橙皮苷对羟自由基引发红细胞膜损伤的影响

 目的：建立羟自由基(·OH)引发的人红细胞膜氧化损伤实验模型，研究橙皮苷对红细胞膜氧化损伤的保护作用。方法：以Fenton反应产生的羟自由基引发人红细胞膜氧化损伤，并以此为实验模型研究橙皮苷对红细胞膜氧化损伤的影响。结果：·OH能引起红细胞膜脂质过氧化，丙二醛(MDA)含量显著升高；膜脂流动性下降以及膜重封闭能力减小。而红细胞膜经一定量橙皮苷预先处理后，膜MDA含量明显减少；膜脂流动性和膜重封闭能力可显著提高。结论：橙皮苷对·OH引起的红细胞膜氧化损伤有一定的保护作用。     

白藜芦醇苷的体外抗氧化活性

目的研究白藜芦醇苷的清除自由基、抗氧化活性.方法以NADH-PMS-NBT系统产生氧自由基O 2-;EDTANa2-Fe(Ⅱ)-H2O2系统和Fe2++Vit C系统产生羟自由基(·OH);H2O2诱导大鼠红细胞氧化溶血来研究白藜芦醇苷的生物活性.结果白藜芦醇苷体外可清除O2-及·OH;抑制H2O2诱导的大鼠红细胞氧化性溶血;抑制·OH引起的小鼠肝微粒体过氧化脂质(LPO)和大鼠红细胞膜丙二醛(MDA)含量的升高.结论白藜芦醇苷具清除自由基及抗脂质过氧化的作用.     

生姜石油醚提取物对四种氧自由基体系抗氧化作用的研究

 目的:研究生姜石油醚提取物对4种氧自由基体来的杭氧化作用。方法:用UV-分光光度法研究提取物杭O₂对红细胞(RBC)的氧化作用;荧光偏振法测定红细胞膜流动性，研究提取物对红细胞膜的保护作用;荧光法研究提取物对·OH的抑制率、清除率和杭脂质过氧化作用。结果:提取物有明显的杭O₂对RBC的氧化作用。对红细胞膜有保护作用，增加膜的流动性。对·0H有很强的清除作用，在C=2.09 g·L^-1时，抑制率和清除率分别为92.41%和97.39%;并能抑制小鼠肝徽拉体的脂质过氧化作用，在C=4.0 g·L^-1时，抑制率为86.81%。结论:生姜石油醚提取物对4种不同氧自由墓有十分显著的抑制和清除作用，是一种高效的杭氧化剂。     

红车轴草总黄酮体外抗氧化作用的研究

 目的 探讨红车轴草总黄酮体外抗氧化作用。 方法 采用分光光度法测定 H₂O₂ 诱导红细胞溶血作用，用 2- 硫代巴比妥酸法测定小鼠红细胞膜脂质及肝组织匀浆脂质过氧化产物丙二醛（ MDA ）含量。 结果 红车轴草总黄酮在 0.2~1.6 mg·L^-1 内能抑制 H₂O₂ 诱导红细胞溶血和红细胞膜脂质过氧化作用， IC₅₀ 分别为 0.93 及 0.92 mg·L^-1 ，均呈较好的量效关系；红车轴草总黄酮在 4~32 mg·L^-1 内能抑制肝组织脂质过氧化产物的形成， IC₅₀ 为 17.5 mg·L^-1 。 结论 在一定浓度范围内红车轴草总黄酮体外具有明显的抗氧化作用。     

油柑多糖的提取与清除氧自由基作用研究

 目的：从油柑中提取油柑多糖，并分析其清除氧自由基作用。方法：建立热水提取 乙醇沉淀 鞣酸除蛋白H₂O₂脱色工艺制备油柑多糖(PePS)，并作了糖及蛋白质含量测定、多糖的特征分析及清除氧自由基活性测定。结果：油柑多糖得率为1.94%。多糖经SephadexG-100柱层析，洗脱峰为一糖峰及一蛋白峰。总糖含量为64.5%％。蛋白质含量为35.0%。红外吸收光谱分析(IR)，具有多糖及蛋白质的特征吸收峰。差示扫描量热分析(DSC)，结果见该多糖除出现117.20℃的特大吸热峰外，尚有三个小吸热峰和一个小放热峰。测定清除·OH自由基活性，其IC₅₀为638μg；清除超氧阴离子自由基(O₂)活性，其IC₅₀为500μg；抑制脂质过氧化(LPO)作用，其IC₅₀为1.25mg。结论：油柑多糖具有清除氧自由基的作用，其活性大小与多糖的用量呈正相关。     

当归不同炮制品清除氧自由基和抗脂质过氧化作用

当归不同炮制品可清除次黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶系统产生的O₂和Fenton反应生成的·OH,并能抑制FRGS诱导的小鼠肝匀浆上清液脂质过氧化作用。各炮制品ED50之间有一定显著性差异。     

炮制对大黄、虎杖抗氧化作用的影响

目的 :研究炮制对大黄、虎杖抗氧化作用的影响。方法 :采用体外氧自由基生成系统和羟自由基诱导的小鼠肝匀浆脂质过氧化反应 ,评价炮制对大黄、虎杖抗氧化作用的影响。结果 :大黄、虎杖炮制品均可清除次黄嘌呤 黄嘌呤氧化酶系统所产生超氧阴离子 (O₂·)以及Fenton反应生成的羟自由基 (·OH) ,并能抑制羟自由基诱导的小鼠肝脏匀浆脂质过氧化 ,各炮制品EC₅₀之间有一定显著性差异。结论 :炮制降低大黄、虎杖抗氧化能力。     

3,4-二甲氧基-D-甘露醇的制备及其抗氧化活性

 目的合成目标化合物3,4-二甲氧基-D-甘露醇,并研究其体外抗氧化活性。方法以海藻中提取的海洋活性物质D- 甘露醇为原料,经缩合、醚化和脱保护反应,制备目标化合物。利用红外光谱、元素分析、核磁共振氢谱、碳谱和质谱分析对合成的中间体和目标产物的结构进行确证。采用体外实验研究目标化合物3,4-二甲氧基-D-甘露醇酯对超氧阴离子、羟自由基、自由基1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH)、双氧水(H₂O₂)诱导的红细胞氧化溶血以及小鼠肝匀浆脂质过氧化作用的保护作用。结果合成了目标产物并确定了结构,两种方法的总收率分别为43.32％和50.92％。抗氧化结果表明,3,4-二甲氧基-D-甘露醇酯对超氧阴离子、羟自由基、DPPH,H₂O₂诱导的红细胞氧化溶血以及小鼠肝匀浆脂质过氧化作用均有不同程度的抑制作用, 对超氧阴离子有良好的清除作用,IC₅₀为1.4 g·L^-1。同时发现对D-甘露醇3,4位的羟基进行甲醚化后,所得的甘露醇衍生物对自由基DPPH的清除作用和对大鼠肝匀浆脂质过氧化的抑制作用都有明显的提高,对羟自由基的清除作用和对H₂O₂诱导的小鼠红细胞氧化溶血的作用基本没有变化,而对超氧阴离子自由基的清除作用则有显著的降低。结论目标化合物3,4-二甲氧基-D-甘露醇酯具有显著的体外抗氧化活性,但与D-甘露醇相比,只是对自由基DPPH的清除作用和对大鼠肝匀浆脂质过氧化的抑制作用有明显提高。     

马齿苋总黄酮对氧自由基引发人红细胞膜损伤的保护作用

 目的研究马齿苋总黄酮对超氧阴离子(O₂^-)引发的人红细胞膜氧化损伤的保护作用。方法 采用邻苯三酚自氧化产生的O₂^-引发人红细胞膜氧化损伤模型,研究马齿苋总黄酮对红细胞膜氧化损伤的影响。结果O₂^-能引起红细胞膜脂质过氧化,丙二醛(MDA)含量、自氧化速率显著增加,膜脂流动性及膜封闭度下降。而红细胞膜经一定量马齿苋总黄酮(60,120,240,480μg·mL^-1)预先处理后,膜MDA含量明显减少,自氧化速率明显降低,膜脂流动性和膜封闭度显著增高。结论马齿苋对氧自由基引发的人红细胞膜氧化损伤有一定的保护作用。     

穿心草酮抗氧化作用初探

以正常大鼠组织匀浆、线粒体为材料研究穿心草酮 (1,6 -二羟基 - 3,5 -二甲氧基酮 ,CanscoraXanthon,CX)抗脂质过氧化作用。以丙二醛 (MDA)为指标 ,观察 CX对组织匀浆、线粒体体外脂质过氧化产物 MDA生成量的影响。以吸光度 (A)值为指标 ,观察 CX对邻苯三酚自氧化产生的 O÷2 及 Cu2 - Vit C自由基产生系统产生的· OH的清除作用。结果 CX抑制正常大鼠脑、肝、心、肾匀浆的体外过氧化脂质生成 ,抑制Vit C和 Fe SO4激发的线粒体膨胀。提示 CX能清除 O÷2 ,· OH。     

长松萝多糖清除氧自由基和抗脂质过氧化反应的研究

目的:对长松萝多糖(PUS)清除氧自由基、抗脂质过氧化作用进行研究。方法:采用黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶体系测定PUS对超氧阴离子自由基的清除作用,采用Fenton反应体系测定PUS对羟自由基的清除作用及其对羟自由基诱发的小鼠肝匀浆脂质过氧化反应的影响。结果:长松萝多糖对超氧阴离子自由基及羟自由基均有清除作用,其百分之五十抑制浓度IC_(50)分别为0.45 mg/ml和1.57 mg/ml,但对羟自由基诱发的小鼠肝匀浆脂质过氧化反应的抑制作用较弱。结论:PUS对氧自由基有明显的清除作用,但在Fenton反应体系中抗脂质过氧化作用较弱。     

黄柏炮制品清除氧自由基和抗脂质过氧化作用

目的 :研究炮制对黄柏抗氧化作用的影响。方法 :采用体外氧自由基生成系统和羟自由基诱导的小鼠肝匀浆脂质过氧化反应方法 ,评价炮制对黄柏抗氧化作用的影响。结果 :黄柏生品、清炒品、盐炙品和酒炙品水提取物和醇提取物可清除次黄嘌呤 黄嘌呤氧化酶系统产生超氧阴离子 (O₂·)和Fenton反应生成的羟自由基(·OH) ,并能抑制羟自由基诱导的小鼠肝匀浆上清液脂质过氧化作用 ,它们之间抗氧化作用存在一定的差异性。炒炭品则无抗氧化作用。结论 :酒炙炮制品醇提取物抗氧化作用较好。     

马齿苋总黄酮对人红细胞膜的保护作用

为建立超氧阴离子自由基 (O2·- )引发人红细胞膜氧化损伤实验模型 ,研究马齿苋总黄酮对红细胞膜氧化损伤的保护作用。以邻苯三酚在碱性条件下自氧化产生 (O2·- )引发人红细胞膜氧化损伤 ,并以此为实验模型研究马齿苋总黄酮对红细胞膜封闭能力唾液酸、丙二醛 (MDA)含量的影响。结果显示 :(O2·- )能引起红细胞膜重封闭能力显著降低 ,其平均封闭度为 4 1 9% ,红细胞膜唾液酸含量较正常膜显著下降 ,MDA含量显著增加。而预先加入不同浓度的马齿苋总黄酮后能显著增加膜封闭能力 ,红细胞膜唾液酸含量较氧化膜显著增加 ,MDA含量显著降低。且存在明显的剂量效应依赖关系。提示 :马齿苋总黄酮对红细胞膜氧化损伤具有保护作用。     

青藤碱清除氧自由基和抗脂质过氧化作用

目的研究青藤碱体外清除氧自由基与抗脂质过氧化的作用。方法超氧阴离子自由基(O2÷)由邻苯三酚自氧化法产生,采用F en ton体系产生羟自由基(.OH),研究青藤碱对O2÷和.OH的清除作用;用硫代巴比妥酸(TBA)法测定VC-F e2 系统诱导大鼠肝匀浆及肝线粒体产生的脂质过氧化物丙二醛(M DA),研究青藤碱抗脂质过氧化的作用。结果青藤碱能清除.OH和O2÷,其EC50分别为1.35和0.136 m g/mL,且呈浓度依赖关系,青藤碱能抑制大鼠肝匀浆自氧化及VC-F e2 系统诱导引起的脂质过氧化。结论青藤碱具有清除氧自由基和抗脂质过氧化的作用,对肝线粒体也有保护作用。     

葡萄籽原花青素舒张家兔离体主动脉的研究

目的研究葡萄籽原花青素(PC)对主动脉环的舒张作用及机制。方法采用家兔离体主动脉平滑肌标本,以去甲肾上腺素(NA)预收缩主动脉后给予不同剂量PC观察其张力变化,并探讨去除血管内皮、给予NO合酶抑制剂左旋硝基精氨酸(L-NNA)、甲烯蓝(M B)、环氧酶抑制剂吲哚美辛(Indo)和β肾上腺素能受体阻断剂普萘洛尔(P rop)对血管张力变化的影响。结果PC对动脉环静息张力无明显影响,但不同剂量PC可使1×10-6m o l/L NA预收缩的血管出现明显地舒张(r=0.63,P<0.001)。去除血管内皮、1×1-0 4m o l/L L-NNA或1×10-5m o l/L M B可减弱PC的舒张作用,但Indo和P rop无影响。另外,40μg/mL PC对无内皮血管环NA和KC l的量效收缩反应明显减弱,且NA和KC l的PD2分别由对照组的7.05±2.19和1.57±1.37降低为6.04±1.77和1.01±0.93。结论PC对主动脉的舒张作用是通过平滑肌细胞膜上的受体依赖性C a2 通道和电压依赖性C a2 通道抑制C a2 内流,使动脉环舒张,其作用与内皮释放的NO有关。     

决明子抗氧化作用的研究

目的研究决明子提取物的抗氧化作用。方法以光照核黄素体系产生超氧阳离子(O2-),测定决明子提取物对O2-的清除能力;以3种自由基生成体系诱导的红细胞膜脂质过氧化为模型,测定决明子提取物对脂质过氧化的抑制作用。结果决明子提取物显示了强的清除O2-能力,对黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶系统、过氧化氢(H2O2)及紫外线照射3种方法引起的细胞膜脂质过氧化均有抑制作用,其作用呈剂量依赖性。结论决明子提取物有较好的抗氧化作用。     

苦豆子多糖及其衍生物的体外抗氧化活性

目的:对苦豆子多糖及其衍生物的体外抗氧化活性进行了研究.方法:将苦豆子多糖硫酸化、磷酸化修饰后,以维生素C(VC)为对照,分别测定苦豆子多糖(SAP)、硫酸化苦豆子多糖(SAPS)和磷酸化苦豆子多糖(SAPP)3种多糖对二苯代苦味酰自由基(DPPH)、羟自由基(·OH)、超氧自由基(O2-·)的体外抗氧化活性及还原力.结果:SAPS和SAPP表现出不同程度抗氧化活性,并随浓度增加,活性增强,其中SAPS和SAPP清除DPPH能力(IC50分别是4.573,6.542 mg·L-1)与SAP(IC5010.233 mg·L-1)相比,有显著提高;SAPP清除羟自由基(IC504.368 mg·L-1)和SAPS清除超氧自由基(IC502.651 mg·L-1)能力显著提高.结论:硫酸化和磷酸化修饰能提高苦豆子多糖的体外抗氧化活性.     

Free radical scavenging activities and inhibition of inflammatory enzymes of phenolics isolated from Tripodanthus acutifolius

Ethnopharmacological relevance

Leaf extracts from Tripodanthus acutifolius (Ruiz and Pavón) Van Tieghem have long been used in argentinean traditional medicine as anti-inflammatory, however, there is no scientific evidence which supports this use in the literature.

Aim of the study

The present study was conducted to evaluate the ability of five phenolic compounds purified from infusion prepared from Tripodanthus acutifolius leaves to inhibit key enzymes in inflammatory processes. As anti-inflammatory compounds frequently possess free radical scavenging activities, purified substances were comparatively evaluated to asses their free radical scavenging properties. Genotoxic effects were also evaluated.

Materials and Methods

Compounds were evaluated on their ability to inhibit hyaluronidase and cyclooxygenase-2 (COX-2) activities to assess their anti-inflammatory capacities. Free radical scavenging activity was assessed by: 1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl radical (DPPH), superoxide anion assay and the inhibition on lipid peroxidation. Genotoxicity was evaluated by Bacillus subtilis rec assay.

Results

Fractionation of Tripodanthus acutifolius infusion yielded a novel phenylbutanoid derivative (tripodantoside) and four known flavonoid glycosides (rutin, nicotiflorin, hyperoside and isoquercitrin). Flavonoids produced higher inhibition on hyluronidase activity (IC₅₀ ≈ 1.7 mM) than tripodantoside (IC₅₀ = 27.90 mM). A similar COX-2 inhibition activity was exerted by tripodantoside and monoglycosilated flavonoids (IC₅₀ ∼ 50 μM). Compounds were strong radical scavengers, with effective concentration 50 (EC₅₀) values for DPPH in the range of 2.7–6.3 μg/mL, and for superoxide anion in the range of 3.9–8.7 μg/mL. All compounds scavenged peroxyl radicals in the lipid peroxidation assay. The substances showed no genotoxic effects.

Conclusions

The anti-inflammatory effects, free radical scavenging activities and lack of genotoxicity of purified compounds may support the folk use of infusion from Tripodanthus acutifolius leaves as anti-inflammatory.