川陈皮素对糖尿病肾病大鼠AMPK和eNOS表达的影响研究

【摘要】目的 观察川陈皮素对糖尿病肾病大鼠的治疗作用，并从腺苷酸蛋白活化激酶（AMPK）和内皮型一氧化氮酶（eNOS）途径探讨其作用机理。方法 采用高脂高糖饲料喂养+链脲佐菌素（STZ）腹腔注射复制2型糖尿病肾脏损害大鼠模型，模型构建成功后，将其随机分为正常组、模型组、贝那普利干预组以及川陈皮素低、中和高剂量治疗组（n=20）。实验中密切监测大鼠一般情况，治疗期结束后收集尿液检测24h蛋白尿，收集血液检测肾功能指标、抗氧化指标，收集肾脏观察肾脏病理学，同时检测肾脏组织中AMPK及eNOS蛋白和mRNA的表达结果。结果 正常组肾小球正常，无明显病理特征；模型组出现肾小球增大，系膜和肾间质纤维组织增生；贝那普利组和川陈皮素三个剂量组相较于模型组明显减轻。与正常组相比，模型组24h尿蛋白定量、UREA、CREA和MDA明显升高(P＜005)；SOD和GSH明显降低(P＜005)，与模型组相比，贝那普利和川陈皮素三个剂量组24h尿蛋白定量、UREA、CREA和MDA明显降低(P＜005)，SOD和GSH明显升高(P＜005)。与正常组相比，模型组p AMPK、AMPK和eNOS蛋白和mRNA表达均明显降低(P＜005)；与模型组相比，贝那普利组和川陈皮素低、中和高剂量组AMPK和eNOS蛋白和mRNA表达明显升高(P＜005)。结论 川陈皮素可保护肾功能，提高血清和肾脏抗氧化指标，同时增加AMPK和eNOS蛋白和mRNA表达，最终保护糖尿病肾脏损害。     

纳尔逊海湾病毒S3蛋白纯化及大鼠多克隆抗体制备

目的制备纳尔逊海湾病毒(NBV)S3多克隆抗体。方法首先将构建好的Pris His MB-S3重组基因质粒,转化到大肠杆菌(E.coil)BL21(DE3)感受态细胞中,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导蛋白表达。镍柱亲和层析法纯化目的蛋白以获得大量融合重组蛋白,以此为抗原免疫大鼠制备抗S3多克隆抗体并进行鉴定。结果 Pris His MB-S3蛋白的相对分子质量(M_r)约39 000,以包涵体形式存在,通过免疫大鼠成功制备出NBV S3多克隆抗体。间接ELISA测定抗体效价达1∶64 000。间接免疫荧光实验证明S3蛋白成功在细胞内表达并以颗粒状分布在细胞质内。结论成功获得高反应性和高特异性的S3蛋白多克隆抗体。     

急性心肌梗死患者的救治与护理1例

急性心肌梗死(AMI)是由于冠状动脉闭塞(栓塞或痉挛), 使相应的心肌严重急性缺血所致。该病发病急,死亡率高。对急性心肌梗死患者实施早期溶栓治疗,能够降低心肌梗死的死亡率。我科于2003年3月运用艾通立(t-PA)行静脉溶栓治疗,成功地救治了1例急性心肌梗死患者。经精心护理, 患者于培天后病愈出院,现将护理过程及体会报告如下。     

基于iTRAQ多重标记串联质谱技术系统性筛选乳腺癌患者血清蛋白表达的差异分析

目的:观察串联质谱技术在乳腺癌血清蛋白表达中的差异。方法:选取2020年2月－2021年2月黑龙江省牡丹江医学院附属二院收治的乳腺癌新辅助化疗患者20例作为研究组,包含10例化疗有效患者及10例化疗无效患者,同时选取8名健康者作为对照组。采集所有患者的肘静脉血,分别采用高通量miRNA、iTRAQ表达谱测序技术,从“组学”的角度对乳腺癌新辅助化疗不同疗效患者miRNA差异表达谱、外周血单个核细胞蛋白组进行研究。随后,先进行Pathway通路分析,该过程在蛋白质层面进行,然后找出sRNA的成熟体序列,在此过程中严格根据miRbase18数据库。将已知的cDNA序列整理为一行,对得到的sRNA对应靶基因进行预测,Pathway分析靶基因,最后将同一Pathway通路中的sRNA靶基因及蛋白质寻找出来。结果:研究组和对照组共筛选出19个差异表达蛋白,选取其中具有较大表达差异的肝细胞生长因子(HGF)进行验证。iTRAQ标记图谱显示,研究组和对照组的血清HGF表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期患者的血清HGF表达水平逐渐升高(P<0.05),均高于对照组(均P<0.05),符合i TRAQ标记图谱鉴定结果。结论:串联质谱技术用于筛选发现乳腺癌细胞HGF表达水平升高具有显著效果,可有效指导临床诊治乳腺癌的工作,将有效参考提供给靶向治疗药物的开发。     

Ephrin-B2在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的：探讨Ephrin-B2.在乳腺癌组织中的表达及临床意义。方法：采用免疫组织化学法检测50例乳腺癌组织和20例正常乳腺组织中Ephrin-B2的蛋白表达,并结合临床病理特征进行相关统计学分析。结果：Ephrin-B2蛋白在乳腺癌中的表达明显高于正常组织,并且与乳腺癌病理分型和淋巴结转移密切相关（P〈0.05）,而与其他病理因素无关（p〉0.05）。结论：Ephrin-B2在乳腺癌的发展与转移中发挥重要作用,为Ephrin-B2为靶点的癌症治疗提供新的思路。     

疏肝健脾解郁汤联合氟哌噻吨美利曲辛片治疗轻中度焦虑抑郁症60例

目的:观察疏肝健脾解郁汤联合氟哌噻吨美利曲辛片治疗轻中度焦虑抑郁症的临床疗效。方法:将120例轻中度焦虑抑郁症患者采用随机数字表法随机分为治疗组和对照组各60例,对照组给予氟哌噻吨美利曲辛片治疗,1片/次,2次/d,口服。治疗组在对照组治疗基础上加服疏肝健脾解郁汤(夜交藤、柏子仁、酸枣仁、牡蛎各、丹参、白芍、茯苓、柴胡、栀子、麦冬、郁金、香附各、五味子、当归、甘草片),1 d1剂,水煎取汁300 m L,早晚温服。两组均以1周为1个疗程,1周治疗5 d,休息2 d,共治疗8个疗程。结果:治疗组治愈14例,显效23例,有效19例,无效4例,有效率为93.33%;对照组治愈6例,显效8例,有效29例,无效17例,有效率为71.67%。两组疗效对比,差别有统计学意义(P0.01);两组治疗后焦虑自评量表(SAS)评分和抑郁自评量表(SDS)评分显著低于对照组(P0.01);两组治疗后血清性激素水平比对照组改善更为明显(P0.01);两组不良反应发生率对比,差别无统计学意义(P0.05)。结论:临床治疗轻中度焦虑抑郁症采用疏肝健脾解郁汤联合氟哌噻吨美利曲辛片疗效更佳,能够促进患者焦虑抑郁症状及血清性激素水平的显著改善,且不会明显增加不良反应发生率,安全性高,值得推广。     

针灸联合银杏达莫治疗炮震性耳鸣类军事训练伤的临床效果

目的:探讨针灸联合银杏达莫治疗炮震性耳鸣类军事训练伤的临床效果。方法:选取2015年8月至2016年7月军事训练后产生的84例因炮震训练引起单侧耳鸣的84例患者作为研究对象,将患者按数字分组法随机平均分为2组,对照组42例采用银杏达莫注射液20 m L加入5%葡萄糖溶液250 m L中静脉滴注进行治疗,观察组在此基础上辅以针灸治疗,比较2组患者的治疗效果、症状改善情况、不良反应。结果:治疗2个疗程后,观察组患者痊愈20例,线型10例,有效9例,无效3例,治疗有效率为92.85%;对照组患者痊愈15例,显效5例,有效10例,无效12例,治疗有效率为71.42%;观察组治疗有效率明显高于对照组,差异统计学意义(P0.05)。2组在治疗前耳鸣评分及听力差异无统计学意义(P0.05);观察组治疗后耳鸣评分(4.02±2.28)分、听力(30.76±2.53)d B,同期对照组治疗后耳鸣评分(7.98±2.43)分、听力(35.84±2.86)d B,观察组耳鸣症状及听力明显较对照组好转,差异有统计学意义(P0.05)。2组在治疗过程中均出现了不同程度的不良反应,观察组恶心呕吐、皮疹、头晕等不良反应发生率为28.58%与对照组的23.80%比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:针灸联合银杏达莫治疗炮震性耳鸣类军事训练伤的临床效果显著,能有效改善耳部血液循环,辅助中医针灸治疗可疏通经气、活血化瘀,有利于本病的根治,提升整体治疗的优势,且安全性高,不良反应可控,具有积极的临床意义。     

肝细胞特异性Sirt1缺失加重小鼠肝脏炎性反应

目的探究沉默信息调节因子1 (Sirt1)基因的缺失对小鼠肝脏炎性反应的影响及其作用机制。方法每周记录在高脂喂养下的野生型C57BL/6J雄性小鼠和肝脏特异性Sirt1敲除(Sirt1-LKO)雄性小鼠的体质量,用Western blot和q-PCR检测炎性因子的表达;给小鼠腹腔注射20 mg/kg LPS,用生存曲线来反映小鼠对炎性反应的敏感性。结果与对照组WT小鼠相比,Sirt1-LKO小鼠表现为体质量明显减轻(P<0.05)。另外,生存曲线KaplaneMeier图显示Sirt1-LKO小鼠对LPS刺激呈现低敏感性(P<0.05)。Sirt1-LKO小鼠原代肝细胞中NF-κB蛋白水平增高(P<0.05),及NF-κB下游靶基因炎性因子Tnfα和IL6明显上调(P<0.05)。结论肝细胞特异性Sirt1缺失加重肝脏炎性反应。     

KLF7联合脂肪源性干细胞对小鼠坐骨神经缺损后轴突再生的影响

目的探讨核转录因子KLF7与脂肪源性干细胞(ADSC)联合应用对小鼠脱细胞同种异体神经支架(ANA)移植坐骨神经缺损后轴突再生和功能恢复的影响。方法成年C57BL/6小鼠随机分为脱细胞神经支架(ANA)组、ADSC组和KLF7+ADSC组,每组10只。坐骨神经功能指数(SFI)和电生理方法检测神经运动功能的恢复,Western bolt检测神经移植体内KLF7、Trk A和Trk B的蛋白表达。NF200免疫荧光法检测神经支架中轴突再生,并示踪PKH26标记的移植ADSC。结果与ADSC组比较,KLF7+ADSC组神经移植体内KLF7、Trk A和Trk B蛋白表达明显增高,NF200表达增强,PKH-26标记的ADSC数量显著增高(P0.05)。与ANA组比较,ADSC组和KLF7+ADSC组电生理波幅增高、神经传导速度增快、延迟期缩短,SFI功能指数增高,其中KLF7+ADSC组神经恢复作用显著优于ADSC组(P0.05)。结论 KLF7联合ADSC移植对小鼠ANA修复坐骨神经缺损后轴突再生和功能恢复的作用优于ADSC组,其机制可能与KLF7高表达促进神经移植体内Trk A和Trk B表达,进而促进移植的ADSC存活有关。