电针联合乌头碱改善大鼠心力衰竭的增效减毒作用观察

目的:观察电针联合乌头碱对心力衰竭大鼠血流动力学、超声心动图及心律失常情况的影响,探讨其增效减毒效应。方法:SD大鼠随机分为对照组、模型组、乌头碱组及乌头碱+电针组,每组6只。采用股静脉注射盐酸普萘洛尔复制心力衰竭大鼠模型。造模成功10 min后,乌头碱组予以乌头碱持续给药治疗1 h(40μg/kg);乌头碱+电针组在乌头碱组治疗的基础上同时给予电针"内关"治疗(3 mA,2 Hz/15 Hz, 30 min)。采用左心室导管、小动物超声成像系统观察造模前、造模后、给药即刻和给药后15、30、60 min时左室内压(LVSP)、左室内压最大上升速率(+dp/dt_(max))、左室内压最大下降速率(-dp/dt_(max))、左室射血分数(EF)、左室短轴缩短率(FS)的变化;通过心电图观察比较各组大鼠心律失常情况。结果:与对照组比较,造模后模型组大鼠LVSP、+dp/dt_(max)、-dp/dt_(max)、EF、FS均明显下降且能维持至实验结束(P0.01)。乌头碱组大鼠给药15 min时,LVSP高于模型组(P0.05);给药15、60 min时,+dp/dt_(max)高于模型组(P0.05);给药15 min起,各时点EF、FS均明显高于模型组(P0.05,P0.01)。与乌头碱组比较,在给药各个时间点,乌头碱+电针组LVSP、+dp/dt_(max)、-dp/dt_(max)均明显升高(P0.01,P0.05),EF、FS在给药即刻、30 min、 60 min时明显升高(P0.01,P0.05)。乌头碱+电针组大鼠心律失常发生率为50.0%,明显低于乌头碱组(100%,P0.05);乌头碱+电针组大鼠心律失常评分明显低于乌头碱组(P0.05)。结论:乌头碱具有一定的强心作用,但易导致心律失常的发生。而电针与乌头碱联用,不仅可以更明显地改善心力衰竭大鼠心脏收缩功能,且可以减小乌头碱的毒性反应。     

枳实薤白桂枝汤对心肌缺氧家兔左心室内压的影响

目的观察枳实薤白桂枝汤对心肌缺氧家兔左心室内压的影响,探讨其机制。方法将50只正常成年家兔按照随机数字表法分为正常组、模型组及枳实薤白桂枝汤高、中、低剂量组,每组10只。各组家兔手术活体取心,应用离体心脏灌流系统制备洛克氏液心脏灌流模型,其中正常组灌注含饱和氧的洛克氏液,模型组予不含氧的洛克氏液灌注,枳实薤白桂枝汤高、中、低剂量组予不含氧的洛克氏液+相应剂量(1.58、0.79、0.395 g/kg)的枳实薤白桂枝汤提取液灌注。记录灌注前和灌注20 min后各时间点左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP)、左室内压等容相最大上升速率(+dp/dt_(max))及左室内压等容相最大下降速率(-dp/dt_(max))的变化。结果与正常组比较,模型组在灌注后5～30 min各时间点LVSP、+dp/dt_(max)、-dp/dt_(max)均降低(P0.01),LVEDP升高(P0.01)。与模型组比较,枳实薤白桂枝汤低剂量组LVEDP在灌注后5、10 min时间点均降低(P0.01),LVSP在灌注后5、10、15 min时间点均升高(P0.01),+dp/dt_(max)、-dp/dt_(max)在灌注后5、10 min时间点均升高(P0.01);枳实薤白桂枝汤中剂量组LVEDP在灌注后5～25 min各时间点均降低(P0.01,P0.05),LVSP、+dp/dt_(max)、-dp/dt_(max)在灌注后5～30 min各时间点均升高(P0.01,P0.05);枳实薤白桂枝汤高剂量组LVEDP在灌注后5、10 min时间点均降低(P0.01),LVSP、+dp/dt_(max)、-dp/dt_(max)在灌注后5、10 min时间点均升高(P0.01)。与枳实薤白桂枝汤低剂量组比较,枳实薤白桂枝汤中剂量组LVEDP在灌注后10～25 min各时间点均降低(P0.05);LVSP在灌注后5～30 min各时间点均升高(P0.05);+dp/dt_(max)在灌注后10～30 min各时间点均升高(P0.05);-dp/dt_(max)在灌注后15～25 min各时间点均升高(P0.05)。结论枳实薤白桂枝汤中剂量组对缺氧心脏泵血功能障碍有显著改善作用。     

基于FXR/SHP通路探讨电针预处理对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌组织相关凋亡基因的影响

目的:观察电针预处理对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠法尼酯衍生物X受体(FXR)/小异二聚体配体(SHP)凋亡通路及凋亡诱导因子(AIF)和热休克蛋白70(HSP70)的影响,探讨电针预处理改善MIRI的作用机制。方法:Wistar大鼠随机分为正常对照组、假手术组、缺血再灌注组、电针预处理组,每组10只。采用结扎大鼠左冠状动脉前降支法建立在体MIRI大鼠模型。电针预处理组取"内关""关元""足三里"给予电针干预,每次20 min, 1次/d,连续7 d。通过BL-420S生物机能实验系统对大鼠进行心功能评价,酶联免疫法检测大鼠血清TNF-α和IL-6的含量,荧光定量PCR法检测大鼠心肌组织中FXR、SHP、AIF及HSP70 mRNA相对表达量。结果:与正常对照组、假手术组比较,缺血再灌注组大鼠左心室舒张末压(LVEDP)、血清TNF-α和IL-6的含量及心肌组织中FXR、SHP、AIF及HSP70 mRNA相对表达量均显著升高(P0.05),左心室收缩压(LVSP)、左室内压最大上升/下降速率(±dp/dt_(max))显著降低(P0.05)。与缺血再灌注组比较,电针预处理组大鼠LVEDP、血清TNF-α和IL-6的含量及心肌组织中FXR、SHP及AIF的mRNA相对表达量均显著降低(P0.05),LVSP、±dp/dt_(max)、HSP70 mRNA相对表达量显著升高(P0.05)。结论:电针预处理可以对MIRI起到预防保护作用,其机制可能与电针预处理调节FXR/SHP信号通路抑制心肌细胞凋亡有关。     

解毒通络浸膏干预对实验性糖尿病大鼠心肌保护作用研究

目的:探讨解毒通络浸膏对实验性糖尿病大鼠心肌的保护作用。方法:38只Wistar大鼠分为正常组8只、糖尿病心肌病(DCM)模型组及治疗组。DCM模型将造模的30只大鼠随机分为DCM模型组、解毒通络浸膏组及伊那普利组。分别灌胃给予解毒通络浸膏16.7g/(kg·d),伊那普利1.5mg/(kg·d),DCM模型组和正常组给予等体积的蒸馏水,共给药6周。采用心室插管对大鼠心功能进行评估;Masson染色观察大鼠心脏组织中胶原水平;免疫组化法检测观察大鼠心肌组织中Coll I、TLR4的表达。结果:与正常组相比,DCM组心功能明显下降,LVSP、+dp/dt_(max)、-dp/dt_(max)明显下降,LVEDP均明显升高(P0.05),Coll I、TLR4表达水平显著升高(P0.05);而与解毒通络浸膏组心功能明显改善,LVSP、+dp/dt_(max)、-dp/dt_(max)均升高(P0.05)。Coll I、TLR4表达水平显著降低(P0.05)。结论:解毒通络浸膏可以明显改善心功能作用,对糖尿病大鼠心肌保护作用,其机制可能改善TLR4心肌纤维化有关。     

参芪养心汤对心力衰竭大鼠心功能的保护作用及相关机制研究

目的:研究参芪养心汤对心力衰竭大鼠心功能的保护作用及相关机制。方法:将40只雄性SD大鼠随机分为四组:假手术组,心衰模型组,参芪养心汤低剂量组,参芪养心汤高剂量组。通过腹主动脉缩窄法制作慢性心力衰竭模型,给予不同剂量的参芪养心汤干预,通过检测血清脑钠肽(BNP)及血流动力学变化评估心功能,免疫组化法观察心肌组织病理学改变,TUNEL法检测心肌细胞凋亡,Western blotting检测凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax的表达。结果:与假手术组比较,心衰模型组大鼠BNP水平升高,大鼠左室收缩压(LVSP)、左心室内压最大上升速率(+d P/dt_(max))和左心室内压最大下降速率(-d P/dt_(max))均显著降低,左心室舒张末压(LVEDP)升高,心肌细胞凋亡量数量显著增加,促凋亡蛋白Bax表达量增加,抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低,差异均有统计学意义(P0.05),说明心衰模型造模成功。与心衰模型组比较,参芪养心汤低剂量组和高剂量组大鼠BNP水平均显著降低,LVSP、+d P/dt_(max)和-d P/dt_(max)均显著升高,LVEDP均降低,大鼠心肌细胞凋亡数量显著减少,Bax表达下降,Bcl-2表达回升,差异均有统计学意义(P0.05)。与假手术组比较,参芪养心汤低剂量组和高剂量组大鼠BNP水平均仍较高,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:参芪养心汤能改善心力衰竭大鼠心功能,抑制心肌细胞凋亡。     

甘草次酸通过抑制Caspase 3/Bax/Bcl-2凋亡信号通路保护心脏骤停心肺复苏大鼠心脏功能

目的:观察甘草次酸防治心脏骤停心肺复苏(CA/CPR)大鼠心脏功能的作用,并探讨其抑制Caspase 3/Bax/Bcl-2凋亡信号通路分子机制。方法:将60只大鼠随机分为:阴性对照组、模型组、阳性对照组(依达拉奉6 mg/kg)及甘草次酸50、100、200mg/kg剂量组,每天给药1次,连续6 d。实验第7 d,除阴性对照组外,其它各组均采用窒息法建立大鼠CA/CPR模型,并再给予相应药物1次。末次给药后1 h,记录大鼠左室收缩压(LVSP)、左室舒张末期压(LVEDP)、左室内压最大上升速率(+dp/dt_(max))、左室内压最大下降速率(-dp/dt_(min))及平均动脉压(MABP)等血流动力学参数;采用生化法测定血清LDH、CK及CK-MB含量的变化;取大鼠心尖组织,进行HE病理切片染色,镜下观察心肌组织病理学变化;采用生化法检测大鼠心肌组织SOD、MDA、GSH-Px及T-AOC水平;采用逆转录聚合酶联反应(RT-PCR)及Western blot法检测大鼠心肌组织Caspase 3、Bax及Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平。结果:与阴性对照组比较,模型组大鼠LVEDP升高,+dp/dt_(max)、-dp/dt_(min)、LVSP及MABP降低,血清LDH、CK及CK-MB含量明显升高;心肌组织SOD、GSH-Px及T-AOC含量降低,MDA含量明显增多;心肌组织肌纤维走行紊乱,有纤维化和断裂现象,部分细胞结构受损、变性或坏死,可见少量炎性细胞浸润,且Caspase 3、Bax mRNA和蛋白表达水平明显上调,Bcl-2 mRNA表达水平明显下调。与模型组比较,甘草次酸200 mg/kg组大鼠LVEDP降低,+dp/dt_(max)、-dp/dt_(min)、LVSP及MABP升高,血清LDH、CK及CK-MB活性下降;心肌组织SOD、GSH-Px及T-AOC含量明显升高,MDA含量明显下降;心肌组织病理损伤明显减轻,且Caspase 3、Bax mRNA和蛋白表达水平下调,Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平上调。结论:甘草次酸对CA/CPR大鼠心脏功能具有保护作用,其作用机制与抑制氧化应激和下调Caspase 3/Bax/Bcl-2凋亡信号通路有关。     

槐定碱对急性心肌缺血大鼠心功能的影响

目的 研究槐定碱对急性心肌缺血大鼠心功能的影响.方法 以结扎左冠状动脉前降支(LAD)方法建立大鼠急性心肌缺血模型,实验分为正常对照组、假手术组、模型组、丹参组、硝酸甘油组、槐定碱2.5,5和10mg/kg剂量组.观察并记录结扎LAD前、结扎LAD后1,5,15,30和60 min的心功能指标的变化.结果 大鼠LAD结扎后, 左心室收缩压(LVSP)、左心室内压最大上升(下降)速率(±dp/dt_(max))明显下降,左心室舒张终未压(LVEDP)明显升高(P<0.01);静脉注射槐定碱2.5,5和10 mg/kg能够改善急性心肌缺血损伤大鼠LVSP 和±dp/dtmax 的变化,降低LVEDP.与假手术组比,各药物组心功能指标降低(除LVEDP升高外),但是与模型组比较均有改善.结论 槐定碱能够改善急性心肌缺血损伤的心功能的变化.     

基于PI3K/Akt通路探讨电针对创伤性颅脑损伤大鼠脑神经细胞凋亡的影响

目的:观察电针对创伤性颅脑损伤(TBI)大鼠脑神经细胞凋亡的影响,探讨电针改善TBI的脑神经功能作用机制。方法:将88只6周龄SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(TBI组)、模型+电针组(TBI+EA组)、阻断+模型+电针组(LY294002+TBI+EA组),每组22只。采用改良Feeney′s自由落体打击法制备左侧TBI大鼠模型。于建模后24 h,TBI+EA组、LY294002+TBI+EA组大鼠采用电针干预,针刺"百会"留针10 min,点刺"水沟"20 s,右侧"内关""足三里"连接电针,予断续波,频率2 Hz,电流强度1 mA,留针10 min,每天1次,连续干预3 d。干预3 d后,TUNEL法检测左侧脑皮质神经细胞凋亡水平;Western blot法检测大鼠左侧脑皮质区丝氨酸/苏氨酸激酶(Akt)、磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶(p-Akt)、B细胞淋巴瘤/白血病-2基因蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、细胞色素C(Cyt-C)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)蛋白表达。结果:干预3 d后,与Sham组比较,TBI组左侧脑皮质损伤区域神经细胞凋亡数增加(P0.01),Bax、Cyt-C、Caspase-9蛋白表达升高(P0.01),p-Akt/Akt、Bcl-2蛋白表达降低(P0.01);与TBI组比较,TBI+EA组大鼠左侧脑皮质损伤区域神经细胞凋亡数减少(P0.01),Bax、Cyt-C、Caspase-9蛋白表达降低(P0.01),p-Akt/Akt、Bcl-2蛋白表达升高(P0.01);与LY294002+TBI+EA组比较,TBI+EA组大鼠左侧损伤区域脑皮质神经细胞凋亡数减少(P0.01),Bax、Caspase-9、Cyt-C蛋白表达降低(P0.01,P0.05),p-Akt/Akt、Bcl-2蛋白表达升高(P0.01)。结论:电针可明显减轻创伤性颅脑损伤大鼠脑神经细胞凋亡,其机制可能与激活PI3K/Akt信号通路有关。     

丹参总酚酸对慢性心衰大鼠肌浆网Ca~(2+)-ATP酶、受磷蛋白表达的影响

目的:观察丹参总酚酸对慢性心力衰竭大鼠心肌肌浆网Ca2+-ATP酶(Ca2+-ATPase,SERCA)、受磷蛋白(Phospholamban,PLB)的蛋白表达的影响,探讨丹参总酚酸抗心力衰竭的作用机制。方法:结扎大鼠冠状动脉左前降支造成心肌梗死后慢性心力衰竭模型,连续给予丹参总酚酸4周后,采用蛋白印迹(Western Blot)技术检测心肌组织的SERCA和PLB蛋白表达水平及PLB的磷酸化水平。结果:与心力衰竭模型组相比,丹参总酚酸能明显升高SERCA及磷酸化受磷蛋白(phosphorylated Phospholamban,P-PLB)的蛋白表达及PLB的磷酸化水平。丹参总酚酸能明显降低PLB/SERCA比值。结论:丹参总酚酸能升高SERCA的蛋白表达,升高P-PLB的蛋白表达及PLB的磷酸化水平,降低PLB/SERCA比值,减轻PLB对SERCA功能的抑制,这可能是丹参总酚酸抗心力衰竭的机制之一。     

双参强心方对心力衰竭大鼠血流动力学和心肌能量代谢的影响

目的研究双参强心方(SSQX)对心力衰竭模型大鼠的血流动力学和心肌能量代谢的影响。方法 SD大鼠分为5组,采用左冠状动脉前降支结扎建立心梗后心衰模型,假手术组和模型组给予0.9%生理盐水,双参强心低剂量、中剂量和高剂量组分别给予双参强心方含生药量8.4g/kg、16.8g/kg和33.6g/kg。配制成10ml/kg的容积灌胃给药,一日2次,连续给药4周。在末次给药后2h,检测各组大鼠的血流动力学指标:HR、LVSP、LVEDP、LV dp/dt min和LV dp/dt max;并检测心肌组织AMPK和FFA含量。结果与假手术组比较,模型组大鼠HR、LVSP、LVEDP、LV dp/dt min升高和LV dp/dt max降低,心肌组织FFA含量增高,AMPK含量降低,差异有统计学意义(P0.05);与模型组比较,SSQXL、SSQXM和SSQXH组大鼠HR、LVSP、LVEDP、LV dp/dt min降低,LV dp/dt max升高,FFA含量降低,AMPK含量增高,差异有统计学意义(P0.05);与SSQXM组比较,SSQXL组大鼠HR、LVSP、LVEDP、LV dp/dt min升高和LV dp/dt max降低,FFA含量增高,AMPK含量降低,差异有统计学意义(P0.05);SSQXH组大鼠HR、LVSP、LVEDP、LV dp/dt min降低,FFA含量降低,AMPK含量增高,差异有统计学意义(P0.05)。结论双参强心方可改善心肌梗死后心衰模型大鼠心脏功能,提高心肌组织AMPK含量,降低FFA含量,有效调节心衰大鼠心肌能量代谢紊乱。     

电针“内关”“太冲”穴对急性心肌缺血家兔心功能的影响

目的:研究电针"内关""太冲"穴对急性心肌缺血家兔心功能的影响,比较同名经原穴间的效应差异。方法:健康青紫蓝家兔50只,随机选择8只作为正常组,余经股静脉注射垂体后叶素造急性心肌缺血模型。将造模成功的家兔随机分为模型组、"内关"组、"太冲"组和非经穴组,每组8只。观察电针前后各组家兔心功能变化情况。结果:"内关"组及"太冲"组家兔的室内压上升段最大变化率(+dp/dt max)、室内压下降段最大变化率(-dp/dt max)与模型组比较显著升高(P0.01)。"内关"组的左心室收缩压力峰值(LVSP)与模型组比较显著升高(P0.05),电针"太冲"穴对LVSP的调节作用不显著(P0.05)。非经穴组的+dp/dt max、-dp/dt max及LVSP与正常组比较明显降低(P0.01),与模型组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:电针"内关""太冲"穴对急性心肌缺血家兔的心功能均有一定的改善作用,且心包经的络穴"内关"对心脏功能的调节作用优于其同名经的原穴"太冲"。     

燧心胶囊对心肌梗死后心衰大鼠心功能及心肌肌浆网钙泵基因表达的影响

目的观察燧心胶囊对心肌梗死后心衰大鼠心功能及心肌肌浆网钙泵(SERCA)、受磷蛋白(PLB)基因表达的影响。方法选取80只大鼠用左前降支冠状动脉结扎法制备大鼠心衰模型,将造模成功大鼠分为模型对照组,卡托普利组,燧心胶囊低、中、高剂量组,同时设置没有进行冠状动脉结扎大鼠10只为假手术组。燧心胶囊低、中、高剂量组依次灌胃2.7、5.4和10.8 g/kg的燧心胶囊药液,卡托普利组给予5.83 mg/kg卡托普利,每日1次,连续8周。假手术组和模型对照组给予等量生理盐水。实验结束后检测大鼠心功能和血流动力学,同时检测心肌中SERCA和PLB mRNA的表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠心功能和血流动力学参数差异有统计学意义(P 0.05),表明模型制备成功。与模型组比较,卡托普利组和各燧心胶囊治疗组大鼠LVESD、LVEDD、LVSP和LVEDP降低,LVEF、LVFS、+dp/dtmax和-dp/dtmax增高,大鼠心肌组织中SERCA mRNA表达升高,PLB mRNA表达降低,各燧心胶囊治疗组指标水平随药物剂量增加而变化,差异具有统计学意义(P 0.05)。结论燧心胶囊可以增强心衰大鼠射血能力,改善心功能,其机制可能与上调心肌细胞中SERCA基因的表达有关。     

经穴效应特异性在穴位注射多巴酚丁胺增效作用中的体现

目的:探讨药物穴位注射是否体现穴位效应的相对特异性。方法:SD大鼠随机分为正常对照组、电针内关+穴位注射组(EA-PC6+AI组)、电针足三里+穴位注射组(EA-ST36+AI组)和电针常规肌肉注射部位+注射组(EA-IMIS+IMI组),每组8只。电针各组分别电针10min后,再于相应部位注射β1-肾上腺素受体的激动剂盐酸多巴酚丁胺(DH,100μg/kg)。分析比较相应部位电针+注射DH前,电针+注射DH后2、5、15和30min左心室收缩压(LVSP)、心率(HR)和左心室最大上升速率(+dp/dtmax)变化。结果:相应部位电针+注射DH后2min时,以EA-PC6+AI组增加LVSP、HR和+dp/dtmax的药理作用表现最为明显(各组相应指标与同时间点EA-PC6+AI组比较P0.01或P0.05)。注射DH后30min时,EA-ST36+AI和EA-IMIS+IMI组心功能各项指标均有较大幅度的回落,而EA-PC6+AI组LVSP、HR和+dp/dtmax的回落幅度最低(与同时间点正常对照组比较均P0.01)。结论:电针"内关"穴加穴位注射确实有作用较强、作用时间窗宽大等优势,体现了其对心脏功能影响的相对特异性。     

燧心胶囊对慢性心力衰竭大鼠保护作用及机制研究

目的:探究燧心胶囊对慢性心力衰竭(CHF)大鼠的保护作用及机制。方法:将50只雄性SD大鼠随机分为5组:假手术组(A组)、模型组(B组)、燧心胶囊高剂量(10.8 g/kg)组(C组)、燧心胶囊低剂量(2.7 g/kg)组(D组)、卡托普利(5.83 mg/kg)组(E组)。连续给药12周后,测定各组大鼠心输出量,血流动力学监测左室收缩压(LVESP)、左室舒张压(LVEDP)、左心室内压最大上升速率(+dp/dtmax)和左心室内压最大下降速率(-dp/dtmax),心肌组织钠钙交换蛋白(NCX)及肌浆网钙泵2a(SERCA2a)蛋白行IHC染色,利用PCR及Western Blot(WB)实验检测心肌组织中NCX和SERCA2a mRNA及蛋白表达量。结果:①与A组比较,B组NCX蛋白表达量增多,SERCA2a蛋白表达量减少;心输出量降低(P0.05);左心室收缩末期内径LVESP及左心室舒张末期内径LVEDP均显著升高(P0.05),±dp/dtmax明显减慢(P0.05);NCX mRNA及蛋白表达量增多(P0.05),SERCA2a mRNA及蛋白表达量减少(P0.05)。②与B组比较,C组、E组NCX蛋白表达量减少,SERCA2a蛋白表达量增多;心输出量增多(P0.05),LVESP及LVEDP均显著降低(P0.05),±dp/dtmax明显升高(P0.05);NCX mRNA及蛋白表达量减少(P0.05),SERCA2a mRNA及蛋白表达量增多(P0.05)。③D组大鼠上述结果与B组大鼠比较,差异无统计学意义(P 0.05)。结论:燧心胶囊对慢性心力衰竭大鼠心肌组织具有保护作用,可通过下调NCX的表达、上调SERCA2a的表达,调节CHF大鼠的心室舒缩功能。     

补阳还五汤对舒张性心衰大鼠心肌钙转运蛋白SERCA2a及受磷蛋白的影响

目的运用补阳还五汤对舒张性心衰(diastolic heart failure,DHF)模型大鼠进行干预,观察补阳还五汤对DHF大鼠左心室舒张功能的影响,检测钙转运蛋白肌浆网上的心肌钙转运蛋白(sarcoplasmic reticulum Ca~(2+)-ATPase2a,SERCA2a)及受磷蛋白(phospholamban,PLB)的表达量,初步探寻补阳还五汤治疗DHF的药物干预靶点。方法选用60只雄性SD大鼠,随机分为假手术组15只和模型组45只,利用腹主动脉缩窄法建立舒张性心衰大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组、中药组、西药组,每组11只。其中中药组、西药组灌胃给予相应药物,假手术组、模型组给予等量的去离子水,各组均每日灌胃1次。药物干预8周后,观察药物对超声舒张功能相关指标的影响,运用蛋白免疫印迹法(Western blot)技术检测SERCA2a和PLB的蛋白表达量。结果与模型组相比,中药组大鼠一般状况好转,超声心动图检测二尖瓣环舒张早期运动速度/二尖瓣环舒张晚期运动速度(e’/a’)显著提高(P0.01)。模型组大鼠心肌中SERCA2a与PLB的蛋白表达量与假手术组相比均有下降(P0.05),而中药组大鼠心肌中SERCA2a与PLB的蛋白表达量较模型组则升高(P0.05)。各项结果中药组与西药组差异均无统计学差异(P0.05)。结论补阳还五汤可改善DHF大鼠左室舒张功能,在一定程度上延缓病情发展,且其的潜在作用靶点可能是心肌钙转运蛋白SERCA2a与PLB。     

人参总皂苷合黄连小檗碱对慢性心衰大鼠血浆 BNP、心肌细胞内钙离子浓度的影响

目的:研究人参总皂苷(ginseng total saponins,GS)合黄连小檗碱(berberine,Ber)对慢性心衰大鼠血流动力学、血浆脑钠肽(BNP)、心肌细胞内钙离子浓度[Ca~(2+)]_i的影响.方法:连续12 d皮下注射较大量异丙肾上腺素(ISO)制备慢性心衰大鼠模型,ISO总量80mg·kg~(-1),随机分为4组:模型组,每天蒸馏水灌胃;GS+Ber组(各20mg·kg~(-1))、卡托普利组(45 mg·kg~(-1)),每天灌胃1次;参麦注射液组(5 mL·kg~(-1)),每天腹腔注射1次.另设正常组,每天蒸馏水灌胃.连续给药4周,测定各组大鼠血流动力学变化、血浆BNP含量,流式细胞仪测定心肌细胞内[Ca~(2+)]_i.结果:与正常组相比,模型组左心室内压峰值(LVSP)、左心室等容收缩期压力上升最大速率(+dp/dt_(max))、左心室舒张期压力下降最大速率(-dp/dt_(max))明显下降,左心室舒张末压(LVEDP)、血浆BNP、心肌细胞内[Ca~(2+)]_i显著升高,均有显著性差异(P＜0.01);与模型组相比,GS+Ber组LVSP,±dp/dt_(max)明显升高,LVEDP、血浆BNP、心肌细胞内[Ca~(2+)]_i显著降低,均有显著性差异(P＜0.01,P＜0.05),治疗效果接近卡托普利组,优于参麦注射液组.结论:GS+Ber对慢性心衰大鼠血流动力学异常、血浆BNP、心肌细胞内钙超载有良好改善作用.     

芪丹利心丸对心肌梗死大鼠左心室心肌组织miR-133a/TGF-β1/CTGF信号通路的影响

目的探讨芪丹利心丸防治心肌梗死后心肌纤维化的可能作用机制。方法采用左冠状动脉结扎术建立心肌梗死大鼠模型,随机分为模型组、卡托普利组和芪丹利心丸组,另设假手术组只穿线不结扎,每组10只。术后第2天,芪丹利心丸组给予芪丹利心丸2.43 g/(kg·d)灌胃,卡托普利组给予卡托普利片2.25 mg/(kg·d)灌胃,假手术组和模型组给予去离子水10 ml/(kg·d)灌胃。4周后检测各组心脏血流动力学指标[包括心率(HR)、左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP)、左心室内压最大上升速率(+dp/dt max)、左心室内压最大下降速率(-dp/dt max)],称取左心室重量(LVM)并计算左心室质量指数(LVMI),HE染色进行病理学观察,Masson染色计算胶原容积分数(CVF),检测左心室心肌组织miR-133a、转化生长因子β1(TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)mRNA及TGF-β1、CTGF蛋白表达情况。结果与假手术组比较,模型组LVSP、+dp/dt max,-dp/dt max下降,LVEDP升高,LVMI、CVF增大,miR-133a下调,TGF-β1和CTGF蛋白及mRNA表达增多(P0.01)。与模型组比较,芪丹利心丸组LVSP、+dp/dt max,-dp/dt max上升,LVEDP降低,LVMI、CVF减小,miR-133a上调,TGF-β1和CTGF蛋白及mRNA表达减少(P0.05或P0.01)。HE染色显示,模型组见梗死边缘区残存的心肌纤维混乱、部分断裂,肌间隙增宽明显,而卡托普利组和芪丹利心丸组心肌梗死边缘区心肌纤维走形相对规整,多数胞膜基本完整。结论芪丹利心丸可防治心肌梗死大鼠心肌纤维化,其机制可能与miR-133a/TGF-β1/CTGF信号通路有关。     

自拟强心汤对心梗后心力衰竭大鼠心肌舒缩功能的实验研究

目的:探讨自拟强心汤对心梗后心力衰竭大鼠心肌舒缩功能的作用机制。方法:采用结扎左冠状动脉法制备大鼠心梗后慢性心力衰竭动物模型;8周后,给予药物灌胃治疗;经治疗4周后,采用通过颈动脉插管测定大鼠血流动力学状态,通过实时荧光定量PCR(FQ-PCR)法和Western Bolt法检测心肌钙调控蛋白肌浆网钙泵(SERCA2a)、雷尼丁受体2(RYR2)mRNA水平及其蛋白表达量。结果:模型组大鼠的心功能显著下降,主要表现在血流动力学参数改变,其中左室舒张末期压(LVEDP)明显升高(P0.01),左室收缩压(LVSP)、左室上升最大速率(+LVdp/dtmax)及左室下降最大速率(-LVdp/dtmax)绝对值均降低(P0.05);心肌钙调控蛋白SERCA2a、RYR2 mRNA水平及其蛋白表达量均明显下降(P0.05)。给予自拟强心汤干预后,能够有效的降低心力衰竭大鼠LVEDP水平(P0.05),升高LVSP、+LVdp/dtmax、-LVdp/dtmax水平(P0.01);能够升高心肌钙调控蛋白SERCA2a、RYR2 mRNA及其蛋白表达量的水平(P0.05)。结论:自拟强心汤能够有效的改善心力衰竭大鼠的心功能,其机制可能与升高心肌钙调控蛋白SERCA2a、RYR2的蛋白表达量,改善钙循环有关。     

心脉康颗粒对腹主动脉狭窄致心衰大鼠心脏血流动力学的影响

目的观察心脉康颗粒对腹主动脉狭窄所致大鼠心力衰竭模型心功能的作用。方法选用SD大鼠50只,采用腹主动脉狭窄诱导法复制心衰大鼠模型,造模4周后随机分为模型组,芪苈强心胶囊组,心脉康颗粒高、中、低剂量组,并另设假手术组(对照组),开始给药,连续12周。然后,观察各组大鼠左心室收缩压(LVSP)、左室舒张末期压(LVEDP)、左室等容期压力变化速率峰值(±dp/dt_(max))及大鼠血清中N-末端脑钠肽前体(NT-pro BNP)、肌钙蛋白I(cTn I)含有量,测定心脏指数。结果心脉康颗粒明显升高心衰大鼠LVSP和+dp/dt_(max),以及LVEDP和-dp/dt_(max),降低心衰大鼠血清中NT-pro BNP、cTn I含有量和心脏指数。结论心脉康颗粒具有明显改善心衰大鼠心力衰竭的作用。     

电针激活SIRT1介导Wnt/β-catenin通路调控脂质生成改善肥胖的机制研究

目的:探讨电针通过激活沉默信息调节因子1(SIRT1)介导Wnt/β-catenin通路调控脂质生成改善肥胖的机制。方法:从75只Wistar雄性大鼠中随机挑选10只为正常组,采用标准饮食喂养;剩余大鼠采用高脂饮食构建肥胖大鼠模型,共喂养8周。将造模成功的40只大鼠随机分为模型组、电针组、电针联合抑制剂组、激活剂组,每组10只。电针组电针"关元""中脘""足三里""丰隆",连续波,频率2 Hz,电流强度约1 m A,每次留针20 min;电针联合抑制剂组尾静脉注射Sirtinol溶液,并予电针同步干预;激活剂组予白藜芦醇溶液灌胃,均隔日1次,每周3次,连续干预8周。记录各组大鼠干预前后体质量、Lee's指数,检测各组大鼠干预后血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、游离脂肪酸(FFA)水平,比较各组大鼠干预后白色脂肪组织(WAT)质量、脂肪细胞面积,并采用Westernblot法检测各组大鼠干预后WAT中SIRT1、糖原合成酶激酶-3β(GSK3β)、β-连环蛋白(β-catenin)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)蛋白表达。结果:干预后,与模型组比较,电针组、激活剂组大鼠体质量减轻、Lee's指数下降(P0.01,P0.05),电针联合抑制剂组大鼠体质量减轻(P0.05)。与正常组比较,模型组大鼠血清TC、TG、FFA含量及WAT质量均升高(P0.01),脂肪细胞面积增大(P0.01);与模型组比较,电针组、激活剂组、电针联合抑制剂组大鼠血清TC、TG(除外电针联合抑制剂组)、FFA含量及WAT质量均降低(P0.01,P0.05),脂肪细胞面积减小(P0.01,P0.05);与电针组比较,电针联合抑制剂组大鼠脂肪细胞面积增大(P0.05)。与正常组比较,模型组WAT中SIRT1、β-catenin、cyclin D1蛋白表达减少(P0.01),GSK3β、PPARγ蛋白表达增多(P0.01)。与模型组比较,电针组和激活剂组WAT中SIRT1、β-catenin、cyclin D1蛋白表达增多(P0.05,P0.01),GSK3β和PPARγ蛋白表达减少(P0.01,P0.05);电针联合抑制剂组GSK3β蛋白减少、β-catenin蛋白增多(P0.05)。结论:电针可明显改善肥胖模型大鼠体质量、Lee's指数、血脂代谢,降低WAT质量以及脂肪细胞大小,其机制可能与上调WAT中SIRT1蛋白表达,激活Wnt/β-catenin信号通路,抑制下游成脂基因PPARγ的表达,从而影响脂质生成有关。