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目的: 观察二苯乙烯苷(TSG)对6-羟基多巴胺(6-OHDA)损伤的SH-SY5Y细胞的保护作用并探讨相关机制。 方法: 以SH-SY5Y细胞为研究对象,以100 μmol ·L-1 6-OHDA建立SH-SY5Y细胞损伤模型,以浓度6.25,12.5,25,50,100,200 μmol ·L-1 TSG作用损伤的SH-SY5Y细胞,另设空白组,四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞存活率,观察不同浓度的TSG对其的保护作用,激光共聚焦显微镜检测细胞内钙离子浓度的变化,高效液相-荧光法检测上清液中兴奋性氨基酸谷氨酸(Glu),抑制性氨基酸γ-氨基丁酸(GABA)含量。 结果: 与空白组比较,模型组细胞存活率降低,游离钙明显增多(P<0.01),细胞外Glu及GABA浓度明显升高(P<0.01);与模型组比较,TSG预处理24 h可以改善6-OHDA造成的细胞存活率的下降,其中12.5 μmol ·L-1的细胞保护作用最为明显(P<0.05),明显降低内游离钙含量,明显降低细胞外Glu及GABA浓度(P<0.05,P<0.01),TSG对其有明显的抑制作用。 结论: TSG可能通过减轻钙超载及兴奋性毒性对6-OHDA损伤的SH-SY5Y细胞起到保护作用。 相似文献
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目的:建立基于荧光分子扩散动态测量的肥大细胞脱颗粒的体外快速评估方法。方法:分别采用β-己糖苷酶法、扫描电镜法及光栅图像关联光谱法(raster image correlation spectroscopy, RICS)对稳定表达CD63-绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的大鼠肥大细胞株RBL-2H3的脱颗粒过程进行评价,比较不同检测方法的灵敏度。结果:β-己糖苷酶法的检测灵敏度为5 mg/L,扫描电镜法的检测灵敏度均为3.9×10-2 mg/L,RICS方法也在3.9×10-2 mg/L即可检测到扩散系数的降低,并与未给药组有显著差异。结论:RICS方法比传统β-己糖苷酶法更灵敏,虽然与电镜方法灵敏度相当,但该方法较扫描电镜法简便易行成本低,易操作,且所观察的指标为扫描电镜所不能做到的活体动态观测,能在细胞脱颗粒早期即可判定过敏反应的发生,具有传统方法不具备的优势,有潜力成为制药企业质量控制的标准方法,或临床过敏性物质筛查的有利工具。 相似文献
3.
目的 研究复方黄柏液涂剂(FFHBFP)对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)毒力和生物膜的抑制作用,发现FFHBFP对MRSA的抗菌作用,为临床指导用药提供理论依据与参考。方法 首先采用微量稀释法和时间-生长曲线测定FFHBFP和万古霉素(VAN)对MRSA的最低抑菌浓度(MIC)和对细菌生长的影响;而后选择亚抑菌浓度(sub-MIC)分别观察FFHBFP和VAN对MRSA毒力因子脂肪酶的抑制能力和恢复过氧化氢(H2O2)敏感性能力;采用微孔板法检测FFHBFP和VAN对MRSA生物膜形成期和成熟期的抑制能力;应用扫描电子显微镜(SEM)观察给药前后成熟生物膜在细菌形态方面的变化;结合实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测生药质量浓度50.600 g·L-1 FFHBFP对MRSA毒力基因crtM和生物膜形成基因fnbA、icaA表达的影响,最后运用分子对接技术预测FFHBFP中潜在抗菌有效成分与MRSA毒力和生物膜的作用靶点机制。结果 VAN的MIC为2 mg·L-1,在1 mg·L-1以下时不影响MRSA生长,而FFHBFP无法测定出MIC,在生药质量浓度101.200~202.400 g·L-1时对生长有抑制作用;相比于空白组和VAN组,sub-MIC(生药质量浓度25.300~50.600 g·L-1)具有显著抑制脂肪酶和恢复MRSA对H2O2敏感(P<0.01);微孔板法结果显示FFHBFP(生药质量浓度25.300~202.400 g·L-1)对生物膜形成期和成熟期均有明显抑制作用(P<0.05,P<0.01);SEM显示FFHBFP使生物膜结构疏松,菌体大小不一;生药质量浓度50.600 g·L-1质量浓度FFHBFP能显著抑制相关的毒力基因和生物膜形成基因的表达(P<0.05,P<0.01),同时分子对接结果也显示FFHBFP主要抗菌活性成分对作用靶点有较好的结合能力。结论 FFHBFP对MRSA没有直接杀灭的能力,而是通过削弱毒力表达和生物膜形成等致病能力来发挥临床疗效。 相似文献
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目的 采用双光子激发荧光(TPEF)成像技术,无创、活体评估X射线引起大鼠皮肤放射性损伤发展和修复过程。方法 24只SD大鼠采用随机数表法分为4组,健康对照组、25 Gy组、35 Gy组和45 Gy组,每组6只。照射后不同时间评估皮肤损伤程度,通过TPEF成像技术在体检测表皮细胞尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸(磷酸)[NAD(P)H]和真皮胶原纤维荧光信号的病理改变。结果 第10天,各辐射组大鼠出现红斑和脱皮;第15~20天,随着辐射剂量地增加,辐射组出现递进性的渗出、水肿和溃疡;第25天,25 Gy组开始修复,其他组仍有渗出和溃疡。第10天,25、35和45 Gy组表皮细胞NAD(P)H荧光信号减少,乳头层和网状层荧光信号值减少,与健康对照组比较,差异有统计学意义(t=24.145、28.303、26.989、6.654、7.510、7.997,P<0.05);第30天,25 Gy组表皮细胞NAD(P)H和真皮胶原纤维开始修复,颗粒层、棘层和基底层细胞出现荧光信号,35、45 Gy组未出现NAD(P)H荧光信号;25 Gy组乳头层和网状层荧光信号均逐渐增高,但仍低于健康对照组(t=115.133、17.431,P<0.05),而45 Gy组未出现荧光信号。结论 TPEF技术可以无创、活体检测X射线照射后表皮细胞和真皮胶原纤维信号损伤和修复的病理变化。 相似文献
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连花清瘟胶囊抗金黄色葡萄球菌生物膜研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的: 观察连花清瘟胶囊对成熟金黄色葡萄球菌生物膜(Staphylococcus aureau biofilm,S.a BF)的抑制作用。 方法: 采用96孔板微量稀释法检测连花清瘟胶囊和青霉素最小杀菌浓度(MBC);用结晶紫(CV)和微生物活性(WST)检测法观察连花清瘟胶囊和青霉素抗S.a BF的作用;用扫描电子显微镜(SEM)和激光共聚焦显微镜(CLSM)观察药物作用后的S.a BF形态并测量厚度。 结果: 连花清瘟胶囊和青霉素对S.a的MBC分别为20 g·L-1和2 mg·L-1。与对照组比较,连花清瘟胶囊显著抑制S.a BF(P<0.05,P<0.01),青霉素差异不显著。SEM观察到空白对照组S.a BF较厚,细菌形态正常,密集叠加,大小一致;连花清瘟胶囊组S.a BF由散在菌落组成,大小不一致;青霉素组S.a BF较厚,细菌形态基本正常,密集叠加,大小一致,个别细菌塌陷萎缩;CLSM观察到空白对照组S.a BF以活菌为主体,其间散落死菌;连花清瘟胶囊组S.a BF有大量死菌,和活菌相互参杂;青霉素组S.a BF以活菌为主,部分死菌分布在S.a BF表层。与空白对照组比较,连花清瘟胶囊组S.a BF厚度显著降低(P<0.01),青霉素组差异不显著,连花清瘟胶囊组S.a BF厚度显著低于青霉素组(P<0.01)。 结论: 连花清瘟胶囊具有显著的抗S.a BF作用,抗S.a BF评估体系可应用于传统中药抗菌作用研究。 相似文献
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穴位不同组织结构决定和影响经穴—内脏效应特异性的科学基础 总被引:1,自引:0,他引:1
经穴特异性是针灸学的基本理论之一,也是指导针灸临床治疗最重要的依据。但是,穴位特异性科学基础至今仍不明确,严重制约着针灸临床疗效的提高,并影响到针灸学国际国内的学术地位。本文回顾了近年来相关的科学研究,并在此基础上就穴区不同组织结构在决定和影响穴位效应特异性中的关键作用及其机制进行了分析探讨,认为由于不同经穴穴区组织结构不同,针刺不同的经穴或同一经穴不同深度的组织结构,将因刺激不同组织内的不同感受器而兴奋不同类别的传入纤维,进而引起不同性质或不同程度的内脏功能变化。 相似文献
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目的:探讨微生物快速鉴定系统(MALDI-Biotyper System)用于快速鉴定铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,P.a),临床分离金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.a)耐药性情况的可行性。方法:通过采用微生物快速鉴定系统及肉汤稀释法进行鉴定质控、临床分离金黄色葡萄球菌的耐药性情况,并将微生物快速鉴定系统检测结果与肉汤稀释法最低抑菌浓度(MIC)值进行比较分析,最后通过同步鉴定铜绿假单胞菌耐药性情况确定微生物快速鉴定系统的准确性及适用性。结果:微生物快速鉴定系统评分鉴定结果显示敏感质控菌株金黄色葡萄球菌评分值大于2.000,耐药质控菌株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant S.a,MRSA)评分值在1.700~2.000。临床分离金葡菌评分鉴定结果均在1.700~2.000,显示耐药,与肉汤稀释法MIC值结果一致。同时,无关质控敏感菌株铜绿假单胞菌的系统评分鉴定值大于2.000,显示敏感,其本身为敏感菌株,结果一致。结论:微生物快速鉴定系统评分方法可以用于金黄色葡萄球菌及铜绿假单胞菌耐药性情况的快速鉴定。 相似文献
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目的:观察痰热清注射液(痰热清)与亚胺培南西司他丁联合对广泛耐药铜绿假单胞菌的抑菌作用,并研究其作用机制,为临床治疗耐药菌提供参考。方法:将医院临床分离到广泛耐药铜绿假单胞菌采用微量稀释法检测痰热清与亚胺培南西司他丁最小抑菌浓度(MIC);棋盘法检测联合用药抑菌效果;微孔板法检测对成熟生物膜内细菌代谢活性的影响;Bio Flux动态观察药物对生物膜的影响并用激光共聚焦扫描显微镜观察活死细菌的分布;扫描电子显微镜(SEM)观察药物作用后细菌的形态变化。结果:亚胺培南西司他丁和痰热清的MIC分别为512 mg·L~(-1)和16 500 mg·L~(-1)。棋盘法结果显示痰热清可增强亚胺培南西司他丁的敏感性,二者协同抑菌,并确定联合用药浓度。与空白组或单用亚胺培南西司他丁组比较,联合用药各组显著减少生物膜内活菌量(P0.05,P0.01)。Bio Flux结果表明与空白组或单用药物组比较,联合用药各组可破坏生物膜结构,减小生物膜面积(P0.05);荧光染色结果显示联合用药对动态生物膜内细菌的代谢活性有明显抑制。SEM显示痰热清可抑制细菌分裂。结论:痰热清与亚胺培南西司他丁联合对浮游和生物膜状态的细菌生长有抑制作用,还可对生物膜产生破坏作用。 相似文献
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目的:观察哮喘宁颗粒药物含药血清对大鼠嗜碱性粒细胞株(RBL-2H3)细胞脱颗粒的影响,以探讨哮喘宁颗粒治疗支气管哮喘的疗效机制。方法:SD大鼠,均分5组,分别按哮喘宁颗粒0.4,0.2,0.1 g.kg-1、地塞米松(阳性对照)8.33×10-5g.kg-1、同体积生理盐水阴性对照,均ig,连续5 d,制备哮喘宁颗粒含药血清;以5%,10%含药血清干预RBL-2H3细胞脱颗粒进程,用钙离子成像法观察细胞脱颗粒早期细胞内钙离子的变化;用比色法检测细胞脱颗粒后β-己糖苷酶的释放量。结果:哮喘宁颗粒含药血清可以抑制Compound 48/80致敏的肥大细胞脱颗粒,在脱颗粒早期抑制细胞内钙离子的升高,并抑制β-己糖苷酶的释放。结论:哮喘宁颗粒含药血清在体外可以抑制致敏肥大细胞的脱颗粒过程,这可能是哮喘宁颗粒剂抑制哮喘I型变态反应,治疗支气管哮喘的机制之一。 相似文献