肝积方含药血清对肝癌HePG2细胞增殖的影响

目的观察中药复方肝积方含药血清对肝癌HePG2细胞增殖影响。方法采用肝积方制备含药血清，应用血清药理学方法，选择不同浓度的含药兔血清与肝癌HePG2细胞培养72小时，通过MTT法及流式细胞仪检测细胞的增殖抑制率和细胞凋亡。结果肝癌HePG2细胞经与不同浓度的含药兔血清培养72h后，细胞增殖受到抑制。并且呈剂量依赖性．不同浓度含药血清与空白兔血清作用肝癌HePG2细胞后，各组细胞凋亡率差异无统计学意义（P〉0．05），而在培养72h后，不同浓度含药血清组与相应对照血清组死亡率比较，均有显著差异，具有统计学意义（P〈0．05）。且随着含药血清浓度的增加，其肝癌HePG2细胞死亡率也显著升高。结论肝积方能够抑制肝癌HePG2细胞增殖，肝积方在体内主要是通过细胞毒这一途径对肿瘤进行杀灭作用，而不是主要通过诱导肿瘤细胞凋亡作用实现抑制肿瘤增殖。     

绿谷灵芝抑制低密度脂蛋白的氧化及单核细胞对内皮细胞的粘附作用

目的：采用血清药理学方法研究绿谷灵芝对代密度脂蛋白（LDL）氧化作用的影响，以及对氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL)和晚期糖基化终末产物（AGE）诱导的单核细胞内皮细胞粘附作用的影响。方法：通过检测培养上清中硫代巴比妥酸反应物质（TBARS）的生成表示含药血清对LDL的氧化作用，用白细胞髓过氧化物酶法测定单核细胞对内皮细胞的粘附作用。结果：0．12g/kg绿谷灵芝一次给药组0．5h、1h、2h、3h，两次给药0．5h、1h取血分离得到的血清对LDL氧化作用无明显影响，两次给药2h、3h以及0．12g/kg、0.24g/kg、0.72g/kg绿谷灵芝连续给药10天后，取血分离得到的血清均可降低LDL的氧化作用（P＜0．05）；0．24g/kg、0．72g/kg绿谷灵芝连续给药10天后，取血分离得到的血清均可抑制由ox-LDL和AGE诱导的单核细胞对内皮细胞的粘附作用（P＜0．05）。结论：绿谷灵芝含药血清能显著降低LDL的氧化作用，减轻由ox-LDL和AGD诱导的单核细胞对内皮细胞的粘附作用。     

红曲对体外培养成骨细胞增殖、分化及矿化功能的影响1

目的：研究中药红曲对体外培养成骨细胞增殖、分化及矿化功能的影响。方法：取SD大鼠48只，随机将大鼠分为A组（空白组）、B组（倍美力组）、C组（普拉固组）、D、E、F组（红曲高、中、低剂量组）六组，按10ml／kg分别予以生理盐水、倍美力水溶液（6.25μg／ml）、普拉固水溶液（0．2mg／m1）及红曲水提液（1．25g／ml、0．625g／ml、0．125g／ml）灌胃。灌骨10天后，制备含药血清；将从乳鼠颅骨取材的成骨细胞培养于含药血清培养液中，然后应用MTT法、对硝基苯磷酸盐法及茜素红染色方法观察体外培养成骨细胞、碱性磷酸酶及矿化结节的变化。结果：经过10天红曲水提液灌胃后采血制备的含药血清明显增加了成骨细胞数量（P〈0．01或P〈0．05）、碱性磷酸酶的表达水平及矿化结节的形成，作用随红曲剂量的增加而增加。结论：成功地运用血清药理学的方法，模拟了体内的药理环境；证实了红曲含药血清可以呈剂量依赖性地促进成骨细胞增殖。     

中药芪红合剂含药血清对人外周血内皮祖细胞增殖的影响

目的观察中药芪红合剂含药血清对体外培养的人外周血内皮祖细胞（EPCs）增殖的影响。方法将12只雄性Wistar大鼠随机分为中药芪红合剂组（低剂量组、中剂量组、高剂量组）和对照组，制备含药血清和空白血清。采用密度梯度离心法分离获得人外周血单个核细胞，经激光共聚焦显微镜、流式细胞仪鉴定为EPCs。加入各实验血清组培养液培养EPCs，分别作用不同时间（24h、48h、72h）后，倒置相差显微镜下观察EPCs生长情况，噻唑蓝比色试验（MTT法）测定EPCs的吸光度值。结果与对照组比较，中药芪红合剂合药血清低、中、高剂量组EPCs增殖明显（P〈0．05），且呈一定的量效、时效关系。在同一作用时间，低剂量芪红合剂含药血清干预后EPCs的增殖明显（P〈0．05）。在同一剂量组中，芪红合剂含药血清干预后EPCs的增殖随时间推移逐渐增强，于72h达到高峰（P〈0．05）。结论中药芪红合剂含药血清对体外培养的人外周血EPCs的增殖具有一定的促进作用，可能是其防治血管内皮损伤及内皮功能障碍相关性疾病的作用机制之一。     

六味地黄方含药血清对酪氨酸酶活性的影响

目的：观察六味地黄方含药血清对酪氨酸酶活性的影响。方法：制备含药血清，采用多巴色素法测定不同浓度不同时间含药血清对酪氨酸酶活性的影响。结果：低浓度的含药血清（10％、20％）对酪氨酸酶的活性呈现促进作用，且随时间变化而逐步增强（P〈0．05），其中以含药血清浓度为20％，测量时间在6min时，测试组对酪氨酸酶的激活率最高（P〈0．01）；而当高浓度（40％、80％）时酪氨酸酶激活率呈现先抑制后促进的双向调节作用（P〈0．05）；当含药血清浓度为80％，测量时间在3min时，测试组对酪氨酸酶的抑制率最高（P〈0．01）。结论：不同浓度六味地黄方含药血清对酪氨酸酶活性呈现双向调节作用。     

扶正合剂含药血清对肺癌细胞生长及耐药基因表达的影响

目的：探讨扶正合剂对肺癌细胞生长及耐药基因表达的作用。方法：选择人肺腺癌细胞株A549／DDP为模型，采用血清药理学及MTT、免疫组化及流式细胞法，进行肺癌细胞生长率、凋亡率及耐药基因LRP的表达。结果：扶正合剂荷瘤动物含药血清能够显著提高DDP抑制肺癌细胞生长的作用，促进肿瘤细胞的凋亡，与0％含药血清比较，差别有统计学意义（P〈0．05）；与0％含药血清比较，其对肺癌细胞A549／DDP肺耐药蛋白LPR表达有显著的抑制作用（P〈0．01），而正常兔血清对LRP的表达差别无统计学意义（P〉0．05）。结论：扶正合剂药物血清有抑制肺癌细胞生长，促进肺癌细胞凋亡，抑制肺癌细胞耐药基因表达的作用，正常动物含药血清无此作用，二者有显著性差异。     

二冬汤含药血清对肺癌细胞A549的作用研究

目的：研究二冬汤含药血清对肺癌细胞A549的抑制作用、最佳给药方案及诱导细胞凋亡。方法：采用MTT法,观察不同给药天数、不同剂量、不同采血时间、不同培养时间的二冬汤血清对肺癌细胞A549的抑制效应,及应用FITC／PI流式细胞术检测最佳给药方案含药血清对A549细胞的凋亡率。结果：二冬汤含药血清对人肺癌细胞A549具有抑制作用,中剂量组[7．99g／（kg·d）]给药5天、10天,末次给药2h的含药血清与细胞培养48h后的抑制作用最明显,抑制率分别为42．27％和39．67％,与空白血清组比较,差异均有非常显著性意义（P〈0．01）;但从给药天数以及与肺癌细胞培养时间上来看,与空白血清组比较,差异无显著性意义（P〉0．05）;FITC／PI双染法显示二冬汤含药血清对A549的凋亡总计为（28．45±0．68）％,与空白血清组（6．75±0．46）％比较,差异有非常显著性意义护〈0．01）。结论：二冬汤最佳给药方案为给药5天,末次给药2h后取血,此时制备的含药血清能诱导细胞发生凋亡。     

血府逐瘀胶囊、血塞通胶囊对溶血磷脂酸诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响

目的观察血府逐瘀胶囊及血塞通胶囊含药血清对溶血磷脂酸（LPA）诱导的血管平滑肌细胞（VSMC）增殖效应的影响。方法采用贴块法培养大鼠主动脉VSMC并分为7组：空白血清组，血府逐瘀胶囊含药血清组，血塞通胶囊含药血清组，3组分别＋LPA组，卡托普利含药血清＋LPA组。以四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法观察不同含药血清对细胞增殖的影响；采用流式细胞仪分析细胞周期和DNA含量。结果空白血清＋LPA组、血府逐瘀胶囊含药血清组较空白血清组0D值升高（P〈0．05），S期指数升高（P〈0．01）。血府逐瘀胶囊含药血清＋LPA组、血塞通胶囊含药血清＋LPA组较卡托普利含药血清＋LPA组0D值降低（P〉0．05，P〈0．01）；S期指数升高（P〈0．01，P〉0．05）。结论LPA、血府逐瘀胶囊对体外培养的VSMC有促增殖作用，血塞通胶囊无促增殖作用。血府逐瘀胶囊、血塞通胶囊对LPA诱导的VSMC增殖有拮抗作用，血塞通胶囊作用更强。其作用机制部分与抑制DNA合成、阻止细胞进入S期有关。     

调坤汤性激素样作用的实验研究

目的：探讨调坤汤对雌二醇（E2）、孕酮（P）等性激素调节的机理。方法：用同龄SD雌性大白鼠30只，随机分为空白对照组、高剂量给药组、低剂量给药组，每组10只，空白对照组不用任何药物，高剂量给药组每天给调坤汤煎液3ml含原生药9g，低剂量给药组每天给调坤汤煎液稀释液3ml含原生药6g，共给药10天（约2个生理周期），用药结束后采血样测性激素。结果：经检验，高剂量给药组、低剂量给药组的E2和P与空白对照组比较差异有显著性（P〈0．05、P〈0．01）。结论：调坤汤有升高血清E2和P的作用。     

清毒栓血清药对宫颈癌SiHa细胞凋亡及周期的影响

目的通过研究中药含药血清对宫颈癌SiHa细胞凋亡及细胞周期的影响，探讨中药抑制宫颈癌SiHa细胞生长可能的作用机制。方法以不同浓度含药血清培养液作用于SiHa细胞，并设立空白血清及含中、西药阳性药血清为对照，用流式细胞分析技术进行细胞周期及细胞凋亡检测。结果口服各组含药血清组S期所占比例较空白血清对照组减少，其差异有显著性（P〈0．05），尤以西药阳性组明显（P〈0．01），清毒栓组次之，中药阳性组再次之。而GO-G1期所占比例较空白血清对照组增加，其差异有显著性（P〈0．01）。结论清毒栓对人宫颈癌SiHa细胞的作用可能是通过阻断细胞从G0-G1期向S期分化及促进其凋亡而抑制细胞生长。