旋覆代赭汤对反流性食管炎大鼠食管组织舒缩神经递质的影响

目的:观察旋覆代赭汤及原方倍用甘补组方对反流性食管炎(RE)模型大鼠食管舒缩神经递质活力的影响。方法:将110只雄性Wistar大鼠随机分成正常对照组、假手术组和造模组。将造模组大鼠制备成反流性食管炎动物模型后随机分为模型对照组、旋覆代赭汤原方组、原方倍用甘补方组、西药对照组。进而观察食管下段黏膜组织形态学变化及食管组织及血浆ChAT及NOS活力的表达情况。结果:原方组、甘补组及西药组大鼠食管组织ChAT活力较模型组明显提高,差异有统计学意义(P<0.05);原方组、甘补组及西药组大鼠食管组织NOS活力较模型组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:旋覆代赭汤能够通过影响食管组织及血浆舒缩神经递质合成酶活力,改善食管组织的舒缩功能。     

旋覆代赭汤对反流性食管炎模型大鼠神经递质合成酶活力的影响

目的:观察旋覆代赭汤对反流性食管炎(RE)模型大鼠神经递质合成酶活力的影响。方法:将大鼠随机分为正常对照组、假手术组、模型对照组、旋覆代赭汤原方组、倍用甘补组及西药对照组,各组给予相应处理或用药后,测定食管黏膜pH值;观察食管黏膜组织形态学变化,并进行病理分级及积分评定;测定血浆和食管组织中神经递质合成酶活力。结果:模型组与正常组比较,ChAT活性明显增加(P<0.05),NOS的活性亦显著提高(P<0.05);西药组与原方组及倍用甘补组比较,ChAT活性增加更为显著(P<0.05),倍用甘补组及原方组与西药组比较,食管组织NOS活力降低更加显著(P<0.05),倍用甘补组与原方组比较,食管组织NOS活力降低亦更加显著(P<0.05)。结论:旋覆代赭汤通过调节血浆及食管组织炎症细胞因子水平,干预炎症反应过程,通过影响血浆及食管组织神经递质合成酶活力,改善食管组织的舒缩功能。     

旋覆代赭汤对混合性反流性食管炎模型大鼠IL-10的影响

目的:观察旋覆代赭汤对混合性反流性食管炎模型大鼠血浆及食管组织细胞因子IL-10浓度水平的影响,揭示RE的关键病机及深入研究旋覆代赭汤治疗RE的作用机理。方法:采用"食管十二指肠端侧吻合术"制作动物模型。110只大鼠随机分为正常对照组、模型组、西药(莫沙必利)对照组、旋覆代赭汤原方组治疗组、原方倍用甘补组给予相应处理或用药后,取血浆及食管组织,通过ELISA的方法分别检测血浆及食管组织中细胞因子IL-10的浓度变化。结果:旋覆代赭汤原方倍用甘补组及原方组能显著提高反流性食管炎模型大鼠食管组织中IL-10的浓度,与模型组相比IL-10的浓度明显增加(P<0.05),与西药组相比IL-10的浓度增加更为明显(P<0.05),西药组与模型组相比差异无显著意义(P>0.05),倍用甘补组与原方组相比无显著性差异(P>0.05),血浆中IL-10含量结果表明,原方组与倍用甘补组及西药组与模型组比较,差异无显著性意义(P>0.05),其余结果与食管组织结果一致。结论:旋覆代赭汤原方倍用甘补组及原方组可显著提高反流性食管炎模型大鼠食管组织中IL-10的浓度,反应旋覆代赭汤原方倍用甘补组及原方组对改善食管局部及外周炎症反应、改善食管下端括约肌的松弛情况等有显著效果,通过对炎症因子的研究,可以更好的指导RE的临床用药,为RE的临床治疗提供新的理论指导。     

旋覆代赭汤对反流性食管炎模型大鼠食管组织及外周血中IL-18及相关促炎因子表达的影响

目的:观察旋覆代赭汤对反流性食管炎(RE)模型大鼠食管组织及外周血中白介素-18(IL-18)及相关促炎因子表达的影响.方法:将60只健康雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、中药组(予旋覆代赭汤)、西药组(予奥美拉唑+莫沙必利),每组15只.除正常组外,其余各组大鼠行"4.2 mm幽门夹+2/3胃底结扎术"制备RE模型.术后第8天开始,各组分别给予相应的药物或生理盐水灌胃,每日2次,连续14 d.第15日处死动物,取动脉血及食管组织.观察食管黏膜大体表现并进行RE分级;制备食管组织病理切片,光镜下观察组织形态.Western blot法检测食管组织中IL-18、环氧合酶-2(COX-2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的蛋白表达情况,ELISA法检测血清中IL-18、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达情况.结果:正常组大鼠食管黏膜光滑,无肉眼可见病理改变,RE分级均为0级;模型组大鼠食管黏膜充血明显,出现红斑和白色溃疡、增生白斑等病理改变,RE分级较正常组明显严重(P<0.05);中药组与西药组大鼠食管黏膜病理变化程度轻于模型组,RE分级亦较模型组明显减轻(P<0.05).模型组大鼠食管组织中IL-18、COX-2、iNOS蛋白表达及外周血中IL-18、IL-6、TNF-α含量均明显高于正常组(P<0.01),中药组、西药组大鼠上述指标均明显低于模型组(P<0.05,P<0.01),中、西药组组间比较差异均无统计学意义(P>0.05).结论:旋覆代赭汤可以通过抑制食管组织及外周血中促炎因子的表达发挥抗炎作用进而治疗反流性食管炎.     

旋覆代赭汤对反流性食管炎模型大鼠IL-6及TNF-α的影响

目的:观察旋覆代赭汤对混合性反流性食管炎模型大鼠血浆及食管组织细胞因子IL-6及TNF-α浓度水平的影响,揭示RE的关键病机及深入研究旋覆代赭汤治疗RE的作用机理。方法:采用"食管十二指肠端侧吻合术"制作动物模型。110只大鼠随机分为正常对照组、模型组、西药(莫沙必利)对照组、旋覆代赭汤原方组治疗组、原方倍用甘补组给予相应处理或用药后,取血浆及食管组织,通过ELISA的方法分别检测血浆及食管组织中细胞因子IL-6及TNF-α的浓度变化。结果:旋覆代赭汤原方倍用甘补组、原方组及西药组能明显降低反流性食管炎模型大鼠食管组织中IL-6及TNF-α的浓度,与模型组相比IL-6及TNF-α的浓度明显降低(P<0.05),倍用甘补组及原方组与西药组相比IL-6及TNF-α的浓度降低(P<0.05),倍用甘补组与原方组差异无显著性意义(P>0.05),而血浆中IL-6含量结果表明,倍用甘补组及原方组与西药组比较,差异无显著性意义(P>0.05),其余结果与食管组织结果一致。结论:旋覆代赭汤原方倍用甘补组及原方组可显著降低反流性食管炎模型大鼠食管组织中IL-6及TNF-α的浓度,反应旋覆代赭汤原方倍用甘补组及原方组对改善食管局部及外周炎症反应、改善食管下端括约肌的松弛情况等有显著效果,通过对炎症因子的研究,可以更好的指导RE的临床用药,为RE的临床治疗提供新的理论指导。     

旋覆代赭汤对RE模型大鼠食管黏膜Na+-K+-ATP酶及 Ca2+-Mg2+-ATP酶的影响

目的: 观察旋覆代赭汤对反流性食管炎(RE)模型大鼠食管黏膜组织Na⁺-K⁺-ATP酶及Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活性的影响,探讨RE食管黏膜细胞能量代谢障碍与黏膜损伤的关系以及旋覆代赭汤治疗RE的作用机制。方法: 将96只雄性Wistar大鼠随机分成6组,即假手术组、模型组、旋覆代赭汤组高、中、低剂量组(24,12,6 g·kg^-1)及西药对照组(奥美拉唑10 mg·kg^-1+2 mg·kg^-1莫沙必利),每组16只。采用"食管-十二指肠端侧吻合术"制备胃及十二指肠液混合RE模型。从术后第3天开始,假手术组、模型组给予生理盐水灌胃,药物治疗组分别给予旋覆代赭汤高、中、低剂量、西药(奥美拉唑10 mg·kg^-1+莫沙必利2 mg·kg^-1)灌胃,连续7天,记录大鼠体重变化及死亡情况,于第8天处死大鼠留取标本,观察食管下段黏膜大体及病理组织学变化;化学法检测食管黏膜组织Na⁺-K⁺-ATP和Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活性。结果: 与假手术组比,模型组大鼠体重明显减轻(P<0.05),食管黏膜肉眼及镜下病理改变明显,评分增高(P<0.05);食管黏膜组织Na⁺-K⁺-ATP酶及Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活性显著降低(P<0.05);与模型组及西药组比,旋覆代赭汤高、中剂量组大鼠死亡率明显降低(P<0.05):与模型组比,旋覆代赭汤高、中剂量组、西药组肉眼及病理评分显著降低(P<0.05);食管黏膜组织Na⁺-K⁺-ATP酶及Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活性明显提高(P<0.05)。结论: 旋覆代赭汤能明显提高RE大鼠食管黏膜细胞膜Na⁺-K⁺-ATP 酶及Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活性, 从而保持食管黏膜细胞完整性,减轻黏膜损伤。     

旋覆代赭汤及其拆方对RE模型大鼠食管线粒体膜电位的影响

目的:观察旋覆代赭汤及其拆方组对反流性食管炎(RE)模型大鼠食管组织线粒体膜电位的影响,从能量代谢的角度研究其作用机制。方法:150只健康雄性Wistar大鼠随机分为10组,即模型对照组、正常对照组、旋覆代赭汤全方组、苦降组、西药组、甘升组、升降相因组、全方去苦降组、全方去甘升组、全方去升降相因组。制备酸碱混合反流性食管炎大鼠模型,前7天正常喂养,第8天开始,旋覆代赭汤全方组及拆方组分别给予对应药液灌胃,西药组给予莫沙必利+兰索拉唑,对照组(正常组+模型组)均给予生理盐水灌胃。实验大鼠处死后,观察食管下段黏膜组织形态学的变化,应用罗丹明123测定食管组织线粒体膜电位的表达情况。结果:1全方组、甘升组、全方去苦降组、升降相因组、西药组体重变化分别与模型组比较差异具有统计学意义(P0.05)。2全方组、甘升组、全方去苦降组、升降相因组、西药组食管黏膜病理积分分别与模型组比较差异具有统计学意义(P0.05)。3全方组、甘升组、全方去苦降组、升降相因组、西药组食管组织线粒体膜电位分别与模型组比较有显著升高(P0.05)。4苦降组、全方去甘升组、全方去升降相因组体质量变化、食管黏膜病理积分、食管组织线粒体膜电位与模型组比较无明显差异。结论:旋覆代赭汤可以稳定RE大鼠食管组织线粒体膜电位,可能是该方改善RE大鼠食管括约肌松弛的作用机制之一。     

基于气机升降理论观察旋覆代赭汤及其拆方对反流性食管炎模型大鼠食管线粒体ANT转运活性的影响

目的:观察旋覆代赭汤及其拆方对反流性食管炎(RE)模型大鼠线粒体腺苷酸转运体(ANT)转运活性的影响。方法:将60只雄性Wistar大鼠,随机分成6组,即正常组、模型组、西药组,旋覆代赭汤全方组及拆方组(包括苦降组、甘升组),每组10只大鼠。对除正常组外的造模组大鼠采用"4.2 mm幽门夹+胃底2/3结扎术"制备RE动物模型。从术后第7天开始,正常对照组、模型对照组给予生理盐水灌胃,旋覆代赭汤全方组、拆方各组及西药组分别给予相应药液灌胃,干预14 d后,第22天处死全部大鼠后,取材,在光学显微镜下观察RE大鼠病理分级,各组随机取6份食管标本匀浆制成线粒体悬浮,液通过H3-ADP掺入法测量检测食管线粒体ANT转运活性。结果:各组大鼠食管黏膜病理形态学积分比较:模型组大鼠食管黏膜病理积分比正常组显著升高,有显著性差异(P0.01);全方组、西药组、甘升组食管黏膜病理形态学积分比模型组明显降低,差异有统计学意义(P0.05),苦降组食管黏膜病理形态学积分较模型组稍有降低,但差异无统计学意义(P0.05);全方组及西药组食管黏膜病理形态学积分较甘升组稍降低,但差异无统计学意义(P0.05)。各组食管线粒体ANT转运活性比较:与正常组比较,模型组、西药组、全方组、甘升组大鼠食管线粒体ANT转运活性略提高,差异无统计学意义(P0.05),苦降组略降低,差异无统计学意义(P0.05);与模型组比较,西药组、全方组及甘升组大鼠食管线粒体ANT转运活性略提高略升高,但差异无统计学意义(P0.05);西药组、全方组、甘升组及苦降组组间比较均无统计学意义(P0.05)。结论:旋覆代赭汤通过调节脾胃气机改善RE模型大鼠食管黏膜光镜下表现,促进黏膜修复,改善炎症。在一定程度上提高RE大鼠线粒体ANT转运活性,辅助线粒体能量的顺利完成,亦可能是旋覆代赭汤治疗RE的作用机制之一。     

天麻素对毛果芸香碱诱发的癫痫大鼠TLR4/NF-κB信号通路影响的研究

目的:探讨天麻素对毛果芸香碱诱发的癫痫大鼠的脑保护作用及其作用机制。方法:72只大鼠随机分为空白组、模型组、阳性药组、天麻素组、Toll样受体4 (TLR4)激活剂脂多糖(LPS)组、天麻素+LPS组,每组12只。采用腹腔注射毛果芸香碱建立癫痫大鼠模型。双抗体夹心酶联免疫法检测大鼠血清和海马组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与白细胞介素-1β(IL-1β)水平,TUNEL染色法检测海马组织细胞凋亡数,Western blot分别检测海马组织活化半胱氨酸基天冬氨酸酶-3 (CleavedCaspase-3)、B淋巴细胞瘤-2 (Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、TLR4、兔抗大鼠p-核因子-κB亚基p65亲和肽(p-NF-κBp65)和磷酸化核因子κB抑制蛋白α(p-IκB-α)表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠脑电频率显著降低(P<0.05),波幅显著升高(P<0.05);血清和海马组织TNF-α和IL-1β水平,海马组织细胞凋亡率、Cleaved-Caspase-3、Bax、TLR4和p-NF-κBp65蛋白明显升高(P<0.05);IL-10水平,Bcl-2和p-IκB-α蛋白表达显著降低(P<0.05)。与模型组比较,阳性药组、天麻素组和天麻素+LPS大鼠脑电频率显著升高(P<0.05),波幅显著降低(P<0.05),血清和海马组织TNF-α和IL-1β水平,海马组织细胞凋亡率、Cleaved-Caspase-3、Bax、TLR4和p-NF-κBp65蛋白明显降低(P<0.05),IL-10水平,Bcl-2和p-IκB-α蛋白表达显著升高(P<0.05);LPS组大鼠脑电频率、血清及海马组织IL-10水平、Bcl-2蛋白显著降低(P<0.05),血清与海马组织TNF-α与IL-1β水平、海马组织细胞凋亡率、Cleaved-Caspase-3、Bax、TLR4、p-NF-κBp65和p-IκB-α蛋白表达明显升高(P<0.05)。与LPS组比较,天麻素+LPS组大鼠脑电频率显著升高(P<0.05),波幅显著降低(P<0.05);血清及海马组织TNF-α与IL-1β水平、海马组织细胞凋亡率、Cleaved-Caspase-3、Bax、TLR4、p-NF-κBp65蛋白表达均明显降低(P<0.05),IL-10水平、Bcl-2及p-IκB-α蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论:天麻素可通过抑制TLR4/NF-κB信号通路对毛果芸香碱诱发的癫痫大鼠发挥脑保护作用。     

升降散调控TLR-4/NF-κB信号通路对脂多糖诱导脓毒症大鼠心肌损伤的影响

目的研究升降散调控TLR-4/NF-κB信号通路对LPS诱导脓毒症大鼠心肌损伤的影响。方法采用腹腔注射LPS法构建急性脓毒血症大鼠模型,大鼠随机分为正常组(n=6),脓毒症模型组(n=6),中药组(n=6),抑制剂组(n=6),除正常组外,各组均腹腔注射注射脂多糖,miR-146a抑制剂组心肌内注射miR-146a抑制剂(0.2μl/g),中药组升降散灌胃。48 h后采集大鼠心肌组织,观察心肌组织切片病理改变,测定白介素-1(IL-1)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等因子的水平,及miRNA-146a、NF-κB mRNA、TNF-αmRNA、IL-6 mRNA、IL-1βmRNA活性水平。结果与正常组相比,各组IL-1、IL-6、TLR4及NF-κB蛋白水平升高(P0.05),模型组及抑制组TNF-α高于对照组(P0.05);模型组miR-146a、NF-κB、TNF-α、IL-6及IL-1基因表达增高(P0.01),中药组miR-146a及NF-κB表达增高(P0.05);抑制剂组NF-κB、TNF-α、IL-6及IL-1表达增高(P0.01)。与模型组相比,中药组、TNF-α、TLR4及NF-κB蛋白水平降低(P0.05),中药组miR-146a表达增高,而NF-κB、TNF-α、IL-1及IL-6基因表达降低(P0.05);抑制剂组IL-6、TNF-α、TLR4及NF-κB活性升高(P0.01),抑制剂组miR-146a表达降低(P0.01),NF-κB、TNF-α、IL-6及IL-1表达增高。与抑制剂组相比,中药组IL-1、IL-6、TNF-α、TLR4及NF-κB蛋白水平降低(P0.01),miR-146a基因表达增高,而NF-κB、TNF-α、IL-6及IL-1表达降低(P0.01)。结论升降散能减轻脓毒症大鼠心肌损害,其机制可能与其促进miRNA-146a表达,负反馈调节TLR-4/NF-κB信号通路,减轻抑制炎症反应有关。     

旋覆代赭汤对反流性食管炎模型大鼠食管黏膜组织形态影响的实验研究

[目的]观察旋覆代赭汤对反流性食管炎(RE)模型大鼠食管黏膜组织形态的影响.[方法]将80只Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、中药治疗组、西药对照组,后3组行"食管十二指肠端侧吻合术",术后1周分别给予0.9%生理盐水、旋覆代赭汤水煎剂和枸橼酸莫沙必利分散片混悬液,连续给药21 d后,检测食管黏膜组织形态.[结果]模型组肉眼及病理积分最高,正常对照组最低,两者比较有显著性差异,中药治疗组及西药对照组肉眼及病理积分均显著降低.两组比较,无显著性差异;两组与模型组相比,均有显著性差异;两组与正常对照组相比,均无显著性差异.[结论]旋覆代赭汤对反流性食管炎有良好的治疗作用,在组织形态学水平上,可明显改善食管黏膜损伤及病理情况.     

黏膜方对IgA肾病肠黏膜TLR4/MyD88信号通路相关因子表达的影响

目的探讨和解清热法黏膜方治疗IgAN的可能药效机制。方法将50只SD大鼠随机分为正常组(10只)、模型组(20只)、黏膜方组(20只),除正常组外,另二组采用"口服BSA+皮下注射CCL4+尾静脉注射LPS"方联合法建立Ig A肾病大鼠模型。黏膜方治疗组给予含生药4.8g/ml的黏膜方原液,按1ml/100g,灌胃8周,模型组和正常对照组给予等剂量的注射用水灌胃8周。8周末处死大鼠,检测各组尿蛋白、尿红细胞水平; QRT-PCR法检测大鼠肠组织TLR4、MyD88、NF-κB、TGF-β1mRNA的表达水平; Western blot法测肠组织TLR4、MyD88、NF-κB、TGF-β1蛋白表达水平。结果与正常组比较,其余各组尿蛋白定量均明显升高(P0.01);与模型组比较,各给药组尿蛋白定量均明显下降(P0.01)。与正常组比较,模型组大鼠肠粘膜TLR4、MyD88、NF-κB、TGF-β1mRNA及蛋白表达均显著高于正常组(P0.05)。治疗组大鼠肠粘膜TLR4、MyD88、NF-κB、TGF-β1mRNA及蛋白表达均分别低于模型对照组(P0.05)。结论黏膜方可以明显降低IgAN大鼠尿蛋白定量。黏膜方可减弱IgAN大鼠肠黏膜组织中TLR4、MyD88、NF-κB、TGF-β1mRNA及蛋白质的表达。     

旋覆代赭汤对反流性食管炎家兔食管黏膜脑肠肽和一氧化氮合酶的影响

目的:研究旋覆代赭汤对混合反流性食管炎(RE)家兔食管黏膜血管活性肠肽(VIP)、P物质(SP)和一氧化氮合酶(NOS2)水平的影响。方法:制备家兔RE模型,并进行常规HE染色观察食管黏膜病理改变,免疫组织化学技术检测兔食管黏膜VIP、SP、NOS2的水平。结果:与正常组比较,模型组家兔食管黏膜炎细胞浸润明显,VIP、NOS2表达明显升高(P<0.01),SP表达明显减弱(P<0.01);经中药治疗后全方组、甘升组、去苦降组、去升降相因组光镜下食管黏膜组织有不同程度的修复,其中全方组、甘升组食管黏膜中VIP的表达明显减弱,与模型组相比有显著性差异(P<0.01);与模型组比较,全方组、去升降相因组SP的表达显著增强(P<0.01);与模型组比较,全方组、去苦降组NOS2的表达显著减弱(P<0.01)。结论:旋覆代赭汤全方通过减少食管黏膜VIP和NOS2表达、增强SP表达调节胃肠运动,抑制胃肠内容物的反流和促进黏膜的修复,对RE治疗作用最好;而苦降组、升降相因组、去甘升组对RE治疗效果不佳。     

复方佛耳草合剂对慢性阻塞性肺疾病大鼠TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的影响

目的 探讨复方佛耳草合剂对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的影响。方法 大鼠随机分为空白组(10只)和造模组(50只),造模组连续12周采用香烟烟雾联合气管注射LPS建立COPD大鼠模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组、地塞米松组(0.5 mg/kg)和复方佛耳草合剂低、中、高剂量组(6.8、13.6、27.2 g/kg),每组10只。给药干预24周后,采用动物肺功能仪检测大鼠肺功能,HE染色法观察肺组织病理变化,ELISA法检测血清TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA水平及SOD活性,RT-qPCR法检测肺组织TLR4、MyD88、NF-κB及caspase-3 mRNA表达,Western blot法检测肺组织TLR4、MyD88、NF-κB及TNF-α蛋白表达。结果 与空白组比较,模型组大鼠存在肺通气功能障碍,肺组织和支气管受损明显,SOD活性降低(P<0.01),血清TNF-α、IL-1β、IL-6及MDA水平升高(P<0.01),肺组织TLR4、MyD88、NF-κB、caspase-3 mRNA表达和TLR4、MyD8...     

旋覆代赭汤对混合性反流性食管炎模型大鼠PCNA表达的影响

目的观察旋覆代赭汤对混合性反流性食管炎模型大鼠食管黏膜组织增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响。方法采用"食管十二指肠端侧吻合术"制作动物模型。80只大鼠随机分为正常对照组、模型组、中药(旋覆代赭汤)治疗组、西药(莫沙必利)对照组,给予相应处理或用药后,取食管组织行HE染色,用免疫组化的方法测其PCNA的表达。结果旋覆代赭汤能显著抑制反流性食管炎模型大鼠PCNA表达的升高,与模型组相比PCNA的表达率显著降低(P<0.01),其疗效与西药组相当,与正常组相比亦无显著性差异(P>0.01)。结论旋覆代赭汤可明显降低混合性反流性食管炎食管黏膜PCNA的高表达,并能抗食管反流,从而起到治疗混合性反流性食管炎、预防复发及癌变的作用。     

清肺排毒汤对LPS诱导急性肺损伤小鼠炎症的作用

目的 探讨清肺排毒汤对脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤(ALI)小鼠的抗炎作用及其机制。方法 小鼠随机分为对照组、模型组、地塞米松组及清肺排毒汤低、高剂量组,除对照组外,其余各组采用气管穿刺注射LPS建立ALI模型,造模成功后给予相应药物干预7 d。记录小鼠存活率、肺湿干重比,HE染色观察肺损伤程度,吉姆萨染色法及血液分析仪分类计数肺泡灌洗液(BALF)中炎性细胞,RT-qPCR法检测肺组织TLR4、MyD88、NF-κB mRNA表达,ELISA法检测小鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平,Western blot法检测肺组织TLR4、MyD88、p-NF-κB p65、p-IκBα蛋白表达。结果 与模型组比较,清肺排毒汤高剂量组小鼠肺水肿和损伤程度,血清、BALF中炎性细胞因子和炎性细胞数量,肺组织TLR4、MyD88、NF-κB mRNA表达和肺组织TLR4、MyD88、p-NF-κB p65,p-IκBα蛋白表达均有不同程度降低(P<0.05,P<0.01)。结论 清肺排毒汤可能通过调控TLR4/MyD88/NF-κB信号通路抑制炎症因子和介质释放,减轻LPS诱...     

槐定碱与TLR4/MD-2阻断剂对LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞TLR4-NF-κB-TNF-α通路的影响

目的:研究槐定碱及TLR4/MD-2阻断剂对LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞TLR4-NF-κB-TNF-α通路的影响,探讨其抗内毒素的药理机制。方法:培养RAW264.7巨噬细胞,分为5组:空白对照组,LPS模型组,槐定碱+LPS组,TLR4/MD-2阻断剂+LPS组,TLR4/MD-2阻断剂+槐定碱+LPS组,各组分别于处理完毕后120 min时收集细胞及细胞培养液。West-ern blot检测TLR4蛋白表达,免疫细胞化学检测NF-κB蛋白的分布与表达,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测NF-κB,TNF-αmRNA表达,放射免疫分析法检测细胞培养液中TNF-α含量。结果:与LPS模型组比较,槐定碱+LPS组TLR4蛋白,NF-κBmRNA与NF-κB入核率,TNF-αmRNA及培养液中TNF-α含量均显著降低(P<0.01);TLR4/MD-2阻断剂+LPS组与TLR4/MD-2阻断剂+槐定碱+LPS组NF-κB mRNA及NF-κB入核率,TNF-αmRNA及培养液中TNF-α含量均低于LPS模型组(P<0.01),接近空白对照组,但2组之间上述各值的差异均无统计学意义。结论:TLR4/MD-2可能是槐定碱作用的靶位之一,槐定碱抑制TLR4-NF-κB-TNF-α通路活化可能是其抗内毒素机制之一。     

基于TLR4/MyD88/NF-κB信号通路探讨刺芒柄花素对LPS诱导的大鼠子宫内膜上皮细胞损伤的影响

目的:探讨刺芒柄花素通过调控Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核转录因子κB(NF-κB)信号通路对脂多糖(LPS)诱导的大鼠子宫内膜上皮细胞损伤的影响。方法:以LPS诱导大鼠子宫内膜上皮细胞损伤,采用CCK8法检测细胞活性;采用RT-qPCR法检测TLR4过表达效率;流式细胞术检测细胞凋亡;ELISA法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-6含量;Western Blot法检测TLR4/MyD88/NF-κB通路相关蛋白的表达。结果:与空白对照组比较,模型对照组细胞抑制率、细胞凋亡率、炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6的含量明显增加,p-P65/P65、p-IκBα/IκBα、MyD88和TLR4蛋白表达明显上调(P<0.05或P<0.01);与模型对照组相比,刺芒柄花素12μmol/L组细胞抑制率、细胞凋亡率、炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6的含量明显降低,p-P65/P65、p-IκBα/IκBα、MyD88和TLR4蛋白表达明显下调(P<0.05或P<0.01);TLR4过表达...     

毒素清对肺炎痰热证大鼠肺组织TLR4、NF-κB的影响

目的探讨毒素清对肺炎痰热证大鼠肺组织TLR4、NF-κB的影响,以揭示毒素清治疗肺炎痰热证的作用机制。方法制备细菌性肺炎痰热证模型,将Wistar大鼠随机分为正常组、肺炎组、肺炎痰热证组、阳性对照组、毒素清组。采用免疫组化法测定各组肺组织TLR4、NF-κB的表达。结果与正常组比较,肺炎组、肺炎痰热证组肺组织TLR4、NF-κB表达水平显著升高(P<0.01),其中,肺炎痰热证组较肺炎组升高明显(P<0.01);与肺炎痰热证组相比,毒素清组、阳性对照组肺组织TLR4、NF-κB表达明显减弱(P<0.01),其中,毒素清组肺组织NF-κB表达与阳性对照组相比减弱尤为明显(P<0.05),TLR4表达与阳性对照组相比有降低的趋势,但无统计学意义。结论 TLR4、NF-κB通路参与了肺炎痰热证肺组织的病理损伤过程;毒素清治疗肺炎痰热证的作用机制可能是通过抑制TLR4、NF-κB的表达,从而起到减轻肺损伤的作用。     

丹参素冰片酯干预TLR4信号通路抗动脉粥样硬化的机制研究

目的:探讨丹参素冰片酯干预TLR4信号通路抗动脉粥样硬化的作用及其机制。方法:选取SD大鼠60只,随机分为空白组(10只)和实验组(50只),实验组建造AS模型,模型成功后随机将实验组分为模型组,辛伐他汀组,丹参素冰片酯高、中、低剂量组。药物干预4周,采用自动生化分析仪测定血脂,通过免疫组化技术检测大鼠腹主动脉中TLR4、MyD88及NF-κB的表达。结果:丹参素冰片酯可显著降低高脂血症大鼠血清TC、TG、LDL-C水平(P<0.05或P<0.01);与模型组相比,辛伐他汀组及各丹参素冰片酯组均能减少TLR4、MyD88、NF-κB的表达(P<0.05或P<0.01),以丹参素冰片酯高剂量组与辛伐他汀组最为明显(P<0.01)。结论:丹参素冰片酯干预能降低血脂、抑制TLR4信号通路中TLR4、MyD88和NF-κB的表达,其抗AS的作用机制与阻断TLR4/MyD88/NF-κB信号传导通路中相关信号分子的过度激活,抑制炎症细胞在动脉管壁集聚有关。