补脾益气中药对哮喘大鼠BALF中IL-5及GM-CSF含量的影响

目的:探讨白细胞介素-5(IL-5)及粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)在哮喘发病过程中的作用及补脾益气中药对其含量的影响。方法:24只大鼠随机分成3组,每组8只,即:正常对照组、哮喘模型组和中药组。采用卵蛋白、灭活百日咳杆菌疫苗和氢氧化铝干粉配制的溶液腹腔注射致敏以及卵蛋白雾化吸入激发制备大鼠哮喘模型;正常对照组用等量生理盐水替代抗原液;中药组则胃饲补脾益气中药(加味玉屏风散)水溶液。观察支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-5及GM-CSF含量的变化。结果:与正常组比较,模型组BALF中IL-5及GM-CSF含量均显著增高(均P<0.05或P<0.01),尤其是IL-5增高更显著;相关分析表明,GM-CSF与IL-5、呈显著正相关(r1=0.519,r2=0.521,均P<0.05)。补脾益气中药能降低BAFL中IL-5及GM-CSF的含量(P<0.05或P<0.01)。结论:IL-5、GM-CSF在哮喘大鼠的气道炎症细胞浸润过程中起重要作用,可能加速了哮喘非特异性气道炎症的发生和发展;GM-CSF与IL-5之间存在密切的联系,可能对嗜酸粒细胞的聚集、迁移、活化和黏附有协同作用。补脾益气中药(加味玉屏风散)可以通过降低细胞因子水平来改善气道的炎症状况。     

补脾益气方药对脾虚哮喘大鼠肺中KKα表达的影响

[目的]研究补脾益气方药对脾虚哮喘大鼠IL-13含量及IKKα表达的影响,揭示其平喘的作用机制。[方法] Wistar大鼠40只,分五组:对照组、脾虚哮喘组、哮喘组、脾虚哮喘中药组、哮喘中药组。ELISA检测大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中1L-13含量;HE染色观察嗜酸性粒细胞(EOs)浸润情况;免疫组化观察肺组织中IKKα蛋白表达。[结果]与对照组比较,哮喘组和脾虚哮喘组IKKα表达及IL-13含量显著增高(P<0.01),且脾虚哮喘组IKKα表达和IL-13含量均高于哮喘组(P<0.05),中药治疗组和哮喘两组比较,IKKα表达和IL-13含量均降低(P<0.05)。[结论]补脾益气方药能调控脾虚哮喘大鼠肺组织中IKKα的表达及BALF中IL-13的含量。     

补脾益气中药对脾虚哮喘大鼠环核苷酸水平的影响

目的：探讨补脾益气中药对脾虚哮喘大鼠环核苷酸水平的影响。方法：以中医理论为指导，建立了大鼠脾虚哮喘病证结合模型。观察补脾益气法对模型动物支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞总数、嗜酸细胞数（Eos）及BALF上清液中环磷酸腺苷（cAMP）、环磷酸乌苷（cGMP）含量及二者的比值的影响，以及补脾益气中药和β2-受体激动剂（β2-AA）对BALF细胞孵育液中cAMP、cGMP含量及二者比值的影响。结果：与正常对照组比较，脾虚哮喘动物和哮喘动物均表现为Tot、Eos升高，cAMP含量降低，cGMP含量升高，cAMP／cGMP比值降低。脾虚哮喘动物的变化更为明显。补脾益气中药对脾虚哮喘和哮喘动物均可降低其Tot、Eos降低cGMP含量，升高cAMP含量和cAMP／cGMP比值。BALF细胞孵育液中，补脾益气中药与β2-AA联合应用能更为显著的降低cGMP含量，升高cAMP含量和cAMP／cGMP比值。结论：补脾益气中药可升高cAMP含量，降低cGMP含量，纠正cAMP／cGMP比值．补脾益气中药与β2-AA合用药可加强抗哮喘作用。     

加味玉屏风散对哮喘大鼠血清总IgE IL-4和IFN-γ含量的影响

目的:探讨白细胞介素-4(IL-4)、γ-干扰素(IFN-γ)及IgE在哮喘发病过程中的作用及中药加味玉屏风散对其含量的影响.方法:采用卵蛋白致敏大鼠哮喘模型,观察正常组、哮喘组和中药治疗组大鼠血清中总IgE、白细胞介素-4和γ-干扰素的含量变化.结果:哮喘大鼠血清总IgE水平、IL-4含量明显增加(P＜0.01),血清中IFN-γ含量明显降低(P＜0.01),而补脾益气方药(加味玉屏风散)可显著降低哮喘大鼠IgE水平及IL-4含量(P＜0.01),提高IFN-γ的含量(P＜0.01).结论:中药加味玉屏风散可能通过调节血清中白细胞介素-4和γ-干扰素的含量,降低血清IgE水平改善气道的炎症状况.     

金泰冲剂对哮喘豚鼠TNF-α与sIL-2R水平及氧自由基代谢的影响

目的：探讨金泰冲剂对哮喘豚鼠肿瘤坏死因子－α（TNF－α）与可溶性白细胞介素Ⅱ受体（sIL-2R）水平及氧自由基代谢的影响。方法：建立豚鼠哮喘模型,分组测定血清和支气管肺泡灌洗液（BALF）中TNF－α、sIL-2R、超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）的含量。结果：金泰冲剂可降低哮喘豚鼠血清及BALF中sIL-2R和血清TNF－α水平,并使哮喘豚鼠血清及BALF中SOD含量回升,MDA水平下降。结论：金泰冲剂可抑制炎性细胞合成sIL-2R,并降低TNF－α水平及减轻哮喘豚鼠氧自由基损伤,从而减轻哮喘豚鼠的气道免疫炎症。     

补脾益气中药对脾虚哮喘大鼠环核苷酸水平的影响

目的探讨补脾益气中药对脾虚哮喘大鼠环核苷酸水平的影响.方法以中医理论为指导,建立了大鼠脾虚哮喘病证结合模型.观察补脾益气法对模型动物支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数、嗜酸细胞数(Eos)及BALF上清液中环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)含量及二者的比值的影响,以及补脾益气中药和β2-受体激动剂(β2-AA)对BALF细胞孵育液中cAMP、cGMP含量及二者比值的影响.结果与正常对照组比较,脾虚哮喘动物和哮喘动物均表现为Tot、Eos升高,cAMP含量降低,cGMP含量升高,cAMP/cGMP比值降低.脾虚哮喘动物的变化更为明显.补脾益气中药对脾虚哮喘和哮喘动物均可降低其Tot、Eos降低cGMP含量,升高cAMP含量和cAMP/cGMP比值.BALF细胞孵育液中,补脾益气中药与β2一从联合应用能更为显著的降低cGMP含量,升高cAMP含量和cAMP/cGMP比值.结论补脾益气中药可升高cAMP含量,降低cGMP含量,纠正cAMP/cGMP比值.补脾益气中药与β2-从合用药可加强抗哮喘作用.     

补脾益气方对哮喘模型大鼠气道炎症反应及气道嗜酸性粒细胞浸润的影响

目的:探讨补脾益气方对支气管哮喘大鼠气道炎症及嗜酸性粒细胞浸润的影响。方法:将48只健康雄性SD大鼠随机分为4组,每组12只。其中,空白对照组以生理盐水激发作为对照,哮喘模型组、地塞米松组与补脾方药组以鸡卵白蛋白激发建立哮喘模型。地塞米松组注射地塞米松,补脾方药组以补脾益气方药灌胃,末次给药后24 h检测大鼠的各项指标。结果:与空白对照组比较,哮喘模型组、地塞米松组、补脾方药组中肺泡灌洗液的细胞总数及嗜酸性粒细胞(EOS)、淋巴细胞(L)、中性粒细胞(N)的比例明显升高;血清中干扰素-γ(IFN-γ)与白介素-12(IL-12)浓度明显下降,白介素-4(IL-4)、白介素-5(IL-5)的浓度明显上升,IFN-γ/IL-4比值出现明显下降;血清中的Eotaxin因子浓度和肺叶中Eotaxin-2蛋白的表达明显升高;哮喘模型组巨噬细胞(M)的比例明显下降,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。与哮喘模型组比较,地塞米松组和补脾方药组中肺泡灌洗液的细胞总数、EOS、L、N的比例显著下降,M的比例明显升高;血清中的IFN-γ、IL-12显著升高,IL-4、IL-5显著下降,IFN-γ/IL-4比值升高;血清中Eotaxin因子浓度和肺叶中Eotaxin-2蛋白的表达明显下降,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。与地塞米松组比较,补脾方药组的IL-12与IL-5变化更甚,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:补脾益气方药可从多靶点促进Th1因子,抑制Th2因子与嗜酸性粒细胞趋化因子,以重塑Th1/Th2的动态平衡,降低炎性细胞数量,阻止嗜酸性粒细胞向炎症部位浸润,从而改善气道炎症反应,促进病情好转,是今后哮喘治疗的主要方向。     

朝药鹿茸对哮喘小鼠模型气道炎症的影响

目的：探讨朝药鹿茸对哮喘小鼠气道炎症和Th1／Th2类细胞因子变化的影响及其可能机制。方法：雄性BALB／c小鼠32只随机分成4组。分别采用酶联免疫吸附法（ELISA）和蛋白质印迹检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中白细胞介素-4（IL-4）、IL-5、IL-13及γ-干扰素（IFN-γ）含量,观察BALF中炎症细胞变化。结果：与正常对照组比较,哮喘模型组小鼠BALF中炎症细胞计数、IL-4、IL-5、IL-13水平明显增高和IFN-γ水平显著降低（P〈0．05）。与哮喘模型组比较,朝药鹿茸低、高剂量组小鼠BALF中炎症细胞计数、IL-4、IL-5、IL-13水平降低,IFN-γ水平显著上升（P〈0．05）。结论：朝药鹿茸对哮喘小鼠具有保护作用,其机制可能与调节IL-4／IFN-γ平衡失调、减轻炎症细胞浸润有关。     

定喘穴穴位注射对哮喘豚鼠GM—CSF mRNA表达干预作用的研究

目的：探讨穴位注射对哮喘豚鼠粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子（GM—CSF mRNA）基因表达及嗜酸性粒细胞（EOS）的干预作用。方法：采用卵蛋白（OVAV）致敏和激发哮喘豚鼠模型，分5组。采用逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）检测哮喘豚鼠及各对照组肺组织中GM—CSF mRNA表达变化。结果：穴位注射可有效抑制哮喘肺组织中GM—CSF mRNA的表达，有效抑制EOS的浸润，减轻气道炎症。结论：哮喘豚鼠支气管肺组织GM—CSF mRNA高表达可能在气道炎症中发挥重要作用。     

补脾益气方药对哮喘大鼠血清白细胞介素-4和γ-干扰素含量的影响

本研究采用卵蛋白等敏大鼠哮喘模型,观察正常组、哮喘和中药治疗组大鼠血清中总ＩｇＥ、白细胞介素－４和γ－干扰素的含量变化。结果表明：哮喘大鼠血清总ＬｇＥ水平、ＩＬ－４含量明显增加（Ｐ〈０．０１）,血清中ＩＦＮ－γ含量明显降低（Ｐ〈０．０１）,而补脾益气方药可显著降低哮喘大鼠ＩｇＥ水平及ＩＬ－４含量（Ｐ〈０．０１）,提高ＩＦＮ－γ的含量（Ｐ〈０．０１）。     

补脾益气方药对哮喘大鼠血清白细胞介素-4和γ-干扰素含量的影响

本研究采用卵蛋白等致敏大鼠哮喘模型,观察正常组、哮喘组和中药治疗组大鼠血清中总ＩｇＥ、白细胞介素－４和γ－干扰素的含量变化。结果表明：哮喘大鼠血清总 ＩｇＥ水平、ＩＬ－４含量明显增加（Ｐ ＜０．０１）,血清中 ＩＦＮ－γ含量明显降低（Ｐ＜０．０１）,而补脾益气方药可显著降低哮喘大鼠 ＩｇＥ水平及ＩＬ－４含量（Ｐ＜０．０１）,提高ＩＦＮ－γ的含量（Ｐ＜０．０１）。     

针刺足三里对脾虚哮喘大鼠TGF—β和GM-CSF浓度的影响

目的探讨脾虚对哮喘大鼠转化生长因子β（TGF-β）、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM—CSF）浓度的影响及针刺足三里的调节作用。方法采用中医脾虚动物模型和西医哮喘动物模型的复合造模方法，建立大鼠脾虚哮喘病证结合模型，采取针刺足三里的方法进行治疗。采用双抗体夹心酶联免疫法（ELISA）检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中TGF-β、GM—CSF的浓度。以脱氧核糖核普酸末端转移酶介导的原位缺口末端标记法（TUNEL）进行肺组织细胞凋亡的检测。结果与哮喘组比较，脾虚哮喘组的GM-CSF浓度显著升高（P〈0．01）；与相应的疾病组比较，两针刺组GM—CSF浓度显著降低（P〈0．01），与哮喘纽比较，哮喘针刺组TGF-β浓度显著升高（P〈0．05）。与哮喘组比较，脾虚哮喘纽的嗜酸粒细胞（EOS）计数值显著升高（P〈0．01）；与相应的疾病组比较，两针刺组EOS凋亡率明显升高（P〈0．01）。结论脾虚加重气道炎症反应是通过影响炎症细胞凋亡调控因子的浓度来实现的。针刺足三里具有促进模型大鼠BALF中低水平TGF—β浓度的增高、抑制GM—CSF浓度增高的作用。     

芩荑合剂治疗实验性哮喘动物模型气道变应性炎症的机理研究

目的：以芩荑合剂为基础，制成超声雾化液，通过实验观察探讨其作用机理。方法：观察谊方对卵白蛋白致敏哮喘动物模型支气管肺泡灌洗液（BALF）中Eo、IL-3、IL-5、GM．CSF、SIL-2R、NO的影响。结果：实验发现：芩荑合剂雾化液能显著降低炎性指标（Eo、IL-3、IL-5、GM-CSF、SIL-2R、NO）。病理切片证实治疗组支气管肺组织中E0等炎症细胞浸润减少。结论：芩荑合剂具有解痉、平喘、抗炎、祛痰等作用。其作用机理可能与拮抗了气道的E0等炎症细胞浸润、活化及相关细胞因子、炎性介质释放有关。     

补肾益气中药仙灵脾和黄芪对哮喘大鼠TNF-α和NF-κB的影响

目的观察补肾益气中药仙灵脾和黄芪对哮喘大鼠前炎症因子之一的肿瘤坏死因子α（TNF-α）和核转录因子κB（NF～κB）的影响。方法将大鼠分为5组：生理盐水对照组、哮喘组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组。ELISA法检测和比较各组大鼠血清中TNF-α的浓度,免疫组化法检测和比较各组大鼠肺组织NF-κB的活性。结果仙灵脾和黄芪可有效减少哮喘大鼠TNF-α的生成,抑制NF-κB的活性．中药低、中、高剂量组间比较,差异无显著性。结论在哮喘发作期和缓解期给予仙灵脾和黄芪,可有效减少前炎症因子TNF-α的生成,抑制NF-κB的活性,抑制炎症的发展。     

脾虚对哮喘大鼠嗜酸细胞凋亡的影响

利用中医脾虚动物模型和西医哮喘动物模型的造模方法。建立了大鼠脾虚哮喘病证结合模型。观察了脾虚对模型动物肺组织中嗜酸性粒细胞（Eos）数和肺组织中Eos凋亡率及支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞因子白细胞介素4（IL-4）和干扰素-γ（IFN-γ）水平的影响。结果：与正常对照组比较，脾虚哮喘动物和哮喘动物均表现为肺组织中Eos数升高，Eos凋亡率降低，灌洗液中IL-4水平升高，IFN-γ水平降低（P〈0．01）。脾虚哮喘动物的肺组织中Eos数及IL-4的含量的变化比哮喘组更为明显（P〈0．05）。结论：脾虚哮喘有明显的IL-4和IFN-γ水平及气道组织局部的嗜酸性粒细胞数和嗜酸性粒细胞凋亡率的改变；脾虚可升高哮喘机体气道组织局部的IL-4浓度和嗜酸性粒细胞数。脾虚是哮喘发病的主要内在因素之一。     

定喘汤对哮喘模型小鼠肺组织炎性病变及Th2细胞相关炎性因子的影响

目的:研究定喘汤对哮喘模型小鼠气道炎症及气道阻力的干预作用及其可能的作用机制。方法:104只雄性C56BL/6小鼠随机均分为生理盐水对照组、定喘汤对照组、哮喘模型组、定喘汤治疗组,每组26只。哮喘模型组与定喘汤治疗组小鼠予卵蛋白(OVA)致敏和激发建立哮喘模型。末次激发24h后,每组取10只小鼠测定气道阻力;每组取8只小鼠右下肺组织行HE染色及肿瘤坏死因子α(TNF-α)免疫组化观察肺组织炎性病变,同时取左上肺组织提取蛋白,行蛋白印迹试验(westernblot)检测肺组织中GATA-3蛋白表达;每组取8只小鼠采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中白介素(IL)-4、IL-5、IL-13和TNF-α含量,计数BALF及外周血中炎性细胞。结果:与生理盐水对照组比较,哮喘模型组小鼠气道阻力显著升高,肺组织出现炎性病变,TNF-α表达升高,BALF及外周血的炎性细胞比例上升,BALF中IL-4、IL-5、IL-13和TNF-α含量升高,肺组织中GATA-3蛋白表达水平上升。与哮喘模型组比较,定喘汤治疗组小鼠气道阻力显著降低,肺组织炎性病变缓解,TNF-α表达降低,BALF及外周血的炎性细胞比例下降,BALF中IL-4、IL-5、IL-13和TNF-α含量降低,肺组织中GATA-3蛋白表达水平下降。上述指标在生理盐水对照组与定喘汤对照组间无显著性差异。结论:定喘汤可减轻哮喘小鼠的气道炎性病变,降低气道高反应性,可能与经GATA-3介导抑制Th2细胞相关炎性因子有关。     

朝医山药补肺元汤对哮喘模型小鼠气道炎症的影响

目的:探讨朝医山药补肺元汤对哮喘小鼠气道炎症和Thl/Th2类细胞因子变化的影响及其可能机制。方法:雄性BALB/c小鼠32只随机分成4组。分别采用酶联免疫吸附法(ELISA)和蛋白质印迹检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素-4(IL-4)、IL-5、IL-13及γ-干扰素(IFN-γ)含量,观察BALF中炎症细胞和肺组织病理学改变。结果:与正常对照组比较,哮喘模型组小鼠BALF中炎症细胞计数、IL-4、IL-5、IL-13水平和IFN-γ水平显著降低(P0.05)。与哮喘模型组比较,朝医山药补肺元汤低、高剂量组小鼠BALF中炎症细胞计数、IL-4、IL-5、IL-13水平降低,IFN-γ水平显著上升(P0.05)。朝医山药补肺元汤能明显减轻哮喘小鼠肺组织病理学改变,朝医山药补肺元汤低、高剂量组之间比较,无显著差异。结论:朝医山药补肺元汤对哮喘小鼠具有保护作用,其机制可能与调节IL-4/IFN-γ平衡失调、减轻炎症细胞浸润有关。     

桑苏二陈汤加味干预支气管哮喘大鼠模型细胞因子的研究

目的：运用＂桑苏二陈汤加味＂治疗哮喘发作期Wistar大鼠模型,观察治疗前后大鼠一般生活状态、细胞因子等指标的变化,探讨桑苏二陈汤加味对哮喘发作期的疗效及作用机制,为临床应用桑苏二陈汤加味治疗哮喘提供实验依据。方法：雄性Wistar大鼠90只按随机数字表分为6组：空白组,桑苏二陈汤加味高剂量组、中剂量组、低剂量组,定喘汤组,模型组,每组15只。大鼠哮喘模型参照吕国平[1]等介绍的方法复制。观察治疗前后大鼠一般生活状态变化;测定大鼠血清中的ET-1、IL-1、IL-6、TNF-α、NO含量。结果：与空白组比较,模型组大鼠ET-1？IL-1？IL-6？TNF-α、NO含量显著升高,提示哮喘炎症存在。与模型组比较,治疗组炎症有减轻,ET-1、IL-1、IL-6、TNF-α、NO含量下降。与定喘汤组比较,桑苏二陈汤加味高、中剂量组ET-1、IL-1、IL-6、TNF-α、NO含量升高（P〈0.01）,桑苏二陈汤加味低剂量组无统计学意义。桑苏二陈汤加味高中低剂量组比较,低剂量组较高、中剂量ET-1、IL-1、IL-6、TNF-α、NO含量降低（P〈0.05,P〈0.01）。结论：桑苏二陈汤加味低剂量组能显著降低哮喘大鼠血清中TNF-α、ET-1、IL-1、IL-6、NO含量,有效控制气道炎症,从而改善气道重塑。     

补脾益气方对哮喘模型大鼠肺组织核因子KappaB抑制剂的激酶β表达的影响

目的:探讨补脾益气方对哮喘模型大鼠肺组织核因子Kappa B(NF-κB)抑制剂的激酶β(the kinase of nuclear fac-tor-kappa B inhibitor β,IKKβ)的调控作用及对白介素8(IL-8)含量的影响。方法:SPF级雄性Wistar大鼠随机分为对照组(A)、哮喘组(B)、补脾益气方治疗组(C)。卵蛋白致敏和激发复制出哮喘模型,按照10 g.kg-1体重给予C组大鼠中药ig 1次/d,共21d。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织IKKβ的mRNA表达水平,采用免疫组化检测肺组织IKKβ的蛋白表达水平,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定支气管肺泡灌洗液IL-8的含量。结果:①肺组织IKKβ的mRNA的表达:B组显著高于A组(P<0.01);C组显著低于B组(P<0.05)。②肺组织IKKβ的蛋白表达水平:B组显著高于A组(P<0.01);C组显著低于B组(P<0.01)。③肺泡灌洗液IL-8含量:B组显著高于A组(P<0.01);C组显著低于B组(P<0.01)。结论:哮喘组大鼠肺组织IKKβmRNA和蛋白的表达水平显著增强,补脾益气方能有效抑制其表达,降低肺泡灌洗液IL-8含量,证明补脾益气方能有效抑制IKKβ信号转导的途径。     

黎氏哮喘方对支气管哮喘患儿细胞因子影响的研究

目的：研究黎氏哮喘方对支气管哮喘患儿外周血血浆中细胞因子TNF-α、IL-8的影响。方法：采用随机对照分组的方法,将60例患几分为两组。治疗组30例用黎氏哮喘方治疗;对照组30例用美喘清治疗。观察两组治疗前后外周血血浆中TNF-α、IL-8含量的变化。结果：治疗后两组患儿外周血血浆中细胞因子TNF-α,IL-8的含量均较治疗前明显降低（P〈0．01,P〈0．05）。结论：黎氏哮喘方具有降低血浆中细胞因子TNF-α,IL-8含量的作用。