基于代谢组学的幼龄大鼠血尿湿热证随时间变化规律的研究

目的：基于代谢组学NMR技术，寻找IgA肾病幼龄大鼠湿热证模型的标志性代谢物及相关代谢通路，为进一步药物干预寻找最佳时机提供理论依据。方法：选取72只3周龄雄性SD大鼠，按随机数字表法分为对照组和模型组，每组36只。构建大鼠IgA肾病模型。观察12周，每周大鼠称重并收集尿液，进行尿常规、代谢组学检测；第4、6、8、10、12各周采血进行生化指标、细胞因子、肾组织病理检测；代谢组学采用模式识别及多元变量统计学分析，筛选出可能的大鼠血尿湿热证标志物并建立相关代谢通路，比较一般情况、生化指标、细胞因子、肾组织病理等，探寻其时间变化规律。结果：与对照组比较，模型组：第5周起体质量增长速度放缓且出现湿热证候；尿检示第6周出现血尿，第8周出现蛋白尿；生化指标示TG、Chol、Scr均增高；肾组织病理示肾小球系膜区增殖性改变，实验第8、10、12周逐渐加重；免疫荧光可见IgA沉积；胞因子示核因子κB与转化生长因子-β1的表达分别自第6周、第10周起显著增高，与肾组织病理改变相对应；代谢组学判别出潜在的标志物14个，主要代谢路径6条，且随时间呈现一定的改变规律。结论：本实验初步探索出与中医血尿“湿热证”相关联的尿代谢组学的标志物及相应代谢通路，并提示尿代谢组学的改变早于生化、细胞因子、肾病理组织等其他微观层面，为进一步准确把握本病的干预时间点奠定了实验基础。     

基于微生物-代谢组学研究尿毒清颗粒改善大鼠慢性肾病的作用及机制

采用微生物组学结合代谢组学的方法，研究尿毒清颗粒干预SD大鼠慢性肾脏疾病的作用，并初步探究其作用机制。采用腺嘌呤诱导的方法制备SD大鼠慢性肾脏疾病模型，模型构建成功后，将动物随机分为阴性对照组和尿毒清颗粒处理组，同时设立正常对照组，每组8只。给药4周后，分别收取动物粪便及血清，采用16S rDNA测序分析肠道微生物丰度、多样性以及功能预测；采用LC-MS进行高通量测序检测动物血清代谢物；利用MetPA数据库筛选出慢性肾脏疾病大鼠潜在的生物学标志物，并进行代谢通路的富集分析。Spearman法分析2个组学之间的相关性。结果显示，尿毒清颗粒可有效改善慢性肾脏疾病大鼠体质量减轻、肾脏功能相关生化及外观指标。16S rDNA测序结果表明，尿毒清颗粒可调节慢性肾脏疾病大鼠肠道菌群的多样性和组成；肠道微菌群的改变，影响了氨基酸生物合成和代谢、脂类代谢、碳水化合物代谢等功能代谢途径。LC-MS检测结果显示，相对于阴性对照组，尿毒清颗粒处理组动物有15种代谢物发生逆转，其中有11种潜在标志代谢物显著上调，有4种潜在标志代谢物显著下调；主要涉及5条氨基酸代谢通路，且与肠道菌群的改变具有显著相关性。尿毒清...     

小儿厌食症模型大鼠血清代谢组特征探析

目的:探析小儿厌食症模型大鼠血清代谢组特征,从代谢组角度探析小儿厌食症生物学本质。方法:采用基于液相色谱质谱联用的代谢组学技术检测小儿厌食症模型大鼠血清代谢物变化,筛选出小儿厌食症模型代谢差异物,分析其代谢通路及生物学意义。结果:模型组大鼠血清代谢物与空白组有显著差异,经数据处理,筛选出鞘氨醇、谷氨酸、柠檬酸等30个代谢差异物;涉及脂类代谢、氨基酸代谢及三羧酸循环等14条代谢通路。结论:模型组大鼠经特制高脂饲料喂养后产生病理性代谢产物,可引起脂质代谢、氨基酸代谢和能量代谢的紊乱,最终导致厌食症的发生;此外,还发现小儿厌食症和肠道菌群失调有很大相关,还需进一步探讨研究。     

基于代谢组学探讨加参方对慢性心力衰竭模型大鼠的作用及机制

[目的] 在加参方治疗慢性心力衰竭（CHF）的药效基础上,利用代谢组学技术探究其抗心力衰竭的作用机制。[方法] 采用结扎大鼠左冠状动脉前降支造成心肌梗死后形成CHF模型,连续给药4周,通过超声检测心脏功能、苏木精-伊红（HE）染色检测心肌病理变化、马松（Masson）染色检测心肌纤维化、酶联免疫吸附剂测定（ELISA）检测心肌组织N-末端脑利钠肽原（NT-proBNP）水平,探究加参方对CHF的药效作用;采用超高效液相色谱-飞行时间质谱联用技术（UPLC-Q-TOF-MS）技术对大鼠血清和尿液中小分子代谢物进行非靶向代谢组学检测并进行多元统计分析,寻找疾病发生的代谢标志物,最后采用MetaboAnalyst代谢组学分析平台构建加参方治疗CHF的代谢通路。[结果] 加参方可显著升高CHF大鼠心脏左室射血分数（EF）和左室短轴缩短率（FS）,减轻CHF大鼠心肌病理损伤和心肌纤维化,降低心肌胶原容积分数（CVF）,降低CHF大鼠心肌组织NT-proBNP水平。CHF大鼠血清得到33个代谢标志物,主要为脂质和氨基酸及其衍生物,尿液得到38个代谢标志物,主要为氨基酸及其衍生物、长链脂肪酸和核苷类;与模型组比较,加参方组大鼠血清和尿液中分别有21个和29个代谢物有回调趋势。加参方主要通过甘油磷脂代谢、鞘脂代谢及丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢通路干预血清代谢标志物,通过泛酸和CoA生物合成、组氨酸代谢及嘌呤代谢通路干预尿液代谢标志物。[结论] 加参方主要通过脂质代谢、氨基酸代谢、能量代谢和嘌呤代谢通路改善CHF。     

基于代谢组学探讨理脾调脂胶囊改善高脂血症大鼠脂代谢紊乱的作用机制

目的:利用代谢组学的策略和方法,通过研究理脾调脂胶囊对高脂血症大鼠模型脂代谢的影响,探讨理脾调脂胶囊对调控脂代谢的作用机制。方法:将大鼠随机分为正常组、模型组与理脾调脂胶囊实验组,对模型组与实验组采用脂肪乳灌胃的方法复制高脂血症大鼠模型,造模成功后对理脾调脂胶囊实验组大鼠灌理脾调脂胶囊药液进行干预,28天后腹主动脉取血,采集血清样本,利用全自动生化分析仪检测血脂水平;采用UPLC-Q-TOF-MS对不同组别的血清样本进行检测,运用主成分分析(PCA)和偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)筛选正常组、模型组和理脾调脂胶囊实验组之间的差异代谢物,利用质谱信息和公共数据库检索对差异代谢物进行鉴定并进行KEGG代谢通路分析。结果:宏观药学显示模型组大鼠血脂水平明显升高,理脾调脂胶囊实验组大鼠血脂水平明显降低,接近正常组;代谢组学研究发现三组大鼠的血清脂质质谱分离良好,并鉴定出与高脂血症相关的肌酸、肌酐、柠檬酸、异柠檬酸、亮氨酸、异亮氨酸、尿酸、缬氨酸等8个潜在生物标志物,涉及的代谢通路包括氨基酸代谢、三羧酸循环、嘌呤代谢等。结论:理脾调脂胶囊对高脂血症脂代谢紊乱大鼠体内的差异代谢物有一定的回调作用,其主要作用机制与调节三羧酸循环,改善氨基酸代谢以及嘌呤代谢密切相关。     

基于代谢通路调控的沙棘籽油抗抑郁作用机制研究

目的采用1H-NMR代谢组学技术结合KEGG数据库,分析沙棘籽油干预慢性温和不可预知应激(CUMS)抑郁大鼠血清和尿液中代谢物及其代谢通路的变化,探讨沙棘籽油抗抑郁的作用机制。方法复制CUMS模型,同步给予沙棘籽油干预,连续4周。采集大鼠血清和尿液进行1H-NMR检测,利用代谢组学技术分析血清和尿液中代谢物的变化,搜索KEGG数据库分析代谢通路。结果在血清和尿液中共寻找出17个与抑郁症相关的潜在生物标志物,其中血清中有9个,包括与对照组比较升高的脂质、β-羟基丁酸、乳酸、N-乙酰糖蛋白和降低的丙氨酸、甜菜碱、氧化三甲胺、α-葡萄糖、β-葡萄糖;尿液中有8个,包括与对照组比较升高的琥珀酸酯、天冬氨酸盐和降低的醋酸、2-酮戊二酸、柠檬酸、三甲胺、甜菜碱、苯丙氨酸。沙棘籽油干预后上述差异代谢物均出现了不同程度的回调,接近对照组水平。结论沙棘籽油主要是通过调节体内的能量代谢、脂质代谢、氨基酸代谢、甲胺代谢和神经递质的合成等代谢通路发挥抗抑郁作用。     

基于网络药理探究糖尿病肾病进展相关代谢物靶标的分子机制

目的:应用网络药理技术,分析糖尿病肾病进展相关代谢物及其分子靶标和作用机制。方法:基于前期代谢组学筛选出的与糖尿病肾病进展高度相关的代谢物,使用京都基因与基因组百科全书（KEGG）、PubChem数据库,检索提取与代谢物有关的有效靶标基因,并进行通路分析;采用Cytoscape 3.2.1软件ClueGO进行代谢物基因靶标的通路、生物过程、细胞组分、分子功能进行富集分析,并绘制网络图。结果：本研究共分析了31个与糖尿病肾病进展相关的代谢物;应用KEGG和PubChem数据库,共提取了31个代谢物,涉及代谢通路82条,涉及基因靶标252个;代谢物的基因靶标共涉及157条通路。代谢物基因靶标主要集中在谷氨酸、色氨酸、苯丙氨酸等代谢物。基于代谢物-基因靶标网络图核心节点进行解析,提示谷氨酸是连线最多的节点,其次是酪氨酸、谷氨酰胺、色氨酸等;连线最多的通路包括糖酵解/糖异生,脂肪酸降解、氨基酸合成等;最集中的基因靶标为NOS2、NOS3、ALDH7A1等。基因靶标的富集分析结果表明,代谢物基因靶标主要集中在氨基酸代谢、脂肪酸、氮代谢等。基因靶标涉及的细胞组分分析提示糖尿病肾病进展主要与线粒体、突触膜、突触前膜等细胞部位异常有关。疾病进展涉及的分子功能包括氨基酸、羧酸、维生素拼接等。结论：通过对代谢物基因靶标进行深入的网络分析提示,氨基酸代谢异常在糖尿病肾病进展中至关重要,是参与机体免疫代谢调节的关键节点。     

基于UPLC-Q-TOF-MS的五味子保肝作用代谢组学研究

该文旨在考察五味子对CCl4致小鼠肝损伤的保护作用,探讨其对血清中代谢产物的影响,寻找五味子保肝功效的潜在生物标志物,以期初步探索五味子保肝作用的科学内涵。采用CCl4建立小鼠肝损伤模型,观察小鼠肝组织病理切片,测定小鼠血清中ALT,AST等生化指标的含量,采用基于UPLC-Q-TOF-MS的代谢组学技术,并结合主成分分析(PCA)和正交校正的偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)等方法筛选、鉴定肝损伤相关的生物标志物。结果表明空白组、模型组以及给药组的代谢物能够显著区分,发现并初步鉴定了50个差异化合物并富集了7条五味子保肝功效可能相关的代谢通路。该实验进一步验证了五味子的保肝功效,并初步探讨了五味子的保肝功效可能与氨基酸代谢,维生素代谢以及甘油磷脂代谢等相关代谢通路有关。     

高分辨非靶代谢组学方法研究臻通集胶囊对高脂血症模型大鼠的影响

目的:通过高分辨非靶代谢组学方法探讨臻通集胶囊对高脂血症模型大鼠的作用特点和机制。方法:无特定病原体级SD大鼠40只,随机取6只作为对照组,给予正常饲料,其余所有大鼠给予高脂饲料喂养,连续4周造模成功后,分为模型组和给药组。高、中、低剂量给药组大鼠分别灌胃给予臻通集胶囊0.432、0.216、0.108 g·kg^(–1),每日1次,连续给药8周。末次给药后将动物麻醉,腹主动脉采血,离心分离血清,全自动生化仪检测血清中血脂水平。取部分肝组织用于高分辨非靶代谢组学的研究。结果:臻通集胶囊给药后,高、中剂量组大鼠的三酰甘油、胆固醇、低密度脂蛋白,高剂量大鼠的高密度脂蛋白较模型组明显降低,且差异具有统计学意义。与对照组比较,模型组大鼠共检测出138个差异代谢物;与模型组比较,给药组大鼠共检测出123个差异代谢物,正离子模式的72个差异代谢物有24个在给药后得到了纠正,负离子模式的51个差异代谢物有9个在给药后得到了纠正。代谢过程涉及多个信号通路,主要包括哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、环磷酸鸟苷酸依赖性蛋白激酶(cGMP-PKG)、叉头框蛋白O(FoxO)、蛋白质消化和吸收、嘧啶代谢、微生物消化和吸收、甘油磷脂代谢、氨基酸生物合成、嘌呤代谢等信号通路。结论:臻通集胶囊能够有效改善高脂血症大鼠的血脂水平,与其能够调节嘌呤代谢、嘧啶代谢、甘油磷脂代谢、mTOR信号通路,cGMP-PKG信号通路等密切相关。     

基于1H-NMR代谢组学探讨柴胡-白芍药对“疏肝解郁”的代谢调控途径

目的:利用核磁共振氢谱(~1H-NMR)代谢组学技术,分析慢性不可预知温和应激(CUMS)抑郁模型大鼠肝脏内源性代谢物的变化,观察柴胡-白芍药对对此的调节作用,分析柴胡-白芍药对疏肝解郁相关的代谢通路。方法:将SD大鼠随机分为对照组、CUMS模型组、阳性药文拉法辛组和柴胡-白芍药对高(CBH)、低(CBL)剂量组。通过抑郁症的传统药效学指标(大鼠体质量、旷场测试、糖水偏爱实验及强迫游泳实验)评价柴胡-白芍药对的药效。采用~1H-NMR代谢组学技术结合多元统计分析方法,分析CBH、CBL组大鼠肝脏代谢物的变化,鉴定可靠的生物标志物并进行代谢通路分析。结果:与对照组比较,模型组大鼠药效学指标均有显著变化,即体质量,旷场穿越格数、直立次数,糖水偏爱率降低(P0.001)及强迫游泳不动时间增加(P0.001);柴胡-白芍药对能显著改善模型组大鼠的抑郁样行为。~1H-NMR代谢组学分析显示,CUMS会使大鼠体内24个代谢物和10条代谢通路紊乱,柴胡-白芍药对能显著回调其中的21个差异代谢物,对其中7条代谢通路产生影响。结论:柴胡-白芍药对能够改善CUMS抑郁模型大鼠的抑郁样症状,可能是通过调节大鼠体内氨基酸代谢和能量代谢等通路实现的。     

Serum Metabolomic Profiling in a Rat Model Reveals Protective Function of Paeoniflorin Against ANIT Induced Cholestasis

Cholestasis is a leading cause of hepatic accumulation of bile acids resulting in liver injury, fibrosis, and liver failure. Paeoniflorin displays bright prospects in liver protective effect. However, its molecular mechanism has not been well‐explored. This study was designed to assess the effects and possible mechanisms of paeoniflorin against alpha‐naphthylisothiocyanate‐induced liver injury. Ultraperformance liquid chromatography coupled with quadrupole time‐of‐flight combined with principle component analysis and partial least squares discriminant analysis were integrated to obtain differentiating metabolites for the pathways and clarify mechanisms of disease. The results indicated that paeoniflorin could remarkably downregulate serum biochemical indexes and alleviate the histological damage of liver tissue. Different expression of 14 metabolites demonstrated that paeoniflorin mainly regulated the dysfunctions of glycerophospholipid metabolism and primary bile acid biosynthesis. Moreover, several pathways such as arginine and proline metabolism, ether lipid metabolism, and arachidonic acid metabolism were also related to the efficacy. In conclusion, paeoniflorin has indicated favorable pharmacological effect on serum biochemical indexes and pathological observation on cholestatic model. And metabolomics is a promising approach to unraveling hepatoprotective effects by partially regulating the perturbed pathways, which provide insights into mechanisms of cholestasis. Copyright © 2016 John Wiley & Sons, Ltd.     

逍遥散对肝郁脾虚证和肝损伤模型大鼠干预作用的代谢组学研究

目的：利用代谢组学方法探讨肝郁脾虚证和肝损伤模型的共同本质及逍遥散的干预作用。方法将40只SD大鼠按随机数字表法分为空白对照组、肝郁脾虚证模型组、肝郁脾虚证给药组、肝损伤模型组、肝损伤给药组,每组8只。采用夹尾激怒致肝郁联合番泻叶致脾虚的方法制备肝郁脾虚证模型,采用四氯化碳致肝损伤法制备肝损伤大鼠模型。肝郁脾虚证给药组、肝损伤给药组灌胃2 g/ml逍遥散液,其余各组灌胃等体积生理盐水,连续给药28 d。末次给药后12 h,采用气相色谱-质谱法分析各组大鼠血清代谢物谱及含量变化,采用 HE 染色法观察各组大鼠肝组织病理学变化。结果肝郁脾虚证模型组和肝损伤模型组大鼠肝组织均出现细胞核萎缩、崩解、变性坏死并伴有淋巴细胞浸润等病理改变,且血清中甘氨酸、琥珀酸、丙酸、蛋氨酸、谷氨酰胺、苯丙氨酸含量较空白对照组升高(P＜0.05)。逍遥散可降低血清中甘氨酸、琥珀酸、丙酸、蛋氨酸、谷氨酰胺、苯丙氨酸含量(P＜0.05)。结论逍遥散可调节一碳单位、含硫氨基酸、芳香族氨基酸等特殊代谢及三羧酸循环,发挥肝保护作用。     

食蟹猴急性酒精性脂肪肝脾胃湿热证模型的建立与评价初探

目的:建立急性酒精性脂肪肝脾胃湿热证食蟹猴模型,为酒精性脂肪肝的中医药现代研究提供研究工具。方法:将6只健康成年雄性食蟹猴按体质量随机分为正常组、模型组,每组3只,采用60d单纯自由饮酒建立急性酒精性脂肪肝病证结合食蟹猴模型。每日观察食蟹猴的外在宏观表征,制定中医证候积分标准,对每只食蟹猴进行中医证候综合评分。采用全自动生化分析仪检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)的含量,应用ELISA检测血清胃泌素(GAS)、胃动素(MTL)含量,肝脏B超及HE染色观察肝组织病理学变化,计算肝指数变化。结果:与正常组比较,模型组第60天时血清ALT、AST、TC、TG、GAS、MTL含量及肝指数均显著升高(P<0.05,P<0.01),肝脏B超、HE染色显示模型组肝组织出现弥漫性脂肪样病变,中医证候积分显示该模型为脾胃湿热证模型。结论:60d梯度饮酒可以成功建立急性酒精性脂肪肝脾胃湿热证食蟹猴模型,该模型符合人类酒精性脂肪肝病理特点和中医脾胃湿热证证候特点,是较为理想的酒精性脂肪肝脾胃湿热证模型。     

经皮下注射CCl_4结合饮用乙醇致大鼠肝硬化模型的研究

目的本实验通过对大鼠经皮下注射CCl4结合饮用乙醇制作肝硬化模型,观察肝脏显微结构、超微结构及血清学指标的变化,以期为今后更有效地研究肝硬化提供依据。方法健康雄性Wistar大鼠模型组、对照组各10只,模型组大鼠经皮下注射CCl4结合饮用乙醇14周,应用HE染色和电镜技术观察肝脏显微结构和超微结构变化并对血液进行血清学指标LN、CⅣ、PCⅢ、HA的检测。结果与对照组相比,模型组显微及超微结构出现了肝硬化的表现,血清学指标提示肝纤维化明显。讨论对大鼠经皮下注射CCl4结合饮用乙醇可以成功制作肝硬化模型。     

当归补血汤对大鼠肝纤维化与肝脏脂质过氧化的影响

目的观察当归补血汤对大鼠肝纤维化的作用及其影响肝脏脂质过氧化的抗肝纤维化作用机制。方法Wistar雄性大鼠采用四氯化碳（CCl4）皮下注射及高脂低蛋白饮食复合因素诱导复制大鼠肝纤维化模型。模型大鼠随机分为模型组(14只),当归补血汤组(14只);另设正常组(10只)。自造模之日起,当归补血汤组以6 g/kg的大鼠体重剂量灌胃,每日1次,共6周。正常组与模型组灌胃以等量生理盐水。HE染色观察肝组织炎症与脂肪变性,天狼猩红染色观察肝组织胶原沉积。试剂盒法测定血清肝功能指标,包括丙氨酸转氨酶(ALT)与天冬氨酸转氨酶(AST)水平、总胆红素(TBil)与白蛋白(Alb)含量。生化法测定肝组织甘油三脂(TG)与丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性,Jamall氏法测定肝组织羟脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)含量,Western印迹法分析肝组织Ⅰ型胶原蛋白表达。结果与正常大鼠比较,模型大鼠血清ALT、AST水平及TBil含量明显升高,Alb含量明显降低;肝组织脂肪变性与胶原沉积明显,TG与MDA含量增加,SOD活性降低（均P<005）。当归补血汤组大鼠肝组织脂肪变性与胶原病理沉积显著改善;血清ALT、AST水平及TBil含量降低,血清Alb含量升高;肝组织Hyp、TG与MDA含量降低,SOD活性提高（均P<005）。结论当归补血汤具有良好的抗实验性大鼠肝纤维化作用,其主要作用机制与抗肝脏脂质过氧化损伤有关。     

人工虫草菌丝及其组分对肝纤维化大鼠胆汁酸代谢的影响及其机制研究

胆汁酸是胆固醇在肝中降解的代谢产物,在肝内蓄积可引起肝脏疾病,可造成肝损伤以致肝纤维化。实验采用二甲基亚硝胺(DMN)大鼠肝纤维化模型,分为正常组、模型组和4个给药组。造模4周,给药组分别灌胃给药2周,模型组与正常组同时给予等量灭菌水。实验以血清胆汁酸为标识物,通过检测并观察肝功能指标和胆汁酸代谢的变化,辨识与肝损伤相关的胆汁酸类靶标,首次从胆汁酸代谢水平评价人工虫草菌丝及其组分对肝纤维化大鼠逆转作用并探讨其可能的机制。主要研究内容和结果如下:对牛磺氨酸结合型胆汁酸、甘氨酸结合型胆汁酸和游离型胆汁酸共17种内源性胆汁酸进行了定量分析,结合血清生化指标检测、病理组织切片检查对模型进行了肝损伤评价。造模后ALT,AST活性和TBil含量都显著性升高,Alb含量显著降低。病理组织切片检查HE染色显示模型组正常肝小叶结构破坏,肝细胞水肿,汇管区结缔组织增生,给药组不同程度病理变化减轻。虫草菌丝及其组分可能主要通过激活与HDCA,TCA,TCDCA,TLCA,TUDCA,UDCA,THDCA代谢有关的受体或阻断相关的信号通路而影响大鼠体内胆汁酸的代谢。     

三七总皂苷对非酒精性脂肪肝大鼠的改善作用及对NO/iNOS/NF-κB通路的影响

目的研究三七总皂苷对非酒精性脂肪肝大鼠的改善作用及对NO/iNOS/NF-κB通路的影响。方法96只雄性SD大鼠随机分为空白组,模型组,辛伐他汀组(2 mg/kg),三七总皂苷低、中、高剂量组(4.5、9、18 mg/kg),每组16只,灌胃给药(10 mL/kg),分别于第8、12周取材,检测2个时间点各组大鼠外周血丙氨酸转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)和肝脏NO、iNOS(诱导型一氧化氮合酶);HE染色观察肝组织病理学形态;免疫组化法检测iNOS在肝脏细胞中的表达情况;Western blot法检测NF-κB(核因子-κB)、p-NF-κB(磷酸化核因子-κB)、IKKα(IκB激酶-α)、p-IKKα(磷酸化IκB激酶-α)、IκBa蛋白表达量。结果与模型组比较,给药8周后,大鼠血清各项生化指标均出现了显著下降(P<0.05);给药12周后,与第8周结果比较,模型组血清生化指标显著增加(P<0.05),而给药组增加趋势并不显著,且三七总皂苷给药剂量在抑制非酒精性脂肪肝大鼠肝脏脂质沉积方面存在剂量-效应关系。三七总皂苷可显著下调肝组织中NO、iNOS水平及NF-κB信号通路蛋白的表达量(P<0.05)。结论三七总皂苷可有效降低非酒精性脂肪肝大鼠转氨酶水平及血脂指标,同时可以抑制NO/iNOS/NF-κB信号通路,减少肝损伤,是三七总皂苷降脂护肝、减轻炎症反应的可能机制之一。     

Effect of a urinary preparation on liver injury by short-term carbon tetrachloride treatment in rats.

The hepatoprotective effect of a preparation of human urine (PHU) was assessed against short-term carbon tetrachloride (CCl4) treatment in rats. Significant prevention of liver injury by PHU was found after CCl4 treatment, judging by the changes of serum biochemical parameters, and hepatic protein and triglyceride contents. The increased liver lipid peroxidation, and decreased liver vitamin C concentrations observed after CCl4 treatment were significantly prevented by PHU administration. The increase in liver glutathione (GSH) contents observed after CCl4 treatment was further increased by PHU treatment. Liver catalase activity decreased after CCl4 treatment, while liver superoxide dismutase and GSH-peroxidase activities did not change. PHU administration further inhibited the decrease in liver catalase activity after CCl4 treatment. These results indicate that PHU administration can prevent liver injury induced by CCl4 in rats by inhibiting enhanced lipid peroxidation and by improving disrupted active oxygen metabolism in the injured liver.     

基于肝脏代谢组学的当归“活血解郁”作用机制研究

目的 研究当归Angelicae Sinensis Radix“解郁”功效与“活血”功效的相关性及机制。方法 采用慢性不可预见性温和应激（chronic unpredicted mild stress，CUMS）结合孤养复制大鼠抑郁模型，以行为学指标及血流变指标评价当归对CUMS大鼠抑郁样症状及血液黏度的调节作用，进行主成分分析和相关性分析量化抗抑郁指标和血流变指标间的相关性。应用¹H-NMR代谢组学技术检测CUMS大鼠肝脏中内源性代谢物的变化，指认相关差异代谢物并构建代谢通路。结果 造模4周后，大鼠体质量、糖水偏爱率、旷场实验穿越格数、直立次数均显著降低（P<0.01），高、中、低切变率下的全血黏度均显著升高（P<0.01）。给予当归干预后，大鼠的行为学指标和血流变指标均有不同程度的改善。相关性分析结果显示，行为学综合指标与血流变综合指标呈显著负相关。代谢组学结果显示，在筛选得到的19个潜在生物标志物中，当归能显著回调异亮氨酸、缬氨酸、乳酸、丙氨酸、柠檬酸等8种差异代谢物，涉及缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸合成，乙醛酸和二羧酸代谢及甘油脂代谢等5条代谢通路。结论 当归的“解郁”功效与其“活血”功效存在显著相关性，其机制可能与调节氨基酸代谢、碳水化合物代谢、脂质代谢等代谢途径有关。     

Metabonomics study of liver and kidney subacute toxicity induced by garidi-5 in rats

Objective Metabonomics was used to analyze and explore the biomarkers and possible mechanisms of liver and kidney subacute toxicity induced by garidi-5 in rats. Methods Taking garidi-5 as the target drug and SD rats as the research objects, each administration group except the normal group was intragastric administration of the corresponding drug solution for 28 d. The serum, liver and kidney samples of rats were detected by metabolomics and characterized by principal component analysis (PCA) and partial least squares discriminant analysis (PLS-DA) to identify the sensitive markers and metabolic pathways of liver and kidney subacute toxicity. Results Metabolomics analysis showed that compared with the normal group (Z), the 52, 64 and 54 different metabolites were identified in the serum, liver and kidney samples of garidi-5 high dose group (GG), which were mainly enriched in ABC transporters, arginine and proline metabolism, nicotinate and nicotinamide metabolism, central carbon metabolism in cancer pathways. Conclusion The preliminarily suggested that garidi-5 can damage the liver and kidney by affecting the ABC transporters, arginine and proline metabolism, nicotinate and nicotinamide metabolism pathways, etc. Trimethylamine N-oxide, L-pyroglutamic acid, glycine-betaine, xanthine, glutathione, L-leucine, cytidine, L-arginine, spermidine, urea, 5-aminovaleric acid, creatine, L-glutamic acid, 1-methylnicotinamide and S-adenosyl-L-methionine can be used as potential biomarkers of liver and kidney toxicity sensitivity.