人类端粒酶活性重组及其重组特异性

目的 对Ｈｅｌａ细胞端粒酶进行活性重组并探讨其重组特异性。方法 以ＲＴ－ＰＣＲ法从纯化的人端粒酶复合体中扩增人类端粒酶ＲＮＡ（ｈＴＲ）基因片段，将其克隆至含有ＳＰ６启动子的ｐＧＥＭ３ｆ＾＋质粒中，构建ｈＴＲ的体外转录体系以获得体外合成的ｈＴＲ。与端粒酶蛋白组分进行活性重组。四膜虫端粒酶ＲＮＡ及１６ｒＲＮＡ作为重组反应对照组，以探测其重组特异性。结果 经ＲＴ－ＰＣＲ扩增出４５０ｂｐ片段；体外转录重组     

细菌内同源重组法快速制备重组腺病毒

目的：探讨细菌内同源重组两步转化法快速构建重组腺病毒质粒和制备重组腺病毒的方法。方法：将腺病毒骨架质粒pAdEasyl转化BJ5183高效感受态,制备pAdEasy-1的大肠杆菌BJ5183感受态,将线性化的腺病毒穿梭质粒pAdtrack—CMV转化至含pAdEasy—1的BJ5183感受态,筛选获得重组腺病毒载体pAdEazy—CMV。获得的重组腺病毒载体线性化后转染HEK293细胞,包装、扩增出重组腺病毒RAdCMV,氯化铯梯度离心法进行纯化,采用电镜负染鉴定重组腺病毒,用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白GFP的表达并检测重组腺病毒的滴度。继而用纯化的蘑组腺病毒感染HeLa细胞,测定转染效率。结果：成功构建了重组腺病毒载体pAdEazyCMV,透射电镜和绿色荧光鉴定证实病毒包装成功,并且具有感染力,病毒的滴度呵达2．0×10^10pfu／ml。结论：细菌内同源重组两步转化法可以快速构建重组腺病毒质粒,为后续构建携带不同目的基因的重组腺病毒奠定基础。     

细菌内同源重组制备重组腺病毒及其初步应用

目的通过细菌内同源重组方法构建重组腺病毒。方法质粒pAdTrack酶切线性化后，通过电转化方法转化AdEasier细菌，线性化的腺病毒重组质粒转染293包装细胞后获得重组腺病毒，观察腺病毒感染喉癌细胞Hep-2后的报告基因表达情况及病毒对培养细胞生长的影响。结果构建的重组腺病毒经酶切电泳鉴定正确；扩增的腺病毒转染培养的Hep-2细胞8 h后即开始表达报告基因，48 h后全部细胞均有报告基因表达；该重组的腺病毒对培养Hep-2细胞生长无明显影响。结论通过细菌内同源重组方法构建重组腺病毒，方法简单、成功率高、实验周期短。     

重组医药供应链

异常活跃的第三方物流企业正在更多地肩负着推动医药供应链聚合的任务医药流通领域的变革一直牵动着整个医疗体制改革的神经。前不久,率先实行"阳光采购"的广东省药品采购新政遭遇利益博弈,近30家药商联名建议明年取消或暂缓实行"两票制",这在业界引起很大的反响。     

重组降钙素研究进展

应用基因工程法可以制备出重组降钙素类似物。通过这种方法可得到生物活性高、免疫原性低的降钙素。该文综述了用基因工程法制备降钙素的研究进展。     

图书馆结构重组

一、现行的结构已不能满足知识交流的需要 现代图书馆多按文献的流程来设置机构,如采访部、编目部、流通部、现刊库、过刊库等;还有按文献的类型等外表特征来设置机构的,如中文期刊部、外文期刊部、电子阅览部、基本书库、典藏库等;甚至按照读者类型来设置机构,如教师阅览部,学生阅览部等等.     

重组百日咳疫苗

加拿大研究人员研制出第一个原型遗传学方法制备的去毒性的百日咳疫苗。康诺特制药厂生物技术研究部副总经理Michel K1ein说,硬计将在1991年对此制剂进行临床试用。新的重组疫苗以一种去毒     

基因重组卡介苗研究进展

卡介苗是用来预防结核病的牛型结核分枝杆菌减毒活疫苗。以卡介苗为载体的基因重组卡介苗因其具有集疫苗与佐剂于一体的特点,近年来成为研究的热点。基因重组卡介苗在免疫功能的研究、传染病和肿瘤的防治中均发挥了重要作用。本文就近年来这方面的研究作一简要概述。