康泰复方对D-IBS大鼠结肠黏膜CRH及CRH-R1 mRNA表达的影响

目的：观察以疏肝健脾、和胃安神法组方的康泰复方对腹泻型肠易激综合征（D-IBS）大鼠结肠黏膜促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）及CRH-R1mRNA表达的影响。方法：将育龄7天的新生SD大鼠100只随机分出10只为正常组,余90只利用幼鼠母子分离加直肠刺激法复制D-IBS内脏高敏感性大鼠模型,造模成功后按体重随机分为对照组、康泰胶囊高、中、低剂量组和西药组各10只。模型复制成功后分别给予生理盐水、康泰胶囊1.52、3.04、6.08g/kg、马来酸曲美布汀片0.1g/kg灌胃,每天1次,连续2周,治疗后再次评价其腹部收缩反射（AWR）阈值,并运用RT-PCR法检测大鼠结肠黏膜CRH及CRH-R1mRNA的表达。结果：康泰胶囊能够升高内脏高敏感性大鼠AWR阈值,降低结肠黏膜CRH-R1mRNA的表达。结论：康泰胶囊对D-IBS内脏高敏感性大鼠有较好的治疗作用,其作用机制可能与影响大鼠结肠黏膜CRH-R1mRNA表达相关。     

四逆散对慢性应激大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴作用的实验研究

目的研究调和肝脾之四逆散对慢性应激大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴（HPA轴）的影响。方法实验设正常组、模型1组、模型2组、四逆散组。除正常组外其余各组用电刺激法制备慢性应激动物模型,并给予相应的处理。观察大鼠行为学指标的变化,测定血浆皮质酮（CORT）、下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）和血浆促肾上腺皮质激素（ACTH）的含量,同时检测大鼠下丘脑CRH mRNA和垂体ACTH mRNA含量变化。结果四逆散能改善大鼠行为表现,降低大鼠血浆ACTH、下丘脑CRH、血浆CORT的含量及下丘脑CRH mRNA和垂体ACTH mRNA的过度表达。结论四逆散可有效调整慢性应激大鼠HPA轴的异常。     

补肾定喘汤对哮喘大鼠血CORT、下丘脑CRHmRNA表达的影响

目的：探讨哮喘大鼠CRHmRNA(促肾上腺皮质激素释放激素信使核糖核酸)、血浆CORT(皮质酮)变化及补肾定喘汤(鹿角、肉苁蓉、巴戟天、熟地等)对它们的作用。方法：采用放射免疫、半定量RT—PCR(逆转录-聚合酶链反应)技术，分别观察血浆CORT、下丘脑CRHmRNA水平的变化。结果：哮喘大鼠血浆CORT水平降低(P＜0．01)，下丘脑CRHmRNA水平明显降低。补肾定喘汤治疗能明显促进CRH基因表达，升高血浆CORT水平。结论：哮喘模型大鼠存在着HPA轴抑制，补肾定喘汤能有效地保护和提高受抑的HPA轴的功能。结果：初步探讨了补肾定喘汤的作用机制。     

缬草醛对肠易激综合征模型大鼠结肠CRF,TPH1 mRNA及5-HT表达的影响

该研究旨在通过探讨蜘蛛香环烯醚萜类成分缬草醛对肠易激综合征(IBS)大鼠结肠中促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)、色氨酸羟化酶1(TPH1)mRNA表达及5-羟色胺(5-HT)含量的影响,阐释缬草醛通过5-HT通路治疗IBS的作用机制。将54只SD雄性大鼠随机分为空白对照组、模型组、缬草醛高、中、低剂量组、匹维溴铵组,每组9只。采用孤养结合慢-急性不可预见性应激法建立IBS大鼠模型,免疫组化法测定大鼠结肠CRF表达,RT-PCR法测定结肠中TPH1 mRNA表达,高效液相色谱法测定大鼠结肠中5-HT含量。实验结果显示,孤养结合慢-急性不可预见性应激可造成大鼠结肠中CRF,TPH1 mRNA表达以及5-HT含量升高(P0.05),缬草醛各剂量组中CRF,TPH1 mRNA及5-HT含量较模型组明显下降(P0.05)。实验结果表明,肠易激综合征能够导致结肠中CRF,TPH1 mRNA的表达以及5-HT的含量升高,而缬草醛通过降低结肠中CRF,TPH1 mRNA的表达以及5-HT的含量,而改善胃肠道的相关症状。     

龙牡桂枝汤对慢性应激状态下ADHD大鼠学习记忆及海马-HPA轴的影响

目的：观察龙牡桂枝汤对慢性应激状态下注意缺陷多动障碍（ADHD）模型大鼠学习记忆能力和海马-下丘脑-垂体-肾上腺轴（HPA轴）的影响。方法：32只ADHD模型动物幼年自发性高血压大鼠（SHR）随机分为空白组、慢性应激组、盐酸哌甲酯组和龙牡桂枝汤组,各8只。采用Morris水迷宫实验评价大鼠学习记忆能力,ELISA法检测血清促肾上腺皮质激素（ACTH）、皮质酮（CORT）、促肾上腺皮质释放激素（CRH）水平,RTPCR法检测下丘脑CRH、促肾上腺皮质激素释放激素受体1(CRHR1)、促肾上腺皮质释放激素结合蛋白（CRH-BP）及垂体CRHR1、CRH-BP mRNA表达水平,免疫组化法检测海马糖皮质激素受体（GR）、盐皮质激素受体（MR）蛋白表达水平。结果：与空白组比较,慢性应激组寻找平台的潜伏期显著延长（P<0.01）,在目标象限停留时间及穿越平台数显著减少（P<0.05）,血清CORT、CRH、ACTH水平显著升高（P<0.01,P<0.05）,下丘脑CRH、CRHR1、CRH-BP mRNA及垂体CRHR1、CRH-BP mRNA表达升高（P<0.05...     

基于中医情志致病探讨促肾上腺皮质激素释放激素介导的十二指肠紧密连接损伤在功能性消化不良发病中的机制

目的 通过研究促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)对应激造模的功能性消化不良(FD)大鼠十二指肠紧密连接蛋白mRNA表达影响,为中医情志致病在脾胃疾病中发生的作用提供一定的基础支撑.方法 18只雄性大鼠随机分为对照组、模型组、拮抗剂组,模型组及拮抗剂组采用夹尾应激方法建立FD模型,而拮抗剂组在每日造模前,提前予促肾上腺皮质激素释放激素受体1(CRHR1)拮抗剂腹腔注射,对照组及模型组予生理盐水腹腔注射.干预结束后,取各组大鼠十二指肠,测定肌球蛋白轻链激酶(MLCK)及紧密连接蛋白(JAM-A、ZO-1、claudin-1)的mRNA表达情况.结果 与对照组相比,模型组大鼠十二指肠MLCK mRNA表达量明显升高,而紧密连接蛋白mRNA表达量显著降低;而提前予CRHR1拮抗剂腹腔注射,可明显下调应激造模大鼠十二指肠MLCK mRNA表达量,同时改善十二指肠紧密连接蛋白mRNA表达情况.结论 夹尾应激的FD大鼠十二指肠紧密连接蛋白mRNA表达下调,而CRH在其中可能起到重要致病作用,为中医情志因素对脾胃功能的影响提供了一定的实验依据.     

健脾益气中药对慢性应激大鼠HPA轴作用的实验研究

目的：观察健脾益气之中药复方四君子汤对慢性应激大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴（HPA轴）的影响。方法：设正常组、模型1组、模型2组、四君子汤组，除正常组外其余各组大鼠用电刺激法制备慢性应激动物模型，观察行为学指标的变化．测定血浆皮质酮（CORT）、下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）和血浆促肾上腺皮质激素（ACTH）含量，同时检测大鼠下丘脑CRHmRNA和垂体ACTHmRNA含量变化。结果：四君子汤能改善大鼠行为表现，降低大鼠血浆ACTH、下丘脑CRH、血浆CORT的含量．控制下丘脑CRHmRNA和垂体ACTHmRNA的过量表达。结论：健脾益气中药复方可有效调整慢性应激大鼠HPA轴的异常。     

肠吉泰对腹泻型肠易激综合征大鼠CRH、SPmRNA表达的影响

目的观察肠吉泰对腹泻型肠易激综合征肝郁脾虚证模型大鼠促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）、P物质（SP）mRNA表达的影响,探讨其治疗机制。方法将60只雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,肠吉泰低、中、高剂量组和匹维溴铵（得舒特）组。除正常组外,各组大鼠予束缚应激加大黄泻下及结直肠扩张法复制模型,并予以相应药物治疗。大鼠处死后剖取小肠,测量小肠墨汁推进率;取下丘脑及结肠标本用RT-PCR半定量检测CRH mRNA及SP mRNA的表达。结果与正常组比较,各组造模大鼠的下丘脑CRH、SPmRNA表达均升高,差异有统计学意义（P〈0.05）;与模型组比较,除肠吉泰低剂量组大鼠下丘脑的SP mRNA表达差异无统计学意义外（P〉0.05）,其余各治疗组大鼠CRH、SPmRNA表达下调（P〈0.05,P〈0.01）;与得舒特组比较,肠吉泰高、中剂量组大鼠结肠SP mRNA降低,差异有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）。与模型组比较,各治疗组大鼠的大便频次显著降低、大便性状明显改善（P〈0.05）,小肠推进率降低（P〈0.05）,且肠吉泰与得舒特组大鼠大便频次、大便性状及小肠墨汁推进率差异无统计学意义（P〉0.05）。结论肠吉泰对于腹泻型肠易激综合征肝郁脾虚证模型大鼠具有改善应激状态、调节肠动力、解除内脏高敏感性等治疗作用。推测肠吉泰通过调节大鼠下丘脑CRH、SP mRNA表达及结肠SP mRNA表达,改善腹泻型肠易激综合征肝郁脾虚证模型大鼠对束缚应激反应导致肠动力的紊乱,改善内脏痛觉敏感状态。     

肝郁脾虚证模型大鼠HPA轴中枢相关受体的表达及疏肝健脾方药的干预作用

目的观察肝郁脾虚证模型大鼠下丘脑-垂体-肾上腺皮质激素（HPA）轴中枢相关受体的变化及疏肝健脾方药的干预作用。方法将SD大鼠随机分为正常对照组、肝郁脾虚模型组、疏肝组（柴胡疏肝散组）、健脾组（四君子汤组）、疏肝健脾组（柴疏四君子汤组），后4组大鼠采用慢性束缚＋饮食失节＋游泳疲劳的方法，连续造模4周，正常组不予处理。于造模第15天，中药各组分别给予柴胡疏肝散4．2g／kg、四君子汤4．53g／kg、柴疏四君汤4．27g／kg灌胃，连续14d。检测大鼠下丘脑促肾上腺皮质激素受体（ACTHR）、糖皮质激素受体（GR）和垂体下丘脑促皮质素释放激素受体（CRHR）、GRmRNA表达水平。结果与正常组相比，模型组大鼠下丘脑ACTHR、GRmRNA及垂体CRHR、GRmRNA表达水平明显降低（P〈0．05，P〈0．01）；与模型组比较，柴疏四君汤组下丘脑ACTHR、GRmRNA及垂体CRHR、GRmRNA表达水平均呈显著性增加（P〈0．05，P〈0．01），柴胡疏肝散组大鼠下丘脑GR和垂体CRHR、GRmRNA的表达水平均见显著性增加（P〈0．05），四君子汤组大鼠垂体CRHR、GRmRNA的表达水平显著性增加（P〈0．05）。与四君子汤和柴胡疏肝散比较，柴疏四君汤组大鼠下丘脑ACTHR、GRmRNA的表达水平显著性增加（P〈0．05），其中柴胡疏肝散组较四君子汤比垂体GRmRNA的表达水平增加更显著（P〈0．05）。结论肝郁脾虚证模型大鼠HPA轴中的中枢相关受体表达呈全面下调，中药三方对模型大鼠下丘脑ACTHR、GRmRNA及垂体CRHR、GRmRNA的表达均有不同程度或选择l生上调作用，其中柴疏四君汤的作用最优，其次是柴胡疏肝散，四君子汤则作用较差。     

左归丸和右归丸对老年大鼠杏仁核促肾上腺皮质激素释放激素表达与HPA轴活性作用的实验研究

目的 观察老年大鼠杏仁核促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)表达和血清皮质酮(CORT)含量变化和左归丸、右归丸对其的影响,探索老年肾虚大鼠CRH多肽表达与下丘脑-垂体-肾上腺皮质(HPA)轴活性的相关性及左归丸和右归丸的作用.方法 以自然衰老SD雄性大鼠(24月龄)为肾虚衰老模型,大鼠随机分为老年对照组、左归丸组和右归丸组,每组35只,另设青年对照组(5月龄)35只,共4组.老年对照组大鼠常规喂养至24月龄.左、右归丸组大鼠自20月龄始,均按相当于左、右归丸生药7.5g·kg-1(成人临床用量的15倍)自由饮用稀释药液,每周停药2 d,连续4个月;采用Western Blot检测大鼠杏仁核CRH多肽表达, 放免检测血清CORT含量.结果 与青年对照组比较,老年对照组大鼠杏仁核CRH多肽表达及血清CORT含量显著增高(P＜0.05),与老年对照组相比,左归丸组及右归丸组大鼠杏仁核CRH多肽表达及血清CORT含量显著下降(P＜0.05).结论 左归丸、右归丸通过调节杏仁核CRH多肽表达进而调节衰老大鼠HPA轴功能.