艾滋病病毒抗原检测试剂研制及应用

为建立检测人类免疫缺陷病毒核心抗原(HIV-1p24)的试剂盒,用识别HIV-1p24抗原不同位点的单克隆抗体构建双单抗夹心酶联免疫法,对HIV-1P24抗原及试剂盒临界值和灵敏度进行了检测和测定,同时对452份抗HIV     

第四代人类免疫缺陷病毒抗原抗体诊断试剂特异性及灵敏度的比较及其意义

目的比较和分析国产、进口第四代人类免疫缺陷病毒(HIV)抗原抗体诊断试剂的特异性及灵敏度。方法用2种第四代HIV诊断试剂分别检测8093份献血者标本和HIV-1 p24抗原国家参考品,并进行分析和评价。结果试剂A的阴性符合率为100%(8085/8085),阳性符合率为100%(8/8),总符合率为100%(8093/8093),试剂B的阴性符合率为99.94%(8080/8085),阳性符合率为100%(8/8),总符合率为99.94%(8088/8093)。结论国产第四代HIV诊断试剂在特异性及灵敏度与进口同类产品具有较高的一致性,可以同时检测HIV1/2抗体和HIV-1 p24抗原,可降低成本。     

血清学方法检测SARS病毒抗体的效果比较

目的比较血清学方法(间接ELISA法和双抗原夹心ELISA法)对严重急性呼吸综合征(SARS)患者特异性抗体的检出情况。方法采用间接法和双抗原夹心法分别检测健康人、肺炎患者、肺结核患者、SARS密切接触医务人员和不同时期的SARS患者血清中的特异性抗体水平。结果双抗原夹心法的阳性检出率为64．4％。间接法的阳性检出率为57．5％。双抗原夹心法检测92例健康人有4例阳性，38例SARS密切接触医务人员有2例阳性，而间接法检测健康人和SARS密切接触医务人员均为阴性。结论两种方法检测抗SARS病毒特异性抗体具有较高的一致性。间接法检测SARS特异性抗体的特异性好于双抗原夹心法。     

双抗原夹心法与间接法检测抗—HIV（1十2）的比较

目的：选择灵敏度和特异性较高的筛选试剂，提高抗—HIV(1十2)的检出率，减少由于抗—HIV(1十2)假阳性导致的血液浪费。方法：采用双抗原夹心法和间接法试剂对卫生部4NCU／m1抗—HIV质控血清和1680名无偿献血者血清进行抗—HIV(1十2)平行检测。结果：双抗原夹心法检测以上血清灵敏度和特异性明显高于间接法，P＜0．01。结论：用双抗原夹心法试剂检测抗—HIV(1十2)，提高了HIV的检出率，减少了由于抗—HIV(1十2)假阳性导致的血液浪费。     

双抗原夹心法检测抗—HIV的效果评价

<正> 从97年始,我院血库就用间接ELISA法对献血者进行抗—HIV(1+2)的筛选试验,发现间接ELISA法普遍存在特异性、重复性差及灰色带反应较多等缺点。近两年市场上推出了抗—HIV的第三代检测试剂—双抗原夹心法,该法以高纯度基因重组HIV抗原包被反应板、以酶标HIV特异性抗原代替间接ELISA法中的酶标二抗,具双重识别机制,可同时检测IgG和IgM抗体。我科从去年11月份起即用双抗原夹心法对献血者血液进行复检(包括间接法初检阳性的标本),经比较觉得双抗原夹心法的特异性和灵敏度均明显优于间接法。现把有关检测结果总结报告如下。     

间接法和双抗原夹心法抗-HIV初筛试剂质量对比分析

目的 综合评估间接法和双抗原夹心法人类免疫缺陷病毒(HIV-1／2)抗体酶标诊断试剂盒的质量。方法 以4对8种试剂(同一厂家间接法和双抗原夹心法配对)对100份人血清样品分别进行对比实验，阳性结果以蛋白印迹法(WB)确认。结果 间接法的敏感性、功效率和阴性预示值范围分别为97．97％～100％，93．49％～98．04％，97．05％～100％，有2种试剂存在不同程度上的HIV抗体阳性漏检，双抗原夹心法的敏感性和阴性预示值均为100％、功效率值范围为96．15%～100％，测试中未发现假阳性。结论 双抗原夹心法试剂多项质量指标均明显优于间接法试剂。     

丙型肝炎病毒抗体的两种检测方法结果比较

目的 比较双抗原夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)法与间接ELISA法检测丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)灵敏度和特异性,为无偿献血的血液筛查提供参考依据.方法 采用双抗原夹心ELISA法和间接ELISA法分别对1500份无偿献血者标本(经血液筛查抗-HCV阴性标本1416份,抗-HCV阳性标本84份)进行检测,记录标本结果与丙型肝炎病毒核酸(HCV-RNA)的符合性,评价两种检测方法的差异.结果 双抗原夹心ELISA法检测84份抗-HCV阳性标本的灵敏度为97.6%(82/84),间接ELISA法的阳性检出率为85.7%(72/84),双抗原夹心ELISA法灵敏度高于间接ELISA法,差异有统计学意义(P<0.05);双抗原夹心ELISA法的特异性为100.0%(1416/1416),高于间接ELISA法的85.9%,差异有统计学意义(P<0.05).结论 双抗原夹心法的灵敏度和特异性优于间接法,可降低间接ELISA法引起的假阳性,减少血液不必要浪费,同时也避免了献血者淘汰.     

抗-HCV ELISA试剂评估结果分析

目的 用酶联免疫吸附试验（ELISA）的双抗原夹心法和间接法检测抗-HCV,并对不同检测方法的试剂进行评估.方法 用1种双抗原夹心法和4种间接法检测抗-HCV血清盘和不同浓度的室内质控品,严格按试剂说明书在Xantus全自动加样仪和FAME全自动酶免分析仪中进行检测.结果 经用不同的ELISA法检测抗-HCV后,血清盘中阴性参考品符合率均为20/20,阳性参考品符合率均为20/20.双抗原夹心法灵敏度高,0.05NCU/mL的室内质控品能完全检测出来,间接法最低检出为0.5 NCU/mL,间接法的10个单试剂阳性标本用双抗原夹心法和RIBA确认法检测全部为阴性.结论 双抗原夹心法的抗-HCV ELISA试剂灵敏度和特异性均优于间接法.     

血清学方法检测SARS病毒抗体的比较

目的：比较血清学方法(间接ELISA法和双抗原夹心ELISA法)对SARS患者特异性抗体的检出情况。方法：采用间接法和双抗原夹心法分别检测健康人、发热非SARS患者、不同时期的SARS患者血清中的特异性抗体水平。结果：双抗原夹心法的阳性检出率为73．6％，而间接法的阳性检出率为57．5％，前者对SARS患者各时期特异性抗体的阳性检出率高于间接法，特别是住院第1周的阳性检出率为30％，而间接法对住院第1周的阳性检出率为0％。结论：双抗原夹心法检测SARS患者特异性抗体优于间接法。     

免疫PCR检测HIV-1 p24的实验研究

目的 以HIV-1 p24为检测对象,建立以金磁微粒为固相载体的免疫PCR检测技术.方法 以鼠抗HIV-1 p24单克隆抗体作为捕获抗体,包被金磁微粒,以生物素化的羊抗p24多克隆抗体作为检测抗体.报告DNA为甘蓝型油菜肉桂酰辅酶A还原酶基因的一个片段,用生物素标记的引物通过PCR扩增预先制备,通过链亲和素的桥联标记生物素化的多抗,被两抗体夹心捕获的人重组HIV-1 p24抗原通过PCR扩增报告DNA的方式予以检测.并且优化了免疫PCR的检测条件,对检测灵敏度进行了分析.结果 为降低非特异性扩增,链亲和素和用于标记的DNA的浓度分别控制在0.1mg/L和10ng/L.免疫PCR检测的灵敏度为0.1ng/L,比ELISA法检测的灵敏度高1.5×104倍.结论 金磁微粒为载体的免疫PCR检测HIV-1 p24抗原是一种灵敏度较高的检测方法.     

术前感染性指标检测结果分析探讨与反思

目的探讨各年龄段患者术前感染性指标的患病率。方法采用酶联免疫试验（ELISA）法检测14 121例患者术前的甲型肝炎病毒抗体（抗HAV）、丙型肝炎病毒抗体（抗HCV）、人类免疫缺陷病毒（1/2）型抗体（抗HIV1/2）及梅毒螺旋体抗体（TPAb）。所有检测项目均严格按照试剂盒操作说明书进行,同时进行质量控制。结果 14 121例患者中,抗HAV阳性率为0.10%,抗HCV阳性率为0.59%,抗HIV1/2阳性率为0.05%,TPAb阳性率为1.33%,提示患者术前均有可能被传染性病症感染。结论术前为患者做甲肝、丙肝、人类免疫缺陷病毒、梅毒抗体检测,具有积极的意义,一方面是检查术前患者体质和手术适应证,二是保护性检测,防止医患纠纷。     

抗核抗体谱IgG检测酶联免疫吸附法试剂盒的临床试验

目的根据《体外诊断试剂临床试验技术指导原则》要求,对由欧蒙(杭州)医学实验诊断有限公司生产的酶联免疫吸附法(ELISA)二类体外诊断试剂盒中抗核抗体谱IgG检测试剂盒进行临床验证试验,以评价该试剂盒的临床应用性能。方法收集2017年11月至2018年3月本院83例系统性红斑狼疮、夏普综合征(MCTD)、干燥综合征、进行性系统性硬化症、皮肌炎/多肌炎等患者有效血清样本及32例有效同源血浆,对照组为健康人群,其中血清27名、血浆26名。使用欧蒙(杭州)医学实验诊断有限公司拟注册的抗核抗体谱IgG检测试剂盒(ELISA)分别与苏州浩欧博生物医药有限公司、INOVA Diagnostics,Inc.及EUROIMMUN Medizinische Labordiagnostika AG生产的酶联免疫吸附法检测系统检测ANA谱,通过计算符合率和Kappa检验评价分析拟注册试剂盒与其他3种试剂的一致性。结果待评价试剂盒(抗核抗体谱IgG检测试剂盒(ELISA)与对比试剂盒,包括[对比试剂盒1[抗核抗体筛查试剂盒(ELISA)]/对比试剂盒2[抗核糖体P蛋白抗体检测试剂盒(ELISA)]检测不相符的样本,以第三方试剂盒EUROIMMUN Medizinische Labordiagnostika AG生产的抗核抗体谱IgG检测试剂盒(ELISA)的检测结果为准,最终待评价试剂盒与对比试剂/第三方试剂的血清检测阳性符合率为100%,阴性符合率为100%,总符合率为100%,Kappa值为1.00。待评价试剂盒检测血清与同源血浆检测阳性符合率为100%,阴性符合率为97%,总符合率为98%,Kappa值为0.96。结论待评价试剂盒经过临床试验验证,待评价试剂盒与对比试剂/第三方试剂血清及血浆检测结果符合性良好,具备应用性能。     

尿液中检测HIV-1抗体进行男同性恋HIV病毒感染筛查的研究

目的：用酶联免疫吸附试验(ELASA)进行男同性恋者尿液中艾滋病病毒Ⅰ型(HIV-1)抗体检测,并与血清学检测结果进行比较,探讨采用尿液检测HIV抗体进行特殊人群HIV感染筛查的可行性。方法：平行采集受检男同性恋者的外周静脉血及尿液标本,分别用血液和尿液EUSA法检测HIV抗体,阳性血清标本采用WB法确认。结果：检测109人,血清学检测结果3人阳性,并经WB实验确认为HIV病毒感染,尿液检测3人为阳性,与血清学实验对照,准确性为100％。结论：尿液检测HIV-1抗体结果可靠,可作HIV病毒感染的筛查。     

焦作市在献血人群中应用ELISA检测尿液标本中HIV-1抗体结果分析

目的检验尿液标本检测人类免疫缺陷病毒(HIV)HIV-1抗体的可信度。方法对焦作市所属2县1区的400名献血人员分别采集尿液标本,应用ELISA方法采用尿液初筛试剂检测尿液标本中的HIV—1抗体。结果400份尿液标本中2份为HIV-1抗体阳性,阳性率为0.050％。结论 采用尿液进行HIV一1抗体检测,方便可行,值得在大范围推广。     

HCV核心抗原检测技术的临床应用

目的:探讨丙型肝炎病毒核心抗原酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法的临床应用价值。方法:采用丙型肝炎病毒核心抗原ELISA试剂盒对临床丙肝感染者血清进行检测,同时用HCV抗体ELISA检测试剂盒和HCV RNA基因扩增试验作为对照进行比较。结果:以HCV RNA PCR检测为对照,HCV抗原检测试剂盒的灵敏度为95.65%,特异性为100%,23例HCV RNA PCR检测阳性血清,用HCV抗体检测法进行检测,其中有3例阴性,将这3例阴性标本用HCV核心抗原检测法进行检测,其中2例为阳性。结论:丙型肝炎核心抗原ELISA检测方法能缩短窗口期,敏感性高,特异性好,费用低廉,在临床上具有很好的推广前景。     

扬州市2015～2017年无偿献血者抗-HIV及HIV-RNA检测结果调查分析

目的?了解扬州市2015年2月～2017年12月无偿献血者抗-HIV抗体及HIV-RNA检测情况。 方法 针对扬州市2015年2月～2017年12月121 617例无偿献血者标本先进行2遍ELISA法检测抗-HIV抗体，然后对ELISA法结果两侧阴性或单侧阴性的116 500例核酸标本再用PCR法检测HIV-RNA。抗-HIV抗体阳性送扬州CDC确证，HIV-RNA阳性送江苏省血液中心进一步确证。 结果 2015年2月～2017年12月抗-HIV抗体检出阳性57例，占0.05%，确证阳性13例，占0.01%；确证阳性均为ELISA法双试剂阳性标本，ELISA法单试剂阳性经确证均为阴性；HIV-RNA阳性检出 4例，占0.003%，确证阳性2例，占0.002%。?结论?采、供血机构相关部门在献血前征询招募时，应充分考虑人群HIV感染分布特征，调整策略，相关部门应加强HIV相关知识的宣传普及工作，进一步确保血液安全。在血液病毒检测中，核酸检测与酶联免疫检测各具优势，两者互补，给予二者联合应用，提高血液病毒检测准确性。     

病毒核酸检测对降低输血传播疾病残余风险的分析研究

目的：探讨核酸扩增技术（NAT）对降低输血传播疾病残余风险的可行性。方法（1）采用2种不同厂家的酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂同时对无偿献血者血液乙肝病毒表面抗原（HBsAg）、丙肝抗体（抗-HCV）、艾滋病抗体（抗-HIV）进行检测;（2）采用血筛系统检测单人份 HBV DNA、HCV RNA、HIV RNA;（3）对 ELISA 检测阴性、NAT 检测阳性的标本定期进行追踪分析,观察有无血清学转换,以确定感染状态。结果共筛查2011年3月-10月乌鲁木齐地区无偿献血者14696例,其中 ELISA 检测阳性共152例（其中2份标本 HBsAg、抗-HCV 同时阳性）：HBsAg 阳性率为0．52％（76/14696）,抗-HCV 阳性率为0．37％（55/14696）,抗-HIV 阳性率为0．16％（23/14696）;NAT 检测阳性共71例：HBV DNA 阳性率为0．22％（32/14696）,HCV RNA 阳性率为0．17％（25/14696）,HIV RNA 阳性率为0．10％（14/14696）;14544例 ELISA 阴性标本经 NAT 检测没有检出 HCV RNA、HIV RNA 阳性标本,检出2例 HBV DNA 阳性标本,经过追踪分析,第1例发生了血清学转换,为“窗口期”感染,第2例无血清学转换,但乙肝核心抗体持续阳性,为隐匿性乙型肝炎。结论ELISA 检测后血液安全性有了很好的保障,但是依然存在输血传播疾病残余风险,NAT 检测可降低输血残余风险,提高输血安全。     

21例HIV抗体阳性报告分析

目的分析抗-HIV阳性患者就医情况和流行病学特点,加深临床医生对HIV感染的认识.方法对2000年1月～2005年9月期间,在住院、门诊24 896例患者中用ELISA法或金标快速测试法初筛抗-HIV,阳性者再由重庆市疾病预防控制中心确认.阳性者除1例门诊患者外,均做了流行病学调查.结果 HIV阳性18例,同时发现夫妻间传播3例.21例中经性传播17例,吸毒传播3例,1例不详.就诊当天送标本2份,第2天2份,第3天以后17份.有2例发现阳性时患者在手术台上.结论临床医师对HIV感染认识不够,需要加强宣传.     

三种IgM酶联免疫试剂盒在麻疹病例实验室诊断中的应用比较

目的对三种抗麻疹病毒IgM酶联免疫试剂盒(海泰快速法、海泰普通法和德国试剂A)在麻疹病例早期诊断的应用进行比较。方法采用双盲法,用三种试剂盒对麻疹疑似病例急性期血清样品平行检测。结果海泰快速法、海泰普通法和德国进口试剂A等三种抗麻疹病毒IgM酶联免疫试剂对170份麻疹疑似病例急性期血清样品的阳性检出率分别为67.65%、64.71%和62.35%;灵敏度分别为100%、99.1%和94.4%;特异度分别为88.7%、95.2%和93.5%;调整一致性分别为95.7%、97.5%和93.7%;约登指数分别为0.887、0.942和0.880。结论三种试剂盒检测结果符合率较高,另外海泰快速法的灵敏度最高,海泰快速法和海泰普通法在敏感性及特异性上都有较为理想的结果,而且海泰快速法试剂操作更为简便、快速,更适合于基层疾病控制部门快速诊断麻疹病例,采取措施,控制疫情。     

False Human Immunodeficiency Virus Test Results Associated with Rheumatoid Factors in Rheumatoid Arthritis

Objective To investigate if immunological factors associated with rheumatoid arthritis（RA） affect the result of human immunodeficiency virus（HIV） screening by electrochemiluminescence immunoassay（ECLIA） and enzyme-linked immunosorbent assay（ELISA）. Methods 100 RA cases were enrolled from January 2012 to February 2013 into this study. HIV screening was conducted with ECLIA detecting both HIV-1 p24 antigen, HIV-1 and HIV-2 antibodies, with ELISA and colloidal gold method detecting HIV-1 and HIV-2 antibodies. The samples producing positive results were submitted to the Center for Disease Control for confirmation using Western blotting method. The antibody titers of rheumatoid factors（RF） including RF-IgG, RF-IgM, RF-IgA, and CCP-IgG were analyzed by ELISA. Results The HIV positive-rate determined by ECLIA was significantly higher than that by ELISA and colloidal gold method（P〈0.01）. The false-positive rate of HIV screening was associated with antibody titers of RF-IgG, RF-IgM, RF-IgA, and CCP-IgG in RA（P〈0.01）. Conclusion Immunological factors, including RF and anti-CCP antibody, may influence the screening of HIV by ECLIA, producing false-positive result.