糖肾康含药血清对高糖诱导小鼠肾小球系膜细胞增殖及周期的影响

目的:观察糖肾康含药血清对高糖诱导小鼠肾小球系膜细胞(GMCs)增殖及周期的影响,阐明作用机制。方法:30只SPF级雄性SD大鼠随机分为正常对照组、糖肾康4.6g/kg组、糖肾康13.8g/kg组、糖肾康41.4g/kg组和罗格列酮0.36mg/kg组5组,分别灌胃等体积生理盐水、糖肾康生药4.6g/kg、13.8g/kg、41.4g/kg和罗格列酮0.36mg/kg,1次/d,连续灌胃7d后腹主动脉取血制备含药血清;小鼠肾小球系膜细胞在高糖(30mmol/L葡萄糖)诱导下经含药血清治疗,分为正常血清组、高糖对照组、10%罗格列酮0.36mg/kg含药血清组、10%糖肾康4.6g/kg、13.8g/kg、41.4g/kg含药血清组,治疗24h、48h、72h和96h后,采用MTT法测定细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期,划痕标记荧光染料示踪技术检测细胞间隙连接通讯功能(GJIC),RTq-PCR技术检测Cx43、DAG、IP3和PKC的mRNA的表达。结果:(1)与高糖对照组比较,10%糖肾康13.8g/kg、41.4g/kg含药血清组A值在24h、48h、72h和96h各时间段均明显下降,且糖肾康各剂量含药血清组A值从72h开始下降程度优于10%罗格列酮0.36mg/kg含药血清组。(2)与高糖对照组比较,含药血清治疗到72h时,G0/G1期细胞百分比升高,S期百分比降低,细胞增殖指数明显降低;与10%罗格列酮0.36mg/kg含药血清组比较,10%糖肾康41.4g/kg含药血清组效果更优。(3)与高糖对照组比较,10%罗格列酮0.36mg/kg含药血清组和10%糖肾康13.8g/kg、41.4g/kg含药血清组均能改善肾小球系膜细胞的细胞间隙连接通讯功能,10%糖肾康41.4g/kg含药血清组最优。(4)与高糖对照组比较,10%罗格列酮0.36mg/kg含药血清组和10%糖肾康13.8g/kg、41.4g/kg含药血清均能降低DAG、IP3、PKC的mRNA,升高CX43mRNA,10%糖肾康41.4g/kg含药血清组最优。结论:糖肾康能够抑制高糖环境下肾小球系膜细胞增生,调节细胞周期,改善细胞间隙连接通讯功能功能,促进增殖细胞凋亡,治疗早期糖尿病肾病,其可能机制是糖肾康阻断了DAG/PKC信号通路,增加了Cx43表达,改善了细胞间隙连接通讯功能。     

保肾颗粒对家兔C-BSA异种血清免疫复合型肾炎模型的影响

目的:观察复方保肾颗粒对兔C-BSA异种血清免疫复合型肾炎模型的影响。方法:连续6周给家兔耳缘静脉注射阳离子化牛血清白蛋白制得肾炎模型,将动物分为空白对照组、模型对照组、复方保肾颗粒1.2g/kg、0.6 g/kg、0.3 g/kg剂量组、醋酸地塞米松组,灌胃给药10周后,检测动物尿蛋白、血清肌酐、尿素氮浓度及肾脏病理变化等指标的变化。结果:保肾颗粒能明显降低C-BSA肾炎模型家兔的尿蛋白、血清肌酐及尿素氮浓度,减轻肾脏的病理损伤。结论:复方保肾颗粒对C-BSA型肾炎家兔具有一定的保护和治疗作用。     

肾复宁颗粒对慢性肾功能衰竭大鼠肾脏TGF-β1mRNA及细胞凋亡基因Fas/FasL表达的影响

目的:观察肾复宁颗粒对慢性肾功能衰竭大鼠的作用及可能机制。方法:SD大鼠采用右肾切除左肾外动脉分支结扎方法建立CRF模型,随机分为模型对照组、雷公藤多甙片组(0.006g/kg)、肾复宁颗粒组(9g/kg)、肾复宁颗粒组(6g/kg)、肾复宁颗粒组(3g/kg),各15只,另设假手术组15只,连续给药8周,观察血清Scr、BUN、Cys-C含量及肾脏组织中TGF-β1mRNA、细胞凋亡基因Fas/Fas L表达水平。结果:治疗后,治疗组及雷公藤多甙片组大鼠血清中Scr、BUN、Cys-C水平明显下降,大鼠肾脏组织中TGF-β1 mRNA、Fas/Fas L表达减少,尤以肾复宁颗粒(9g/kg)显著。结论:肾复宁颗粒通过抑制慢性肾功能衰竭大鼠肾脏TGF-β1mRNA、Fas/Fas L表达,调控肾实质细胞调亡,从而改善肾功能,达到延缓肾脏纤维化作用,其疗效具有一定剂量依赖性。     

柴黄益肾方对大鼠慢性肾损害的改善作用

目的研究柴黄益肾方对5/6结扎肾动脉大鼠慢性肾损害的作用.方法实验大鼠随机分为假手术组、模型组、蒙诺对照组、柴黄益肾方小剂量组(0.55 g/kg)、中剂量组(1.1 g/kg)和大剂量组(2.2 g/kg),利用结扎5/6肾动脉加高蛋白饲料喂养诱导慢性肾损害大鼠模型,观察大鼠24 h尿蛋白定量、血清总蛋白、血清白蛋白、血清胆固醇、三酰甘油、血清尿素氮、血清肌酐等血清生化学指标,对肾组织进行病理组织学观察并对损害程度进行评分,探讨柴黄益肾方对蛋白尿、肾小球硬化及肾间质纤维化的治疗作用.结果柴黄益肾方能明显抑制大量尿蛋白,提升血清总蛋白和白蛋白含量,降低胆固醇及三酰甘油含量,降低血清尿素氮,改善肾脏病理损伤.结论柴黄益肾方能减轻由肾动脉结扎诱导的肾组织损伤,改善肾功能和纠正脂蛋白代谢紊乱.     

莫诺苷对晚期糖基化终末产物加重链脲佐菌素诱导糖尿病肾病保护作用及其机制

目的探讨山茱萸Cornus officinalis中效应成分莫诺苷对晚期糖基化终末产物(AGEs)加重链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病肾病(DN)小鼠的保护机制。方法将STZ诱导成功的DN小鼠饲喂高AGEs饲料,并分别ig给予氨基胍(0.1 g/kg)、二甲双胍(0.2 g/kg)、卡托普利(0.02 g/kg)、莫诺苷低剂量(0.02 g/kg)和莫诺苷高剂量(0.10 g/kg)12周。检测空腹血糖、胰岛素、血清肌酐和尿素氮、血清和肾脏AGEs、24 h尿蛋白等指标,RT-PCR法检测肾组织中晚期糖基化终末产物受体(RAGE)m RNA表达,Westorn blotting法检测肾组织中RAGE蛋白表达,观察各组小鼠胰腺和肾脏的病理改变。结果莫诺苷可显著降低DN小鼠血糖,改善"三多一少"症状,增加胰岛素分泌,降低24 h尿蛋白、血清尿素氮和肌酐、血清和肾脏AGEs水平,缓解胰腺及肾脏病变,下调肾皮质RAGE m RNA和蛋白的表达。结论莫诺苷具有保护DN小鼠的作用,且高剂量作用较优,其相关机制可能与降低血清、肾脏AGEs水平,下调肾皮质RAGE m RNA和蛋白的表达有关。     

扶正泄浊保肾汤对慢性肾功能衰竭大鼠瘦素的影响

目的:观察扶正泄浊保肾汤对5/6肾切除CRF大鼠动物模型的疗效,探讨该方药治疗CRF的部分机制。方法:采用5/6肾切除方法制造CRF模型。60只SD雄性大鼠随机分为六组:假手术组,模型组,对照组,中药大、中、小剂量组。大、中、小剂量组分别予扶正泄浊保肾汤,按29.4g/kg、19.6g/kg、9.8g/kg比例灌胃。假手术组及模型组予以生理盐水灌胃;对照组予以尿毒清颗粒灌肠。给药8周后处死大鼠,放射免疫法测定血清瘦素(Lepin)的含量。     

肾康汤对大鼠长期毒性试验研究

目的:考察肾康汤长期应用的安全性。方法:将SD大鼠随机分成4组,即对照组、肾康汤高剂量组6.9g/kg(30倍于临床用药)、中剂量组3.45g/kg(15倍于临床用药),低剂量组1.15g/kg(5倍于临床用药),每组按剂量连续灌胃3个月,每天观察给药后大鼠的饮食、活动、体质量、摄食量。于给药3个月和停药2周(恢复期)后处死大鼠进行血液学、血清生化学指标检测,并进行剖检和组织病理学检查。结果:肾康汤高中低剂量组大鼠一般情况、血液学、血清生化学指标及脏器系数与对照组比较无明显差异(P≤0.05),也未见异常组织学病理改变,肾康汤长期服用不会产生积蓄性中毒反应。结论:肾康汤在临床剂量下服用安全可靠。     

芪蛭肾安丸对5/6肾切除肾衰大鼠的肾保护作用

目的观察芪蛭肾安丸对5/6肾切除肾衰大鼠的肾保护作用。方法 SD雄性大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、芪蛭肾安丸(1.0 g/kg)组、芪蛭肾安丸(2.0 g/kg)组、芪蛭肾安丸(4.0 g/kg)组和尿毒清颗粒组,每组8只。5/6肾切除建立慢性肾衰竭(CRF)大鼠模型,给药组大鼠连续用药6周后,检测血脂,肾功能及尿量、蛋白尿的变化。结果与模型对照组比较,芪蛭肾安丸(1.0 g/kg、2.0 g/kg、4.0 g/kg组大鼠尿量明显增加(P<0.05),蛋白尿、BUN、Cr、TC、TG均明显减低(P<0.01)。结论芪蛭肾安丸对模型大鼠肾脏具有保护作用,它可能是通过调节脂代谢、降低蛋白尿而实现的。     

滋肾消渴汤对大鼠糖尿病肾病及TGF-β1表达的影响

目的:观察滋肾消渴汤对糖尿病肾病的治疗作用及肾组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA表达的影响。方法:选用摘除单侧肾加腹腔注射链脲佐菌素(STZ)法,复制糖尿病肾病大鼠模型,按血糖值随机分组后给药12周后,按试剂盒方法,酶标仪检测各组大鼠尿液中尿总蛋白和微量白蛋白含量,生化仪检测各组大鼠血清中血糖、血脂、肌酐(Crea)和尿素氮(BUN)水平,ELISA法检测血清胰岛素含量,RT-PCR法检测肾组织中TGF-β1 mRNA表达。结果:滋肾消渴汤于3g/kg具有调节血糖血脂和改善肾功能的作用,滋肾消渴汤于6g/kg可上调血清胰岛素水平,滋肾消渴汤于3g/kg可降低组肾组织TGF-β1 mRNA表达。结论:滋肾消渴汤能拮抗糖尿病肾病,其作用机制可能与促进胰岛素分泌,抑制TGF-β1表达有关。     

昆仙胶囊对阿霉素诱导的肾病综合征大鼠的治疗作用

目的:观察昆仙胶囊对阿霉素诱导大鼠肾病综合征的治疗作用。方法:雄性Wistar大鼠尾静脉一次性注射阿霉素6mg/kg建立大鼠肾病综合征模型,分为模型组、激素组(7.5 mg/kg)、昆仙胶囊大(30 g/kg)、中(15 g/kg)及小剂量组(7.5 g/kg),正常对照组大鼠注射等体积生理盐水。连续灌胃52天,每周检测各组大鼠大鼠24 h尿蛋白水平,实验结束时取血测定血清总蛋白、白蛋白、总胆固醇、甘油三酯、尿素氮、肌酐;取肾组织观察病理学改变并对其损害程度进行半定量评分。结果:与模型组比较,昆仙胶囊各剂量组24 h尿蛋白水平显著降低,血清总胆固醇水平显著升高,昆仙胶囊15g/kg、7.5g/kg组能显著降低模型大鼠血清甘油三酯水平,减轻肾小球病理损伤(P<0.01);昆仙胶囊30g/kg和15g/kg也能显著改善模型大鼠肾小管间质损害(P<0.01)。结论:昆仙胶囊对阿霉素诱导的大鼠肾病综合征有良好的治疗作用,其作用机制与改善脂代谢紊乱和减少尿蛋白有关。     

UFLC-ESI-IT-TOF鉴定六味地黄丸中的化学成分和代谢成分

目的：鉴定六味地黄丸中的化学成分和代谢成分。方法：采用超快液相色谱梯度洗脱，飞行时间质谱正负离子同时检测。结果：在六味地黄提取物中鉴定了40 种化学成分，在大鼠血中鉴定了6 种原型药物和9 种代谢产物，并推断了以上产物的代谢途径。结论：UFLC-ESI-IT-TOF 方法适合于复杂中成药样品的分析，有助于全面了解六味地黄丸中的化学成分和代谢成分。     

UFLC-ESI-IT-TOF鉴定六味地黄丸中的化学成分和代谢成分

目的：鉴定六味地黄丸中的化学成分和代谢成分。方法：采用超快液相色谱梯度洗脱，飞行时间质谱正负离子同时检测。结果：在六味地黄提取物中鉴定了40种化学成分，在大鼠血中鉴定了6种原型药物和9种代谢产物，并推断了以上产物的代谢途径。结论：UFLC—ESI-IT—TOF方法适合于复杂中成药样品的分析，有助于全面了解六味地黄丸中的化学成分和代谢成分。     

二仙汤、二至丸和地黄煎对小鼠脾细胞和卵巢颗粒细胞的调节作用

目的探讨二仙汤、二至丸和地黄煎对小鼠脾细胞和卵巢颗粒细胞的调节作用。方法取小鼠脾脏和卵巢分别制备脾单个核细胞和卵巢颗粒细胞,于24孔板中培养,分别加入二仙汤、二至丸以及地黄煎的水提物和醇提物,以香菇多糖水溶剂为阳性对照药物,运用MTT法观察细胞增殖情况;酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞上清液中IL-1、IFN-γ及E2的浓度。结果二仙汤、二至丸、地黄煎各组对脾单个核细胞及卵巢颗粒细胞均具有较好的增殖作用(P0.05,P0.01);三方均可提高小鼠脾单个核细胞培养上清液中IL-1、IFN-γ的含量(P0.05,P0.01),但与阳性对照组相比,三方均无差异(P0.05);三方均可提高小鼠卵巢颗粒细胞上清液中的E2水平(P0.01,P0.05);与阳性对照组相比,三方均无差异(P0.05)。结论二仙汤、二至丸、地黄煎对小鼠脾细胞和卵巢颗粒细胞均有较好的调节作用。     

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??OBJECTIVE To improve the quality control method of Liuwei Dihuang Pills.METHODS Morroniside and loganin from processed Fructus Corni were identified by TLC. Morrniside, loganin and paeonol in Liuwei Dihuang Pills were determined by HPLC. The determination was performed on a Phenomenex Gemini 110?~ C₁₈ column (4.6 mm??250 mm, 5 ??m) maintained at 40 ?? with gradient elution of acetonitrile (A) and 0.3% phosphoric acid aqueous solution (B) at a flow rate of 1 mL??min^-1. The detective wavelength was set at 240 nm for morroniside and loganin and 274 nm for paeonol. RESULTS The TLC spots were clear. Morrniside, loganin and paeonol showed good linear relationship in the range of 0.020 78-1.039, 0.020 34-1.017, and 0.045 76-2.288 ??g, respectively. The average recoveries (n=9) were 99.97%-100.99% with RSDs less than 2.3%. CONCLUSION The method is simple, rapid, accurate and can be used to control the quality of Liuwei Dihuang Pill more effectively.     

六味地黄丸的HPLC指纹图谱和模式识别研究

目的研究六味地黄丸的质量控制方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Agilent Zorbax SB C18(250 mm×4.6 mm,5μm),乙腈-水梯度洗脱,柱温:30℃,体积流量:1.0 mL/min,检测波长为236 nm,并利用聚类分析法和主成分分析法分析结果。结果通过聚类分析将不同厂家和批次的25个样品分为3类,不同剂型的六味地黄制剂HPLC指纹图谱存在明显的差异。主成分分析分类结果与聚类分析分类结果一致,经主成分分析,8个共有峰可综合为3个主成分,其累积贡献率达82.844%,马钱苷的相对峰面积为六味地黄丸指纹图谱中影响比较大的指标。结论此方法可较系统地用于六味地黄丸的质量控制。     

HPLC法测定参麦地黄丸中毛蕊花糖苷含量的研究

目的:建立测定参麦地黄丸中毛蕊花糖苷的含量测定方法。方法:采用HPLC法,流动相为乙腈-0.1%冰醋酸溶液(14∶86),色谱柱为ChromCore^TM C18(5μm,4.6×250 mm),流速1.0 mL·min^-1,检测波长为334 nm,柱温30℃,进样量20μL。结果:毛蕊花糖苷在2.13~106.4μg/mL范围内呈现良好的线性关系(r=0.9992),平均加样回收率在97.63%,RSD为0.63%。结论:该方法准确可靠,且重现性好,为参麦地黄丸质量标准研究提供参考。     

黄连地黄汤对糖尿病性心肌病大鼠心肌CTGF及FN1表达的影响

[目的] 研究黄连地黄汤对糖尿病性心肌病的防治作用。[方法] 80只SPF级SD大鼠分为空白对照组、模型组、黄连地黄汤低剂量组（2.7 g/kg生药）、黄连地黄汤中剂量组（5.4 g/kg生药）、黄连地黄汤高剂量组（10.8 g/kg生药）、二甲双胍（90 mg/kg）合并苯那普利（0.9 mg/kg）对照组。除空白对照组外其余大鼠先用高脂高糖饲料喂养6周，然后各组造模大鼠腹腔注射浓度为44 mg/kg的链脲佐菌素（STZ）。3 d后检测空腹血糖，选择血糖大于11.1 mmol/L的2型糖尿病模型。血糖符合标准的大鼠继续边喂饲高脂饲料边给药12周。末次给药1 h后测空腹血糖，然后各组大鼠用5%水合氯醛（6 mL/kg）麻醉，腹主动脉取血，检测血清低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、总胆固醇（TC）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA），取心脏用福尔马林溶液固定，用于苏木精-伊红（HE）染色及免疫组化检测心肌细胞结缔组织生长因子（CTGF）和纤维连接蛋白抗体（FN1）表达。[结果] 研究结果表明黄连地黄汤可降低糖尿病性心肌病模型大鼠空腹血糖值、LDL-C、TC含量及心肌细胞结缔组织生长因子的表达，增加其抗氧化能力及纤维连接蛋白的表达。[结论] 黄连地黄汤对糖尿病性心肌病模型大鼠心肌细胞具有保护作用。     

头痛宁滴丸治疗偏头痛的实验研究

目的采用多种实验模型评价头痛宁滴丸治疗偏头痛的有效性。方法采用硝酸甘油致大鼠实验性偏头痛模型,观察头痛宁滴丸对偏头痛的治疗作用;采用小鼠化学性刺激、热刺激及大鼠机械性刺激、福尔马林刺激实验模型,观察头痛宁滴丸的镇痛作用;采用硝酸士的宁致小鼠惊厥实验模型、正常小鼠自主活动实验模型,观察头痛宁滴丸的镇静作用;采用高黏滞血症大鼠模型、微循环障碍小鼠耳廓微循环实验模型,观察头痛宁滴丸的活血作用。结果与模型组比较,头痛宁滴丸给药5d,1、2g/kg剂量能明显减少大鼠挠头次数、爬笼次数,缩短耳红消退时间;头痛宁滴丸1.5、3g/kg剂量明显减少醋酸引起的小鼠扭体次数;对热刺激模型无明显影响;头痛宁滴丸1、2 g/kg剂量能明显提高机械性刺激致痛大鼠的痛阈值,缩短福尔马林致痛大鼠实验II相时间;头痛宁滴丸1.5、3g/kg剂量能明显延长小鼠惊厥潜伏期、减少自主活动次数;头痛宁滴丸0.5、1、2 g/kg剂量明显抑制大鼠全血黏度的升高;1.5、3 g/kg剂量明显改善微循环障碍小鼠耳廓微循环的血液流态、减少红细胞聚集、增加毛细血管交点数。结论头痛宁滴丸有明显的镇痛、镇静、活血作用,对实验性偏头痛有明显的治疗作用。     

犀角地黄汤合银翘散含药血清抑制流感病毒感染大鼠肺泡巨噬细胞致炎物质的研究

目的:研究犀角地黄汤合银翘散含药血清对甲型流感病毒鼠肺适应株(FM1)感染大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)后产生的致炎物质的影响。方法:运用中药血清药理学的方法制备等效剂量(13.8g/kg)的大鼠犀角地黄汤合银翘散含药血清。FM1感染NR8383细胞1h后,加入15%的犀角地黄汤合银翘散含药血清,同时设正常细胞和病毒对照组。药物作用后6、12、24h,ELISA检测细胞上清中炎症细胞因子TNF-α、MCP-1的含量,放免法检测细胞上清中炎性介质PGE2、PLA2、LTB4的含量;药物作用后8、24、36、48h,生化法检测细胞内自由基NO、iNOS含量;药物作用后24h,RealtimePCR检测细胞内TNF-α、MCP-1的mRNA水平。结果:犀角地黄汤合银翘散含药血清抑制了FM1感染NR8383细胞后TNF-α、MCP-1的转录和表达(P<0.05),抑制了NO、iNOS的产生(P<0.05),降低了PGE2、PLA2、LTB4、MDA的含量(P<0.05)。结论:犀角地黄汤合银翘散含药血清明显抑制了流感病毒感染后肺泡巨噬细胞内炎性细胞因子、炎性介质及自由基的产生,具有抗炎作用。     

知柏地黄丸对抑那通诱导特发性性早熟小鼠模型的干预作用

目的观察知柏地黄丸对抑那通诱导的特发性中枢性性早熟（ICPP）模型小鼠的影响。方法选用18日龄BALB／c雌性小鼠，随机分为5组：正常对照组，ICPP模型组，知柏地黄丸高、低剂量组（剂量分别为101．4g·kg^-1·d^-1、50．7g·kg^-1·d^-1）。甲地孕酮对照组（剂量为3．9mg·kg^-1·d^-1）；除正常对照组外，其他各组均给予促性腺激素释放激素拟似物抑那通，首次剂量为1573．5雌／kg，第2次、第3次剂量均为1180μg／kg，隔日1次，复制模型；检测各组小鼠阴道开口数，体重，血清雌二醇（E2）和黄体生成素（LH）水平，子宫、卵巢重量，计算子宫指数和卵巢指数，子宫和阴道脱落细胞涂片，卵巢组织病理学变化等。结果知柏地黄丸高剂量组于造模第3_4天对抑那通所致阴道开口提前有抑制作用（P〈0．05，P〈0．01），知柏地黄丸低剂量组于造模第2-5天对抑那通所致阴道开口提前有抑制作用（均P〈0．05，P〈0．01），甲地孕酮对照组于造模第3天对抑那通所致阴道开口提前有抑制作用（P〈0．05）；知柏地黄丸高剂量组可降低抑那通所致子宫重量增加（P〈0．05），知柏地黄丸低剂量组及甲地孕酮对照组均可降低抑那通所致子宫、卵巢重量增加及子宫指数和卵巢指数的升高（P〈0．01）；高、低剂量的知柏地黄丸及甲地孕酮均有抑制抑那通降低E2水平的作用（P〈0．05，P〈0．01），各给药组对抑那通升高LH水平、诱导阴道角化细胞的出现及排卵后出现的子宫内膜分泌期改变无明显影响。结论知柏地黄丸对抑那通刺激诱导的ICPP模型具有一定的对抗作用，其机制可能是通过抑制HPGA的靶腺（性腺）而起作用。