基于网络药理学的黄芪治疗肾病综合征的机制研究

目的运用网络药理学的方法探讨黄芪治疗肾病综合征(NS)的分子作用机制。方法通过TCMSP数据库和文献挖掘获取黄芪主要活性成分,利用Pharm Mapper服务器、GeneCards和CoolGeN数据库预测和筛选黄芪活性成分的作用靶点。采用String数据库和Cytoscape软件绘制蛋白相互作用网络,通过Systems Dock Web Site对成分与靶点进行分子对接验证。借助DAVID数据库对靶点进行GO分析和KEGG通路分析,采用Cytoscape软件构建成分-靶点-通路-疾病网络。结果筛选得到黄芪25个活性成分,涉及47个作用靶点。网络分析结果表明,靶点主要涉及氧化应激、足细胞凋亡和脂质代谢等生物过程,通过调节Ras、Rap1、MAPK、PI3K-Akt和AGE-RAGE等信号通路来发挥治疗NS的作用。结论黄芪中黄酮类、皂苷类等活性成分可能是其治疗NS的物质基础,其作用机制涉及抗细胞凋亡、抗氧化应激和调节脂质代谢等。     

膜荚黄芪根中的抗氧化成分

对膜荚黄芪(Astragalus membranaceus)根甲醇提取物中的抗氧化活性成分进行了分离和鉴定。首先将膜荚黄芪根用甲醇提取,而后再用乙醚提取,乙醚组分经硅胶柱层析分离(以苯-乙酸乙酯作为洗脱液)。所得4种成分用亚麻酸空气氧化法检测其抗氧化活性,所采用的指标为空气氧化(恒温60℃,通空气500ml/min,共2h)后亚麻酸的过氧化物值(POV)、硫代巴比妥酸值(TBAV)。结果     

基于网络药理学及分子对接技术探讨黄芪-丹参治疗缺血性脑卒中的作用机制

目的 采用网络药理学和分子对接技术探究黄芪-丹参治疗缺血性脑卒中(IS)的作用机制。方法 通过中医药整合药理学研究平台(TCMIP)V 2.0获取黄芪与丹参的活性成分及靶点,利用GEO数据库检索IS的靶点信息,构建蛋白互作网络(PPI)、成分-靶点网络,筛选黄芪-丹参治疗IS的关键成分和核心靶点,并利用Autodock 4.2软件进行分子对接技术验证,GO和KEGG富集分析预测黄芪-丹参治疗IS的分子机制。结果 共筛选出黄芪-丹参治疗IS的7个核心靶点和6个关键成分。GO生物过程涉及脂质定位、蛋白质丝氨酸/苏氨酸激酶活性调节、脂质转运、急性炎症反应正向调控、脂肪酸转运等,KEGG通路富集主要集中在抗叶酸剂、一碳单位池、脂肪细胞因子信号通路、PPAR信号通路等。分子对接结果提示黄芪-丹参中关键成分与核心靶点存在结合位点。结论 黄芪-丹参中多种活性成分通过调控靶点蛋白,调节叶酸代谢、脂肪代谢、炎症反应等信号通路,发挥了对IS的治疗作用。     

黄芪中免疫活性成分的不同提取方式比较

目的:优选黄芪中免疫活性成分的提取工艺。方法:以黄芪甲苷和黄芪总多糖提取量、干浸膏得率为综合评价指标,通过单因素试验考察水提法、1%NaOH温浸法、1%CaO煎煮法对黄芪中免疫活性成分提取效率的影响。采用HPLC测定黄芪甲苷含量,流动相乙腈-水(30∶70),空气泵压力0.4 MPa,ELSD漂移管温度105℃,载气流速2.7 L·min-1;利用UV测定黄芪总多糖含量,检测波长489 nm。结果:3种提取方式的黄芪甲苷提取量分别为0.826,1.016,0.842 mg·g-1,黄芪总多糖提取量分别为14.49,5.82,17.04 mg·g-1,干浸膏得率无显著性差异。结论:采用水提法能达到较好的提取效果,同时生产成本较低,适用于黄芪中免疫活性成分的工业大生产。     

基于网络药理学和分子对接分析黄芪治疗溃疡性结肠炎的作用机制

目的通过网络药理学方法联合GEO 数据库预测黄芪治疗溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）的核心 活性成分及靶点,并通过分子对接初步验证。方法利用中药系统药理分析平台（TCMSP）提取黄芪的活性成分 及对应靶点,借助Uniprot 数据库对靶点进行规范化,通过GEO 数据库提取溃疡性结肠炎的差异表达基因,并 利用R 语言筛选药物与疾病的交集基因,分别通过DAVID 数据库、STRING 数据库对交集基因进行富集分析 和蛋白互作分析;通过Cytoscape 软件构建黄芪“活性成分-药物靶点”网络、黄芪治疗溃疡性结肠炎“活性 成分-疾病靶点”网络及蛋白互作网络筛选出核心成分及靶点,借助Auto dock Vina 软件进行分子对接验证, PyMol 软件绘制对接结果图。结果共获得黄芪16 个活性成分,对应189 个作用靶点;GEO 数据库提取获得 溃疡性结肠炎差异表达基因1 355 个;药物与疾病交集基因44 个;富集分析显示多与炎症相关;筛选得到核 心活性成分异鼠李素（Isorhamnetin）和毛蕊异黄酮（Calycosin）,核心靶点前列腺素G/H 合成酶2（PTGS2）;分子 对接结果表明其核心活性成分与核心靶点之间均有较强的结合活性。结论黄芪中的异鼠李素、毛蕊异黄酮等 主要活性成分可能通过参与炎症相关信号通路及生物功能作用于PTGS2 等疾病靶点,从而发挥治疗溃疡性结 肠炎的效用。     

黄芪类品种的药理研究

本文报告了六种黄芪类品种(膜荚黄芪、蒙古黄芪、多序岩黄芪、多花黄芪、梭果黄芪、东俄洛黄芪)的药理活性,在相同的实验条件下进行了比较。实验结果表明,六种黄芪类品种的药理活性,只有膜荚黄芪和蒙古黄芪在镇痛、免疫功能、利尿、降压、促进微循环、抗过氧化脂质、增加血浆中环磷酸腺苷上有显著的药理作用。提示膜荚黄芪和蒙古黄芪是六种黄芪类品种中质量最佳的。     

阿克苏黄芪抗脂质过氧化作用研究

新疆黄芪(Arstragalus aksuensis Bge)为豆科紫云英植物,维吾尔名为Aksu K tirasi,主要分布于新疆维吾尔自治区境内的伊犁、天山等地,是新疆地方常用药材.具有补气固表、托疮生肌和强心利尿等作用,可用于治疗体虚自汗、久泻等病症[1].为考察阿克苏黄芪的药用价值,我们曾对阿克苏黄芪与蒙古黄芪的成分进行了比较[2,3],为进一步研究其活性,我们对阿克苏黄芪进行初步分离,得到醇提取物、水提取物及阿克苏黄芪总多糖,采用体外诱发脂质过氧化的方法观察不同组分抗脂质过氧化的作用,采用化学模拟体系研究阿克苏黄芪多糖清除活性氧(·OH,O-2)的作用.并同时与蒙古黄芪品种进行了比较,从而为阿克苏黄芪的综合利用提供理论依据.     

太白花活性成分的筛选与药理作用相关性研究

 目的筛选太白花中对主动脉血管有舒张作用、对心肌收缩力有抑制作用的有效成分。方法采用柱色谱法分离,反相高效液相色谱法与细胞膜色谱法联用,并结合离体药理实验确定太白花中的有效成分。结果太白花乙醚提取部位中TBH2 2和TBH2 6含有对血管细胞膜及膜受体有作用的活性成分;太白花石油醚提取部位中所含成分TBHG8是对心肌细胞膜及膜受体有作用的活性成分;太白花中含量较高的松萝酸不是对血管以及心肌细胞膜及膜受体有作用的活性成分。结论太白花中含有对主动脉血管有舒张作用、对心肌收缩力有抑制作用的有效成分；细胞膜色谱法的筛选结果与其药理作用有显著的相性。     

黄芪的药理新用

黄芪为中医传统的重要益气药，现代药理研究分析，黄芪的化学成份主要含有皂苷类、黄酮类、多糖类以及氨基酸类等。黄芪中不同的化学成份具有不同的药理活性。研究证实，黄芪甲苷是心脏正性肌力作用的主要有效成份，也是降压有效成份之一。黄芪总黄酮具有清除超氧阴离子自由基(O2^-)或H202作用，从而抑制膜脂质过氧化调节机体免疫，     

基于网络药理学研究黄芪-白术治疗新冠肺炎的作用机制

目的采用网络药理学的方法探讨黄芪-白术治疗新型冠状病毒肺炎(新冠肺炎)的作用机制。方法利用TCMSP数据库对黄芪-白术活性成分和作用靶点进行查找与筛选,获得黄芪-白术的有效活性成分和作用靶点,用Cytoscape 3.7.2软件绘制黄芪-白术的有效活性成分-作用靶点网络;利用GeneCards数据库获取新冠肺炎作用靶点,利用Venny 2.1.0在线工具,获得黄芪-白术与新冠肺炎共同作用靶点(即是黄芪-白术治疗新冠肺炎的作用靶点);利用String数据库构建和分析共同作用靶点互作网络;最后利用R软件对共同作用靶点进行GO和KEGG富集分析。结果通过对黄芪-白术活性成分、作用靶点查找与筛选,获得黄芪-白术有槲皮素、山奈酚、蛇床子素、毛蕊异黄酮等19个有效活性成分,作用靶点189个,并绘制出黄芪-白术的有效活性成分-作用靶点网络图;用GeneCards数据库获取新冠肺炎作用靶点259个,经过Venny 2.1.0在线工具分析,获取41个黄芪-白术与新冠肺炎共同作用靶点;GO和KEGG富集分析提示:黄芪-白术参与细胞因子受体结合、细胞因子活性、受体配体活性、磷酸酶结合等生物学过程,可能通过调控IL-17、P53、HIF-1、B细胞、T细胞等信号通路而起到治疗新冠肺炎的作用。结论黄芪-白术主要是通过抗炎、抗氧化及调节免疫而达到治疗新冠肺炎目的。     

宁夏枸杞及甜菜碱对H2O2诱发RBC膜脂质过氧化的影响

用H2O2,致大鼠RBC膜发生脂质过氧化,观察加入宁夏枸杞不同组分及甜菜碱后RBC膜的保护作用。结果:各受试物对RBC膜脂质过氧化均有不同程度抑制作用;它们抗氧化效能大小顺序为:枸杞干果>枸杞多糖>枸杞渣>甜菜碱。     

生姜石油醚提取物对四种氧自由基体系抗氧化作用的研究

 目的:研究生姜石油醚提取物对4种氧自由基体来的杭氧化作用。方法:用UV-分光光度法研究提取物杭O₂对红细胞(RBC)的氧化作用;荧光偏振法测定红细胞膜流动性，研究提取物对红细胞膜的保护作用;荧光法研究提取物对·OH的抑制率、清除率和杭脂质过氧化作用。结果:提取物有明显的杭O₂对RBC的氧化作用。对红细胞膜有保护作用，增加膜的流动性。对·0H有很强的清除作用，在C=2.09 g·L^-1时，抑制率和清除率分别为92.41%和97.39%;并能抑制小鼠肝徽拉体的脂质过氧化作用，在C=4.0 g·L^-1时，抑制率为86.81%。结论:生姜石油醚提取物对4种不同氧自由墓有十分显著的抑制和清除作用，是一种高效的杭氧化剂。     

海带褐藻多糖硫酸酯的抗氧化活性研究

目的 研究海带褐藻多糖硫酸醋的抗氧化作用。方法 采用体外实验研究海带褐藻多糖硫酸醢对超氧阴离子、羟自由基、DPPH的清除作用以及对H2O2诱导的红细胞氧化溶血和大鼠肝匀浆脂质过氧化的保护作用。结果 海带褐藻多糖硫酸醋对超氧阴离子具有良好的清除作用，IC50为20．3μg／mL，其对羟自由基的清除作用较弱，对有机自由基DPPH的作用很弱。褐藻多糖硫酸醋能够抑制H2O2诱导的红细胞氧化溶血，对FeSO4-抗坏血酸体系造成的脂质过氧化具有良好的保护作用。结论 海带褐藻多糖硫酸醋具有显著的体外抗氧化活性。     

3,4-二甲氧基-D-甘露醇的制备及其抗氧化活性

 目的合成目标化合物3,4-二甲氧基-D-甘露醇,并研究其体外抗氧化活性。方法以海藻中提取的海洋活性物质D- 甘露醇为原料,经缩合、醚化和脱保护反应,制备目标化合物。利用红外光谱、元素分析、核磁共振氢谱、碳谱和质谱分析对合成的中间体和目标产物的结构进行确证。采用体外实验研究目标化合物3,4-二甲氧基-D-甘露醇酯对超氧阴离子、羟自由基、自由基1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH)、双氧水(H₂O₂)诱导的红细胞氧化溶血以及小鼠肝匀浆脂质过氧化作用的保护作用。结果合成了目标产物并确定了结构,两种方法的总收率分别为43.32％和50.92％。抗氧化结果表明,3,4-二甲氧基-D-甘露醇酯对超氧阴离子、羟自由基、DPPH,H₂O₂诱导的红细胞氧化溶血以及小鼠肝匀浆脂质过氧化作用均有不同程度的抑制作用, 对超氧阴离子有良好的清除作用,IC₅₀为1.4 g·L^-1。同时发现对D-甘露醇3,4位的羟基进行甲醚化后,所得的甘露醇衍生物对自由基DPPH的清除作用和对大鼠肝匀浆脂质过氧化的抑制作用都有明显的提高,对羟自由基的清除作用和对H₂O₂诱导的小鼠红细胞氧化溶血的作用基本没有变化,而对超氧阴离子自由基的清除作用则有显著的降低。结论目标化合物3,4-二甲氧基-D-甘露醇酯具有显著的体外抗氧化活性,但与D-甘露醇相比,只是对自由基DPPH的清除作用和对大鼠肝匀浆脂质过氧化的抑制作用有明显提高。     

叶下珠抗肝细胞损伤作用机制

叶下珠能明显降低CCl4引起的小鼠血清ALT的升高,抑制肝脏MDA的生成。叶下珠体外与大鼠肝细胞共同孵育,能抑制CCl4所致肝细胞膜流动性降低,降低〔Ca²⁺〕i浓度。结果提示,叶下珠保护肝脏损伤作用可能与其抗指质过氧化和膜保护作用有关。     

Garlic compounds protect vascular endothelial cells from hydrogen peroxide-induced oxidant injury

Oxygen radical injury and lipid peroxidation have been suggested as major causes of cancer, atherosclerosis and the aging process. In this study, we determined in vitro the effect of aged garlic extract (AGE) and one of its components, S-allyl cysteine (SAC), on hydrogen peroxide (H₂O₂)-induced oxidant injury using bovine pulmonary artery endothelial cells (PAEC). After overnight preincubation with AGE or SAC, PAEC monolayers were exposed to H₂O₂ for 3 h. Cell viability, lactate dehydrogenase (LDH) release and lipid peroxidation were measured to assess oxidant injury. Pretreatment with AGE at 2–4 mg/mL or SAC at 4 mg/mL significantly reversed the loss of cell viability induced by 50 and 100 μm of H₂O₂. AGE or SAC also exhibited a dose-dependent inhibition of both LDH release and lipid peroxidation induced by 50 μM of H₂O₂. The results show that both AGE and SAC can protect vascular endothelial cells from oxidant injury. The data thus suggest that these compounds may be useful for retardation of the aging process and for prevention of cancer and atherosclerosis.     

漏芦醇提取物的体外抗氧化作用

目的:研究祁州漏芦醇提取物的抗氧化活性。方法:以高铁还原法检测祁州漏芦醇提取物对肝组织总抗氧化能力的影响,以硫代巴比妥酸(TBA)法检测对肝组织的抗脂质过氧化作用。结果:漏芦醇提取物浓度依赖性地增高肝匀浆总抗氧化能力,同时浓度依赖性地抑制肝组织脂质过氧化作用,其对H2O2,.OH和Fe2+诱导的肝匀浆脂质过氧化作用的半数抑制浓度(IC50)分别为56.4,144.2,355.6 mg·L-1;对H2O2和Fe2诱导的肝线粒体脂质过氧化作用的IC50分别为781,36.3 mg·L-1。结论:漏芦醇提取物具有体外抗氧化作用。     

黄芪总黄酮对羟自由基所致哺乳动物细胞损伤的防护作用

黄芪总黄酮对羟自由基所致V79细胞的多种损伤皆有不同程度的防护作用。可降低细胞脂质过氧化物的生成,升高细胞SOD活性,维持细胞正常代谢。     

槲皮素对H2O2致内皮细胞损伤的保护作用

目的:探讨槲皮素对血管内皮细胞损伤的保护作用及机制.方法:采用体外培养的人脐静脉内皮细胞株ECV304,观察内皮细胞加入槲皮素8,4,2 mg·L-1培养24 h后,再加入H2O2培养18h后,造成血管内皮细胞损伤模型.用流式细胞仪测定内皮细胞死亡率,用ELISA法检测内皮细胞培养液血栓调节蛋白(TM)的含量;荧光分光光度法测定内皮细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的活性.结果:与H2O2损伤后的模型组相比,槲皮素可以减低细胞死亡率,[模型组细胞死亡率为(28.36±0.10)％,槲皮素高、中、低剂量分别为(8.34±0.01)％,(16.58±0.04)％,(10.12±0.02)％],可使培养液中TM蛋白含量减少,[模型组为(58.5±18.8)μg·L-1,槲皮素高、中、低剂量为(32.7±9.7),(27.8±1.9),(32.1±8.6) μg·L-1]和LDH活性减少[模型组为(1 931.9±159.5) U·L-1,槲皮素高、中、低剂量为(1.092±126.2),(1 159.6±274.2),(1 223.5±120.5)U·L-1].结论:槲皮素能明显保护过氧化氢对内皮细胞的损伤,其保护作用与抗脂质过氧化、保护细胞的完整性有关.     

草苁蓉抗脂质过氧化活性研究

目的: 研究草苁蓉提取物(BRE)的抗脂质过氧化活性。 方法: 用分光光度法测定肝匀浆和肝线粒体的总抗氧化能力、抗活性氧能力以及H₂O₂和Fe²⁺+H₂O₂诱导的肝匀浆和肝线粒体丙二醛(MDA)含量。 结果: BRE可明显提高肝匀浆和肝线粒体总抗氧化能力和活性氧清除能力,明显抑制肝匀浆和肝线粒体脂质过氧化作用。 结论: BRE具有抗脂质过氧化活性。