大鼠中缝背核至背海马投射纤维递质性质的研究

目的研究大鼠中缝背核至背海马投射纤维的递质性质。方法用辣根过氧化物酶(HBP)逆行追踪法和免疫细胞化学相结合的双重标记技术研究中缝背核5-羟色胺(5-HT)样神经元至背海马投射。结果在中缝背核内可见到HRP标记细胞、5-HT阳性反应细胞和5-HT-HRP双标细胞。结论中缝背核5-HT样神经元至背海马投射为进一步研究海马的生理功能提供了有价值的形态学资料。     

大鼠中缝核群星形胶质细胞对睡眠剥夺的反应及其与神经元的关系

目的探索大鼠脑干中缝核群星形胶质细胞对睡眠剥夺(SD)的反应及其与神经元的关系。方法采用小平台水环境法建立大鼠SD模型,分为睡眠剥夺12h(SD)组,睡眠剥夺12h恢复睡眠3h(SR)组及大平台对照(TC)组和正常单独饲养(CC)组,每组3只。用免疫组化的方法观察c-fos和胶原纤维酸性蛋白(GFAP)在脑干中缝核群的表达,及其与5-羟色胺(5-HT)阳性神经元的关系。结果GFAP在中缝核群尤其是中缝背核表达明显增多,睡眠恢复后表达明显减少,其变化趋势及部位与c-fos基因表达相一致。在中缝背核形成3种形式的复合体样结构:(1)c-fos(+)、5-HT(+)、GFAP(+);(2)5-HT(+)、GFAP(+)、c-fos(-);(3)5-HT(-)、GFAP(+)、c-fos(+)。结论GFAP对睡眠剥夺和恢复睡眠的影响反应敏感,与神经元反应趋势一致,提示星形胶质细胞和神经元可能共同参与睡眠调节。     

大鼠中缝背核、正中隆起接触脑脊液神经元化学性质的研究

用CB-HRP追踪与免疫细胞化学结合的方法,对大鼠中缝背核、正中隆起接触脑脊液神经元的化学性质进行了研究。将CB-HRP注入第三脑室后,中缝背核、正中隆起内观察到CB-HRP标记细胞。标记细胞分布于中缝背核的腹侧部(在中脑水管腹侧呈对称性分布)及正中隆起的室管膜带。在CB-HRP与5-羟色胺(5-HT)免疫细胞化学结合的切片上,中缝背核及正中隆起内出现三种标记细胞:HRP单标细胞、5-HT免疫反应阳性细胞、HRP/5-HT双标细胞,双标细胞中为中小型、三角形或圆形。上述结果提示:中缝背核、正中隆起存在着5-HT能触液神经元。     

5-羟色胺系统在肠易激综合征内脏感觉过敏机制中的作用研究

目的:研究检测5-羟色胺(5-HT)系统在脑-肠轴上的表达,探索肠易激综合征内脏感觉过敏的神经机制。方法:将新生期SD雄性大鼠随机分为两组,母婴分离组(实验组),在出生后第2～21天,每天将新生大鼠与哺乳期母鼠分离3 h;对照组在出生后第2～21天,不给予任何处理。成年后(出生后60 d)进行结直肠球囊扩张(Colorectal distcnsion,CRD),用免疫组化方法检测脊髓背角、脑干中缝背核5-HT神经元的表达和分布。结果:母婴分离组CRD后中缝背核5-HT免疫反应阳性细胞的数量为(40.67±4.73)个,脊髓背角5-HT免疫反应阳性细胞的数量为(20.67±2.08)个,均较对照组显著增加,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:新生期母婴分离引起大鼠5-HT系统在中枢改变,提示早期生活事件所致5-HT系统的异常可能在肠易激综合征内脏感觉过敏发生机制中起重要作用。     

血清素是婴儿猝死综合征的关键因素吗？

神经病理学研究表明，血清素（即5-羟色胺[5-hydroxytryptamine，5-HT]）通路在婴儿猝死综合征（sudden infant death syndrome，SIDS）中发挥着关键作用。Panigrahy等在对美国SIDS病例进行观察后报告说，患者弓状核、中缝隐核以及其他含有5-HT细胞的髓区均出现5-HT受体结合减少的现象。无独有偶，Ozawa和Okado也在日本SIDS病例中发现迷走神经背核、弧核和延髓腹外侧部5-HT受体结合减少的现象。后来，Kinney等。证实了其既往研究结果，即美国印第安人（SIDS高危人群）髓区5-HT受体结合情况确实发生了改变。     

雌二醇和氟西汀对强迫游泳应激大鼠5-羟色胺合成的影响

目的 观察雌二醇和氟西汀对经历强迫游泳应激去卵巢大鼠中缝核色氨酸羟化酶(TPH)与5-羟色胺(5-HT)含量的影响.方法 手术切除28只成年雌性SD大鼠双侧卵巢后饲养3周,随机分成4组(n=7):非应激组、应激组、雌二醇组、氟西汀组.各组慢性给药14 d,第14天,非应激组除外,其他3组进行15 min强迫游泳实验(FST),FST结束后2 h,各组大鼠麻醉后经4%多聚甲醛溶液灌注固定、取脑,制备冰冻脑组织切片,间接免疫荧光染色法观察大鼠中缝核TPH和5-HT含量.结果 (1)应激组中缝背核和中缝正中核,TPH与5-HT阳性区域积分光密度值显著低于非应激组[TPH:(2418±272)比(4623±689),(2153±555)比(3749±848);5-HT:(1276±118)比(3747±1206),(478±161)比(2085±643),均P<0.01].(2)雌二醇组、氟西汀组中缝背核及中缝正中核TPH和5-HT阳性区域积分光密度值高于应激组[TPH:(5407±231)、(6075±600)比(2418±272),均P<0.01;(3760±796)、(3456±1008)比(2153±555),均P<0.05;5-HT:(4428±839)、(5013±1134)比(1276±118);(2451±669)、(3388±682)比(478±161),均P<0.001].结论 强迫游泳应激可导致大鼠中缝核5-HT合成减少,而预先给予雌二醇、氟西汀可阻止这种变化,这为理解雌激素、应激与5-HT递质系统的关系及它们在部分女性抑郁症患病机制中的作用提供了实验依据.     

创伤后应激障碍大鼠动眼神经核神经元5-羟色胺1A受体表达的变化

 目的 观察创伤后应激障碍（PTSD）大鼠动眼神经核神经元5-羟色胺1A （5-HT1A）受体的表达变化。方法 采用无连续单一刺激（SPS）方法,建立PTSD样大鼠SPS模型,随机分为SPS后1 d、4 d和7 d组及正常对照组。应用免疫组化、Western blot和透射电镜技术,检测动眼神经核神经元5-HT1A受体的表达变化和观察神经元超微结构的改变。结果 SPS后大鼠动眼神经核神经元5-HT1A受体的表达高于正常对照组,尤以SPS后7 d组最为明显;神经元超微结构也发生改变。结论 SPS刺激可促进大鼠动眼神经核神经元5-HT1A受体的表达增强,进而导致神经递质紊乱,影响动眼神经核支配眼球肌的运动功能出现相应的PTSD症状。     

大鼠中缝核及其邻近网状结构5-羟色胺能神经元的细胞构筑

用免疫组织化学的方法研究了大鼠中缝核及其邻近网状结构的细胞构筑,5-羟色胺免疫阳性细胞见于以下核团:中缝大核、中缝隐核、中缝苍白核、中缝背核、中缝脑桥核、巨细胞网状核和外侧网状核。其中中缝大核、巨细胞网状核和外侧网状核的神经元突起多在脑干横断面上连结成网,而中缝脑桥核和中缝背核在脑干横断面上的突起却很少。对中缝核群及其邻近网状结构5-羟色胺能神经元的细胞构筑和功能的关系进行了讨论。     

音乐治疗对慢性应激大鼠脑内5-羟色胺及微管蛋白的影响

目的 探讨音乐治疗对慢性轻度不可预测性应激（CUMS）大鼠脑内前额叶、海马、下丘脑等脑区5-羟色胺及微管蛋白的水平及可能作用机制.方法 随机将24只SD雄性大鼠分为音乐治疗应激组（n=8）、应激组（n=8）和正常对照组（n=8）.采用慢性轻度不可预测性应激（CUMS）模型连续刺激大鼠21 d,音乐治疗应激组在应激的同时给予音乐治疗.实验结束后对每组大鼠进行行为学观察,然后处死大鼠,检测下丘脑、海马和前额叶皮质中5-羟色胺（5-HT）及其代谢产物5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）的含量和微管蛋白的表达.结果 旷场试验的中央格停留时间比较,应激组大鼠显著低于对照组（P＜0.01）,而音乐治疗应激组与对照组相比差异无统计学意义（P＞0.05）.与应激组相比,对照组和音乐治疗应激组的海马、前额叶中5-HT及5-HIAA含量均显著升高（P＜0.01）;但三组下丘脑中5-HT及5-HIAA含量差异无统计学意义（P＞0.05）.与应激组相比,对照组和音乐治疗应激组的海马中乙酰化微管蛋白表达均显著降低（P＜0.01）,酪氨酸化微管蛋白表达均显著升高（P＜0.01）;但三组的前额叶和下丘脑中乙酰化微管蛋白、酪氨酸化微管蛋白表达差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 音乐治疗能改善应激所致的前额叶、海马5-羟色胺水平的低下和海马微管蛋白的降低.     

5—羟色胺细胞在成人脑干中缝核群的分布

目的：研究人脑干中缝核群内５－羟色胺细胞的形态及分布。方法：免疫细胞化学中ＡＢＣ法。结果：５－羟色胺细胞出现在中缝苍白核、中缝背核、中缝大核、脑桥中缝核、中央上核、中缝背核和嘴侧线形核内。细胞呈圆形、卵圆形成或梭形。结论：成人脑干中缝核群内存在有５－羟色胺细胞，其形态大小 和数量与大鼠及新生儿脑干中缝核群的５羟色胺细胞有差异。     

吗啡戒断大鼠中缝背核FOS、NADPH-d的表达

目的　研究吗啡戒断大鼠中缝背核FOS、NADPH -d酶表达的变化。方法　运用免疫组织化学、组织化学方法观测吗啡戒断大鼠动物模型中缝背核FOS、NADPH -d酶表达的变化。结果　吗啡戒断组FOS、NADPH-d阳性神经元、纤维和终末表达明显增加 (P <0 .0 5 )。结论　一氧化氮参与吗啡耐受、依赖和戒断的转导与调控 ;中缝背核可能是介导吗啡耐受、依赖和戒断的部位之一。     

大鼠中缝背核内一氧化氮合酶阳性神经元向伏隔核的投射

目的:观察大鼠中缝背核内一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元向伏隔核的投射,为阐明一氧化氮(NO)在中缝背核与伏隔核的纤维联系中的作用提供有价值的形态学依据。方法:用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶(NADPH d)法结合辣根过氧化物酶(HRP)逆行追踪法,观察大鼠中缝背核内NOS阳性神经元向伏隔核的投射。结果:在中缝背核内观察到HRP/NOS双标记神经元,所占比例为5%。结论:中缝背核内有NOS阳性神经元向伏隔核投射。     

PTSD样大鼠中缝背核神经元细胞凋亡及其TMP 活性表达变化的研究

 目的研究创伤后应激障碍（PTSD）样大鼠中缝背核神经元细胞凋亡及三偏磷酸酶（TMP）活性的表达变化。方法采用SPS 刺激方法,建立PTSD样大鼠SPS 模型,随机分为SPS 刺激后1 d、7 d、14 d和正常对照组,应用Annexin V鄄FITC/PI 双标记流式细胞术、透射电镜和酶组化方法,分别对各组中缝背核神经元细胞凋亡及其TMP 活性变化的观察和定量检测。结果SPS 刺激后1 d、7 d、14 d中缝背核神经元出现了细胞凋亡的特征性形态学改变、其凋亡率明显增加、TMP 活性表达明显比正常对照组增强,并于7 d 达到高峰。结论PTSD 样大鼠中缝背核神经元细胞出现凋亡,凋亡率增加的同时TMP 活性增强,提示TMP参与了中缝背核神经元细胞的凋亡产物的降解与处理过程,脑桥体积缩小可能与中缝背核神经元细胞凋亡有关。     

SETD2基因敲除前后鼻咽癌细胞中定量蛋白组学研究及差异信号富集

目的分析甲基转移酶SETD2 表达改变对人鼻咽癌（NPC）细胞中蛋白表达谱的影响并富集差异信号通路。方法提取 SETD2基因敲除细胞株CNE1SETD2-KO和野生型细胞CNE1WT的总蛋白,利用Tandem Mass Tag（TMT）标记蛋白质定量技术和串联 质谱分析技术筛选出差异表达蛋白质,应用GO数据库对差异表达蛋白质进行注释和富集,应用KEGG数据库进行差异蛋白质 涉及信号通路富集。结果以表达倍数（FC）≥1.2倍且P<0.05为筛选标准,SETD2基因敲除的CNE1细胞鉴别出2049个差异表 达蛋白质,其中904个表达上调,1145个表达下调。GO功能注释结果表明,SETD2敲除后在生物过程（细胞过程及调节,细胞运 动、代谢过程及细胞组分的生物合成）、分子功能（催化活性及分子结合、转录因子活性）和细胞组分（胞膜、细胞器、大分子复合 物）等具有特征性。KEGG信号富集结果表明SETD2 敲除主要影响与肿瘤关系密切的信号有MAPK、PI3K-Akt、Ras、Rap1、 mTOR、Hippo、HIF-1、Wnt、AMPK、FoxO、ErbB、p53、JAK-STAT等。结论SETD2敲除后显著改变了NPC细胞中蛋白质表达特 征并影响多条与肿瘤关系密切的信号通路,研究结果为NPC的发病机制和治疗标靶筛选提供了参考。     

大鼠中缝背核一氧化氮合酶神经元投射分布于大脑皮质一氧化氮合酶神经元

目的：研究通过损毁脑干中缝背核（DR），探讨中缝背核一氧化氮合酶（NOS）阳性神经元是否投射分布于大脑皮质NOS阳性神经元。方法：将16只SD雄性成年大鼠分为实验组与对照组，对实验组动物DR微量注射喹啉酸，饲养1周，灌注固定，然后将大脑及脑干作冠状冷冻切片，NADPH－d组化染色。结果：实验组动物的中缝背核被有效损毁，其NOS阳性神经元的数量减少了59．1％（P＜0．001），大脑皮质NOS阳性纤维终末减少了28．2％（P＜0．05），与大脑皮质NOS神经元构成接触的NOS阳性纤维终末减少了33．9％（P＜0．05），结论：位于中缝背核的NOS阳性神经元投射分布于大脑皮质NOS神经元，推测中缝背核的NOS阳性神经元可能通过大脑皮质NOS阳性神经元间接对皮质脑血流量起调节作用。     

登革病毒-2感染人脐静脉内皮细胞的磷酸化蛋白质组学分析

目的 对登革病毒-2（DENV-2）感染人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的差异磷酸化蛋白质进行分析以及初步探究DENV-2感染的可能致病机制。方法 实验设置DENV-2感染HUVEC组和HUVEC空白对照组,每组3个重复。收集细胞沉淀后,利用SDT裂解法获取蛋白质,通过串联质谱标签（TMT）法对磷酸化蛋白质进行定性与定量分析,对鉴定到的差异磷酸化蛋白质进行氨基酸保守基序分析、亚细胞定位分析、蛋白质结构域分析、GO富集分析、KEGG通路分析和蛋白质互作（PPI）等生物信息学分析。利用Western blot检测JUN、MAP2K2和AKT1磷酸化蛋白的表达。结果 共检测到1385个差异蛋白质上的2918个修饰肽段,其中有1346个修饰肽段显著上调（FC>1.2,P<0.05）,1572个修饰肽段显著下调（FC<0.83,P<0.05）。氨基酸保守基序分析共获得49个磷酸化保守基序。蛋白质结构域分析中富集到的差异磷酸化肽段最多是RNA识别基序、蛋白激酶结构域和PH结构域。通过亚细胞定位分析发现差异的修饰肽段主要定位在细胞核和细胞质中。GO富集和KEGG通路分析结果显示差异肽段主要在刺激反应的调节、含核碱基的小分子生物合成过程、吞噬体和白细胞跨内皮迁移处富集。对上调和下调的差异磷酸化蛋白分别进行蛋白质互作—KEGG联合分析,结果发现上调和下调的差异磷酸化蛋白质共富集到15条通路,且通过Western Blot检测与自噬途径相关的3个差异磷酸化蛋白质即JUN、MAP2K2和AKT1的表达,结果显示DENV-2组与空白组相比,p-JUN表达显著下调（1.48±0.01 vs 1.23±0.01,P<0.0001）;p-AKT1表达显著上调（0.87±0.02 vs 1.01±0.01,P<0.001）;p-MAP2K2表达显著上调（1.10±0.02 vs 1.29±0.05,P<0.01）。结论 DENV-2感染HUVEC存在较多差异表达蛋白,p-JUN的下调、p-MAP2K2和p-AKT1的上调提示3个能够调节自噬的磷酸化蛋白可能与DENV-2感染机制有关。     

大鼠间脑和脑干向颞叶听皮质纤维投射的实验性研究

应用荧光金（ＦＧ）逆行追踪技术，探索了大鼠颞叶听皮质的传入纤维投射。向一侧颞叶听皮质注入ＦＧ后，可在间脑和脑干的下列核区内见到ＦＧ逆行标记细胞：丘脑室旁核、丘脑外侧背核、丘脑腹后内侧核、丘脑网状核、无名质、连合核、菱形核、外侧膝状体核、内侧膝状体核、中缝背核、中缝线形核、脑桥中缝正中核和蓝斑核。     

Colocalization of SOM and NOS in the neurons of raphe nuclei innervating the pharyngeal muscles in the rats: PRV,SOM and NADPH d triplelabelingstudy

Swallowingisacomplexnervereflex.Pharyngealmusculatureistheimportantmuscleofswallowing.Themotorneuronsinnervatingthepharyngealmusculaturewerelocatedinthesemicompactpartofthenucleusambiguus(NA)[l.21.TheefferentfibersfromtheraphenucleiprojecttotheNAandnucleusofsolitarytract(NTS),andmodulatethefunctionofvisceralorgans.Theraphenucleihavebeenshowntocontainsomatostatinergicfibersandcellbodiesinadditiontoserotoninergicones[3].Besidestheimportantregulationoftheendocrines,somatostatinergic(SOM)also…