人类羊膜细胞表达神经干细胞特异性蛋白研究

目的利用神经干细胞特异性标志蛋白鉴定人类羊膜组织中多分化潜能神经前体细胞的存在.方法利用免疫组织化学法检测人类羊膜组织和培养人类羊膜细胞中巢蛋白(nestin)、胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)、musashi-1、波形蛋白(vimentin)和PSA-NCAM等神经干细胞特异性标志蛋白的表达.结果人羊膜组织中存在nestin/GFAP双阳性细胞,此外,还表达musashi-1、vimentin和PSA-NCAM等神经干细胞特异性标志蛋白;培养羊膜细胞中存在vimentin和PSA-NCAM阳性细胞,以及nestin/GFAP双阳性细胞.结论羊膜组织和培养羊膜细胞中有神经干细胞特异性标记蛋白的表达.     

高脂饮食诱导幼鼠脂肪肝模型的建立及其相关代谢研究

目的 通过高脂饮食诱导幼龄大鼠建立非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)模型.方法 3周龄刚离乳SD大鼠30只,雌雄各半,随机分为正常(N)组、20%高脂饮食组(HFI组)、30%高脂饮食组(HF2组).无特定病原环境下饲养6周,第6周末处死大鼠,分别进行如下检测:(1)身长、体质量、肝脏质量测量,计算肝指数;(2)采血测空腹ALT、AST、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、胰岛素、血糖水平,计算HOMA胰岛素抵抗指数;(3)肝组织匀浆,检测肝脏TG水平;(4)肝组织切片苏木素-伊红染色观察肝组织病理形态,油红O染色显示脂质沉积;(5)免疫组织化学EnVision法染色,显示肝组织固醇调节元件结合蛋白-1、瘦素的表达.组间均数比较采用One-way ANOVA、两两比较采用LSD方法进行统计学分析.结果 病理结果显示模型组大鼠肝脏符合典型的NAFLD病理特征,HF2组内各标本脂肪变性程度较均匀,无动物死亡现象发生;与N组相比,HF2组血清TC显著升高[(2.50±0.39)mmol/L对比(1.82±0.43)mmol/L,P<0.01],肝脏TG含量显著升高[(25.38±13.29)mmol/L对比(12.09±9.59)mmol/L,P<0.01],血清ALT显著升高[(69.80±18.22)U/L对比(48.00±10.45)U/L,P<0.01];与N组相比,HF1组血清TG显著下降[(0.17±0.10)mmol/L对比(0.32±0.12)mmol/L,P<0.05];血糖水平显著升高[(12.33±3.48)mmol/L对比(8.13±2.53)mmol/L,P<0.05];各组血清AST、胰岛素、及HOMA胰岛素抵抗指数差异无统计学意义;模型组肝组织固醇调节元件结合蛋白-1、瘦素表达增加.结论 30%高脂饲料饲养6周,可以诱导幼龄大鼠建立NAFLD模型,高脂饮食导致幼鼠肝脏固醇调节元件结合蛋白-1表达增加,脂肪合成增加,瘦素表达增加.     

同步辐射光源相衬成像技术在形态学研究中的应用

目的探讨同步辐射相位衬度成像在形态学研究中的应用前景。方法以北京同步辐射装置（BSRF）4W1A束线提供的硬X线，采用衍射增强成像（DEI）和类同轴成像法对经10％福尔马林固定的正常猪、大鼠、小鼠的肝、肾、肺、骨等组织进行成像，并与成像样品的相邻组织及成像后原位组织切片的光镜染色结果进行对比分析。结果衍射增强成像显示大鼠肝脏血管的逐级分支，走行方向清楚，最细可分辨直径为30μm的血管；猪肝脏中央静脉、肝小叶分界隐约可见；大鼠肾脏皮、髓质分界清楚，弓形动脉、静脉及髓质区集合管、乳头管结构清晰可见，最细可分辨直径为30μm的管道结构；小鼠肺支气管树分支清楚，重叠肺泡隐约可见。类同轴成像大鼠股骨头关节软骨及骨小梁结构清楚。结论利用同步辐射相位衬度成像方法，样品无需制片处理即可观察到光镜及其他影像学技术尚不能直接观察到的脉管系统模式结构及其与周围组织的结构关系，此外还可以观察到常规X线成像方法无法观察到的软骨影像，比较适合形态学研究。     

一氧化氮合酶与缺氧复氧所致神经细胞凋亡及银杏叶提取物的保护作用

目的　探讨一氧化氮 (NO)在缺氧复氧诱导神经细胞凋亡中的作用及中药银杏叶提取物的保护机制。方法　实验使用胎龄 16～ 17日Wistar大鼠的大脑皮层神经细胞进行原代分离培养 ;采用Wright Giemsa染色 ,光镜、透射电子显微镜观察 ;原位末端标记法确立缺氧复氧神经细胞凋亡病理模型 ;应用NADPH d组织化学方法检测神经细胞一氧化氮合酶 (NOS)的表达并用计算机图像分析系统进行定量检测。　结果　缺氧复氧可以使大鼠大脑皮层神经细胞发生凋亡 ,随缺氧时间的延长 ,凋亡细胞数渐多 ,至缺氧 8h复氧 18h达高峰 ;在缺氧 2h(H2 R0 组 )和缺氧 8h复氧 18h(R8R1 8)组中神经细胞NOS表达均显著增高 ,与正常对照组比有显著性差异 (P <0 0 1;P <0 0 5 )。EGB能显著抑制此双时相NOS活性的增强 ,并明显降低神经细胞凋亡率。　结论　缺氧复氧损伤可诱导培养的大鼠大脑皮层神经细胞发生凋亡。NOS表达增强从而使NO产生增加可能是缺氧复氧诱导神经细胞凋亡的机制之一。银杏叶提取物 (EGB)经下调NOS表达活性 ,抑制NO的产生保护培养的大鼠大脑皮层神经细胞免于凋亡。     

小鼠腹腔巨噬细胞C_3b受体

用酵母补体花环试验检测小鼠腹腔M_φ的C_3b受体,结果看到不同品种小鼠腹腔M_φ的YC花环率不同,杂种昆明小鼠明显高于纯种BALB/c及C_(57)BL/6小鼠。不同年龄小鼠M_φ的YC花环率不同,青年小鼠明显高于老年小鼠。用糖元或黄芪给小鼠腹腔注射后,M_φYC花环率及吞噬率均比对照组明显升高,用免疫抑制剂氢化可的松注射后,M_φ的YC花环率及吞噬率均比对照组明显降低,以上结果表明M_φ的C_3b受体与M_φ的功能有密切关系。     

柴黄益肾方提取物的长期毒性实验研究

目的：观察柴黄益肾方提取物（CYE）对大鼠的长期毒性,为临床安全用药提供依据.方法：将大鼠随机分为4个组,3个剂量组分别按8.8g/kg、4.4g/kg、2.2g/kg连续灌胃给予CYE 6个月,对照组给予同体积生理盐水.停药后继续观察4周,测试大鼠体重、血液学指标、血液生化学指标、脏器指数及病理组织学变化.结果：高剂量组大鼠体重增长缓慢,3个剂量组与红细胞相关指标与对照组比较小幅下降,尿素氮与对照组比较小幅上升,高中剂量组肝脏指数小幅上升,与对照组比较有显著性差异,以上改变均在正常生理范围之内.结论：CYE在临床推荐剂量下有一定的安全性.     

脱抗原胎牛骨治疗犬股骨头坏死骨缺损的实验研究

目的研究脱抗原胎牛松质骨(AECB)治疗犬股骨头坏死骨缺损的治疗效果。方法选择成年杂交犬5只,在股骨头后外侧近头颈交界处造骨缺损模型。将AECB修剪后填充入一侧缺损区内;另一侧不填充材料。术后12周取材,染色观察。结果AECB侧:交界区可见相对成熟的骨组织,周围可有编织骨形成,可见髓腔形成。对照侧:缺损区与周围组织分界清楚,缺损区周边成骨明显,缺损区内为纤维肉芽组织。材料区周围及内部可见有多量软骨带形成,其中有较多钙化的骨组织。对照侧缺损区内只有少量软骨带形成,未见软骨或新骨形成。材料周围及内部可见多量Ⅰ型胶原及少量Ⅲ型胶原。对照侧缺损区内未见Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原。结论AECB具有较好的组织相容性,可能是治疗股骨头坏死的合适材料。     

西洋参茎叶总皂苷对载脂蛋白E基因敲除小鼠血脂及脂质代谢相关基因周脂素和CD36表达的影响

目的观察西洋参茎叶总皂苷对载脂蛋白E基因敲除小鼠斑块成分及脂质代谢相关基因周脂素和清道夫受体CD36表达的影响,探讨西洋参茎叶总皂苷稳定动脉粥样硬化斑块的作用及可能机制。方法33只6~8周龄小鼠载脂蛋白E基因敲除小鼠予高脂饮食喂养13周后,待其形成成熟的动脉粥样硬化斑块后,随机分为3组:模型组、西洋参茎叶总皂苷组、辛伐他汀组(阳性对照组),每组11只。继续高脂喂养,并按体重比折算给予小鼠临床推荐剂量的相应药物治疗13周,处死动物,检测血脂,取心脏和主动脉,每只小鼠均取主动脉根部的4个切面,分别行HE染色和Movat染色,观察并计算各组小鼠主动脉粥样斑块内脂质核心大小,脂质成分与胶原成分比值。实时荧光定量PCR法检测主动脉内周脂素和CD36 mRNA的表达。结果给药13周后,与模型组比较西洋参茎叶总皂苷组小鼠主动脉斑块内脂质核心面积以及脂质成分与胶原成分比值明显减小(P<0.01),血清高密度脂蛋白显著升高(P<0.01)。而主动脉内周脂素和CD36 mRNA的表达与模型组比较均显著降低(P<0.05)。结论在临床推荐剂量上,西洋参茎叶总皂苷可通过改善载脂蛋白E基因敲除小鼠主动脉斑块内部成分,尤其是减少斑块内脂质含量来起到稳定动脉硬化斑块的作用,其机制可能与抑制脂质代谢相关基因周脂素和清道夫受体CD36 mRNA的表达有关。