股骨转子间骨折手术方式与术后早期康复干预对患肢功能恢复的影响

目的:探讨股骨转子间骨折的手术方式及术后早期康复干预对患肢功能恢复的作用。方法:对36例股骨转子间骨折病例中的21例行Richard钉板内固定,15例行解剖型钢板内固定,术后进行康复治疗,包括持续被动运动(CPM、主动抗引力运动、关节屈伸运动及关节抗阻力运动。过渡性部)分负重行走,直至完全负重行走。结果:36例患者随访6个月～5年,患髋关节屈伸范围为伸至180°,屈至60°,骨折全部愈合,5例行走轻度跛行,Richard钉板固定组2例股骨头缺血性坏死。结论:股骨转子间骨折内固定术后行早期康复干预,可减轻肌肉萎缩及关节挛缩,有利于患肢关节功能恢复。     

人载脂蛋白E基因型测定方法的建立

目的：建立一种准确、简便和经济的适用于大范围测定载脂蛋白Ｅ基因型的方法。方法：自中血中采用ＴＫＭ法提取人基因组ＤＮＡ,ＰＣＲ－ＲＦＬＰ确定载脂蛋白Ｅ的基因型,硝酸银染色聚丙烯酰胺凝胶,若银染效果不佳可用硝酸脱色后重染。结果：ＴＫＭ法获得ＤＮＡ在产量和质量上均能满足ＰＣＲ需求;电泳凝胶经银染可得清晰的ＤＮＡ特异带,据此能准确确定样品载脂蛋白Ｅ的基因基因型;用硝酸溶液脱色后的凝胶经重染仍可得到清晰的图     

幽门螺杆菌感染动物模型的研究

幽门螺杆菌为一种感染率极高的病原菌,动物模型的建立对疫苗研制、临床治疗及致病机制的研究有着重要的作用。本文综述了近年来国外幽门螺杆菌感染动物模型的研究进展,并对几种成功的动物模型及存在的问题作了介绍。     

突变型人白细胞介素-2基因在大肠杆菌中的表达

目的：建立突变型人白细胞介素-2（rhIL-2）基因大肠杆菌表达系统，为rhlL-2的生产及临床应用奠定基础。方法：自人胎盘组织中提取总RNA，逆转录PCR（RT-PCR）扩增突变型人IL-2基因cDNA，通过对下游引物的设计将编码125位半胱氨酸（c125）的密码子TGT更改为编码丝氨酸的密码子TCT。构建表达型重组质粒pBV-IL-2，温度诱导表达．表达产物行SDS一聚丙烯酰氨凝胶电泳（SDS-PAGE）及WesternBlot鉴定。结果：DNA序列分析证实，重组质粒pBV-IL-2含有突变型人IL-2编码序列及正确的开放读码框架。SDS-PAGE显示，诱导表达碎菌后的沉淀中有分子质量大小约为16．5ku的外源蛋白产生。经Western印迹（WesternBlot）证明为rhlL-2。结论：成功构建了突变型人白细胞介素-2大肠杆菌表达系统。表达产物主要以包涵体的形式存在于碎菌后的沉淀中。     

TNF-a与2型糖尿病胰岛素抵抗的关系

目的:探讨血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平以及TNF-α基因多态性与2型糖尿病胰岛素抵抗的关系。方法:选取2型糖尿病肥胖患者50例,非肥胖患者50例,健康对照50例,应用酶联免疫法检测血清中TNF-α水平,并应用PCR-RFLP方法检测TNF-α-308启动子区基因多态性,所有数据以SPSS 10.0软件进行分析。结果:糖尿病肥胖组血清TNF-α水平较非肥胖组及对照组明显增高,在糖尿病组中TNF-α-308A等位基因携带者体质指数(BMI)及胰岛素抵抗均高于TNF-α-308G等位基因携带者。结论:TNF-α与BMI和胰岛素抵抗明显相关。携带TNF-α-308A等位基因者更易于发生胰岛素抵抗。     

肠出血性大肠杆菌0157:H7 LexA蛋白的表达、纯化及鉴定

目的 对EHEC 0157:H7 lexA达、纯化,并检测其免疫活性.方法 lexA基因片段插入表达载体pET22b( ),在E..coli BL21(DE3)中表达.包涵体经洗涤并用8 mol/L尿素溶解,Heparin Agrose亲合柱层析为第-步纯化,Superdex75凝胶过滤层析作为第二步精细纯化,HPLC测定LexA蛋白的浓度,将纯化的kxA蛋白经注射途径免疫家兔,制备兔抗lexA血清,采用免疫双扩、ELISA及Western blot分析LexA的免疫活性.结果 lexA以包涵体形式表达,表达产量高达总菌体蛋白的40%左右,经Heparin Agrose亲合柱层析和凝胶过滤层析两步组合纯化目的 蛋白,经HPLC测定目的 蛋白的最终纯度为98%,表达及纯化的lexA具有良好的免疫活性.结论 在E.coli BL21(DE3)中表达的LexA蛋白具有良好的免疫活性.     

甲状腺素对甲状腺功能减低大鼠子代海马突触素表达的影响

目的:探讨不同剂量甲状腺素对甲状腺功能减低孕鼠子代海马突触素表达的影响.方法:选取断乳1个月的Wistar大鼠160只,雌雄各半.将雌性大鼠随机分为正常组,甲低对照组,甲低孕鼠妊娠1～17 d(妊早期甲低)补充甲状腺素高、中、低剂量组,甲低孕鼠妊娠18～20d(妊晚期甲低)补充甲状腺素高、中、低剂量组共8组,每组10只.各组均饲以低碘饲料,对照组饮用碘酸钾溶液,总碘摄入量相当于大鼠生理碘需要量,其余7组饮用去离子水.3个月后与正常雄性大鼠交配.高、中、低剂量组每100 g体质量每天分别补充甲状腺素3.5、2.0、0.5 μg.分别于新生当天、生后7、14、21及28 d,取8组子代大鼠的右侧大脑半球,应用免疫组织化学SABC法及图像分析技术检测海马突触素的表达.结果:正常组的突触素表达水平均高于同时期甲低对照组(P＜ 0.01).在新生当天,妊晚期甲低中剂量组与甲低对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05),妊早、晚期甲低低剂量组突触素表达水平均低于甲低对照组(P＜0.01);妊早期甲低中、高剂量组,妊晚期甲低高剂量组突触素表达水平均高于甲低对照组(P＜0.01).生后7、14、21及28 d,妊早、晚期甲低低剂量组与甲低对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05),其他各组的突触素表达水平均高于甲低对照组(P＜0.01).结论:孕鼠甲低导致子代大鼠海马突触素表达下降,甲低孕鼠子代大鼠海马突触素的表达受补充甲状腺素剂量及孕期的影响.     

泌尿外科腹腔镜技术阶梯式教学模式的建立与应用

摘要：目的探讨针对进修医生的泌尿外科腹腔镜手术技能教学新模式。方法选取2010—2012年间在我院学习的117名进修医生,评估其腹腔镜掌握程度,针对不同程度的学生采用不同的多媒体教学、模拟器训练、活体动物模拟手术、观看手术录像及协助完成真实病例等项目进行阶梯式训练。结果所有进修医生均能熟悉腹腔镜及配套设备的结构和性能,熟悉腹腔镜下的解剖标志及其在临床应用中的价值,掌握腹腔镜基本操作技能,并可在上级医生指导下完成后腹腔镜肾切除术或肾上腺腺瘤切除术等常规手术。结论针对泌尿外科进修学员的具体情况,开展腹腔镜技术阶梯式教学,学习效果显著。     

重叠延伸PCR法在合成人骨保护素N端编码序列中的应用

目的：获得人骨保护素(OPG)N端D1-D4结构域编码序列。方法：OPGN端D1-D4域仅由2个外显子编码。采用改良方法自人血标本提取基因组DNA，以此DNA作为模板，PCR分别扩增OPG基因外显子2和外显子3，并使外显子2的3’引物和外显子3的5’引物具有相互重叠的一段序列。以2种PCR产物的混合物作为模板，采用重叠延伸法再次进行PCR，扩增产物克隆于载体pGEM—Teasy进行序列分析。结果：PCR扩增得到N端编码序列，序列分析证实该序列完全正确。结论：重叠延伸PCR法合成人OPGN端编码序列的完成为基因工程研制有生物活性蛋白提供了可行的技术手段。     

肺良性肿瘤73例微创手术诊治中的体会

目的探讨微创手术在诊断和治疗肺良性肿瘤中的应用价值.方法 2007年7月至2010年12月共收治肺良性肿瘤患者73例,69次（同期双侧3次）微创手术,其中包括VATS（video-assisted thoracoscopicsurgery）电视胸腔镜手术和VAMT（video-assisted mini-thoracotomy）电视胸腔镜辅助小切口手术,切除瘤体72个.手术方式：肺楔形切除术22例（其中3例双侧VATS）,肺叶切除术11例,肺肿瘤摘除术36例,中转开胸4例.VATS为2-3个小切口;VAMT为辅助5～8cm左右小切口.结果全组无围手术期死亡病例,术中出血量（VATS：50～130 mL）/（VAMT：110～200 mL）;手术时间（VATS：110 min/VAMT：125 min）;住院时间（VATS：4～5 d）/（VAMT：5～7 d）;术口平均长度为5～10 cm.术后病理：结核球10例,炎性假瘤18例,慢性肉芽肿11例,肺囊肿6例,错构瘤21例,硬化性血管瘤3例.结论微创手术在肺良性肿瘤是一种值得推广的诊断和治疗方法,有广泛的开展价值.