补肾活血方对卵巢早衰小鼠颗粒细胞凋亡的影响

目的探讨补肾活血方抑制卵巢早衰(POF)小鼠卵泡颗粒细胞凋亡的作用机制。方法以小鼠透明带3为抗原,皮下多点注射免疫BALB/c雌性小鼠建立免疫性POF模型。取40只清洁级雌性小鼠,随机分为空白组、模型组、阳性药组、补肾活血方组。补肾活血方组给予补肾活血方药液灌胃,阳性药组给予戊酸雌二醇药液灌胃,模型组和空白组给予等量生理盐水灌胃,2次/d,连续15 d。取卵巢、子宫、胸腺进行称重,计算其脏器指数;HE染色观察颗粒细胞凋亡情况;采用放射免疫法检测雌二醇(E2)、促黄体生成激素(LH)和促卵泡生成激素(FSH)的水平;采用RT-PCR分析卵巢颗粒细胞中Fas、Fas-L m RNA表达情况。结果与空白组比较,模型组卵巢、胸腺、子宫质量和E2水平显著降低(P0.05,P0.01),FSH、LH水平和Fas、Fas-L m RNA表达显著升高(P0.01);与模型组比较,给药组颗粒细胞凋亡明显减少,卵巢指数、子宫指数、胸腺指数增加(P0.05),E2水平升高(P0.01),FSH、LH水平及Fas、Fas-L m RNA表达明显降低(P0.05,P0.01)。结论补肾活血方可调节下丘脑-垂体-卵巢轴的激素水平,通过降低Fas、Fas-L的m RNA表达抑制细胞凋亡。     

补肾调经方对PCOS模型大鼠性激素、卵巢形态及TGF-β_1/smad通路的影响

目的探讨补肾调经方对多囊卵巢综合征(PCOS)模型大鼠性激素、卵巢形态及转化生长因子-β_1(TGF-β_1)/smad通路的影响。方法将60只雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、补肾调经方低剂量组、补肾调经方中剂量组、补肾调经方高剂量组与炔雌醇环丙孕酮组,每组10只。除空白组外,其余组大鼠采用丙酸睾酮+注射用绒促性素建立PCOS模型。造模成功后,补肾调经方低、中、高剂量组给予0.264 g/(kg·d)、0.528 g/(kg·d)、1.056 g/(kg·d)的补肾调经方溶液灌胃,炔雌醇环丙孕酮组给予临床剂量1倍的炔雌醇环丙孕酮溶液灌胃,空白组、模型组给予等体积蒸馏水灌胃,均1次/d,连续12 d。末次灌胃结束后次日,采用放射免疫法测定各组大鼠血清黄体生成激素(LH)、睾酮(T)、促卵泡成熟激素(FSH)、雌二醇(E_2)水平;光镜下观察各组大鼠卵巢组织形态学变化,并计算卵泡数目;蛋白免疫印迹法检测各组大鼠卵巢组织中TGF-β_1、Smad3、Smad4和Smad 7蛋白表达情况。结果与模型组比较,补肾调经方中、高剂量组与炔雌醇环丙孕酮组大鼠血清LH、T水平及卵巢组织中Smad 7蛋白表达量均明显降低,血清FSH、E_2水平及卵巢组织中TGF-β_1、Smad3、Smad4蛋白表达量均明显升高,卵巢质量减轻,卵泡数目减少,差异均有统计学意义(P均0.05);与炔雌醇环丙孕酮组比较,补肾调经方高剂量组大鼠血清LH、T水平及卵巢组织中Smad 7蛋白表达量更低,血清FSH、E_2水平及卵巢组织中TGF-β_1、Smad3、Smad4蛋白表达量更高,卵巢质量更轻,卵泡数目更少,差异均有统计学意义(P均0.05)。补肾调经方各剂量组与炔雌醇环丙孕酮组大鼠卵巢病理性改变均呈不同程度改善,以补肾调经方高剂量组改善最为明显。结论补肾调经方可有效调节PCOS大鼠性激素分泌,促进卵泡发育和排卵,能够改善卵巢形态,机制可能与调控TGF-β_1/Smad信号通路的激活有关。     

补肾法通过抑制内质网应激提高子宫内膜容受性研究

目的:研究补肾法(补肾调经方)对控制性超促排卵(COH)小鼠围着床期内质网应激的影响,探讨其提高子宫内膜容受性的作用机制。方法:实验小鼠建立COH模型并给予补肾干预,观察小鼠妊娠数和胚胎种植数,于孕4 d取子宫,Western blot和实时定量PCR分析子宫组织中雌激素受体(ERα)和内质网应激相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的表达变化;组织免疫荧光观察ERα和GRP78在子宫内膜的分布。结果:模型组小鼠妊娠数、胚胎种植数显著低于正常组(P0.05);模型组小鼠ERα和GRP78在子宫内膜基质细胞、微血管内皮细胞中表达,且ERα的表达水平显著降低(P0.05),GRP78的表达水平显著增高(P0.05)。与模型组相比,给予补肾调经方干预后,小鼠妊娠数、胚胎种植数明显增高(P0.05);ERα的mRNA和蛋白水平明显增高(P0.05),GRP78的mRNA和蛋白水平显著降低(P0.05)。结论:补肾法(补肾调经方)改善COH小鼠子宫内膜容受性,与促进ERα表达抑制子宫内膜内质网应激有关。     

调经助孕胶囊对不孕大鼠卵巢FSHR、LHR的影响

目的建立SD大鼠ASR模型,探讨调经助孕胶囊对排卵障碍性不孕模型大鼠性周期、卵巢组织形态、血清Inhibin-B(抑制素B)及卵巢FSHR(卵泡刺激素受体)、LHR(黄体生成素受体)的影响。方法给幼年雌性SD大鼠注射雄激素可导致其成年后不孕,这种雄激素致不孕的大鼠不排卵。结果调经助孕组大鼠阴道上皮细胞有明显的周期性变化;调经助孕组大鼠卵巢各级卵泡总数大于模型组(P0.05),调经助孕组大鼠卵巢病理性囊性卵泡个数小于模型组(P0.05);调经助孕组大鼠血清抑制素B含量高于模型组(P0.05);调经助孕组大鼠卵巢FSHR、LHR表达水平高于模型组(P0.05)。结论调经助孕胶囊有使排卵障碍性不孕症的大鼠恢复性周期趋势的作用,增加模型大鼠血清Inhibin-B含量,提升卵巢储备功能,增强模型大鼠卵巢FSHR、LHR的表达水平,促进卵泡的发育与成熟。     

五子衍宗丸对GnRHa控制性超促排卵小鼠着床期S100A11基因的调控

目的:研究中药五子衍宗丸对GnRHa长方案控制性超促排卵(COH)小鼠着床期S100A11表达的影响,探讨COH影响胚胎着床的机制,寻求有效改善COH低妊娠率的中药方剂。方法:将60只小鼠随机分成3组:模型组(GnRHa+HMG+HCG),中药组(五子衍宗丸+GnRHa+HMG+HCG),对照组(生理盐水)。观察小鼠阴栓率和着床期子宫胚胎着床数及着床率;应用免疫组化法、RT-PCR和Western blot方法分别检测小鼠着床期子宫内膜S100A11 mRNA及蛋白的表达。结果:模型组胚胎着床数高于对照组和中药组(P0.01),但胚胎着床率和妊娠率均明显降低(P0.05)。模型组着床期子宫内膜S100A11mRNA及蛋白表达下降,与对照组和中药组比较均有明显差异(P0.05)。结论:中药五子衍宗丸可上调因GnRHa长方案COH所致下降的S100A11基因的表达,提高子宫内膜容受性,改善小鼠妊娠率和胚胎着床率。     

针刺对多囊卵巢综合征胰岛素抵抗大鼠生殖内分泌及磷酸化蛋白激酶B蛋白表达的影响

目的:研究针刺对多囊卵巢综合征胰岛素抵抗(PCOS-IR)大鼠生殖内分泌激素及磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)蛋白表达的影响,探讨针刺改善PCOS-IR的作用机制。方法:雌性Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型组、二甲双胍组、针刺组,每组8只。采用背部皮下注射脱氢表雄酮建立PCOS-IR模型。针刺组针刺双侧"肾俞""胰俞""子宫""三阴交""丰隆"及"关元"穴,提插捻转5min;二甲双胍组给予二甲双胍溶液(100mg/kg)灌胃,两组均每日治疗1次,连续治疗28d。采用HE染色观察卵巢组织变化;ELISA法检测血清卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E2)、黄体生成素(LH)和睾酮(T)水平及空腹胰岛素(FINS)水平,并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);Western blot法检测卵巢组织Akt和p-Akt蛋白表达情况。结果:与正常组比较,模型组卵巢呈多囊样改变,闭锁卵泡增多,未见黄体分布,且模型组血清FSH、E2明显降低(P0.01),血清LH和T水平明显升高(P0.01),FINS水平和HOMA-IR值升高(P0.01),卵巢组织Akt和p-Akt蛋白表达明显降低(P0.01,P0.05)。与模型组比较,针刺组和二甲双胍组可见不同发育阶段的卵泡及少量黄体,血清FSH、E2水平明显升高(P0.01),血清LH、T水平明显降低(P0.05,P0.01),FINS水平及HOMA-IR值降低(P0.01),卵巢组织Akt和p-Akt蛋白表达明显升高(P0.05,P0.01)。针刺组和二甲双胍组各指标的差异无统计学意义(P0.05)。结论:根据中医生殖轴选取的穴位针刺可以改善PCOS-IR大鼠生殖内分泌水平以及IR情况,这可能与针刺对卵巢组织p-Akt蛋白表达的调控有关。     

补肾调经方、逍遥丸对雄激素致排卵障碍模型大鼠腺垂体、卵巢影响的比较研究北大核心CSCD

目的观察补肾调经方、逍遥丸对雄激素致排卵障碍模型大鼠(ASR)腺垂体、卵巢形态及其分泌性激素的影响。方法 60只9日龄SD雌性大鼠随机选取10只为正常组,余50只皮下注射丙酸睾丸酮建立ASR模型,选取30只造模成功者,随机分为模型组、补肾调经方组(灌服补肾调经方混悬液)、逍遥丸组(灌服逍遥丸混悬液),每组10只,给药5周,择动情前期,断头法取血,放射免疫分析法检测血清雌二醇(E2)、孕酮(P)、睾酮(T)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH);HE染色后观察腺垂体、卵巢形态。结果与正常组比较,模型组血清E2、T升高,FSH、LH降低(均P<0.01);腺垂体、卵巢形态异常。与模型组比较,补肾调经方组和逍遥丸组E2、T降低,FSH、LH升高(P<0.05,P<0.01),且补肾调经方组E2、T,逍遥丸组FSH恢复正常(均P>0.05);两组受损的腺垂体、卵巢结构均得到不同程度修复。结论补肾调经方及逍遥丸可改善排卵障碍性疾病。     

补肾疏肝针药结合对卵巢早衰大鼠卵巢储备力的影响研究

目的:观察补肾疏肝针药结合对卵巢早衰(POF)模型大鼠卵巢储备力的影响。方法:将60只雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、电针组、中药组、针药组、西药组,除空白组外其余各组大鼠采用雷公藤多苷片50mg/kg灌胃联合束缚建立卵巢早衰动物模型。造模成功后,中药组予具有补肾疏肝作用的中药复方灌胃,电针组予电针三阴交、关元、太冲穴,针药组同时予中药灌胃及电针治疗,西药组予戊酸雌二醇溶液灌胃,疗程均为30d。造模前与治疗后称重大鼠计算体质量增量,处死后摘取卵巢称湿重,计算卵巢指数,酶联免疫吸附法测定大鼠血清雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)、抗苗勒氏激素(AMH)水平,HE染色观察卵巢组织形态学变化,光镜下计数各级卵泡数目。结果:模型组大鼠体质量增量、卵巢质量和卵巢指数均明显低于空白组(P0.01),西药组、中药组和针药组大鼠治疗后上述指标均明显高于模型组(P0.05,P0.01),电针组大鼠卵巢质量明显高于模型组(P0.05),电针组体质量增量、卵巢质量明显低于针药组(P0.05,P0.01)。模型组大鼠卵巢体积缩小,生长卵泡数减少,还可见大量闭锁卵泡和间质腺,黄体纤维化;各治疗组大鼠卵巢情况明显改善。模型组大鼠卵巢生长卵泡、成熟卵泡、黄体数目均明显低于空白组(P0.01),闭锁卵泡数目明显高于空白组(P0.01);各治疗组上述指标均较模型组有不同程度的改善;针药组较其他治疗组改善程度更有优势,其中生长卵泡、成熟卵泡数目明显高于西药组(P0.05),闭锁卵泡与黄体数目与西药组相当。模型组大鼠血清E2、AMH含量显著低于空白组(P0.01),FSH含量显著高于空白组(P0.01);与模型组相比,各治疗组大鼠性激素水平均有不同程度的改善,针药组FSH、AMH含量与西药组相当。结论:补肾疏肝针药结合治疗POF模型大鼠疗效显著,可改善大鼠低雌激素高促性腺激素状态,促进卵泡生长发育及成熟,抑制卵泡过度闭锁,提高卵巢储备力。     

补肾疗更浸膏延缓老年小鼠卵巢功能衰退的实验研究

目的研究补肾疗更浸膏延缓老年小鼠卵巢功能衰退作用及其作用机制。方法选取12~13月龄自然衰老小鼠60只,随机分为6组,每组10只,即老年空白组,戊酸雌二醇片组(0.00026 g·kg-1),坤泰胶囊组(1.56g·kg-1),补肾疗更浸膏低、中、高剂量组(6.5,13.0,26.0 g·kg-1),另取3月龄小鼠作为青年对照组。末次给药24 h后,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清雌二醇(E2)、促黄体生成素(LH)、促卵泡激素(FSH)、孕酮(P)含量;取小鼠子宫、卵巢,称质量并计算脏器指数;10%甲醇固定,观察子宫、卵巢病理学改变;采用DNA末端原位标记法(TUNEL)测定小鼠卵巢颗粒细胞凋亡数。结果补肾疗更浸膏可升高老年小鼠血清E2、P含量(P0.05,P0.01),降低FSH、LH含量(P0.01),提高老年子宫、卵巢系数(P0.05,P0.01),增加子宫内膜厚度(P0.05,P0.01),并可明显增加老年小鼠卵巢各级卵泡数(P0.05,P0.01),降低卵巢颗粒细胞凋亡数(P0.01),同时可不同程度改善老年小鼠病变子宫内膜组织结构。结论补肾疗更浸膏能有效延缓老年雌性小鼠卵巢功能衰退进程,改善其生殖系统功能,其作用机制与调节血液性激素水平,改善病变子宫、卵巢超微结构,抑制卵巢颗粒细胞凋亡有关。     

补肾调经方在IVF助孕出现卵巢低反应后应用的临床观察

目的评价补肾调经方对多次接受体外受精-胚胎移植(In Vitro Fertilization and Embryo Transfer,IVF-ET)后卵巢反应不良患者的干预作用。方法将60例卵巢低反应证属肾阴虚患者随机分为治疗组(补肾调经方),对照组(瓯佳侬),以1个月经周期为1疗程,连续服用3个疗程。比较2组患者的中医证候积分,临床疗效,卵泡刺激素(Follicule-Stimulating Hormone,FSH)、雌二醇(Estradiol,E2)、黄体生成素(Luteinizing hormone,LH)值及基础窦卵泡数目变化情况。结果 (1)中医临床证候疗效:治疗组中医证候积分与对照组相比均明显降低,差异有统计学意义(P0.01),中医证候(肾阴虚证)治疗总有效率与对照组相比明显升高,差异有统计学意义(P0.01)。(2)基础性激素水平:与治疗前相比,治疗组能明显降低升高的FSH值(P0.01);对E2有双向调节作用,能降低过高的E2,升高过低的E2(P0.01);LH水平治疗前后差异无统计学意义(P0.05)。对照组能明显降低升高的FSH(P0.01)及LH(P0.01);而E2在治疗前后无显著变化(P0.05)。与对照组相比,治疗组对降低升高的FSH的效果比对照组更显著,差异有统计学意义(P0.01)。(3)基础窦卵泡数目:2组均能增加基础窦卵泡偏少的数目,差异无统计学意义(P0.05)。结论补肾调经方可有效减轻卵巢低反应证属肾阴虚患者中医相关证候,降低过高的FSH水平,对E2具有双向调节作用,对基础窦卵泡的数目偏少的患者可有效增加其窦卵泡数目,值得临床推广与应用。     

加减归肾丸对卵巢储备功能减退模型小鼠卵巢组织PI3K/AKT/mTOR信号通路的影响

目的探讨加减归肾丸治疗卵巢储备功能减退的可能作用机制。方法将90只ICR雌性小鼠随机分为空白对照组、模型组、雌二醇组和加减归肾丸低、中、高剂量组,每组15只。除空白对照组外,其余小鼠腹腔注射二氧化乙烯环己烯溶液160mg/(kg·d)连续15天建立卵巢储备功能减退小鼠模型。造模成功后加减归肾丸高、中、低剂量组分别灌服加减归肾丸混悬液57.0、28.5、14.3g/(kg·d),雌二醇组灌服戊酸雌二醇0.15mg/(kg·d),空白对照组和模型组每日灌服0.1ml/10g生理盐水,共干预30天。HE染色观察卵巢组织病理形态学变化,酶联免疫法检测血清促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E_2)、抗缪勒管激素(AMH)水平,Western Blot法检测小鼠卵巢组织中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)蛋白表达。结果病理结果显示,模型组较空白对照组始基卵泡、窦前卵泡、窦状卵泡数量明显减少,闭锁卵泡明显增多,黄体数量稀少。雌二醇组和加减归肾丸高剂量组卵泡数量较为丰富,可见到较多黄体。加减归肾丸中、低剂量组主要以闭锁卵泡为主,可见少量黄体。与空白对照组比较,模型组小鼠血清FSH、LH显著升高,AMH、E_2显著降低,卵巢组织PI3K、AKT、mTOR蛋白含量均降低(P0.05或P0.01)。与模型组比较,加减归肾丸中、高剂量组和雌二醇组血清FSH、LH显著降低,AMH显著升高,卵巢组织PI3K、AKT蛋白升高(P0.05或P0.01)。加减归肾丸高剂量组各指标与雌二醇组差异均无统计学意义(P0.05)。结论加减归肾丸可能通过影响卵巢组织PI3K/AKT/mTOR信号通路,从而改善卵巢功能,并且以高剂量效果更佳。     

补肾调经方对雄激素致无排卵大鼠模型卵巢血管舒-缩因子的影响

目的:观察补肾调经方(熟地、枸杞、覆盆子、淫羊藿、紫河车、当归、白芍、香附、红花、川芎、桃仁)对雄激素致无排卵大鼠模型血浆及卵巢血管舒张因子一氧化氮(NO)、环磷酸鸟苷(cGMP)、神经型一氧化氮合酶(nNOS)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、血管收缩因子内皮素-1(ET-1)、血管紧张素Ⅱ(ATⅡ)的影响,探讨其治疗无排卵性疾病的作用及机理。方法:建立雄激素致无排卵大鼠模型。40只大鼠分为正常组、模型组和中药治疗组。采用放射免疫法测定大鼠血浆NO、cGMP、ET-1、ATⅡ以及血清雌二醇(E2)、孕酮(P)、睾酮(T)含量;采用免疫组化法检测大鼠卵巢nNOS、eNOS、ET-1表达;采用HE染色观察大鼠卵巢组织形态学变化。结果:与模型组比较,中药治疗组大鼠血浆NO、cGMP含量升高(P0.01),血浆ET-1、ATⅡ含量降低(P0.01),血清E2、T、E2/P降低(P0.01);卵巢颗粒细胞、髓质nNOS、eNOS表达增加(P0.01),ET-1表达降低(P0.01);卵巢结构有一定改善,卵泡发育并有黄体形成。结论:补肾调经方具有一定的调节无排卵大鼠模型血浆及卵巢血管舒-缩因子、改善无排卵大鼠模型卵巢血液供应、抑制颗粒细胞凋亡和卵泡闭锁的作用,揭示其可能促进卵泡发育、成熟、排卵的作用机制。     

补肾促排卵颗粒剂对高雄激素所致抑孕小鼠促排卵的影响

目的:通过补肾促排卵颗粒剂对高雄激素所致的抑孕小鼠促排卵的影响,探讨其作用机制.方法:选用昆明种20日龄小鼠,正常对照组16只,颈背皮下注射生理盐水;余为80只造模组,颈背皮下注射丙酸睾丸酮0.06 mL.将造模成功后的小鼠随机分为模型对照组、构椽酸氯米芬胶囊组和补肾促排卵颗粒剂大、中、小剂量组,相应灌胃等容积生理盐水、枸椽酸氯米芬胶囊混悬液(16.67 μg/g)及补肾促排卵颗粒剂大(8.33 g/kg)、中(4.11 g/kg)、小(2.08 g/kg)剂量.结果:给予补肾促排卵颗粒剂后血清中的雌激素及其受体、卵巢组织形态学、卵巢及子宫指数与模型对照组对比,差别有统计学意义(P＜0.05);以补肾促排卵颗粒剂大、中剂量组为明显并可以提高治疗组小鼠血清中的E2水平,使卵巢、子宫增重,并增加卵丘及卵泡、黄体的数量,使间质腺体发达,促进卵泡的发育.结论:补肾促排卵颗粒剂促排卵的机制可能是因其能改善下丘脑—垂体—卵巢轴的功能——升高E2水平,使卵巢、子宫增重,并增加卵丘及卵泡、黄体的数量,使间质腺体发达,促进卵泡的发育.其机制可能为通过调节性腺轴的功能,发挥其治疗排卵障碍性不孕的作用.     

毓麟珠对早发性卵巢功能不全模型小鼠卵巢形态、卵泡发育及mTOR信号通路的影响

目的观察毓麟珠对早发性卵巢功能不全(POI)小鼠卵巢功能、卵泡发育及mTOR通路的影响,探讨其作用机制。方法以小鼠透明带3(Zp3)为抗原,皮下多点注射BALB/c雌性小鼠建立免疫性POI模型。实验分为空白组、模型组、阳性药组和毓麟珠低、中、高剂量,各给药组给予相应药物。HE染色观察小鼠卵巢形态及卵泡,ELISA检测小鼠血清激素水平,Western blot检测卵巢组织AKT、mTOR的蛋白表达,PCR检测mTOR下游相关Rheb、S6k1、4E-BP1的mRNA表达。结果与空白组比较,模型组小鼠卵巢明显缩小,卵泡数量明显减少,血清促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)明显升高,抗苗勒氏管激素(AMH)、雌二醇(E2)明显下降,Rheb、S6k1、4E-BP1 mRNA和AKT、mTOR蛋白相对表达量明显降低(P0.05,P0.01);与模型组比较,各给药组小鼠卵巢增大,卵泡数量增加,血清FSH、LH均下降,AMH、E2均升高,差异有统计学意义(P0.05,P0.01);小鼠卵巢mTOR蛋白表达及其下游相关Rheb、S6k1、4E-BP1 mRNA表达均升高,差异有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论毓麟珠治疗POI机制可能与调节mTOR信号通路相关因子基因和蛋白表达水平有关,通过促进卵泡发育,改善卵巢功能。     

地黄菟丝调经颗粒对环磷酰胺所致卵巢早衰大鼠干细胞因子的影响

目的:观察地黄菟丝调经颗粒(DHTSTJG)对环磷酰胺(CTX)所致卵巢早衰(POF)大鼠卵巢干细胞因子(SCF)表达的影响,探讨DHTSTJG防治POF的机制。方法:采用一次性腹腔注射CTX60 mg/kg的方法制备POF大鼠模型,实验设正常对照组、模型组、戊酸雌二醇组(西药组)、DHTSTJG组(中药组)、DHTSTJG预防组(预防组),共5组,灌胃给药8 W后,采用化学发光法检测大鼠血清雌二醇(E2)、促卵泡刺激素(FSH)水平,免疫组织化学方法检测大鼠卵巢SCF蛋白的表达,RT-PCR法检测卵巢SCF-mRNA表达。结果:SCF主要表达于大鼠卵巢次级卵泡的颗粒细胞。与正常组比较,模型组大鼠血清FSH水平、卵泡颗粒细胞SCF蛋白、SCF-mRNA的表达显著升高(P0.05);E2水平明显降低(P0.05)。各治疗组血FSH、卵泡颗粒细胞SCF蛋白、mRNA表达明显降低;E2水平升高;与模型组比较差异具统计学意义(P0.05);预防组优于西药组(P0.05)。结论:DHTSTJG可能是通过降低FSH水平以及升高E2水平,调节SCF在大鼠卵巢颗粒细胞的表达变化,改善卵巢功能,从而减轻CTX对卵巢的损伤。     

PI 3K/Akt/mTOR信号通路介导艾灸改善大鼠卵巢早衰的研究

目的:探讨艾灸对雷公藤多苷片诱导的卵巢早衰大鼠卵巢的保护作用及机制。方法:雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、艾灸组,每组15只。除空白组外,模型组和艾灸组均采用雷公藤多苷片(40mg/kg)灌胃,每日1次,连续6周;灌胃第4周给予艾灸组悬灸"关元"及双侧"三阴交"10min,每日1次,治疗3周。HE染色观察卵巢组织形态结构;ELISA法检测血清中雌二醇(E2)、促黄体生成素(LH)、促卵泡生成素(FSH)等激素水平,白介素-6(IL-6)、IL-1β等炎性因子含量;Western blot法测定卵巢组织中磷脂酰肌醇3-激酶(PI 3K)、蛋白激酶B(Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)含量及磷酸化水平。结果:与空白组相比,模型组卵巢内卵泡减少,卵泡的粒细胞层次明显减少,黄体减少,闭锁卵泡明显增多,血清中E2显著降低(P0.01),LH、FSH、IL-6、IL-1β含量均显著增加(P0.01),卵巢组织中p-PI 3K、p-Akt和p-mTOR蛋白表达显著增加(P0.01);与模型组相比,艾灸组卵巢组织病理损伤改善,艾灸能够显著降低血清中LH(P0.05)、FSH(P0.01)、IL-6(P0.01)、IL-1β(P0.01)含量,增加E2含量(P0.05),降低卵巢组织磷酸化PI 3K、Akt、mTOR的表达水平(P0.01)。结论:艾灸能够改善雷公藤多苷片诱导的大鼠卵巢早衰,其机制可能与抑制PI 3K/Akt/mTOR信号通路磷酸化相关。     

助孕胶囊对多囊卵巢大鼠卵巢组织白血病抑制因子表达的影响

目的观察助孕胶囊对多囊卵巢（PCO）大鼠生殖内分泌激素、卵巢白血病抑制因子（LIF）表达的影响，分析其可能的作用机制。方法采用孕激素联合人绒毛膜促性腺激素（HcG）造模法制备PCO模型大鼠。随机分为对照组、PCO模型组、PCO模型组＋助孕胶囊组（中药组）、PCO模型组＋克罗米酚组（西药组），采用放免法测定血性激素水平的变化，光镜观察卵巢、卵泡发育的情况，免疫组化法检测卵巢组织LIF的表达水平。结果助孕胶囊可使PCO大鼠的颗粒细胞层增厚，卵泡膜细胞层变薄，血清雄激素（T）、黄体生成素（LH）水平均明显下降，E2、FSH水平上升，并上调卵巢组织LIF的表达（P〈0．05）。结论助孕胶囊能够降低PCO大鼠血清中T、LH水平，升高E2、FSR水平，上调卵巢组织LIF的表达，从而促进卵泡的发育、成熟及排卵。     

电针预处理对早发性卵巢功能不全模型大鼠卵巢保护作用的实验研究

目的:探讨电针"中髎""天枢"预处理对早发性卵巢功能不全模型大鼠卵巢的保护作用和可能机制。方法:将动情周期规律的32只SD雌性大鼠随机分为空白组、模型组、电针组、捆绑组,每组8只。模型组、电针组和捆绑组采用去氧乙烯基环己烯(VCD)按160 mg/kg体质量连续腹腔注射15 d造模。电针组自造模之日起于"中髎""天枢"穴进行电针预处理,前2周每日1次、5次/周,后2周隔日1次、3次/周。每次20 min,共4周。捆绑组只捆绑固定,时间、频次和总次数同电针组。空白组、模型组不干预。模型组造模成功后处死大鼠,检测各组大鼠性腺湿重和性腺指数;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清性激素抗苗勒激素(AMH)、抑制素B(inhibin B)水平,采用放射免疫分析法检测促卵泡生成素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、孕酮(P)、睾酮(T)水平,并观察卵巢组织形态和卵泡数量,采用蛋白印迹法检测卵巢组织B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白基因(Bax)蛋白表达。结果:与空白组相比,模型组大鼠左、右侧卵巢湿重和卵巢指数均降低,子宫湿重和子宫指数均降低(P0.05,P0.01);血清AMH和inhibin B均降低(均P0.01),血清FSH、LH、T升高(均P0.01),E2、P降低(均P0.01);卵巢组织中原始卵泡、初级卵泡相应降低(均P0.01),闭锁卵泡增多(P0.01);Bax蛋白表达明显升高(P0.01),Bcl-2蛋白表达降低(P0.01)。与模型组相比,电针组大鼠左、右侧卵巢湿重和卵巢指数均升高,子宫湿重升高(P0.05,P0.01);血清AMH和inhibin B均升高,血清FSH、LH降低,E2、P升高(P0.05,P0.01);卵巢原始卵泡、初级卵泡相应升高,闭锁卵泡减少(P0.05,P0.01);卵巢组织Bax蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达升高(P0.05,P0.01)。捆绑组和模型组各指标间比较差异均无统计学意义(均P0.05)。结论:4周的电针"中髎""天枢"预处理对早发性卵巢功能不全模型大鼠的卵巢有一定的保护作用,该保护作用可能是通过上调卵巢颗粒细胞抑制凋亡因子Bcl-2蛋白的表达、下调促凋亡因子Bax蛋白的表达来发挥作用的。     

补肾活血复方直肠给药促卵泡发育作用研究

目的:探讨补肾活血复方资冲颗粒直肠给药的促卵泡发育作用及其机制。方法:幼龄大鼠(160～170g)和去势小鼠经直肠给予资冲颗粒,并与己烯雌酚、女金丹进行对照。对大鼠卵巢各级卵泡及黄体进行计数;对大鼠与小鼠子宫指数、子宫组织形态学进行观察;采用酶免疫分析法测定小鼠血清E2水平。结果:资冲颗粒、己烯雌酚、女金丹作用相似,均可增加大鼠卵巢窦前卵泡数和卵泡总数(P0.05或P0.01)并能增加子宫指数及子宫内膜厚度(P0.05);增加去势小鼠子宫指数(P0.01)、子宫内膜厚度(P0.05),提高血清E2水平(P0.05)。结论:资冲颗粒直肠给药能促进幼龄大鼠卵泡发育,提高去势小鼠血清雌激素水平,并产生雌激素样效应。提示补肾活血复方促卵泡发育的作用可能与提高雌激素水平有关。直肠给药可能是促卵泡发育的有效给药途经之一。     

孕康口服液对早发性卵巢功能不全小鼠的影响

目的 观察孕康口服液对早发性卵巢功能不全小鼠的影响.方法 采用正常动情周期ICR小鼠灌胃给予雷公藤多苷溶液40 mg/kg构建早发性卵巢功能不全模型,大鼠随机分为正常组、模型组及孕康口服液高、中、低剂量组(36、18、9 mL/kg),灌胃给药10周.给药期间定期观察小鼠动情周期;ELISA法检测血清中雌二醇(E2)、孕激素(P)、促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)、催乳素(PRL)、抗苗勒管激素(AMH)、抑制素B(INHB)水平;HE染色观察卵巢组织形态;TUNEL染色检测卵巢颗粒细胞凋亡;免疫组化检测Bax、Bcl-2蛋白表达.结果 与模型组比较,孕康口服液高剂量组能缩短小鼠动情周期(P<0.05),改善卵巢组织形态学并增加窦状卵泡数量(P<0.05);升高血清E2水平(P<0.05);减少卵巢颗粒细胞凋亡数量,并能降低Bax表达以及升高Bcl-2表达.结论 孕康口服液能改善雷公藤多苷致小鼠早发性卵巢功能不全,其机制可能是通过调节凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达,减少卵巢颗粒细胞凋亡.