槐定碱对大鼠海马CA3区神经元超微结构的影响

目的观察槐定碱对大鼠脑电、行为的改变及其对海马CA3区神经元超微结构的影响.方法采用电生理学方法观察槐定碱对清醒大鼠自由活动时行为的影响,并记录脑电图;采用电镜观察给予槐定碱0.5、1.5、8 h后,大鼠海马CA3区神经元线粒体和细胞核超微结构的改变.结果对照组大鼠未见痫样脑电波型及痫性行为,海马CA3区神经元细胞超微结构正常.槐定碱组大鼠腹腔注射槐定碱(55 mg/kg)后,海马区出现痫样放电并伴有惊厥行为发作,在电镜下可见各时间点海马CA3区神经元不同程度线粒体嵴肿胀及轴突末梢变性等改变,以1.5 h组表现最为明显.结论槐定碱可诱发大鼠出现急性癫痫发作,并出现线粒体超微结构的损伤,其损伤早于细胞核的改变,提示线粒体的损伤可能是槐定碱引起神经元损伤的关键环节.     

槐定碱对大鼠海马组织CA3区神经元组织形态学和超微结构的影响

目的 观察槐定碱(sophoridine,SRI)致痫大鼠行为学、大鼠海马CA3区神经元组织形态学和超微结构,探讨槐定碱毒理作用.方法 将30只成年SD大鼠(雌雄不拘)随机分为生理盐水对照组(NS)、槐定碱组(SRI)、苯巴比妥钠﹢槐定碱组(PBS+SRI),每组各10只.腹腔注射大剂量槐定碱(47.83 mg/kg)后,观察大鼠行为学变化以及应用电镜技术观察各组大鼠致痫后海马CA3区神经元组织病理学和形态学的改变.结果 腹腔注射大剂量槐定碱后,大鼠出现了痫性行为发作;电镜下可见槐定碱致痫大鼠海马CA3区神经元核膜双层结构破坏,神经细胞核严重固缩,染色质颗粒状聚集,线粒体肿胀,嵴断裂或消失,毛细血管内皮细胞核固缩.经苯巴比妥钠干预后,槐定碱致痫大鼠海马CA3区神经细胞的损伤程度减轻.结论 大剂量槐定碱可导致大鼠在体海马神经细胞损伤,从而诱发癫痫.     

槐定碱致痫大鼠海马清醒脑电图及血清细胞因子含量变化的研究

目的：建立槐定碱（sophojridine,SRI）诱导大鼠癫痫模型,同步观察槐定碱致痫大鼠行为和清醒脑电的变化,并探求细胞因子与癫痫发病之间的关系.方法：选取30只大鼠,通过立体定位仪在大鼠海马埋置电极,1周后将存活健康的26只大鼠随机分成对照组和实验组,实验组大鼠予腹腔注射槐定碱（55 mg/kg）,造成强直-阵挛性发作癫痫持续状态模型;对照组腹腔注射等量生理盐水,观察记录自由大鼠海马的脑电活动和行为学改变;同时运用放射免疫法,检测大鼠血清TNF-α、IL-2和IL-6的水平.结果：实验组大鼠腹腔注射槐定碱后,逐渐出现癫痫样发作,且海马脑电图同时显示癫痫波发放,对照组大鼠无癫痫症状且未记录到痫性脑电图;实验组大鼠血清中TNF-α、IL-2和IL-6含量均明显高于对照组（P＜0.01）.结论：大剂量槐定碱腹腔注射可使大鼠引发典型的痫样发作行为和痫样脑电;TNF-α、IL-2、IL-6在槐定碱所致的癫痫发病中起促进作用,是癫痫发病的基础之一.     

槐定碱对大鼠皮层脑电的影响

目的:观察槐定碱(sophoridine,SR)对麻醉大鼠皮层脑电图(EEG)的影响。方法:利用脑立体定位手段将电极置入大鼠额叶皮层,采用单极引导法及计算机辅助FFT技术记录槐定碱对大鼠额叶皮层脑生物电变化的影响。结果:侧脑室注射(icv)槐定碱0.1、0.2、0.4mg/只,大鼠额叶皮层出现痫样放电,痫样放电持续时间和频率均表现出明显的剂量依赖关系。结论:槐定碱可使大鼠脑功能增强,并诱发痫样放电。     

槐定碱致癫痫样作用研究

目的:观察槐定碱(sophoridine)致痫大鼠清醒核团脑电(IEEG)变化特点;研究痫样特征分类和致痫作用机制。方法:采用慢性埋藏电极记录清醒大鼠核团脑电(intracranial electroencepholography,IEEG)的方法,观察槐定碱对大鼠产生痫样放电的特点,并判断致痫原发部位;采用小鼠模型实施工具药拮抗实验,探讨槐定碱所致癫痫样发作的作用机制及类型。结果:海马齿状回(DG)内颗粒细胞对于槐定碱致痫作用最敏感,其次是内侧穿行通路(PP)和颞叶皮层(TC)。阈下催眠剂量的地西泮、催眠剂量的巴比妥钠可以对抗槐定碱引起的痫样惊厥的发生;对抗最大电休克剂量的苯妥英钠不能对抗槐定碱引起的痫样惊厥的发生,但可以减缓惊厥的发生时间和小鼠的死亡时间。结论:海马内部异常放电在槐定碱致痫作用中可能起到重要作用,海马部位可能是痫样发作的原发部位;槐定碱的致动物癫痫样发作属于临床小发作类型,地西泮是较理想的预防药物。     

槐定碱对大鼠学习记忆的影响及其ERK信号转导机制

目的 观察槐定碱( sophoridine,SRI)对大鼠学习记忆和海马神经元p- ERK1/2表达的影响.方法 成年SD大鼠24只随机分为生理盐水对照组、槐定碱组、PD98059+槐定碱组,腹腔注射大剂量槐定碱(47.83mg/kg)后,观察各组大鼠行为学改变,Morris水迷宫检测大鼠的学习和记忆,免疫组化测定海马组织内p- ERK1/2阳性细胞数.结果 与生理盐水对照组相比,槐定碱组大鼠逃避潜伏期明显延长,穿越平台次数明显减少(P＜0.05);海马组织内p - ERK1/2阳性细胞数明显增加(P＜0.05).经PD98059干预后,槐定碱致痫大鼠逃避潜伏期显著减小,穿越平台次数明显增多(P＜0.05);海马组织内p- ERK1/2阳性细胞数明显降低(P＜0.05).结论 槐定碱可能通过ERK信号通路损伤海马神经元,从而影响大鼠的空间学习记忆能力.     

槐定碱对大鼠海马组织CA1区ERK信号转导通路的影响

目的：观察槐定碱（sophoridine,SRI）对大鼠海马组织CA1区ERK信号转导通路的影响。方法：成年雄性SD大鼠72只随机分为生理盐水对照组（n=8）,槐定碱组（n=32）,PD98059＋槐定碱组（n=32）。腹腔注射大剂量槐定碱（47.83mg/kg）建立癫痫模型,应用免疫组化法和Western blot法检测各组大鼠致痫后0.5h、1.5h、5.0h、8.0h海马组织CA1区ERK1、ERK2和p-ERK1/2的免疫阳性神经元数量的变化。结果：免疫组化结果显示生理盐水对照组大鼠海马CA1区有少量的ERK1和ERK2表达,p-ERK1/2仅在胞浆内表达弱阳性,槐定碱致痫0.5h后P-ERK1/2表达迅速增强,在神经元的胞核胞浆内都有表达;同时ERK1和ERK2阳性神经元数量明显多于生理盐水对照组（P〈0.05）,尤以致痫1.5h后该三种蛋白阳性细胞数量达到最高,5.0h时阳性神经元数量回降,8.0h继续回降,但仍高于生理盐水对照组。经PD98059干预后,槐定碱致痫大鼠海马ERK1、ERK2和P-ERK1,2阳性神经元数量明显低于槐定碱组（P〈0.05）。Western blot检测显示痫性发作各时间点大鼠海马组织内ERK1、ERK2和p-ERK1/2蛋白表达较生理盐水对照组显著增多（P〈0.05）,其中1.5h点组的蛋白表达水平高于其他各时间点组。PD98059＋槐定碱组与槐定碱组比较三种蛋白含量明显降低（P〈0.05）。结论：槐定碱通过ERK信号通路对大鼠海马组织造成痫性损害。     

槐定碱对大鼠中脑网状结构脑区生物电活动的影响

目的:观察槐定碱(Sophoridine,SR)对麻醉大鼠中脑网状结构区生物电信号(EEG)变化的影响。方法:利用脑立体定位手段,将电极置入大鼠中脑网状结构,采用单极引导法及计算机辅助FFT技术记录并分析槐定碱对大鼠中脑网状结构脑区生物电变化的影响。结果:与对照组比较,侧脑室注射(icv)槐定碱0.1、0.2、0.4mg/只,大鼠中脑网状结构脑电出现去同步化,并见痫样放电,痫样放电持续时间和频率均表现出明显的差异性(P0.05,P0.01),并呈剂量依赖关系。结论:SR具有明显的中枢兴奋作用,其作用与增强中脑网状结构的电活动,激活上行性网状结构系统有关;中脑网状结构可能是槐定碱中枢兴奋作用传导通路上的重要结构之一。     

氧化槐定碱对糖尿病大鼠主动脉超微结构的保护作用研究

目的 研究氧化槐定碱对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的糖尿病大鼠主动脉内膜超微结构的保护作用.方法 一次性腹腔注射STZ(60mg·kg~(-1)),建立大鼠糖尿病模型,采用形态学观察氧化槐定碱预防性给药对大鼠主动脉内皮细胞超微结构的影响.结果 实验动物饲养5周后,与生理盐水对照组相比,糖尿病模型组大鼠一般状况差,体重明显降低,主动脉内皮细胞增生明显,内膜下胶原化;与模型对照组比较,氧化槐定碱(250,500,1 000 mg·kg~(-1))各组大鼠精神状态有所改善、电镜下主动脉内皮超微结构损伤减轻.结论 氧化槐定碱可减轻STZ诱导的糖尿病大鼠主动脉内皮损伤,对主动脉内膜超微结构具有保护作用.     

癫痫定胶囊对实验性癫痫发作的影响

本试验以皮层电图 (ECoG)的痫样放电频率、波幅 ,海马电图 (EHG)的痫样放电频率、波幅为指标 ,观察癫痫定胶囊对海马内微量注射ZnSO4造成的实验性癫痫发作的影响。结果表明 :癫痫定胶囊大剂量组可明显降低因ZnSO4注射引起的ECoG电位持续性棘慢波的频率和波幅 ,减少EHG持续性痫样放电的频率 ,降低海马痫样放电电位的波幅增加值。提示 :癫痫定胶囊具有明显的抗癫痫作用 ,可能是加强了脑的抑制过程 ,使皮层和海马电活动出现同步化趋势 ,从而抑制了癫痫发作。     

Melatonin might be one possible medium of electroacupuncture anti-seizures

To explore the alteration of melatonin (MT) levels in pineal, hippocampus and serum during seizure crises and electroacupuncture (EA) anti-seizures, we established a rat seizure model by microinjecting benzylpenicillin into hippocampus. EA was performed on "Fengu" (DU 16) and "Jinsuo" (DU 8) acupoints in rats. Electroencephalogram (EEG) of rats was recorded and the relative power (RP) of 1 approximately 30 HZ band of EEG was analyzed. A capillary electrophoresis-electrochemical detection method was used to determine MT contents. Our results indicated that MT level was elevated in pineal and hippocampus, and first had no change then significantly evaluated in serum during seizure crisis. The elevation of MT level was greatly potentiated with 30 min EA treatment (P<0.05). Meanwhile, the degree of seizures and the increases of EEG RP induced by seizures were significantly reduced (P<0.05). Because MT was considered as an antistressor and a natural downregulator of epileptiform activity, we postulate that the elevation in MT level during seizures may be one endogenous mechanism that counteracts convulsions and seizure-induced stress. A further elevation of MT levels with EA treatment suggests that MT might be one of the possible mediums of EA anti-seizures.     

氧化槐定碱对大鼠海马脑区电活动及其功率谱的影响

目的:观察氧化槐定碱(Oxysophoridine,OSR)对麻醉大鼠海马区脑生物电(EEG)变化及其功率谱的影响。方法:利用脑立体定位技术,将电极置入大鼠海马脑区,采用单极引导法及计算机辅助FFT技术记录并分析氧化槐定碱对大鼠海马脑生物电变化的影响。结果:侧脑室注射(icv)氧化槐定碱2.5、5、10mg/只,大鼠海马脑电图出现以低幅慢波为主并伴有梭形睡眠波的波形,脑电总功率有一定下降,主频略有后移(P<0.05),θ波占总频率比例明显升高(P<0.05),但δ波比例下降(P<0.05),主频后移。结论:氧化槐定碱具有中枢抑制作用,其作用与降低海马脑生物电活动有关;海马核团可能是氧化槐定碱中枢抑制作用传导环路上的结构之一。     

半夏等7种中药超临界CO2萃取物抗惊厥作用比较

目的:对柴胡等7种中草药的超临界CO2萃取物进行抗惊厥作用的比较,并初步探讨其作用机制.方法:将昆明种小鼠1 060只随机分为11组,柴胡CO2萃取物组(柴Ⅰ)、柴胡CO2乙醇提取物组(柴Ⅱ)、石菖蒲CO2萃取物组(石Ⅰ)、石菖蒲CO2乙醇提取物组(石Ⅱ)、天南星CO2乙醇提取物组(天Ⅱ)、钩藤CO2乙醇提取物组(钩Ⅱ)、半夏CO2乙醇提取物组(半Ⅱ)、瑞香狼毒CO2萃取物组(狼Ⅰ)和柏子仁CO2萃取物组(柏Ⅰ)、托吡酯组、生理盐水组,每组分为4～6个剂量组,每个剂量组20只,ig给药,观察各剂量组对最大电休克(maximal electroshock seizure,MES)模型的对抗作用;以上述各药抗MES惊厥的ED50为给药剂量,观察ig各药对小鼠戊四唑惊厥模型(metrazol seizure test,MET)的对抗作用;由小鼠抗MES惊厥的ED95折算得到大鼠ig剂量,建立大鼠皮层定位注射青霉素点燃模型,比较各药对惊厥行为和脑电图的影响.结果:①9种受试中药提取物中天Ⅱ、钩Ⅱ、石Ⅰ、半Ⅱ、狼Ⅰ、柴l、石Ⅱ对MES模型均有对抗作用,且量效均呈正相关性.②7种受试中药提取物均可延长MET惊厥潜伏期,数值由大到小排列依次为天Ⅱ、钩Ⅱ、石Ⅰ、半Ⅱ、狼Ⅰ、柴Ⅰ、石Ⅱ,其中天Ⅱ(11.06 ±4.32)min的作用效果优于托吡酯(9.57±4.47) min.③CO2萃取物较CO2乙醇萃取物起效快,作用持续时间短.(4)半Ⅱ、柴Ⅰ、天Ⅱ、钩Ⅱ、石Ⅰ、石Ⅱ均可不同程度的延长青霉素诱发的痫性发作潜伏期、减轻发作程度,延长痫性放电的潜伏期,减少痫波发放频率,减小放电最高波幅.结论:天Ⅱ、钩Ⅱ、石Ⅰ、半Ⅱ、狼Ⅰ、柴Ⅰ、石Ⅱ均可对抗小鼠MES和MET惊厥;半Ⅱ、柴Ⅰ、天Ⅱ、钩Ⅱ、石Ⅰ、石Ⅱ可抑制大鼠皮层定位注射青霉素诱发的癫痫发作和痫性放电,其中半Ⅱ是对抗青霉素点燃惊厥发作最有效的药物,且对该模型的对抗作用优于托吡酯.     

侧脑室注射中药提取物三氧化二砷对海马神经元Kv4.2和Kv4.3钾通道表达的影响

目的：观察中药提取物三氧化二砷（Arsenic Trioxide,As2O3）对海马神经元Kv4.2、Kv4.3钾通道表达的影响.方法：将SD大鼠随机分为5组,分别经侧脑室注射生理盐水、不同剂量的As2 O3（1mg/mL,0.1mg/mL,0.01 mg/mL）和4-氨基吡啶（4-AP,15mmol/L）,观察给药后大鼠行为学的改变及Westem-blot法检测海马神经元Kv4.2、Kv4.3钾通道的表达.结果：As2 O3随浓度增加,能够剂量依赖性的引起海马神经元Kv4.2、Kv4.3蛋白表达增强,1mg/mL和0.1mg/mL的As2O3可引起大鼠癫痫样的抽搐发作.结论：As2O3能够影响海马神经元Kv4.2、Kv4.3钾通道的表达并引起癫痫样发作的行为学的改变.     

艾灸大椎穴对慢性应激大鼠神经营养因子的影响

目的 :观察艾灸大椎穴对慢性应激状态下大鼠海马神经元及脑源性神经营养因子的影响。方法 :SD雄性大鼠 18只 ,按随机表分为正常组、模型组、艾灸组。应用孤养和长期不可预见性的中等强度刺激造成应激失调模型 ,观察各组大鼠海马神经元的变化。采用HE染色、尼氏体染色的方法光镜下观察海马神经元形态的改变 ,用免疫组织化学的方法对海马脑源性神经营养因子 (BDNF)阳性神经元进行染色 ,并用图像分析仪定量分析。结果 :慢性应激可致大鼠海马神经元明显受损 ,神经营养因子阳性神经元数量亦显著减少 ,形态以空泡为主。艾灸大椎穴对此有明显改善作用。结论 :艾灸大椎穴对慢性应激大鼠脑源性神经营养因子有良性调节作用 ,并对海马神经元有保护作用。     

盐酸戊乙奎醚对抗敌敌畏的毒性作用

 目的：研究盐酸戊乙奎醚（penequinine hydrochloride，PCHE）对敌敌畏（DDVP）诱发的呼吸循环抑制和脑电图（EEG）变化的影响。方法：同时测定麻醉大鼠的血压、心率、呼吸频率和呼吸通气量；记录清醒大鼠的EEG。结果：给麻醉大鼠iv DDVP 5mg·kg^－1，可使呼吸频率，呼吸通气量，血压及心率很快抑制。当iv不能通过血脑屏障的胆碱受体阻断剂甲基阿托品后，DDVP的呼吸循环抑制作用改善不明显；而应用PCHE1，2mg·kg^－1及阿托品2，4mg·kg^－1时能明显对抗DDVP引起的呼吸循环抑制。清醒大鼠DDVP中毒后EEG出现去同步化改变，少数出现癫痫波，PCHE可完全对抗DDVP诱发的EEG改变，阿托品仅部分对抗。结论：PCHE具有较强的中枢及外周抗DDVP中毒作用。     

穴位埋线预处理对癫痫大鼠行为学及脑电的影响

目的:探讨穴位埋线预处理对癫痫大鼠行为学及脑电的影响。方法:40只Wistar大鼠,随机分为空白组、模型组、埋线组、西药组,每组10只。腹腔注射青霉素钠造成癫痫大鼠模型。埋线组大鼠在造模前第1、4、7天"印堂"透"百会"、"长强"穴埋线;西药组大鼠丙戊酸钠灌胃,每日1次,连续7d。观察发作潜伏期及发作程度,及脑电电压和脑电频率。结果:治疗后埋线组、西药组癫痫发作潜伏期均较模型组显著延长(P0.01),发作程度均明显轻于模型组(P0.01),脑电电压低于模型组(P0.01),脑电频率高于模型组(P0.01);埋线组与西药组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:穴位埋线预处理可使癫痫发作潜伏期延长、发作程度减轻,使癫痫痫性放电幅度降低,调节脑电频率,具有明显的抗癫痫作用,疗效与口服丙戊酸钠相当。     

宽叶缬草提取物抗戊四氮致大鼠癫痫的作用机理研究

为研究宽叶缬草提取物抗癫痫作用及其机理 ,用戊四氮 37 5mg/kg腹腔注射Wistar大鼠 2 8d建立慢性癫痫模型 ,同时胃管给予宽叶缬草提取物 (5 0 0mg/kg、10 0 0mg/kg、15 0 0mg/kg)每天 3次 ,观察大鼠行为及脑电图变化 ,用RT PCR检测GABA转运体 (GAT 1)mRNA的表达。结果 :大鼠 2 8d点燃后 ,GAT 1mRNA表达明显增加 ,与正常组比较 ,P <0 0 5 ;治疗组与模型对照组比较 ,P <0 0 5 ,大鼠癫痫发作次数明显减少 ,且发作时间缩短。提示 ,宽叶缬草提取物能有效对抗戊四氮的点燃作用 ,且有剂量依赖性 ,其机理可能是通过抑制GAT 1mRNA表达而起作用。     

4-氨基-2-甲基斑蝥胺对惊厥大鼠脑电、γ-氨基丁酸和γ-氨基丁酸受体的影响

 目的 研究4-氨基-2-甲基斑蝥胺（AMC）的抗惊厥作用及对皮层脑电图（EcoG）、γ-氨基丁酸（GABA）和γ-氨基丁酸受体（GABA_B）受体的影响。方法 建立大鼠皮层运动区定位注射青霉素诱发惊厥（PIC）模型,以丙戊酸钠（VPA）为阳性对照,以惊厥潜伏期和Racine分级评定药效,RM6240C型多道生物信号采集处理系统同步记录惊厥大鼠EcoG,分析灌胃AMC（25.0,100.0 mg·kg^-1）后的抗惊厥作用及对EcoG影响。采用免疫组化技术,测定皮层和海马区GABA和GABA_B受体蛋白量的变化。结果 两剂量AMC均能显著减轻大鼠惊厥发作及癫痫样脑电（P<0.01）;小剂量AMC组皮层和海马GABA含量虽然均较正常组和模型组高,但差异无显著性（P>0.05）;海马部位的GABA_B受体蛋白表达量升高(P<0.05),而在皮层部位的表达量虽然较模型组高,但差异无显著性（P>0.05）。VPA组和大剂量AMC组皮层、海马区GABA含量与GABA_B受体蛋白表达量均显著升高 (P<0.05)。结论 AMC可对抗PIC惊厥,抑制痫性放电。抗惊厥作用的机制与提高皮层和海马区的GABA含量和GABA_B受体表达有关。