小柴胡汤对HL-60白血病细胞株体外分化的诱导作用研究

目的 观察小柴胡汤对HL-60白血病细胞的体外分化诱导作用,并初步探讨其作用机制.方法 通过药物作用后观察细胞形态学的变化,细胞吞噬功能及硝基蓝四氮唑(NBT)还原能力的改变;流式测定细胞周期改变和免疫组化检测抑癌基因P53的表达变化初步揭示其作用机制.结果 小柴胡汤能使HL-60细胞显著向成熟粒系细胞分化而且吞噬功能、NBT还原能力出现增强的趋势,以中、高剂量组最为显著(P<0.05);并使 HL-60的细胞周期阻滞于G0/G1期,S期细胞数减少,抑癌基因P53表达明显升高(P<0.05).结论 小柴胡汤可诱导HL-60细胞向粒系成熟分化;其作用机制可能与阻滞细胞于G0/G1期,并且上调抑癌基因P53的表达有关.     

苦参碱对HL-60细胞增殖与分化影响的实验研究

目的 观察苦参碱对HL-60细胞增殖和分化的影响作用.方法 以HL-60细胞为实验对象, 采用体外培养技术, 通过MTT法测细胞活力、细胞周期分析、细胞凋亡检测、硝基四氮唑蓝(NBT)还原试验、细胞表面分化抗原检测等方法来观察不同浓度苦参碱对HL-60细胞的作用.结果 浓度为 12.5～ 50 μg/ml的苦参碱能明显抑制HL-60细胞的增殖,使细胞周期发生改变,G0/ G1 期细胞增多,S期细胞减少,凋亡细胞明显增多,对NBT的还原能力增强,细胞表面分化抗原CD11b和CD15表达增加.结论 苦参碱对白血病细胞具有一定的抑制增殖、诱导凋亡和诱导分化作用,对白血病的治疗提供有力的实验依据.     

珠子参对人早幼粒白血病HL-60细胞增殖的抑制和诱导分化作用的研究

目的:观察珠子参对人早幼粒白血病HL-60细胞增殖的抑制和诱导分化作用.方法:采用HL-60细胞株体外培养,MTT法观察各药物及含药血清不同作用时间的直接细胞毒作用;细胞涂片观察细胞形态学改变;试剂盒检测酸性磷酸酶(ACP)含量.结果:珠子参血清和珠子参煎液均有明显的细胞毒作用,72小时时抑制率分别为31.27%、34.23%,与5-氟脲嘧啶(5-FU)联合应用后,达73.32%、76.28%;作用72小时后ACP活性高于对照组(P<0.01).细胞形态学观察以中幼粒及晚幼粒为主,分别占36.8%、75.8%,向成熟细胞方向分化.结论:珠子参在体外对HL-60细胞株有细胞毒作用,且能提高5-FU的敏感性,有诱导HL-60细胞分化的功能.     

SPGL诱导HL-60细胞分化作用的研究

目的:研究光叶海桐总皂苷(SPGL)诱导HL-60细胞分化的作用。方法:采用1×10-5~5×10-4mg/ml浓度SPGL处理第3 d的HL-60细胞进行Wrigh-Giemsa染色、NBT还原能力及细胞表面抗原的检测。结果:在药物作用下,HL-60细胞形态学出现分化特征;NBT还原能力增强,且其阳性细胞数与SPGL的浓度有明显的量-效关系;CD11b与CD14表面抗原的表达明显升高。结论:SPGL有诱导HL-60细胞分化的作用,并诱导其向粒细胞系和单核系细胞分化。     

Rabdosin B对急性早幼粒白血病细胞HL-60分化的诱导作用

目的研究螺环内酯型对映-贝壳杉烷型二萜rabdosin B(RB)诱导HL-60向成熟粒细胞分化的特征及机制。方法采用台盼蓝染色、吉姆萨染色、硝基四氮唑蓝(NBT)还原力测定及流式细胞术检测RB对HL-60细胞增殖、细胞周期、NBT还原力、细胞吞噬及细胞表面抗原CD11b表达的影响。结果 RB在1.0、3.0、5.0μmol/L下抑制HL-60细胞增殖,引起HL-60细胞G0/G1期阻滞,增加HL-60细胞肾形核和分叶核细胞比率,并伴随细胞NBT还原力和吞噬能力显著增强以及CD11b阳性细胞率明显上升。进一步检测显示,活性氧(ROS)清除剂N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC,300μmol/L)及NADPH氧化酶抑制剂夹竹桃麻素(APO,100μmol/L)和二联苯碘锚(DPI,0.1μmol/L)不仅可显著抑制RB诱导的细胞内ROS升高,并且可显著抑制RB诱导的HL-60细胞分化的各项特征指标的改变。结论 RB可通过上调HL-60细胞NADPH氧化酶活性,升高胞内ROS浓度,诱导HL-60细胞向成熟粒细胞分化。     

力达霉素抑制HL-60细胞增殖和诱导分化作用

 目的 研究力达霉素对人急性髓性白血病细胞(HL-60) 增殖和诱导分化的作用。方法 用不同浓度的力达霉素处理HL-60 细胞，通过MTT法检测力达霉素对细胞的增殖抑制作用；利用瑞氏-姬姆萨染色法观察力达霉素对细胞形态的影响；通过硝基蓝四氮(NBT)还原比色法测定力达霉素对HL-60细胞的诱导分化作用。结果 不同浓度力达霉素处理细胞后，HL-60 细胞的增殖能力明显受到抑制。当力达霉素的作用浓度超过100 μmol·L-1时，抑制率可高达99%，并且抑制作用呈现时间依赖性和剂量依赖性的特点。Wright-Giemsa染色结果显示，力达霉素作用HL-60 细胞后，细胞在形态学方面发生很大变化。同时，力达霉素能够提高细胞的NBT还原能力。1 nmol·L-1和0.1 nmol·L-1浓度的力达霉素可以使HL-60细胞的NBT还原率分别提高到39.2% 和54.5 % ；0.01 nmol·L-1和0.001 nmol·L-1浓度的力达霉素则使阳性细胞的百分率增加到78.6%和89.9% ，与对照组相比，差异具有显著性（P<0.01）。结论 力达霉素具有较强的抑制HL-60细胞增殖的能力，同时，低浓度力达霉素能使HL-60细胞形态发生改变，NBT还原阳性率升高，诱导细胞发生分化，其作用机制有待于进一步深入研究。     

红芪总黄酮对人白血病细胞诱导分化的影响

目的研究红芪总黄酮对人早幼粒白血病HL-60细胞诱导分化的作用及其分子机制。方法HL-60细胞经红芪总黄酮处理后，检测细胞NBT还原能力的改变，用流式细胞仪测定细胞增殖周期及CD11b、C-fos表达。结果红芪总黄酮作用于HL-60细胞后，NBT还原能力增强；CD11b表达升高；细胞被阻滞于G0／G1及G2／M期，S期细胞数相应减少；C-fos基因表达增强。结论红芪总黄酮可诱导HL-60细胞分化成熟，其机制可能与上调C-fos基因表达有关。     

苦参碱诱导白血病细胞株HL-60分化的实验研究

目的 观察苦参碱对HL-60细胞的诱导分化作用。方法 采用体外细胞培养技术,从细胞增殖、形态学变化、NBT还原能力测定、非特异性酯酶染色及细胞表面分化抗原测定等方面观察。结果 苦参碱在12.5μg/ml—50μg/ml浓度范围内能明显抑制HL-60细胞的增殖,细胞向成熟粒系方向分化,NBT还原反应能力增强,α-NAE染色呈阴性,CD_(15)、CD_(11b)阳性率表达上升而CD_(33)阳性率表达降低,CD_(14)阳性率处理前后无变化。结论 苦参碱可能是一种良好的白血病细胞分化诱导剂,具有潜在的抗白血病作用。     

威灵仙总皂苷诱导急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4分化作用的研究

目的研究威灵仙总皂苷对NB4细胞分化的影响。方法取对数生长期的NB4细胞,设置多个浓度梯度的威灵仙总皂苷药物组,观察用药后不同时间点NB4活细胞数,计算生长抑制率;Wright's-Giemsa染色计数法和NBT还原试验测定细胞分化率,透射电镜观察细胞形态学变化;流式细胞术检测CD11b/CD33表达情况。结果与空白对照组比较,威灵仙总皂苷对NB4细胞有明显的生长抑制作用,且具有剂量-效应依赖关系;但具有统计学意义的诱导分化现象不明显。结论威灵仙总皂苷可有效抑制NB4细胞增殖,但对NB4细胞无明显的诱导分化作用。     

雄黄纳米微粒对人白血病细胞株HL-60的诱导分化作用

目的：探讨雄黄（As4S4）纳米微粒对于人急性早幼粒白血病细胞HL-60的抑制增殖和诱导分化作用。 方法：采用MTT法观察低浓度雄黄对HL-60细胞增殖的影响,Wright-Giemsa 染色观察细胞形态,硝基四氮唑蓝（NBT）还原反应和流式细胞术抗原检测等鉴定细胞的分化。结果：细胞经雄黄处理后呈现明显的分化形态。经0.25～1.0 μmol·L^-1 雄黄作用24 h 后,NBT阳性率升高。用0.50 μmol·L^-1雄黄处理48 h,细胞表面分化抗原CD11b表达升高,细胞周期阻滞于G1期。 结论：低浓度雄黄对HL-60细胞具有诱导分化作用。     

水蛭提取物对HL-60细胞增殖与分化的影响

目的：研究水蛭提取物对人白血病HL-60细胞的细胞增殖与分化的影响.方法：用液氮快速冻融法制备水蛭提取物,将0.7～2.8g/L浓度提取物作用HL-60细胞48h,采用MTT法、NBT还原法分别观察提取物对HL-60增殖、分化的影响,并用流式细胞检测CD11b、CD14表面抗原法探讨HL-60细胞分化方向.结果：0.7～2.8g/L浓度范围内的水蛭提取物以剂量依赖性抑制HL-60细胞增殖、诱导其向粒系方向分化.结论：水蛭提取物可抑制HL-60细胞增殖并诱导其向成熟粒系方向分化.     

川芎嗪诱导HL-60细胞株分化与分子机制的研究

目的:研究川芎嗪(TMP)诱导HL-60细胞分化并初步探讨其机制.方法:MTT实验测定细胞增殖变化;硝基四氮唑蓝(N BT)还原实验、瑞氏染色细胞形态学观察和流式细胞仪检测细胞表面CDllb,CD14表达率测定细胞分化状态;流式细胞仪检测细胞周期;RT-PCR,Western blot检测c-myc,p27,CDK2和cyclinEl mRNA和蛋白表达.结果:TMP能明显抑制HL-60细胞增殖,呈剂量和时间依赖性.TMP低质量浓度(200～ 300 mg·L-1)促进HL-60细胞分化;300 mg·L-1 TMP处理HL-60细胞后,细胞被阻滞于G0/G1期,c-myc mRNA和蛋白表达水平逐渐减弱;p27 mRNA和蛋白表达水平显著上升;CDK2,cyclinE1 mRNA水平变化并不显著,但其蛋白表达水平则显著下降,呈时间依赖性.结论:小剂量TMP能诱导HL-60细胞的分化,其机制可能是c-myc表达的下调,p27表达的增加,在蛋白水平抑制与cyclinE-CDK2复合物的结合,使细胞周期停滞于G0/G1期.     

小鼠阳和汤血清对细胞的诱导分化作用

目的观察小鼠阳和汤血清对细胞的诱导分化作用.方法SRB法和乳酸脱氢酶释放法检测B16细胞活性;油红染色法检测3T3-L1前脂肪细胞的分化;NBT还原能力和细胞吞噬功能法检测HL-60细胞的分化;血红蛋白含量法检测K562细胞的分化;黑色素含量法检测B16细胞的分化.结果小鼠阳和汤血清能明显呈剂量依赖性抑制B16细胞生长,但不表现细胞毒作用;阳和汤血清能促进3T3-L1前脂肪细胞在分化液刺激下的油红染色,提高HL-60细胞的NBT还原能力和对辣根过氧化物酶的吞噬功能,增加K562细胞的血红蛋白含量,降低B16细胞的黑色素含量.结论小鼠阳和汤血清对3T3-L1前脂肪细胞、肿瘤细胞均有诱导分化和成熟作用,这可能是其抗肿瘤作用的主要机制.     

威灵仙总皂苷对HL60细胞株体外作用的研究

目的:提取威灵仙总皂苷(TSRC),体外作用于急性早幼粒细胞白血病HL60细胞,研究TSRC对HL60细胞的作用机制。方法:将25～400 mg·L-1的TSRC在体外与HL60细胞共同培养,WST-1法检测TSRC对HL60细胞的增殖抑制作用;采用细胞形态学、透射电镜观察细胞、AnnexinV/PI双染色研究TSRC诱导HL60细胞凋亡作用;采用Wright’s-Giemsa染色细胞形态学观察、硝基蓝四氮唑(NBT)还原试验、细胞免疫表型CD11b检测等方法研究TSRC诱导HL60细胞分化作用。结果:50～400 mg·L-1TSRC在体外对HL60细胞增殖有明显抑制作用,呈现剂量和时间的量效关系;不同浓度TSRC作用24 h后均能显著促进HL60细胞凋亡;但具有统计学意义的诱导分化现象不明显。结论:TSRC在体外可有效抑制HL60细胞增殖,并诱导HL60细胞凋亡,但对HL60细胞无明显的诱导分化作用。     

朱砂七总蒽醌抑制HL-60细胞增殖和诱导凋亡的研究

目的:研究朱砂七总蒽醌(ZSQ)对HL-60细胞增殖抑制和诱导凋亡的作用,探讨其抗肿瘤作用及其机制。方法:应用MTT法检测朱砂七总蒽醌对HL-60细胞的生长抑制作用,Giemsa染色观察细胞形态学改变,DNA ladder和流式细胞术等方法检测朱砂七总蒽醌诱导肿瘤细胞凋亡及对细胞周期的作用。结果:32、3.2、0.32、0.032mg/ml朱砂七总蒽醌作用HL-60细胞72h后,细胞生长抑制率分别为28.69%,36.84%,63.76%和80.57%,抑制作用呈时间及浓度依赖性,朱砂七总蒽醌在48h的IC50约为3.2mg/ml。形态学观察到用药后凋亡细胞典型的形态学特征,伴有多核细胞形成。FCM分析发现朱砂七总蒽醌阻断HL-60细胞生长于细胞周期的G2/M期,诱导凋亡作用呈时间及浓度依赖性,能够诱发肿瘤细胞产生凋亡小体、DNA ladder和细胞凋亡峰。结论:朱砂七总蒽醌能抑制HL-60肿瘤细胞的增殖并诱导凋亡。     

复方维甲酸注射液诱导K562分化及凋亡作用

目的:比较复方维甲酸注射液及其拆方制剂青蒿油注射液、维甲酸注射液在体外对人红白血病细胞株K562的增殖、分化和凋亡的影响。方法:用MTT法了解三种注射液对人红白血病细胞株K562增值的抑制作用,用形态学观察、NBT还原实验以及流式细胞术检测表面抗原CD14、CD33观察三种注射液对K562细胞的诱导分化作用;通过流式细胞术观察药物对细胞凋亡和周期的影响。结果:MTT结果显示复方维甲酸注射液对K562细胞增殖有抑制作用,且效果优于其拆方制剂,IC50为11.98±0.06μg/m l;形态学观察、NBT还原实验以及流式检测CD14、CD33均提示复方维甲酸注射液有较好的诱导细胞分化成熟能力;流式检测提示复方维甲酸注射液可将细胞周期阻滞在G2/M期,对K562细胞有诱导早期凋亡的作用,且效果最优。结论:复方维甲酸注射液对人红白血病细胞K562有抑制增殖、诱导分化和凋亡的作用,且效果优于其拆方制剂。     

芒果苷对白血病HL-60细胞增殖和凋亡的影响

目的 研究芒果苷对人髓系白血病HL-60细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制.方法 用MTT法观察芒果苷对HL-60 细胞增殖的影响;应用细胞形态学、DNA 凝胶电泳和流式细胞术等观察芒果苷对HL-60细胞的诱导凋亡作用;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR) 检测芒果苷作用前后Bcl-2、survivin基因mRNA 表达水平的变化.结果 芒果苷能明显抑制HL-60细胞的增殖,并能有效诱导HL-60细胞凋亡,随着药物浓度增加和作用时间延长,其抑制作用增强、凋亡率也逐渐上升,呈剂量和时间依赖性;芒果苷作用HL-60细胞后Bcl-2、survivin基因mRNA表达随着药物浓度增加和作用时间的延长而逐渐减弱.结论 芒果苷能有效抑制HL-60细胞增殖,诱导其凋亡;Bcl-2、survivin可能参与了芒果苷抑制HL-60细胞增殖、诱导凋亡的过程.     

羊栖菜多糖诱导肿瘤细胞凋亡的实验研究

目的研究羊栖菜多糖(SFPS)对人白血病HL-60细胞系增殖抑制和凋亡诱导作用。方法MTT法检测SFPS对HL-60细胞增殖的抑制作用;扫描电镜、透射电镜、琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测细胞凋亡。结果SFPS对HL-60细胞具有显著生长抑制作用,并呈量效和时效关系;药物浓度为300 mg/L和500 mg/L作用HL-60细胞后,观察到典型的细胞凋亡形态学特征;DNA凝胶电泳呈现梯状条带;DNA直方图出现亚G1峰。在一定浓度范围内,SFPS诱导细胞凋亡的作用呈现浓度和时间依赖性,同时G2/M期细胞比例增多。结论SFPS抗肿瘤作用与诱导细胞凋亡和G2/M期细胞阻滞有关。     

刺梨三萜化合物CL1体外抗人子宫内膜腺癌作用

目的 研究刺梨单体CL1体外抗人子宫内膜腺癌(human adenocarcinoma endometrium cell.1ine JEC)作用.方法 通过细胞形态学改变、MTT法和细胞生长曲线绘制法检测CL1的抗JEC作用.运用全自动分析仪检测细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)含量;通过检测NBT还原法分析CL1对JEC细胞分化的影响;采用AO/EB荧光染色法和FCM检测CL1对肿瘤细胞周期和细胞凋亡的影响.结果 生长曲线、细胞形态学观察和MTT检测显示,CL1对JEC细胞增殖的抑制作用呈时间和剂量依赖性;与阴性对照组比,随CL1剂量的增加,NBT阳性细胞比率增加,LDH含量逐渐降低;与阴性对照组比,CL1能诱导JEC细胞凋亡,并阻滞JEC细胞于G<,0>-G<,1>和G<,2>-M期.结论 CL1具有体外抗JEC作用,其机制可能与其细胞毒性、诱导细胞分化、诱导细胞凋亡以及抑制细胞增殖有关.     

8-硝基白杨素对HL-60细胞凋亡与PTEN-Akt途径的影响

目的 观察8-硝基白杨素(NOChR)抑制人急性髓性白血病细胞系(HL-60)细胞增殖和诱导凋亡作用,并探讨其作用机制是否与PTEN-Akt信号传导途径相关.方法 体外培养HL-60细胞.MTT比色法检测增殖活性;流式细胞术(FCM)定量分析细胞凋亡程度;Western Blot分析HL-60细胞PTEN、P-Akt蛋白表达的影响.结果 NOChR显著抑制HL-60细胞增殖,呈浓度依赖性,其IC50值为1.34 μmol/L;NOChR具有诱导HL-60细胞凋亡作用,且呈浓度和时间依赖性.NOChR以浓度和时间依赖方式上调HL-60细胞PTEN蛋白表达和抑制P-Akt蛋白表达,其作用可被PPARγ特异性阻断剂GW9662(10 μmol/L)预孵育拮抗.结论 NOChR诱导HL-60细胞凋亡作用与其活化PPARγ,上调PTEN蛋白表达,抑制抑制Akt磷酸化相关.