的延长而降低(P＜0.05).观察组治疗有效率为87.5％,显著高于对照组的70.0％ (P ＜0.05).治疗5d后两组患儿血清CK-MB水平均较前降低(P＜0.05),且观察组明显低于对照组(P＜0.05).结论 猪肺磷脂注射液气管内给药联合NCPAP可以显著降低呼吸衰竭早产儿CK-MB的含量,提高治疗有效率,起到很好的呼吸循环支持作用.     

Survey and practice of reporting quality of randomized controlled clinical trials on traditional Chinese medicine

Evidence obtained from randomized controlled trials （RCTs） has been generally accepted as the gold standard in the evaluation of clinical effectiveness. Readers need to understand the trial design, implementation, results, analysis and interpretation, so as to fully Jnderstand the results of RCTs. Thus, the investigators of RCTs have to report these items in a complete, accurate and clear manner. Since 1998, we have conducted several evaluations on the reporting quality of RCTs published in Chinese journals on traditional Chinese medicine （TCM） and results have shown that there is an urgent need for higher quality RCTs on TCM.     

TCM Treatment of Ankylosing Spondylitis by Tonifying the Kidney and Strengthening the Governor Vessel

Ankylosing spondylitis is a chronic and progressive disorder with inflammation mainly involving the central axis joints. It mainly affects the cervical spine and the lumbosacral area, with the pathogenesis closely related to the kidney and the Governor Vessel (GV). TCM holds that the syndrome is deficiency in origin and excess in superficiality, which is due to insufficiency of the kidney, deficiency of GV, and blocking of the channels with the invasion of exogenous evil, leading to poor circulation of qi and blood and malnutrition of the bones, muscles and joints. The TCM method of tonifying the kidney and strengthening GV to regulate circulation of qi and blood and check the arthralgia pain should be adopted, with the Kidney-Tonifying and GV Strengthening Decoction (益肾强督汤) prescribed.     

IMPROVING P-gp EXPRESSION IN HUMAN MONONUCLEAR CELLS IN VITRO TRANSFECTED BY MULTIDRUG RESISTANCE-1 mRNA

CHEMOTHERAPY playsa greatrolein the treat- ment of malignanttumors,especiallyingynecolo- gicalones.But inanticancerchemotherapy,leuko-cytopeniaisfrequentlytheprimarydose-limitingsideeffect factor.Moreover,cancersarefrequentlychemoresistantbe-causeof overexpressionof P-glycoprotein(P-gp), which isencodedby multidrugresistancegene (MDR1 ) and detectableinup to50% ofhuman cancersand renderscellsresistancetoanticancerdrugs.The safetyand potentialtherapeuticbenefitof mdr1 gene transferredto h…