消渴停对糖尿病大鼠胰岛B细胞凋亡影响的形态学观察

目的：探讨消渴停降血糖的疗效和作用机理。方法：采用STZ腹腔注射所致糖尿病大鼠模型,运用HE染色、免疫组化、原位杂交和透射电镜技术,观察消渴停对胰岛B细胞凋亡的影响。结果：模型组大鼠均有不同程度的胰岛B细胞凋亡阳性表达,而消渴停预防组大鼠胰岛B细胞分布均匀,胞核清楚,内外分泌部界限清楚;消渴停中、低剂量组大鼠胰岛中均有新生胰岛细胞和毛细血管。结论：消渴停具有预防胰岛B细胞凋亡,促进胰岛B细胞再生的作用。     

针灸大鼠血清诱导人肺癌A549细胞凋亡及相关因子的研究

目的：观察针灸血清对人肺癌细胞的A549增殖和凋亡压相关因子Fas的影响。方法：针灸剌激Wister大鼠双侧足三里、三阴交穴，此大鼠“针灸血清”分别作用于A549细胞．MTF法检测细胞生长情况，48h后流式细胞技术检测细胞凋亡率及Fas表达率。结果：Fas表达率明显增高．A549细胞生长受到明显抑制。作用48h后的细胞凋亡率分别为9．36％，5．12％。结论：针灸血清作用于A549细胞可能通过增加Fas的表达率来诱导细胞凋亡的。     

升清降糖合剂对糖尿病大鼠胰岛β细胞的保护作用及机制研究

目的:探讨升清降糖合剂(简称SQ)对糖尿病大鼠胰岛细胞Fas、Fas L蛋白表达的影响及对糖尿病大鼠胰岛β细胞的保护机制。方法:腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导建立糖尿病大鼠模型。根据不同的干预方式将糖尿病大鼠分为模型对照组、SQ低剂量组、SQ中剂量组、SQ高剂量组。干预后第8周末,摘除并制备胰腺组织标本,免疫组化染色观察胰岛细胞Fas、Fas L蛋白的表达及TUNEL法检测胰岛细胞的凋亡率。结果:空腹血糖水平,模型对照组SQ低剂量组SQ高剂量组SQ中剂量组正常对照组,SQ中、高剂量组与模型对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。胰岛细胞Fas蛋白的表达:药物干预后,与模型对照组比较,SQ中、高剂量组均减少(P0.05),SQ低剂量组无明显改变(P0.05)。胰岛细胞Fas L蛋白的表达:药物干预后,与正常对照组比较,模型对照组、SQ低、中、高剂量组均增高(P0.05),组间比较差异无统计学意义(P0.05)。胰岛细胞凋亡率:药物干预后,与模型对照组比较,SQ中、高剂量组降低(P0.05),SQ低剂量组无明显改变(P0.05)。结论:SQ能明显降低糖尿病大鼠的空腹血糖水平,抑制胰岛细胞凋亡,其机制可能是通过抑制胰岛细胞Fas蛋白的表达而实现。     

生血合剂对再生障碍性贫血患者CD34+细胞凋亡的影响

目的：探索生血合剂治疗再生障碍性贫血的疗效机理。方法：对15例再障患者骨髓CD34^ 细胞进行分离培养,并与10例正常对照组比较,观察生血合剂对CD34^ 细胞凋亡率的影响。结果：再障患者CD34^ 细胞凋亡和Fas阳性率均明显高于正常对照组;IL－3能降低CD34^ 细胞的凋亡率和Fas阳性率;IFN－γ则能增加CD34^ 细胞凋亡率和Fas阳性率;生血合剂能降低CD34^ 细胞的凋亡率和Fas阳性率,不同剂量的生血合剂有不同程度的作用,而以大于300mg/ml剂量的作用明显,而再障患者的骨髓液中同时加入IL－3和生血合剂后,其降低CD34^ 细胞的凋亡和Fas阳性率更为显著,同时加入IFN－γ和生血合剂后,CD34^ 细胞的凋亡和Fas阳性率均低于IFN－γ。结论：生血合剂能抑制CD34^ 细胞Fas蛋白的表达,延缓CD34^ 细胞的凋亡,并能调节IL－3和IFN－γ正负细胞因子,增加IL－3的抑制细胞凋亡的作用和抑制IFN的促凋亡作用。     

参麦注射液及氨茶碱对肺气肿大鼠小气道平滑肌细胞凋亡及相关基因表达的影响

目的；探讨参麦注射液及氨茶碱对木瓜蛋白酶致大鼠肺气肿小气道平滑肌细胞凋亡及其Fas/FasL系统表达的影响。方法：采用免疫组织化学及TUNEL法，检测气管内注入木瓜蛋白酶后肺气肿模型1、3、5、7、15、30天组和正常对照组，小气道平滑肌细胞凋亡及其Fas/FasL系统表达，以及参麦注射液和氨茶碱对其影响。结果：正常对照组小气道平滑肌细胞Fas、FasL表达很低，阳性率分别为（2．31±0．55）％、（1．28±0．47）％，气道内注入木瓜蛋白酶后，空白组小气道平滑肌细胞（SASMC）Fas、FasL表达随着注酶时间的延长而阳性率也明显增加，参麦注射液有抑制大鼠SASMC Fas 、FasL表达的作用，而氨茶碱作用不明显。同时，发现正常对照组大鼠SASMC凋亡百分率也很低（0．87±0．32）％，气道内注入木瓜蛋白酶后，空白组SASMC凋亡百分率随着注酶时间的延长而凋亡百分率也明显增加，用参麦注射液治疗后可使大鼠SASMC凋亡降低，而氨茶碱作用不明显。结论：在肺气肿形成过程中，Fas和FasL参与了小气道平滑肌细胞的凋亡调控，参麦注射液可能通过抑制炎性介质释放，影响Fas和FasL蛋白表达和减少小气道平滑肌细胞的凋亡，对肺气肿有一定的治疗作用。     

降糖消渴颗粒含药血清对INS-1细胞凋亡的影响

目的:研究降糖消渴颗粒含药血清对胰岛瘤细胞INS-1凋亡的影响并对其作用机制进行初步探讨。方法:应用中药血清药理学方法制备降糖消渴颗粒含药血清及空白血清,以大鼠胰岛瘤细胞INS-1为研究对象,观察降糖消渴颗粒含药血清对INS-1细胞形态的影响,并用流式细胞术检测含药血清对细胞凋亡率的影响,用Western blot的方法检测Bax和Bcl-2蛋白表达水平,初步探讨其抗凋亡机制。结果:与空白血清组比较,降糖消渴颗粒含药血清可保护INS-1细胞形态,并降低细胞凋亡率,同时降糖消渴颗粒含药血清减少了Bax蛋白表达,增加Bcl-2蛋白表达,提高了Bcl-2/Bax蛋白的比值。结论:降糖消渴颗粒含药血清可抑制胰岛瘤细胞的INS-1凋亡,其机制可能与以线粒体为核心的凋亡途径有关。     

益气化瘀法对体外培养子宫肌瘤细胞增殖凋亡相关蛋白表达影响的研究

目的：研究具有益气化瘀功效的中药复方化瘤方对体外培养子宫肌瘤细胞增殖相关蛋白（PCNA）、凋亡相关蛋白（Bcl-2、Fas／Fas—L）表达的影响。方法：制备化瘤方、宫瘤宁、米非司酮药物血清，采用免疫细胞化学方法检测药物作用后增殖细胞核抗原（PCNA），凋亡相关基因（Bcl-2）蛋白、Fas及其配体Fas—L变化。结果：3种药物血清均能明显下调PCNA、Bcl-2、Fas及其配体Fas—L蛋白在肌瘤细胞中的表达（P〈0．001）。结论：中药复方化瘤方通过降低PCNA蛋白表达，直接抑制子宫肌瘤细胞增殖；调节Bcl-2、Fas—L蛋白表达诱导子宫肌瘤细胞凋亡。     

消渴灵的降血糖作用及其降糖机理的实验研究

为观察消渴灵的降血糖作用并初步阐明其作用机理，笔者采用四氧嘧啶所制实验性糖尿病大鼠模型，以对照方法通过血糖、果糖胺、胰岛素的测定及胰岛病理形态的观察，结果显示：消渴灵具有降低实验性糖尿病大鼠高血糖的作用，而这种作用是通过保护胰岛β细胞，促进β细胞的修复，提高胰岛素的含量实现的。     

白毛藤诱导人结肠癌SW1116细胞凋亡作用及其机制研究

目的:研究白毛藤诱导人结肠癌细胞凋亡的作用及其机制。方法:荧光显微镜观察不同浓度白毛藤诱导SW1116细胞凋亡的作用,RT-PCR检测Bcl-2、Fas基因表达量的变化。结果:白毛藤具有诱导SW1116细胞凋亡的作用,并且上调Fas基因、降低Bcl-2基因的表达。结论:白毛藤促进SW1116细胞凋亡,其机制可能与激活Fas基因、抑制Bcl-2基因表达有关。     

体视学方法在分析“消渴停”胶囊对糖尿病大鼠胰岛B细胞的免疫细胞化学影响中的应用

本文通过体视学定量分析的方法，运用免疫细胞技术观察研究了“消渴停”胶囊对四氧嘧啶造成的实验性糖尿病大鼠胰岛Ｂ细胞的影响。结果实验组和消渴丸对照组的Ｂ细胞数密度（Ｎｖ）值分别为３９７９．４４×１０２ｍｍ－３、３９０９．０６×１０２ｍｍ－３，而模型组仅为２２２２．３０×１０２ｍｍ－３，这表明“消渴停”胶囊可以改善四氧嘧啶造成的大鼠胰岛Ｂ细胞的损伤，而体视学方法也使得这一分析更加直观、客观性更强     

艾易舒诱导骨肉瘤细胞凋亡的研究

目的：研究中药制剂艾易舒注射液对骨肉瘤细胞的凋亡作用及相关机制。方法：免疫组化及RT-PCR方法检测不同浓度艾易舒作用下骨肉瘤细胞的Fas表达，采用MTT法检测细胞增殖的抑制作用，流式细胞仪定量分析凋亡细胞所占比例，荧光显微镜及电子显微镜镜下观察凋亡细胞超微结构改变。结果：艾易舒可上调骨肉瘤细胞Fas表达并诱导细胞凋亡，艾易舒浓度大于25μl／ml时，细胞抑制率不再明显改变。结论：艾易舒可通过上调Fas表达诱导骨肉瘤细胞凋亡。     

补骨脂素加长波紫外线光化学疗法诱导HL-60细胞凋亡时对Fas表达的影响

目的探讨补骨脂素（PSO）加长波紫外线（UVA）光化学疗法（PUVA）诱导人白血病细胞HL-60凋亡时对Fas表达的影响。方法HL-60细胞分别予不同浓度PSO、接受（或不接受）UVA照射后共同培养，观察细胞超微结构改变，检测细胞Fas基因的表达、细胞凋亡率和Fas蛋白的表达。结果PUVA处理后的HL-60细胞超微结构出现明显的凋亡形态学改变；PSO、UVA照射及PUVA可使细胞凋亡率增加，上调HL-60细胞Fas在基因、蛋白水平的表达，PUVA的作用显著强于前两者：结论PUVA可诱导白血病细胞HL-60发生凋亡，作用强于PSO及UVA照射。PUVA诱导HL-60凋亡的途径之一为上调HL-60细胞Fas基因的表达。     

温心胶囊对大鼠实验性缺血心肌细胞凋亡及Bcl-2、Fas蛋白表达的影响

目的：探讨临床有效中药复方温心胶囊防治冠心病心肌缺血的分子作用机制。方法：采用盐酸异丙肾上腺素连续多点皮下注射制备大鼠心肌缺血模型。运用透射电镜技术及TUNEL法,观察温心胶囊对缺血损伤大鼠心肌细胞凋亡的影响,并运用免疫组化的方法观察其对细胞凋亡相关基因Bcl-2、Fas蛋白表达的影响。结果：异丙肾上腺素所致心肌缺血损伤可明显诱导大鼠心肌细胞发生凋亡,显著引发Fas基因蛋白表达增强,并轻度引发Bcl-2基因蛋白表达增强,温心胶囊可显著下调Fas基因的蛋白表达,上调Bcl-2基因的蛋白表达,明显抑制和阻断心肌细胞发生凋亡。结论：通过调节缺血心肌Bcl-2、Fas基因的蛋白表达从而抑制和阻断细胞凋亡的发生,可能是中药复方温心胶囊防治冠心病心肌缺血损伤的分子作用机制之一。     

乐尔脉对脑缺血再灌注中期大鼠海马神经细胞凋亡作用与机制

目的探讨乐尔脉对脑缺血再灌注损伤中期大鼠海马神经细胞凋亡和Fas、Bax表达的作用与机制。方法采用大鼠右侧大脑中动脉内栓线阻断法（MCA（））造成局灶性脑缺血再灌注模型，凋亡细胞原位未端标记法（TUNEL）检测海马神经细胞凋亡，免疫组化与逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）技术检测大鼠海马Fas、Bax、Caspase-3、Caspase-9 mRNA的表达，并进行图像处理分析结果。结果在缺血再灌注损伤海马组织可检测到较多的凋亡细胞，主要分布在CA1区。海马Fas mRNA表达上调，海马CA，区锥体层神经元、胶质细胞、室管膜细胞Fas蛋白表达均明显增加，与凋亡呈同样趋势。海马Bax mRNA上调，但与假手术组比较无统计学意义（P〉0．05），Bax蛋白水平却显著增加，下游Caspase-3、Caspase-9 mRNA显著上调。乐尔脉和氟桂利嗪可明显降低缺血再灌注损伤大鼠海马神经元细胞凋亡．降低Fas mRNA和Fas蛋白表达，但不降低Bax mRNA和Bax蛋白表达。结论乐尔脉限制和减少脑缺血再灌注损伤中期神经细胞凋亡的发生和发展，对局灶性脑缺血再灌注损伤具有保护作用，其作用机制可能与乐尔鼠、降低海马Fas mRNA表达而抑制神经细胞凋亡有关。     

芒果甙对白血病K562细胞端粒酶活性和凋亡的影响

目的:探讨芒果甙对K562细胞端粒酶活性及凋亡的影响,以进一步研究芒果甙抗白血病作用的分子机制。方法:用光学显微镜及透射电镜观察经芒果甙作用后K562细胞具有的凋亡形态学改变;采用流式细胞仪检测Fas蛋白的表达;采用多聚酶链式反应-酶联免疫测定法(PCR-ELISA)检测白血病细胞端粒酶活性。结果:芒果甙能抑制K562细胞端粒酶活性,随药物浓度增加和利用时间的延长,其抑制作用增强;并能诱导K562细胞凋亡,使Fas蛋白水平上调。结论:芒果甙能显著抑制K562细胞端粒酶活性,其作用可能与诱导细胞凋亡有关。在此过程中,Fas也可能参与了细胞凋亡的调节。     

参芪扶正注射液联合顺铂对人胰腺癌PANC-1细胞增殖及凋亡的影响

目的:研究参芪扶正注射液联合顺铂对人胰腺癌PANC-1细胞增殖、诱导凋亡的影响,并讨论其作用机制。方法:常规培养细胞,采用参芪扶正注射液和顺铂分别单独及联合作用于PANC-1细胞,于倒置显微镜下观察细胞形态的变化;MTT法检测不同浓度的参芪扶正注射液和顺铂单独及联合作用PANC-1细胞后的抑制率;流式细胞术检测细胞凋亡率,ELISA法检测凋亡因子Caspase-9、Fas和Survivin的含量。结果:参芪扶正注射液和顺铂均能有效抑制PANC-1细胞增殖,并诱导其凋亡,两药联合应用具有协同效应,可促进Caspase-9、Fas的表达,抑制Survivin的表达。结论:参芪扶正注射液联合顺铂能协同抑制PANC-1细胞的增殖,并诱导其凋亡,其作用机制与上调Caspase-9、Fas及下调Survivin因子的表达有关。     

梁金菇多糖诱导K562细胞凋亡的研究

目的 :探讨梁金菇多糖对K562细胞凋亡的影响及其机制。方法 :应用集落形成实验观察梁金菇多糖对K562细胞增殖的影响 ,细胞形态学、DNA凝胶电泳等检测细胞凋亡 ,逆转录 聚合酶链反应 (RT-PCR)检测凋亡相关基因FasmRNA的表达。结果 ;梁金菇多糖能明显抑制K562细胞的增殖 ,促进细胞凋亡 ,细胞凋亡率的增加呈剂量依赖性。Fas基因的表达与K562细胞凋亡呈正相关。结论 :梁金菇多糖具有抑制K562细胞增殖、诱导其凋亡的作用 ,Fas基因表达的上调可能是梁金菇多糖诱导细胞凋亡的机制之一。     

益心康对感染柯萨奇病毒B3大鼠体外心肌细胞凋亡相关因子Fas/FasL mRNA表达的影响

目的探讨益心康对体外感染柯萨奇病毒(CV)B3的新生SD大鼠心肌细胞的保护作用,分析其对细胞凋亡相关因子Fas/Fas L mRNA表达的影响。方法取新生SD大鼠心肌细胞,分成4组并进行不同干预:正常细胞对照组、病毒对照组给予感染病毒,益心康组感染病毒后加入益心康,利巴韦林组感染病毒后加入利巴韦林。用RT-PCR方法检测各组心肌细胞中Fas及Fas L mRNA的表达。结果益心康组给药48h后细胞内Fas及Fas L mRNA的表达较病毒对照组降低,差异有统计学意义(P0.05)。益心康组及利巴韦林组减轻Fas及Fas L mRNA的表达效果差异无统计学意义(P0.05)。结论益心康可有效减轻细胞凋亡相关因子Fas/Fas L mRNA的表达水平,证实该方有抑制心肌细胞凋亡的作用。     

丹参酮ⅡA通过Fas/FasL途径抑制海水诱导的人肺泡上皮细胞凋亡

目的研究海水对人肺泡上皮A549细胞凋亡的影响,探讨海水诱导A549细胞凋亡的机制及丹参酮ⅡA的保护作用。方法实验分为空白对照组、海水浸泡组和丹参酮ⅡA干预(25μg/m L)组,以40%海水浸泡A549细胞6 h,倒置相差显微镜观察细胞形态变化,利用流式细胞术检测凋亡率,蛋白质免疫印迹法(Western blotting)分析Fas L、Fas和cleaved caspase-8蛋白表达。结果与对照组相比,在海水作用下A549细胞凋亡率明显增加(P<0.01),同时Fas L、Fas和cleaved caspase-8蛋白表达也显著上调,加入丹参酮ⅡA后,细胞凋亡明显减少(P<0.01),Fas L、Fas和cleaved caspase-8蛋白表达相应下调。结论海水可导致人肺泡上皮A549细胞凋亡,其诱导凋亡的机制与Fas/Fas L介导的死亡受体信号途径有关,丹参酮ⅡA可通过此途径抑制海水诱导的A549细胞凋亡。     

扶正抑瘤颗粒对小鼠肝癌H22细胞凋亡及Fas和FasL表达的影响

目的：观察扶正抑瘤颗粒含药血清诱导小鼠肝癌H22细胞凋亡的作用和对细胞Fas、FasL表达的影响．方法：应用血清药理学方法，用不同剂量的含药血清与小氟肝癌细胞在体外共同孵育后，应用相差显微镜，流式细胞仪、电子显微镜对肿瘤细胞的生长和凋亡进行观察，用SABC法检测H22细胞Fas和FasL的表达结果：小鼠肝癌H22细胞经含药血清作用后，发生明显的形态学改变，相差显微镜下可见细胞体积缩小，折光性增强，染色质浓缩，核浆比例增大，密度增高，胞浆出现颗粒样物质。电镜下可见明显的凋亡形态变化，流式细胞仪可测到凋亡峰；SABC法显示，扶正抑瘤含药血清可上调小鼠H22细胞Fas的表达，而对FasL表达的影响不明显结论：扶正抑瘤颗粒能诱导H2：细胞发生凋亡，其机制可能与其上调H22细胞Fas的表达有关，