精子顶体膜蛋白的研究

目的：研究提取和纯化与人卵透明带(HZP)作用更为密切的人精子膜蛋白，为改进精子包被抗原的制备方法和筛选避孕疫苗抗原提供科学依据。方法：①悬浮离心法制备人精子膜蛋白混合溶液；②卵子热溶透析法制备HZP溶液；③将人精子膜蛋白混合溶液进行SDS-PAGE电泳，然后全胶电洗脱分别收集蛋白溶液30管；④梅花孔葡聚糖凝胶试验及精卵结合体外实验鉴定出阳性管；⑤以阳性管内的HZP特异精子膜蛋白溶液包被抗原进行抗精子抗体(AsAb)检测。结果：SDS-PAGE电泳、梅花孔葡聚糖凝胶试验及精卵结合体外实验证实，与HZP结合的人精子膜蛋白有多种成分；全胶电洗脱后以第14管内成分之特异性最强，与标准蛋白分子量对照，其分子量范围为48～53kD。结论：以电洗脱转移法纯化、筛选的人精子膜蛋白是特异的，与HZP具极强相关性；以该精子膜蛋白包被抗原用于检测AsAb，其灵敏度更高，交叉反应会明显减少。     

精子膜表面IgG型抗精子抗体的检测应用

目的:探讨混合凝集反应(MAR)检测精子膜表面的抗精子抗体(AsAb)的临床应用价值、利弊。方法:对85例有精子凝集现象的男性不育患者同时检测血清及精子膜表面抗精子IgG型抗体,分析其阳性率,同时分析阳性组与对照组主要精液参数的差异。结果:不育血清AsAb阳性率为32.9%。MAR阳性率为7.06%,MAR阳性组各主要参数如精子活率、a+b级活力、密度均明显低于血清阳性组及正常对照组(P<0.05)。结论:MAR检测精子膜表面的抗精子抗体更具临床意义,且特异性高、操作简单快捷。MAR试验可作为免疫性不育诊断的常规筛选方法。     

免疫性不育小鼠精子超微结构的研究

目的通过人工免疫雄性小鼠获得抗精子抗体介导的免疫性不育雄性小鼠动物模型,观察其精子超微结构的变化,探讨抗精子抗体(AsAb)对精子的影响机制。方法用同种精子及福氏佐剂免疫昆明种雄性小鼠,ELISA法验证获得免疫性不育动物模型,同时设立正常对照组;观察精子密度、直线运动速度及活率,并计算与雌鼠合笼后的胚胎数,透射电镜观察各组精子的超微结构。结果人工免疫后的雄鼠血清AsAb均为阳性,正常对照组均为阴性;模型组血清AsAb、使雌鼠怀孕的胚胎数、精子参数及精子超微结构均明显低于正常对照组(P<0.05),模型组小鼠精子超微结构大多数形态异常,表现为顶体结构不完整,双层膜不平行、肿胀,膜破裂,部分顶体缺失,核电子密度不均匀,头颈连接部异常,可见尾部线粒体排列紊乱甚至缺失。结论用同种精子及福氏佐剂免疫动物,可成功制作AsAb介导的免疫性不育动物模型;AsAb可通过攻击精子影响雄性小鼠的生育力。     

抗精子抗体与早期自然流产的相关性分析

目的:探讨抗精子抗体(AsAb)对早期自然流产的影响.方法:早期自然流产者112例,其中继发于人工流产术后52例,首次妊娠自然流产者60例,用ELISA方法检测其血清中AsAb,并与50例正常生育妇女对照.结果:早期自然流产组AsAb阳性率(30.35 %)显著高于正常生育组(6.0 %,P<0.01),继发于人工流产术后组的AsAb阳性率(36.54 %)高于首次妊娠流产组的(20.0 %,P<0.01).结论:AsAb是与早期自然流产密切关系的重要免疫因素,是导致人工流产术后继发自然流产的重要原因.     

精子膜处理方法对精子介导的外源质粒转基因效率的影响

目的 探讨超声、NaOH和溶血卵磷脂三种小鼠精子膜处理方法对转染质粒与精子共孵育后卵胞质内单精子注射(ICSI)授精,观察质粒转染的效率.方法 采用上述三种方法对小鼠精子进行膜处理,通过Transgreen/PI荧光染色,观察小鼠精子质膜的完整性;通过流式细胞仪检测小鼠精子DNA的完整性;将处理后的小鼠精子与带GFP的转染质粒共孵育,再采用ICSI与促排卵后成熟小鼠卵子授精,统计各组受精率、卵裂率及荧光囊胚率,观察三种方法对小鼠精子作为质粒载体ICSI后转基因效率的影响.结果 溶血卵磷脂方法处理小鼠精子膜的效果显著优于超声和NaOH组(99.2％ vs 94.7％％,90.9)(P＜0.05).三种方法对小鼠精子DNA结构的损伤无显著性差异(P＞0.05),行ICSI后三组小鼠胚胎发育率差异不显著(P＞0.05),各组之间荧光胚胎的形成率无显著性差异(P＞0.05).结论 三种小鼠精子膜处理方法的效率均能达到90％以上,且对小鼠精子DNA的损伤、行ICSI后小鼠胚胎的发育率和转基因效率无显著差异,因此,三种方法均可用于ICSI法小鼠转基因研究.     

免疫因素与男性不育的相关性

目的: 观察不育男性血清抗精子抗体(AsAb),抗心磷脂抗体(ACA),抗弓形虫抗体与精液各指标之间的关系,揭示免疫因素与不育症的相关性及致病机制. 方法: 用ELISA(nzyme-linked immunosorbent assay)法测定286例男性不育患者及198例正常生育者血清的AsAb, ACA,抗弓形虫抗体并常规检测精液的各项指标. 结果:　不育者血清中的AsAb, ACA, 抗弓形虫抗体阳性率(29.4％, 18.2％, 17.1％)明显高于正常生育组(9.0％, 7.0％, 9.0％),P＜0.01;不育患者血清AsAb水平变化能导致精子的活动力明显下降,呈显著性正相关, P＜0.01. 结论: AsAb与男性不育有密切关系,可引起精子活率、活力明显下降,但对精子密度及液化无明显影响.     

扶正促孕汤治疗抗精子抗体不孕症28例

目的 探讨中药扶正促孕汤治疗抗精子抗体阳性不孕症的疗效.方法 将57例血清抗精子抗体(AsAb)阳性患者分为两组,其中28例采用扶正促孕汤中药治疗,并设对照组29例对比,观察每个疗程后AsAb的转阴率及抗体转阴后的妊娠率.采用IBL全自动酶标仪,酶免疫法定量分析.结果 治疗组中痊愈7例,有效16例,无效5例,有效率为82.14%,其中痊愈率为25%,服药一疗程后转阴者16例.对照组29例中,痊愈4例,有效9例,无效15例,有效率为44.82%,其中痊愈率为13.79%.两组比较,有显著性差异(P＞0.05),治疗组的疗效明显优于对照组.结论 中药扶正促孕汤治疗抗精子抗体阳性不孕症抗体转阴率及转阴后妊娠率高,对AsAb所致的免疫性不孕有显著疗效.     

抗精子抗体阳性大鼠动物模型的建立

目的　建立抗精子抗体 (AsAb)阳性大鼠动物模型。方法　同种Wistar大鼠精子抗原人工免疫法建立模型 ,通过ELISA法检测血清AsAb ;光镜HE染色观察大鼠附睾组织形态学改变 ;考马斯亮蓝顶体染色法检测精子的顶体反应率 ;化学比色法检测精子的ATP酶活性。结果　模型AsAb阳性大鼠血清样品的AsAb符合实验要求 ,其精子的顶体反应率、Na+ -K+ ATP酶、Ca2 + -ATP酶活性与对照组相比均显著降低 (P <0 0 1;P <0 0 5 ;P <0 0 5 )。结论　成功建立抗精子抗体阳性大鼠动物模型。     

二甲基甲酰胺对雄性小鼠精子质量及其性激素的影响

目的 研究二甲基甲酰胺(DMF)对雄性小鼠精子质量及其血清性激素的影响,探讨:DMF对雄性生殖系统影响的作用机制.方法 将SPF级健康成年雄性昆明小鼠40只随机分为对照组(蒸馏水)和低(0.5 g/kg)、中(1 g/kg)、高(2g/kg)剂量DMF染毒组,每组10只.采用灌胃方式进行染毒,灌胃容积10 ml/kg,每天1次,连续灌胃30 d.染毒后,称重,迅速分离双侧附睾,测定精子活动度、精子计数和精子畸形数,并计算精子畸形率.摘除眼球取血,采用放射免疫分析方法测定血清睾酮(T)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)和睾丸T水平.结果 与对照组相比,从染毒第9天开始各剂量DMF染毒组小鼠体重明显降低,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).与对照组相比,中、高剂量DMF染毒组小鼠附睾精子计数较少,精子活动度较低,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01),且随着DMF染毒剂量的增高,精子计数及精子活动度均呈下降趋势,呈现一定的剂量-效应关系.与对照组相比,中、高剂量DMF染毒组小鼠血清FSH含量较高,高剂量DMF染毒组小鼠血清T和睾丸T含量较低,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).各染毒组小鼠的精子畸形率、血清LH含量间比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 DMF可能是通过睾丸轴调节性激素的分泌,最终导致精子质量的降低,从而造成雄性小鼠生殖功能的损害.     

中药强体种子颗粒治疗女性抗精子抗体阳性不孕症的治疗价值

目的 探讨中药强体种子颗粒治疗女性抗精子抗体阳性不孕症的疗效。方法 将68例血清抗精子抗体（AsAb）阳性患者分为两组，其中36例采用中药强体种子颗粒治疗，并设对照组32例对比，观察每个疗程后AsAb的转阴率及抗体转阴后的妊娠率，AsAb应用酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定。结果 中药组的AsAb的转阴率及妊娠率均明显高于对照组（P〈0．05）。结论 中药强体种子颗粒治疗AsAb阳性不孕症抗体转阴所需时间短、转阴率和转阴后妊娠率高，对AsAb所致的免疫性不孕有显著疗效。     

计划生育 基础理论

042 0 94　精子膜表面抗精子抗体与精液参数的关系/陈欣洁…∥中国男科学杂志 — 2 0 0 4 ,1 8( 5 ) — 35～ 38为探讨精子膜表面抗精子抗体 (AsAb)导致男性不育的机制。对 1 0 2例不孕夫妇的丈夫精液进行混合球蛋白反应试验 (MAR) ,其中 48例同时进行了血清AsAb的检测。结果 :48例同时进行MAR和ELISA的不育男性 ,精液MAR阳性率为1 4 6% ( 7/48) ;血清ELISA阳性率为 5 0 % ( 2 4 /48)。两种方法的阳性率有显著性差异 (P <0 0 0 1 )。 1 0 2例进行MAR检测的不育男性中 ,随着精液量、密度、存活率、活动力、畸形率的变化 ,精子膜…     

细菌性阴道病与抗精子抗体的相关性分析

目的　探讨细菌性阴道病 (bacterialvaginosis,BV)与抗精子抗体 (antispermantibodies ,As Ab)的关系。方法　通过检测不孕妇女的抗精子抗体 ,分析细菌性阴道病与抗精子抗体的相关性。结果　经统计学分析各组间阳性率比较 ,血清AsAb ,BV不孕组与非BV不孕组相比显著增高 (P <0 .0 5 ) ;宫颈粘液AsAb ,BV不孕组与非BV不孕组有极显著差异 (P <0 .0 1) ;各组均高于健康孕妇对照组 (P <0 .0 1)。BV与AsAb的相关性 :BV感染阳性与血清AsAb、宫颈粘液AsAb阳性相关分析 (均P <0 .0 5 )。结论　BV与免疫性不孕的形成和发展有一定的关系。尤其是与AsAb的产生有相关性 ,致使反复自然流产增加。     

中药治疗免疫性不育的临床研究

目的观察中药治疗男性免疫性不育的临床效果。方法将80例男性免疫性不育患者随机分为治疗组50例和对照组30例,治疗组采用中药治疗,对照组未经治疗。检查方法用精子混合凝聚试验（MAR）,直接用精液检查精子膜表面抗体IgG阳性。结果治疗组较对照组抗精子抗体（AsAb）转阴率、受孕率显著提高,P〈0．05。结论中药治疗男性免疫性不育有较好疗效。     

慢性前列腺炎不育男性抗精子抗体与精液有关参数的关系

目的探讨慢性前列腺炎不育男性血清、精浆中抗精子抗体（AsAb）水平与精液有关参数的关系.方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测慢性前列腺炎不育男性,非慢性前列腺炎不育男性及正常生育男性的血清、精浆中的AsAb水平,对AsAb阳性前列腺炎不育男性的精液有关参数与AsAb的关系进行分析.结果慢性前列腺炎不育组的AsAb阳性率明显高于非慢性前列腺炎不育组及正常生育组（P〈0.05,P〈0.01）.血清、精浆AsAb水平增高者的精子密度、精子活率和精子运动速度均明显降低.结论AsAb与慢性前列腺炎有关,AsAb水平增加可影响精子质量.     

血清抗精子抗体与精液参数关系的临床分析

目的 :探讨血清抗精子抗体AsAb与精液主要参数的相关性。方法 :使用郑州博赛公司ELISA法AsAb检测试剂盒检测血清AsAb ,分析观察组、对照组精液检测参数与AsAb的相关性。结果 :不育组 5 1 4例共检出AsAb阳性 1 0 8例 ,阳性率为 2 1 .0 %。经相关分析 ,血清中AsAb与精子密度 ,精子率、精子活力 (a级 +b级 )呈负相关 (P <0 .0 5 )。结论 :血清AsAb检测阳性时 ,可导致男性生育能力低下或不育。     

抗精子抗体阳性不孕症的中西医结合疗效分析

目的 观察中西医结合方法治疗血清抗精子抗体(AsAb)阳性不孕症患者的疗效.方法 选用2008年3月～2009年9月在我科门诊治疗的血清抗精子抗体(AsAb)阳性不孕症患者86例,随机分为对照组43例和治疗组43例,分别采用口服单纯西药及口服中药、西药配合治疗的中西医结合方法,治疗期间两组均予避孕套隔离疗法.结果 治疗组抗体转阴率及妊娠率明显高于对照组的抗体转阴率及妊娠率,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05).结论 中西医结合治疗抗精子抗体(AsAb)阳性不孕症疗效显著,值得临床推广应用.     

抗精子抗体与男性不育的研究进展

1900年Meichnikoff发现精子具有抗原性并能诱导特异性免疫应答的产生,1954年Wilton和Rumke首先在男性不育患者血清中发现了抗精子抗体(antisperm antibody,AsAb).随着生殖免疫学的发展,研究者做了大量的免疫试验,发现男性免疫性不育患者血清中存在多种AsAb[1].Marshburn等[2]通过众多研究提出,血清和生殖道内的AsAb影响人类的生育能力.Rajesh[3]提出AsAb通过多种环节干扰生殖.     

解脲支原体感染与抗精子抗体引起不育关系的研究

运用分离培养和ELISA法对5422例不育患者进行解脲支原体(UU)培养和抗精子抗体(AsAb)检测,结果发现,有UU感染组中血清AsAb的阳性率23.91%,明显高于无UU感染组血清AsAb的阳性率10.12%(P<0.01).对UU、AsAb双阳性者按UU和AsAb同时治疗以及分别单一治疗,结果显示:3组AsAb转阴率分别为88.41%,79.16%,60.38%.各组之间的差异有非常显著性(P相似文献   

金标法检测抗精子抗体的测定和临床意义

抗精子抗体(AsAb)检测对免疫性不育的诊断具有重要意义,研究表明,在多种导致不育因素中,以抗精子抗体最为密切。抗精子抗体是由精子或精子膜抗原诱发的特异性抗体,它具有凝集精子细胞,抑制精子通过宫颈黏液向宫腔内移动,抑制精子获能、顶体反应及受精,从而降低生育力。其在血清中的存在通常以IgGI、gM为主,精浆中通常以IgAI、gG为主。目前应用的AsAb检测方法有:精子制动试验(SIT)、精子凝集试验(SAT)、混合凝集试验(MAT)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、间接免疫荧光试验(IIF)等,由于其原理和实验条件不同,各家报道有一定差异。     

不育症患者精子DNA完整性与精液相关参数的研究

目的：探讨不育症患者精子DNA完整性与精液相关参数的相关性。方法：收集100例男性不育患者的精液标本,采用精子染色体扩散实验检测精子DNA的完整性,采用混合抗球蛋白凝集实验检测抗精子抗体（ AsAb）,通过计算机辅助精液分析系统对不育患者的精液进行常规分析。结果：年龄与精子DNA碎片率、AsAb和精液各参数均无相关关系（P〉0.05）。精子DNA碎片率与精子密度及精子活力均呈负相关关系（P〈0.01）,与AsAb无相关关系（P〉0.05）。 AsAb仅与精子摆动性和前向性呈弱相关关系（P〈0.05）。结论：精子DNA完整性和AsAb作为精液分析的补充指标,具有重要的临床应用价值。