基于ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化模型的四妙勇安汤活性部位配伍规律研究

目的:观察四妙勇安汤活性部位配伍方(N8,N16,N18)对载脂蛋白E基因缺陷(ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块形成的影响。方法:48只8周龄ApoE-/-小鼠随机分为6组:四妙勇安汤活性部位配伍方N8、N16、N18(1 g/kg.d)组、辛伐他汀组(15 mg/kg.d)、罗格列酮组(10 mg/kg.d)及模型组,各组同时饲以高脂饲料,对照组采用C57小鼠8只,给药第16周后,采用小动物成像系统观察主动脉弓动脉粥样斑块形成程度;主动脉根部切片、HE染色,测定斑块面积与管腔面积比值(PA/LA);酶法测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)含量。结果:与模型组比较,N16组可显著抑制ApoE-/-小鼠主动脉弓粥样硬化斑块的形成,明显减少PA/LA值;与模型组比较,N8、N16、N18各组均有降低ApoE-/-小鼠血清TC、TG、LDL水平的作用。结论:四妙勇安汤活性部位配伍方具有较好的抑制动脉粥样硬化形成的作用。     

铁皮石斛对ApoE-/-小鼠血脂及TNF-α,IL-6的影响

目的:考察铁皮石斛对ApoE-/-小鼠血脂、炎症相关蛋白的影响,探讨其抗动脉粥样硬化的作用机制.方法:将ApoE-/-小鼠以高脂饲喂养4w构建AS小鼠模型,分别用辛伐他汀(3 mg·kg-1)、铁皮石斛(1.5,3 g·kg-1)对小鼠灌胃给药,8w后处死,酶法检测血清血脂;ELISA检测血清中TNF-α,IL-6表达;苏丹Ⅳ染色观察主动脉瓣处斑块形成情况;HE和油红0染色观察小鼠主动脉管腔内粥样斑块;免疫组化法检测TNF-α和IL-6在主动脉壁的表达.结果:铁皮石斛可显著降低小鼠血清中TG,TCHOL,LDL-C水平,下调血清中TNF-α,IL-6表达;可明显减少ApoE-/-小鼠主动瓣处粥样斑块的面积和ApoE-/-小鼠主动脉管腔内粥样斑块的面积,可明显降低TNF-α,IL-6在主动脉内表达.结论:铁皮石斛能有效降低ApoE-/-小鼠血清中有关脂质含量,降低血清和主动脉内TNF-α,iL-6的表达,降低炎症反应的发生,缓解动脉粥样硬化损伤.     

罗格列酮对动脉粥样硬化兔白介素-18、单核细胞趋化蛋白-1及基质金属蛋白酶-9表达的影响

 目的 通过比较罗格列酮和辛伐他汀对动脉粥样硬化兔炎症因子的影响,探讨其抗动脉粥样硬化的作用机制。方法 36只雄性新西兰大白兔随机分为对照组、模型组、辛伐他汀组、罗格列酮组,采用皮下注射同型半胱氨酸硫内酯及高脂饮食相结合的方法建立动脉粥样硬化模型,酶联免疫吸附法检测血清白介素-18水平,免疫组化技术测定主动脉粥样斑块中单核细胞趋化蛋白-1和基质金属蛋白酶-9的表达。结果 与对照组比较,其他3组血清白介素-18水平、主动脉粥样斑块中单核细胞趋化蛋白-1和基质金属蛋白酶-9表达显著增高（P0.05）。结论 罗格列酮可降低动脉粥样硬化兔血清IL-18和主动脉粥样斑块中单核细胞趋化蛋白-1和基质金属蛋白酶-9的表达,抑制动脉粥样硬化的进展,其机制与抗炎作用有关。     

脑络通颗粒对动脉粥样硬化小鼠血管组织NF-κB、PPAR-γ的影响

目的探讨脑络通颗粒抗动脉粥样硬化(AS)的可能作用机制。方法 30只8周龄ApoE-/-小鼠高脂饲料饲养10个月建立AS模型,随机分为模型组、脑络通组、辛伐他汀组,每组10只;同时以同周龄C57BL/6J小鼠10只作为空白组。脑络通组小鼠给予脑络通颗粒溶液6.67 g/kg灌胃,辛伐他汀组给予辛伐他汀片溶液6.67mg/kg灌胃,空白组和模型组给予等量生理盐水,各组均每天灌胃1次,共2个月。比较各组小鼠血脂水平及血管组织斑块面积指数、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、核因子κB(NF-κB)、过氧化体增殖物激活型受体γ(PPAR-γ)蛋白及mRNA水平。结果与空白组比较,模型组小鼠血脂水平及血管组织TNF-α蛋白、NF-κB蛋白及mRNA升高,PPAR-γ蛋白及mRNA降低(P0.01);与模型组比较,脑络通组和辛伐他汀组小鼠血脂水平、血管组织斑块面积指数及血管组织TNF-α蛋白、NF-κB蛋白及mRNA降低,PPAR-γ蛋白及mRNA升高(P0.01)。结论脑络通颗粒能调控ApoE-/-小鼠AS模型NF-κB与PPAR-γ的平衡,可能是其抗AS的机制之一。     

黄连提取物对ApoE基因敲除小鼠主动脉易损斑块Perilipin和PPAR-γ基因表达的影响

目的 观察黄连提取物对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化（AS）易损斑块内周脂素（perilipin）和过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPAR-γ）基因表达的影响,探讨黄连提取物稳定AS斑块的作用及可能机制。方法 33只6～8周龄ApoE基因敲除小鼠予高脂饮食喂养13周,待其形成成熟的AS斑块后,随机分为3组：模型组、黄连提取物组、辛伐他汀组（阳性对照组）,每组11只。继续高脂喂养,并按体重比折算给予小鼠临床推荐剂量的相应药物治疗13周,处死动物,每只小鼠分别取主动脉根部的4个切面,分别行HE染色和Movat染色,观察并计算各组小鼠主AS斑块内埋藏纤维帽的平均数目,实时荧光定量PCR法检测主动脉内perilipin和PPAR-γmRNA的表达。结果 给药13周后,黄连提取物组斑块内埋藏纤维帽的数目与模型组比较明显减少（P<0.05）,并且斑块内perilipin mRNA的表达与模型组比较显著降低（P<0.05）,而PPAR-γmRNA的表达较模型组显著增加（P<0.01）。结论 在临床推荐剂量上,黄连提取物可显著减少ApoE基因敲除小鼠主动脉粥样斑块破裂次数,有助于稳定易损斑块,其机制可能与促进小鼠AS斑块内PPAR-γmRNA表达,抑制perilipin mRNA表达有关。     

搜风祛痰法对ApoE基因敲除小鼠过氧化物酶体增殖物激活受体γ表达的影响

目的 通过观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPAR-γ）的表达水平,来阐明搜风祛痰法中药对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化不稳定斑块的干预作用机制.方法 制备ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化模型,随机分为5组：模型组、稳斑汤低剂量组、中剂量组、高剂量组及西药（他汀）组,另设空白对照组.采用HE染色、Masson染色法用于实验观察,应用RT-PCR法检测PPAR-γmRNA的表达.结果 与空白组、模型组相比,稳斑汤各剂量组及西药组PPAR-γ mRNA表达水平明显升高（P＜0.01）.结论 稳斑汤可以提高PPAR-γmRNA表达水平,对小鼠动脉粥样硬化有一定稳定斑块的效应,因剂量不同而各异.     

艾灸及艾烟对载脂蛋白E基因敲除小鼠肺组织病理及血清IL-4、IFN-γ的影响

目的观察艾灸及艾烟对载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠肺组织病理及血清白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)的影响,评价艾灸及艾烟的安全性,并探讨艾灸在动脉粥样硬化炎症反应过程中的起效机制。方法 30只8周龄雄性采用高脂饮食喂养的载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠随机分为3组(每组10只):模型组、艾灸组、艾烟组。10只同周龄雄性普通饲料喂养的C57BL/6非转基因小鼠作为空白对照。空白组和模型组小鼠均采用固定器固定,每日抓取固定20 min;艾灸组采用固定器固定小鼠,在膻中施灸20 min,艾烟组采用固定器固定小鼠后,将固定器放入5~15 mg/m3的艾烟环境中20 min,各组每周均干预6 d,连续干预14周后取材,观察小鼠的一般情况和肺组织病理及血清IL-4、IFN-γ水平。结果肺组织病理切片显示,空白组、模型组、艾灸组和艾烟组肺组织结构完整清晰;模型组小鼠血清中IL-4含量最低,IFN-γ含量最高,与空白组比较,差异有统计学意义(P <0.05);与模型组比较,艾灸组和艾烟组小鼠血清中IL-4水平含量均显著升高(P <0.05),IFN-γ水平含量均显著降低(P <0.05)。结论艾灸及艾烟对小鼠肺组织病理变化无影响;模型组ApoE-/-小鼠表现为动脉粥样硬化过程中的炎症反应,IL-4水平降低,IFN-γ水平升高;艾灸及艾烟能够提高IL-4水平,降低IFN-γ水平,可明显降低动脉粥样硬化过程中的炎性反应。     

四妙勇安汤调控滋养血管网重建稳定ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化易损斑块的实验研究

观察四妙勇安汤干预AS易损斑块的效应,并以滋养血管（Vasa Vasorum,VV）新生为切入点,进一步探讨其起效的机制和靶点。方法：将雄性ApoE-/-小鼠随机分模型组、辛伐他汀组、四妙勇安汤组,采用添加1.1% L-蛋氨酸的高脂饲料喂养8周,建立AS易损斑块模型,并以C57BL/6小鼠作为对照。连续给药8周后,采用HE染色观察斑块的病理形态;采用免疫组化法观察斑块内与主动脉外膜VV密度以及斑块内巨噬细胞的聚集情况;检测血清TC、TG、LDL-C、HDL-C等血脂变化;采用Western blot技术检测HIF-1α-Apelin/APJ信号通路的关键节点蛋白。四妙勇安汤能够显著改善小鼠主动脉斑块病理形态,减小斑块面积及斑块与管腔面积比,增加最小纤维帽厚度以稳定斑块,且四妙勇安汤对纤维帽厚度的改善明显优于辛伐他汀;可有效抑制斑块内与血管外膜VV新生,降低斑块内巨噬细胞含量。四妙勇安汤可有效降低小鼠血清TC、TG、LDL-C水平,但对血清HDL-C水平无明显的改善作用。四妙勇安汤可降低HIF-1α蛋白表达水平,且其作用优于辛伐他汀;下调主动脉Apelin蛋白、APJ蛋白表达水平;显著降低Phospho-MEK1/2（Ser217/221）、Phospho-p44/42 MAPK（Erk1/2）（Thr202/Tyr204）、Phospho-p70 S6 Kinase（Thr421/Ser424）蛋白表达水平。结论：四妙勇安汤可通过调节HIF-1α-Apelin/APJ信号通路,抑制VV新生,从而稳定AS易损斑块。     

补阳还五汤抗ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化作用与调控巨噬细胞自噬的机制研究

目的:探究补阳还五汤对高脂饮食造成ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块的影响,及其与斑块内巨噬细胞自噬及表型变化的关系。方法:8周龄60只ApoE-/-小鼠随机分为模型组、补阳还五汤组5、10、20g/kg组、自噬诱导剂雷帕霉素4 mg/kg组,以C57/BL-6J小鼠作为正常组。模型组和治疗组均采用高脂饲养,造模同时,治疗组分别给予补阳还五汤和雷帕霉素。动物取血后用于血清生化指标高敏C反应蛋白(hs-CPR)、白介素1L-1、1L-6的测定;制备血管组织标本;电镜观察巨噬细胞自噬体形成情况;Western Blot测定自噬相关通路蛋白的水平。结果:ApoE-/-小鼠高脂饮食喂养16周可成功诱导AS斑块模型。与正常组相比,模型组动脉粥样硬化斑块面积明显增加,血清hs-CRP、白介素IL-1β和IL-6含量均显著升高,小鼠动脉硬化斑块内巨噬细胞自噬体减少,微管轻链蛋白3(LC3-II/I)比值含量明显降低。与模型组相比,补阳还五汤及雷帕霉素组对比模型组斑块面积明显减少,血清hs-CRP、白介素IL-1β和IL-6含量显著降低,自噬体形成显著增多,显著升高LC3-II/I比值含量。与正常组比较,模型组血管组织中P-I3K、P-62、P-mTOR表达量明显升高,P-Beclin1、ULK表达量明显降低;与模型组相比,补阳还五汤各剂量组及其雷帕霉素可以显著抑制PI3K、P-62、P-mTOR的蛋白表达,升高P-Beclin1、ULK的表达。结论:补阳还五汤可以通过减少炎症因子的释放,调控斑块内巨噬细胞自噬水平,从而明显地降低动脉硬化斑块的斑块面积,达到抗动脉粥样硬化作用。     

四妙勇安汤对动脉粥样硬化小鼠动脉血管斑块外膜滋养血管通透性的影响

目的:观察四妙勇安汤对动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)易损斑块病理形态及外膜滋养血管(vasa vasorum,VV)通透性的影响,并以VV为靶点探讨其干预机制。方法:采用健康雄性Apo E~(-/-)小鼠,随机分为模型组、四妙勇安汤组(11.7 mg·kg~(-1)·d~(-1))和辛伐他汀组(2.6 mg·kg~(-1)·d~(-1)),给予添加1.1%L-蛋氨酸的高脂饲料喂养;以C57BL/6小鼠作为正常组,喂养8周后进行模型评价,在模型成功基础上,持续药物干预8周,采用油红O染色观察小鼠主动脉的病理形态变化;通过免疫组化染色观察主动脉根部斑块外膜基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9),基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)蛋白的表达情况。结果:油红O染色结果显示,与正常组比较,模型组主动脉血管内壁斑块面积显著增加(P0.01);与模型组比较,辛伐他汀组主动脉内壁斑块面积显著减少(P0.01);四妙勇安汤组主动脉内壁斑块面积明显减少(P0.05)。免疫组化染色结果显示,与正常组比较,模型组小鼠主动脉外膜MMP-9阳性表达面积明显增大(P0.01);与模型组比较,辛伐他汀组与四妙勇安汤组MMP-9阳性表达明显减小(P0.01);与辛伐他汀组比较,四妙勇安汤组MMP-9阳性表达明显减小(P0.01)。结论:四妙勇安汤能减轻小鼠主动脉斑块面积,通过调节MMP-9,TIMP-1的表达,降低斑块外膜VV通透性,稳定易损斑块。     

黄连解毒汤对动脉粥样硬化大鼠MCP-1/CCR2 mRNA表达的干预作用

目的研究黄连解毒汤对动脉粥样硬化大鼠主动脉组织MCP-1/CCR2mRNA表达的影响。方法建立动脉粥样硬化大鼠模型,随机分成正常对照组、模型对照组和黄连解毒汤低,中,高剂量组,阿托伐他汀组,用RT-PCR方法检测各实验组大鼠主动脉组织MCP-1,CCR2 mRNA表达。结果与模型组相比,黄连解毒汤中,高剂量组及阿托伐他汀组的MCP-1 mRNA、CCR2 mRNA表达明显降低,结果有显著性差异(P0.05～0.01)。结论黄连解毒汤能下调MCP-1,CCR2 mRNA在主动脉的表达,减少局部炎症反应,减轻血管的损害。     

降脂平肝汤含药血清对大鼠3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗的影响

目的观察降脂平肝汤含药血清对大鼠3T3-L1脂肪细胞胰岛素受体底物1(IRS-1)mRNA和过氧化物酶增殖体激活受体(PPAR)-γmRNA表达的影响,探讨其对脂肪细胞胰岛素抵抗影响的可能机制。方法选择Wistar大鼠16只,诱导分化3T3-L1脂肪前体细胞为成熟的脂肪细胞并以肿瘤坏死因子α(TNFα)诱导建立脂肪细胞的胰岛素抵抗模型,取诱导成功的胰岛素抵抗模型细胞分为对照组(基础培养液加入20%大鼠空白血清)、模型组(基础培养液加入20%大鼠空白血清和20ng/mlTNF-α)、罗格列酮组(基础培养液加入20%大鼠含药血清和20ng/mlTNF-α)、降脂平肝汤组(基础培养液加入20%大鼠含药血清和20ng/mlTNF-α)每组4只,培养48h,观察细胞IRS-1mRNA和PPAR-γmRNA表达水平的变化。结果模型组IRS-1mRNA和PPAR-γmRNA表达明显降低,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);罗格列酮组与降脂平肝汤组IRS-1mRNA和PPAR-γmRNA表达均明显增高,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论降脂平肝汤可能通过增强大鼠IRS-1、PPAR-γ基因的表达起到抑制脂肪细胞胰岛素抵抗的作用。     

不同处理方式艾燃烧生成物对动脉粥样硬化小鼠炎症及斑块稳定性的影响

目的观察不同处理方式艾燃烧生成物对载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠血清炎症因子及斑块稳定性的影响。方法40只雄性8周龄ApoE-/-小鼠随机均分为5组:艾烟组、滤过艾烟组、艾绒挥发组、艾叶精油组、模型组。8只同龄雄性C57BL/6小鼠为空白对照。艾烟组置于遮光率为2%的艾烟环境;滤过艾烟组置于艾烟滤过后的环境;艾绒挥发组置于150℃加热艾绒挥发环境;艾叶精油组置于精油雾化环境。干预14周后,ELISA测定血清γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-10(IL-10)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)含量,HE染色观察主动脉病理改变。结果与模型组相比,艾烟组与滤过艾烟组小鼠血清INF-γ、MMP-9显著降低(P>0.05),IL-10、TIMP-1显著升高(P>0.05),主动脉病变显著减轻,两组间无显著差异(P<0.05)。结论艾烟与滤过艾烟可抑制血管内炎症反应及稳定斑块,有效缓解动脉粥样硬化病变。     

四妙勇安汤对ApoE~(-/-)动脉粥样硬化小鼠IL-6和MCP-1的影响

目的:研究四妙勇安汤对高脂饲料喂养的ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化炎症反应的干预作用。方法:采用高脂饲料喂养ApoE~(-/-)小鼠14周制备动脉粥样硬化模型,成模后随机分为5组:模型组,阳性药组(阿托伐他汀,2.57 mg·kg~(-1)),四妙勇安汤高剂量组(34.9 g·kg~(-1))、四妙勇安汤中剂量组(23.14 g·kg~(-1))和四妙勇安汤低剂量组(11.61 g·kg~(-1)),分别灌胃给药12周,同时以C57BL/6小鼠为正常对照组,给予去离子水灌胃12周。采用生化仪检测三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量;HE染色观察主动脉血管形态,并测量主动脉内膜厚度(IT)、中膜厚度(MT)、血管管腔面积(LA)、粥样斑块面积(PA)、内中膜厚度比(IT/MT)、管腔狭窄率(PA/LA);采用流式高通量多因子检测技术检测血清中白介素-6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)炎症细胞因子表达。结果:与对照组相比,模型组小鼠血清TC、TG、LDL-C明显提高,HDL-C明显降低,PA、IT及IT/MT明显升高(P0.01)。与模型组比较,四妙勇安汤能够明显降低ApoE~(-/-)小鼠主动脉PA、IT及IT/MT(P0.01),并明显降低IL-6及MCP-1表达(P0.01、P0.05),但对血脂水平无明显的影响。结论:四妙勇安汤可以通过抑制炎症反应防治动脉粥样硬化,而不依赖血脂水平的变化。     

四妙勇安汤调控核因子-κB活性及抑制相关炎症因子的实验研究

目的:观察四妙勇安汤是否对动脉粥样硬化(AS)家兔模型核因子-κB(NF-κB)表达及相关因子有调控作用,从而拮抗AS的发生和斑块的形成。方法:56只雄性日本大耳白家兔随机分成空白对照组、模型组、辛伐他汀组和四妙勇安汤组,除空白对照组外,其余各组建立主动脉粥样硬化斑块模型,从实验第1d开始予相应药物干预,第10周末麻醉处死后取主动脉行NF-κB免疫组化染色观察,并于实验0,3,6,10周动态检测血清中TNF-α、IL-1及MCP-1含量。结果:模型组粥样斑块中泡沫细胞NF-κBp65亚基表达丰富,用药组NF-κBp65亚基较模型组阳性细胞表达减少,四妙勇安汤对斑块区NF-κBp65亚基的表达有明显的抑制。模型组各时间点血清中TNF-α、IL-1和MCP-1含量显著增高(P<0.01),两给药组在各时间点均有不同程度的降低IL-1、TNF-α和MCP-1水平的作用(P<0.05或P<0.01)。结论:四妙勇安汤可减少斑块区NF-κBp65亚基表达,同时具有减少炎症因子释放的作用。     

降脂宁抗动脉粥样硬化作用的效应机制研究

目的:观察中药降脂宁对载脂蛋白E基因缺陷(ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化的影响及其作用机制。方法:将ApoE-/-小鼠随机分为4组:降脂宁大剂量组、降脂宁小剂量组、阿托伐他汀阳性药物组及模型组。给药第12周后全部处死,主动脉根部切片,HE染色,观察动脉斑块形成程度,测定斑块面积与管腔面积之比。酶法测定血清总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)含量,ELISA法测定血清中脂联素(Ad iponectin)含量。结果:给药12周后,主动脉HE染色可见降脂宁大、小两个剂量组均可显著抑制ApoE-/-小鼠主动脉根部动脉粥样硬化斑块的形成,斑块面积/管腔面积均小于模型对照组(P<0.001)。此外,与模型组比较,降脂宁大剂量可降低ApoE-/-小鼠血清TC水平(P<0.01);降脂宁小、大剂量组均可降低血清TG水平。此外,与模型组比较,降脂宁大、小剂量组均可升高ApoE-/-小鼠血清脂联素含量(P<0.001)。结论:降脂宁具有较好的抑制动脉粥样硬化形成的作用,与其降血脂及升高脂联素水平的作用有关。     

竹节参总皂苷对DSS诱导溃疡性结肠炎小鼠PPAR-γ信号通路及炎症因子的影响

目的:观察竹节参总皂苷对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导小鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的改善作用及对PPAR-γ信号通路和炎症因子的影响。方法:将小鼠随机分为6组:正常对照组、模型组、柳氮磺吡啶(SASP)阳性对照组及竹节参总皂苷高、低剂量组。通过自由饮用4%DSS诱导建立小鼠UC模型,各组连续灌胃给予不同药物10 d,正常对照组和模型组给予等体积溶剂。记录疾病活动指数(DAI)。以HE染色、免疫组化、分光光度法和ELISA法分别检测结肠病理变化、PPAR-γ表达、结肠匀浆髓过氧化物酶(MPO)活性和血清IL-1β、IL-10、IL-17、IFN-γ含量。结果:竹节参总皂苷能显著降低UC模型小鼠的DAI,减轻结肠黏膜损伤,降低结肠组织MPO活性和血清IL-1β、IL-17、IFN-γ含量,而升高结肠组织PPAR-γ的表达及血清IL-10的含量。结论:竹节参总皂苷可能通过上调PPAR-γ的表达,抑制促炎因子IL-1β、IL-17、IFN-γ的释放,提升IL-10水平而产生对实验性UC的保护作用。     

扶正化瘀片对非酒精性脂肪性肝炎大鼠枯否细胞极化的影响

目的?研究扶正化瘀片对非酒精性脂肪性肝炎（NASH）大鼠枯否细胞极化的影响，并进一步探讨相关机制。方法?50只雄性SD大鼠随机分为正常组，模型组，低、高剂量中药组和罗格列酮组，每组10只。除正常组外，其余4组经高脂喂养20周后，模型组以等体积蒸馏水灌胃干预，低、高剂量中药组分别予浓度750、1 500 mg/（kg·d）扶正化瘀片混悬液灌胃，罗格列酮组给予浓度30 mg/（kg·d）混悬液灌胃，6次/周，共4周；HE染色观察肝组织病理变化并计算NAFLD活动度积分（NAS)；全自动生化仪检测血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）水平；ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素（IL）-6及IL-10含量；免疫组织化学染色法及Real-time PCR测定肝组织诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、甘露糖受体（CD206）蛋白及mRNA表达水平；Western Blot法测肝组织核转录因子-kappaB（NF-κB）、过氧化物酶体增殖物激活受体（PPAR）-γ蛋白表达水平。结果?与正常组比较，模型组肝组织显示典型NASH组织学特征，出现明显脂肪变性，不同程度的炎细胞浸润和坏死灶；血清TC、TG、ALT、AST、TNF-α、IL-6表达均升高而IL-10表达下降（P<0.05）；肝组织iNOS、CD206 mRNA及蛋白表达均升高（P<0.05）；肝组织NF-κB、PPAR-γ蛋白表达均升高（P<0.05）。NAS及血清ALT、AST、TNF-α、IL-6表达、肝组织iNOS mRNA及蛋白、NF-κB蛋白表达各药物组较模型组均降低（P<0.05），高剂量中药组较罗格列酮组均降低（P<0.05）。血清IL-10表达、肝组织CD206 mRNA及蛋白、PPAR-γ蛋白表达各药物组较模型组均升高，高剂量中药组较罗格列酮组均升高（P<0.05）。结论?扶正化瘀片对NASH大鼠治疗效应确切，可能与扶正化瘀片增强PPAR-γ信号通路表达并抑制NF-κB信号通路表达，从而促进M2型枯否细胞极化有关。     

“六郁同治”法对动脉粥样硬化易损斑块ApoE-／-模型小鼠脂代谢及高敏C反应蛋白的影响

目的观察“六郁同治”法对动脉粥样硬化易损斑块ApoE-／-模型小鼠血脂及高敏c反应蛋白（hsCRP）表达的影响,探讨其稳定易损斑块的作用机制。方法将6周龄ApoE-／-小鼠高脂喂养24周后随机分为中药高剂量组、中药低剂量组、辛伐他汀组、模型组,治疗12周后检测其血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL—C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、hsCRP水平,并观察斑块病理形态。结果光镜下显示造模小鼠主动脉管壁厚薄不均,可见由大量泡沫细胞及胆固醇结晶形成的粥样斑块期病灶,表示造模成功。与模型组比较,中药低剂量组、中药高剂量组、辛伐他汀组血清Tc、TG、LDL—C水平明显降低（P〈0．05）,HDL-C水平明显升高（P〈0．05）,斑块内脂质成分减少（P〈0．01）,hsCRP表达水平降低（P〈0．01）。结论“六郁同治”法可稳定易损斑块,延缓动脉粥样硬化进程,其作用机制可能与抑制血脂代谢及炎性因子hsCRP表达有关。     

四妙勇安汤对动脉粥样硬化巨噬细胞泡沫化的影响

目的 探讨四妙勇安汤对于载脂蛋白E敲除（ApoE-/-）小鼠动脉粥样硬化（AS）病变及J774A.1小鼠单核巨噬细胞泡沫化的影响。方法 将30只ApoE-/-小鼠按随机数字表法分为模型组、阿托伐他汀组、低剂量组、中剂量组和高剂量组，每组6只，给予西方饮食饲料喂养8周后，连续给药8周。阿托伐他汀组给予3.64×10-5 g/d阿托伐他汀（蒸馏水溶解）灌胃，低、中、高剂量组分别给予四妙勇安汤0.164、0.328、0.655 g/d灌胃；另将6只C57BL/6J小鼠作为对照组，给予普通饮食喂养16周，对照组和模型组每日予相同体积的蒸馏水灌胃。采用Movat法观察小鼠主动脉窦形态改变及泡沫细胞含量；免疫荧光染色观察主动脉窦F4/80表达情况。制备四妙勇安汤含药血清，CCK-8法筛选给药浓度；建立氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导的单核巨噬细胞株J774A.1泡沫化模型，分为模型组、四妙勇安汤组，另设对照组；采用油红O染色检测细胞脂质吸收；Western Blot法检测各组细胞清道夫受体分子蛋白表达水平。结果 动物实验证明：与对照组比较，模型组主动脉窦病理形态改变明显，斑块内泡沫细胞含量和F...