月华胶囊对耐多药结核分支杆菌感染自噬的影响

目的:以月华胶囊含药血清对耐多药结核分支杆菌感染小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7)进行干预,探讨其对耐多药结核分支杆菌感染巨噬细胞自噬的作用及其机制。方法:低温冷冻干燥法制备月华胶囊,大鼠按3.02 g·kg^-1灌胃给药7 d,制备月华胶囊含药血清。体外培养RAW264.7,耐多药结核分子杆菌。以细胞增殖毒性检测试剂盒(CCK-8)检测含药血清对RAW264.7的增殖能力并选定其有效浓度。细胞分为模型组(10%胎牛血清);月华胶囊含药血清组(10%月华胶囊);自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)+月华胶囊含药血清组(5 mg·L^-1的3-MA+10%月华胶囊含药血清);雷帕霉素(Rap)组(200 mg·L^-1的Rap+10%胎牛血清);正常组(10%胎牛血清)。除正常组外,各组细胞培养24 h后,按细胞-细菌1∶10感染4 h。透射电镜观察细胞自噬体的出现和形成;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞中I型微管相关蛋白轻链3(LC-3Ⅰ),Ⅱ型微管相关蛋白轻链3/I型微管相关蛋白1轻链3(LC-3Ⅱ/LC-3Ⅰ),Beclin-1蛋白的表达;间接免疫荧光染色法观察细胞中LC3B荧光颗粒、斑点及亮度;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测细胞中LC3,Beclin-1 mRNA的表达。结果:与正常组比较,模型组细胞未见自噬体,细胞中LC-3Ⅱ,LC-3Ⅱ/LC-3Ⅰ,Beclin-1蛋白及LC3,Beclin-1 mRNA的相对表达量均无显著变化,细胞无荧光颗粒、斑点,无荧光亮度。与模型组比较,月华胶囊含药血清组及Rap组细胞,均可观察到自噬体的形成,细胞LC-3Ⅱ,LC-3Ⅱ/LC-3Ⅰ,Beclin-1蛋白及LC3,Beclin-1 mRNA的相对表达量值均明显升高(P<0.05),月华胶囊含药血清组细胞荧光颗粒和荧光斑点明显增多,Rap组细胞荧光颗粒和荧光斑点增多非常明显,荧光闪亮,可判定细胞荧光呈现为阳性;自噬抑制剂3-MA+月华胶囊含药血清组细胞未见自噬体,细胞中LC-3Ⅱ,LC-3Ⅱ/LC-3Ⅰ,Beclin-1蛋白及LC3,Beclin-1 mRNA的相对表达量值均无明显升高。结论:月华胶囊含药血清能使耐多药结核分支杆菌感染细胞产生自噬而发挥抗结核的免疫效应,其机制是通过调控自噬相关蛋白LC3,Beclin-1蛋白及其mRNA的表达水平,促使LC3-I趋向LC3-Ⅱ的转化加快而实现的。     

“5+3”中医学专业医学免疫学教学改革的探索与实践

对"5+3"中医学专业的医学免疫学课程教学模式进行改革和探索,将医学免疫学独立成为一门课程,同时修改教学计划、调整教学内容、开展创新性实验教学和采用多种教学方法和手段等,以期找到一种适合"5+3"中医学专业的医学免疫学教学模式,达到提高学生学习效果、促进学生科研能力提升的目的。     

益气散结泄水复方中配伍温热药对癌性胸水小鼠生存期及胸水中相关免疫细胞因子的影响

目的：探讨在益气散结泄水复方中配伍温热药对癌性胸水模型小鼠生存期的影响及对胸水中自细胞介素2(IL-2）、γ干扰素含量的影响。方法：实验于2003-09／12在湖南中医学院完成。在用艾氏腹水癌细胞瘤株对昆明种小白鼠进行胸腔注射的方法复制癌性胸水模型72只，随机分为：益气散结泄水复方组(简称复方组)．复方+低温热组．复方+高温热组，温热药组．环磷酰胺对照组(简称化疗组)．荷瘤对照组(简称模型组)，给药9d后计算各组平均生存天数及生命延长率。相同方法造模、分组、给药，9d后断头处死小鼠，ELISA法测胸水中IL-2、γ下扰素含量。结果：复方+高温热组、复方+低温热组、复方组、化疗组小鼠生存期分别为（19．3&;#177;1．3)．(19．0&;#177;2．0）．（6．9&;#177;2．2）．(14．2&;#177;2．9）d．模型组为(11．8&;#177;1.9)d，差异有显著性意义(P&;lt;0.01)；复方+高温热组、复方+低温热组小鼠生存期较复方组显著延长，差异有显著性意义(P&;lt;0．05)；单用温热组小鼠生存期为(11．2&;#177;1．9)d．末见延长复方+高温热组、复方+低温热组胸水中γ干扰素含量为(16．23&;#177;2．81)．(16．67&;#177;2.55)ng／L较复方组[(14．60&;#177;2．89)ng／L]显著增加．差异有显著性意义(P&;lt;0．01)；复方加高温热组胸水中IL-2含量为(129．50&;#177;21.13)ng／L．较复方组[(113.41&;#177;15.82)ng／L]增加，差异有显著性意义(P&;lt;0.05)；单用温热组胸水中γ干扰素、IL-2较模型组升高，但差异无显著性意义。结论：在益气散结泄水复方中配伍温热药较单用该复方更能延长癌性胸水模型小鼠的生存期，提高胸水中IL-2、γ干扰素含量，而单用温热药未见此效果。     

泌尿生殖道支原体感染状况调查及药敏结果分析

应用Mycoplasma ICS试剂盒对1523例泌尿生殖道系统感染患者进行支原体培养和药敏试验，支原体阳性率为44.39%。解脲支原体感染占90.53%，药敏试验对交沙霉素、米诺环素（美满霉素）、强力霉素敏感;人型支原体感染占3.40%，对强力霉素、米诺环素、交沙霉素敏感;解脲支原体合并人型支原体感染占6.07%，对强力霉素、交沙霉素、美满霉素敏感。根据药敏结果合理用药，对防止支原体耐药株产生具有重要意义。     

MKR转基因糖尿病小鼠血糖血脂与血清炎症因子CRP、IL-6、TNF-α的相关性分析

2型糖尿病发病机制较为复杂,至今尚未完全阐明,炎症反应发病学说备受关注,这种炎症反应被认为是一种亚临床炎症,是导致胰岛素抵抗、胰岛β细胞损伤和血管内皮细胞功能紊乱,从而对糖尿病及其慢性血管并发症的发生发展起着重要作用[1].     

妇科千金片对急性盆腔炎模型大鼠血清IgA、IgG、IgM的影响

目的 探讨妇科千金片治疗急性盆腔炎的机制.方法 选用8周龄雌性Wistar大鼠,随机分为空白组、假手术组、模型组、妇科千金片低、中、高剂量组、妇炎康组、罗红霉素组,其中造模采用子宫内接种混合茵液制作急性盆腔炎模型.造模后药物治疗21 d,取大鼠静脉血.采用ELISA检测血清中IgA、IgG、IgM含量.结果 大鼠血清中3种免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM)的含量,妇科千金片高、中、低剂量组分别高于模型组,差异具有统计学意义(P＜0.05);血清IgA的含量,妇科千金片高、中剂量组高于低剂组,差异具有统计学意义(P＜0.05);血清IgM的含量,妇科千金片低剂量组、高剂量组高于中剂量组、妇炎康组、罗红霉素组,差异具有统计学意义(P＜0.05);血清IgG的含量,中剂量组与罗红霉素比较差异无统计学意义(P＞0.05),但均低于低剂量组、高剂量组、妇炎康组,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 妇科千金片通过促进3种免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM)产生,提高机体免疫能力,而起到抗菌、抗炎保护机体的作用.     

秦香颗粒对人轮状病毒感染乳鼠血清IFN-γ的影响

目的 研究秦香颗粒（又名秦香止渴肠溶片）对人轮状病毒（HAY）感染乳鼠血清干扰素-γ（IFN-γ）的影响及作用机制。方法将KM乳鼠按体质量随机分成7组,正常对照组常规饲养。其余6组经口感染刳成HRV感染模型,并分别灌服病毒唑、肠康片、泰季颗粒高、中、低剂量、生理盐水（NS）,连续给药5d。采用ELISA检测HRV感染乳鼠血清中IFN-γ含量。结果与正常组相比,各造模组INF叫含量均有显著升高,差异具有统计学意义（P〈0．01）;与模型组相比,肠康片组及秦香颗粒组均能提高血清IFN叫含量,其中以秦香颗粒中、高剂量组差异具有统计学意义（P〈0．05,P〈0．01）。结论泰香颗粒能增强HRV感染乳鼠IFN-γ的含量。提示有一定的量效关系。     

加味四逆散对血吸虫病小鼠肝纤维化相关因子表达的影响

目的观察加味四逆散对血吸虫病肝纤维化小鼠透明质酸（HA）、血清III型前胶原（PcIII）、羟脯氨酸（Hyp）及转化生长因子-β。（TGF—β1）mRNA表达的影响。方法NIH小鼠经皮肤人工感染血吸虫尾蚴后随机分为4纽：模型组（B组）、吡喹酮组（C组）、吡喹酮＋加味四逆散组（D组）、吡喹酮＋秋水仙碱组（E组）,同时设正常对照组（A组）。病理观察小鼠肝组织,于肝纤维化形成后第21日开始灌服相应药物及生理盐水,C、D、E组在第45日时予以吡喹酮一次性灌胃进行杀虫,第78日小鼠心脏采血用放免法测定血清PC III和HA含量,取肝组织匀浆测定Hyp含量;RT—PCR检测TGF—β1 mRNA的表达。结果HA水平D组高于A组,低于B、C、E组（P〈0．01,P〈0．05）;PC III水平D组低于B、C、E组（P〈0．05）;Hyp水平D组高于A组,低于B、C、E组（P〈0．05）;TGF-β1 mRNA表达D组低于B、C、E组（P〈0．05）。结论加味四逆散联合吡喹酮能有效改善血吸虫病小鼠肝纤维化,降低TGF-β1 mRNA的表达。     

左归降糖清脂方对2型糖尿病转基因MKR 鼠脂肪肝发生的影响

目的:探讨左归降糖清脂方对2型糖尿病转基因MKR鼠脂肪肝发生的影响。方法:30只MKR鼠随机分为MKR组、MKR高脂组和左归降糖清脂方组;左归降糖清脂方组以生药29.64 g.kg-1 ig干预治疗高脂饮食诱发脂肪肝的MKR鼠,观察其肝脏病理形态、血糖、血胰岛素、肝功能和血脂变化。结果:高脂饲料诱发MKR鼠形成非酒精性脂肪肝,肝细胞有大小不一的脂滴,呈脂肪性变;MKR高脂组小鼠空腹血糖、血胰岛素、肝质量、肝指数、肝功能指标[谷丙转氨酶(ALT),谷草转氨酶(AST)]、血清总胆固醇(TCHO)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)高于MKR组(P<0.05,P<0.01),甘油三酯(TG)下降,低于MKR组(P<0.01)。2型糖尿病并发脂肪肝MKR鼠经左归降糖清脂方治疗后,肝细胞内脂肪性变得到改善,空腹血糖、血胰岛素、肝质量、肝指数、肝功能指标(ALT,AST)和血脂(TCHO,LDL-C和TG)显著下降,低于MKR小鼠(P<0.05,P<0.01);HDL-C高于MKR小鼠(P<0.05)。结论:左归降糖清脂方可通过调节高脂饮食MKR鼠体内的糖脂代谢,改善肝脏脂肪性变。     

灭幽汤对幽门螺杆菌感染性胃炎小鼠胃组织IKKβ表达的影响

目的探讨IκB分子的上游蛋白激酶(IKKβ)在幽门螺杆菌相关性胃炎(HAG)病理变化的可能作用机制及灭幽汤的影响效应。方法建立HAG模型,将造模成功的小鼠按体质量随机分为模型组、丽珠得乐组,灭幽汤组。采用免疫组化法检测胃黏膜组织中核转录因子(NF-κB)、IKKβ的蛋白表达情况。HE染色观察胃组织病理变化。结果灭幽汤组能明显减轻胃组织的炎症反应,灭幽汤组胃黏膜炎症程度低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);能抑制HAG胃组织中NF-κB、IKKβ蛋白的活性,灭幽汤组NF-κB、IKKβ表达强度明显低于模型对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 NF-κB和IKKβ在HAG的炎症反应中发挥重要的作用,灭幽汤治疗HAG的可能作用机制是通过抑制IKKβ的激活,阻止其活化。