化痰通络方对急性脑梗死大鼠rt-PA溶栓后神经细胞凋亡途径中内质网应激相关基因GADD153/CHOP与JNK1表达的影响

目的:观察化痰通络方对急性脑梗死大鼠重组组织纤溶酶原激活剂(rt-PA)溶栓后内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)后期神经细胞凋亡途径中生长抑制DNA损伤基因153(C/EBP homologous protein,GADD153/CHOP)和c-Jun氨基末端激酶-1(c-Jun NH2-terminal kinases-1,JNK1)基因表达的影响。方法:将160只健康SD大鼠随机分为假手术组,模型组,rt-PA组,化痰通络方联合rt-PA组(简称中药组)。采用自身栓子法制备大鼠大脑中动脉栓塞模型(MCAO),rt-PA组与中药组分别给予尾静脉注入rt-PA(5.67 mg·kg-1)及联合化痰通络中药(7.2 g·kg-1)干预,2次/d。于6 h,1,3,7 d 4个时相分别采用RT-PCR检测各组大鼠大脑皮质梗死区组织中GADD153/CHOP与JNK1 mRNA的表达,采用TUNEL法检测各组大鼠大脑神经元细胞的凋亡。结果:与假手术组比较,模型组在4个时相中GADD153/CHOP与JNK1基因表达均明显增高(P0.05),同一时相内与假手术组比较,模型组神经元凋亡显著升高(P0.05);与模型组比较,rt-PA组和中药组在4个时相中均可降低JNK1 mRNA的表达量(P0.05),同时rt-PA组在1 d时可降低GADD153/CHOP mRNA的表达,而中药组可在6 h和1 d时同时降低其表达,差异显著(P0.05),rt-PA组在1 d和7 d时相神经元凋亡明显低于模型组(P0.05),中药组各个时相神经元凋亡均显著降低(P0.05),但rt-PA组与中药组之间无明显差异。结论:化痰通络方可通过降低内质网应激后期神经细胞凋亡途径中GADD153/CHOP与JNK1 mRNA的表达,部分抑制神经细胞的凋亡,从而防治急性脑梗死溶栓后缺血再灌注的发生与发展。     

肾复宁颗粒对慢性肾功能衰竭大鼠肾脏TGF-β1mRNA及细胞凋亡基因Fas/FasL表达的影响

目的:观察肾复宁颗粒对慢性肾功能衰竭大鼠的作用及可能机制。方法:SD大鼠采用右肾切除左肾外动脉分支结扎方法建立CRF模型,随机分为模型对照组、雷公藤多甙片组(0.006g/kg)、肾复宁颗粒组(9g/kg)、肾复宁颗粒组(6g/kg)、肾复宁颗粒组(3g/kg),各15只,另设假手术组15只,连续给药8周,观察血清Scr、BUN、Cys-C含量及肾脏组织中TGF-β1mRNA、细胞凋亡基因Fas/Fas L表达水平。结果:治疗后,治疗组及雷公藤多甙片组大鼠血清中Scr、BUN、Cys-C水平明显下降,大鼠肾脏组织中TGF-β1 mRNA、Fas/Fas L表达减少,尤以肾复宁颗粒(9g/kg)显著。结论:肾复宁颗粒通过抑制慢性肾功能衰竭大鼠肾脏TGF-β1mRNA、Fas/Fas L表达,调控肾实质细胞调亡,从而改善肾功能,达到延缓肾脏纤维化作用,其疗效具有一定剂量依赖性。     

保肾冲剂对系膜增生性肾小球肾炎大鼠肾组织内质网应激相关蛋白葡萄糖调节蛋白78表达的影响

目的观察保肾冲剂对系膜增生性肾小球肾炎(Ms PGN)大鼠肾脏的保护作用及内质网应激(ERS)相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达的影响,探讨其作用机制。方法将21只雄性SD大鼠随机分为造模组(14只)及空白对照组(7只)。造模组大鼠予尾静脉注射抗大鼠胸腺细胞抗血清(ATS)建立Ms PGN模型,造模成功后再随机分为模型组及中药组,每组7只。中药组给予保肾冲剂药液灌胃,空白对照组和模型组予等容积0.9%氯化钠注射液灌胃,连续14周。实验结束后,观察比较各组大鼠治疗前后24 h尿蛋白定量(24 h UTP)及血肌酐(Cr)水平变化,并检测大鼠肾组织内GRP78蛋白及基因表达水平情况。结果治疗前中药组及模型组大鼠24 h UTP及Cr水平均明显高于空白对照组(P0.05),治疗后中药组大鼠24 h UTP及Cr水平较模型组均明显降低(P0.05);模型组及中药组大鼠治疗后GRP78蛋白及基因表达水平IOD值均明显高于空白对照组(P0.05),但中药组大鼠治疗后GRP78蛋白及基因表达水平IOD值均低于模型组(P0.05)。结论 Ms PGN大鼠肾脏组织GRP78表达增高,提示ERS可能参与其肾脏损害过程,而中药保肾冲剂对Ms PGN模型大鼠肾脏具有一定的保护作用,可减轻大鼠肾功能损害,降低大鼠24 h UTP及Cr水平,降低GRP78蛋白及基因表达水平,从而起到治疗作用,且抑制ERS相关蛋白GRP78的过度表达可能是其减轻肾功能损害的重要作用机制靶点之一。     

芩翘四物汤及其拆方对系膜增生性肾炎大鼠MIP-1α、TNF-α表达的影响

目的对芩翘四物汤进行拆方,观察人巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在系膜增生性肾小球肾炎(Ms PGN)模型大鼠肾组织的表达情况,探讨不同中药作用的强弱及其对大鼠的肾脏保护作用。方法按随机数字表法,将大鼠分为空白组、模型组、全方组、拆方1组、拆方2组。检测大鼠24小时尿蛋白定量、血清白蛋白(ALB)、血清肌酐(SCr);光镜下观察肾组织形态学变化;免疫组化检测肾组织中MIP-1α、TNF-α的表达情况。结果造模后6周,全方组大鼠血清ALB水平明显高于模型组(P0.05)。造模后8周,与模型组相比,全方组大鼠尿蛋白定量、血清SCr下降显著(P0.05),血清ALB水平明显升高(P0.01)。与模型组相比,全方组和拆方2组可减轻Ms PGN大鼠肾小球系膜细胞(GMC)增生(P0.01)和系膜外基质(ECM)积聚(P0.05);各治疗组均可降低肾组织MIP-1α水平,疗效强弱为:全方组拆方1组拆方2组;全方组和拆方1组肾组织TNF-α水平较模型组明显降低(P0.01)。结论芩翘四物汤能改善Ms PGN大鼠的肾功能,减轻肾脏病理,降低肾组织的MIP-1α、TNF-α表达,和拆方相比具有较好的肾脏保护作用。     

扶肾降浊方对肾小管间质损害大鼠抗纤维化因子HGF、BMP-7的影响

[目的]探讨扶肾降浊方对系膜增生性肾小球肾炎(Ms PGN)大鼠肾小管间质损害的疗效机制。[方法]在Ms PGN动物模型基础上,延长造模时间至20周,使其自然发展为肾小管间质损害模型。实验设中药组、西药组、模型组及空白组。中药组给予扶肾降浊方,西药组给予贝那普利,模型组和空白组给予生理盐水,连续20周,分别于实验第12、16和20周末取材,采用实时逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学法检测大鼠肾组织抗纤维化因子肝细胞生长因子(HGF)、骨形态发生蛋白-7(BMP-7)m RNA及蛋白表达水平。[结果]模型大鼠肾组织HGF、BMP-7m RNA和蛋白表达下调,扶肾降浊方随着给药周期的延长可部分逆转间质损害造成的上述m RNA和蛋白表达异常。[结论]扶肾降浊方对Ms PGN大鼠肾小管间质损害保护作用机制可能与调节抗纤维化因子HGF、BMP-7 m RNA和蛋白表达有关。     

升清降浊胶囊对慢性肾衰竭大鼠CHOP、Caspase-12表达的影响

目的:探讨升清降浊胶囊对慢性肾功能衰竭(CRF)大鼠CHOP、Caspase-12表达的影响。方法:30mg/mL腺嘌呤灌胃21d建立SD大鼠肾衰模型。72只大鼠随机分为6组:空白组,模型组,肾衰宁组,升清降浊低、中、高剂量组,每组12只。治疗28d后,观察各组大鼠体重变化,全自动生化分析仪检测大鼠肾功能,应用TUNEL法检测肾组织细胞凋亡情况,Western blot检测CHOP和Caspase-12肾内表达水平。结果:模型组BUN、Scr较空白组明显升高(P0.01);TUNEL结果显示空白组肾组织细胞有少量凋亡,而模型组细胞凋亡数明显增多(P0.01);模型组CHOP、Caspase-12表达量较空白组显著增强(P0.01)。升清降浊胶囊低剂量能抑制慢性肾功能衰竭大鼠肾组织细胞凋亡,与模型组相比差异有统计学意义(P0.05),CHOP和Caspase-12表达亦有统计学意义(P0.01)。结论:升清降浊胶囊低剂量能保护腺嘌呤导致的大鼠肾损害,可能与其抑制ERS相关凋亡分子CHOP、Caspase-12高表达有关。     

芪泽汤对慢性肾功能衰竭大鼠 内质网应激相关凋亡分子表达的影响

目的:探讨芪泽汤对慢性肾功能衰竭(CRF)大鼠内质网应激(ERS)相关凋亡分子表达的影响.方法:2.5％腺嘌呤ig24 d建立SD大鼠肾衰模型.分为5组:正常组、模型组、尿毒清组(2.5 g·kg-1·d-1)、芪泽汤高、低剂量组(50.4,12.6g·kg-1·d-1),每组10只.造模同时各治疗组ig给药,干预24 d后,观察体重变化,全自动生化分析仪检测大鼠血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr),应用TUNEL法检测肾组织细胞凋亡,Western blot检测CHOP( C/EBP-homologous protein)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12( Caspase-12)肾内表达水平.结果:模型组BUN(17.21±4.63) mmol·L-1,SCr( 67.00±25.62) μmol·L-1较对照组BUN(4.19±0.77) mmol· L-1,SCr( 15.89±2.62)μmol·L-1明显升高(P ＜0.01);TUNEL结果显示空白组肾小管上皮细胞有少量凋亡,而模型组细胞凋亡数明显增多(P＜0.01);模型组CHOP,Caspase-12表达显著增强(P＜0.01).芪泽汤低剂量和尿毒清能抑制慢性肾功能衰竭大鼠肾小管上皮细胞凋亡和CHOP,Caspase-12表达(与模型组相比较P＜0.05).结论:芪泽汤低剂量能保护腺嘌呤导致的大鼠肾损害,可能与其抑制ERS相关凋亡分子CHOP,Caspase-12高表达有关.     

和肾络颗粒对慢性肾功能衰竭大鼠肾组织黏附分子-1表达的影响

目的：观察和肾络颗粒对慢性肾衰竭大鼠肾组织细胞间黏附分子-1（intercellular adhesion molecule,ICAM-1）表达的影响,探讨其对肾纤维化的保护作用。方法：采用5/6肾切除模型,实验分为正常对照组、模型组、福辛普利组、和肾络低剂量组、中剂量组及高剂量组,给药处理8周,检测血尿素氮（BUN）、血肌酐（SCr）水平,取残肾组织行HE染色,光镜观察肾组织病理变化;免疫组化法检测肾组织ICAM-1的变化。结果：中药组与福辛普利组BUN、SCr明显低于模型组;ICAM-1在模型大鼠残肾组织中的表达较正常对照组明显升高,各用药组ICAM-1表达明显降低。结论：和肾络颗粒可抑制ICAM-1在肾组织内的过度表达,延缓肾脏的纤维化进程。     

和肾络颗粒对5/6肾大部切除大鼠肾脏增殖细胞核抗原表达的影响

目的:观察和肾络颗粒治疗5/6肾大部切除慢性肾衰竭模型大鼠肾组织增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响,探讨其对肾纤维化的保护作用。方法:采用5/6肾切除模型大鼠,设立正常对照组、模型组、西药福辛普利组、和肾络低剂量组、中剂量组及高剂量组。检测血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr),取残肾组织行HE染色,光镜观察肾组织病理变化,免疫组化检测PCNA的变化。结果:中药组与福辛普利组BUN、SCr明显低于模型组;PCNA在术后表达较正常对照组升高,用药组表达明显低于模型组。结论:和肾络抑制PCNA在肾组织内的过度表达,延缓肾脏纤维化的进程。     

黄葵胶囊联合雷公藤多甙片治疗糖尿病肾病的临床疗效观察

目的观察黄葵胶囊联合雷公藤多甙片治疗糖尿病肾病的疗效。方法将68例糖尿病肾病患者分为实验组(传统治疗基础上加用黄葵胶囊和雷公藤多甙片)和对照组(传统治疗基础上加用黄葵胶囊)。治疗前及治疗后4,8,12周分别检测24 h尿蛋白定量、血白蛋白、肾功能、肝功能、血脂、血常规等并进行比较。结果组间总有效率比较,实验组较对照组有显著性差异(P0.05)。2组治疗后尿蛋白明显减少,肾功能改善,血浆白蛋白逐渐升高,血脂逐渐下降,均有显著性差异,实验组P均0.01,对照组P均0.05。治疗后同时间点2组间各项指标比较均有显著性差异(P均0.05)。结论黄葵胶囊对糖尿病肾病有较好的疗效,联合雷公藤多甙片可以提高疗效、缩短疗程。     

痹颗粒对RA-MsPGN大鼠肾组织PTK活性的影响

目的探讨尪痹颗粒对RA—MsPGN大鼠模型肾组织PTK活性的影响，治疗RA—MsPGN的作用机制。方法按照PhosphoSafeTM ExtRAction Reagent试剂盒提取蛋白质。按照K—LISA PTK Screening Kit试剂盒测定蛋白酪氨酸激酶（PTK）活性，并根据检测试剂盒提供的标准品直线回归方程计算PTKs的含量。结果RA—MsPGN模型大鼠与正常组相比肾组织PTK含量显著升高（P〈0．001），雷公藤多苷片和尪痹颗粒各剂量组均能显著降低大鼠肾组织FTK含量（P〈0．05或0．01）。结论尪痹颗粒对RA—MsPGN大鼠肾组织PTK活性有明显抑制作用，其治疗作用有可能是通过对PTK的作用而实现的。     

中药复方银屑1号对角质形成细胞增殖影响的相关研究

目的:探讨中药复方银屑1号方对人角质形成细胞增殖及细胞生长周期的影响,从细胞水平为银屑1号方临床治疗寻常型银屑病提供理论依据。方法:将浓度为8%的PBS、雷公藤多甙片、复方银屑1号含药血清,分别处理HaCaT细胞,于24h、48h采用酶联免疫法检测其对细胞增值的影响,用流式细胞术分析细胞周期。结果:银屑1号方能抑制HaCaT细胞增殖,并导致HaCat细胞G1期比例显著增加,S期与G2期比例则显著下降,并可抑制G1/G2期转换。中药组与雷公藤组和PBS组比较,P<0.01,均有统计学意义。结论:中药银屑1号能对人角质形成细胞可产生明显抑制并诱导其分化的作用,为其治疗银屑病提供理论依据。     

利用文本挖掘技术分析治疗类风湿关节炎中成药和西药使用基本规律

目的:利用文本挖掘技术探索中成药及西药治疗类风湿关节炎(RA)的使用规律。方法:在中国生物医学文献数据库(CBM)中采集(1978—2010年)治疗RA的相关文献,建立Access数据库,运用SQL对数据进行处理,结合人工降噪后,分析中成药及西药治疗RA的使用规律。结果:共有4455篇文献,结果显示:风痛宁片、丹参注射液、正清风痛宁止片、寒湿痹颗粒、丹参注射液、雷公藤多甙片、雷公藤片为治疗RA的高频中成药;甲氨蝶呤、柳氮磺砒啶、免疫抑制剂、糖皮质激素、美洛昔康、沙利度胺依次为治疗RA的高频西药;雷公藤多甙片和甲氨蝶呤、吲哚美辛分别是联用时常用的中成药和西药。结论:利用文本挖掘能够找到高频使用治疗RA的中成药及西药,以及合用的中成药与西药,为分析中成药和西药治疗RA使用规律提供文献学依据。     

雷公藤多甙对IgA肾病系膜细胞凋亡及其调控基因Fas影响的实验研究

目的 :探讨雷公藤多甙片 (GTT)治疗IgA肾病的分子机理。方法 :制造IgA肾病小鼠模型。HE染色光镜下观察肾小球系膜增殖 ;原位末端标记法 (TUNEL)检测系膜区凋亡细胞 ;免疫组化法观察系膜区Fas、PCNA的表达。结果 :GTT治疗组肾小球系膜区凋亡率较模型组升高 (P <0 .0 1) ,Fas表达增强 (P <0 .0 5 ) ,PCNA表达下降 (P <0 .0 1) ,病理损害减轻。结论 :GTT可能通过调控系膜区Fas的表达 ,诱导IgA肾病系膜区细胞凋亡 ,进而抑制系膜增殖。     

丹芍丸对实验性大鼠IgA肾病模型的治疗作用

目的观察丹芍丸对IgA肾病大鼠的治疗作用。方法使用口服牛血清白蛋白和葡萄球菌肠毒素B感染的复合方法,复制大鼠IgA肾病模型,并分别给予丹芍丸和雷公藤多甙片治疗,进而观察各组大鼠的尿蛋白、尿红细胞计数、血清尿素氮、血清肌酐和肾组织的病理变化。结果丹芍丸能明显降低IgA肾病模型大鼠的尿蛋白、尿红细胞计数、血清尿素氮和血清肌酐的含量,减轻肾组织病理改变。结论丹芍丸对IgA肾病大鼠具有显著的治疗作用。     

补肾通督胶囊治疗类风湿关节炎42例疗效观察

目的:观察补肾通督胶囊治疗类风湿关节炎的疗效。方法:选77例类风湿关节炎患者随机分成两组。治疗组42例给予补肾通督胶囊,对照组35例给予雷公藤多甙片,治疗3个月后进行疗效观察。结果:治疗组显效26例,有效12例,无效4例,总有效率为90.48%(95%CI=81.60%～99.36%);对照组显效13例,有效12例,无效10例,总有效率为71.43%(95%CI=56.46%～86.40%);两组综合疗效比较(u=2.244 6,P=0.025 2),差异有显著性意义;治疗组治疗后症状、体征积分、血沉、C-反应蛋白明显低于对照组(P<0.05或<0.01)。结论:补肾通督胶囊治疗类风湿关节炎的疗效明显优于雷公藤多甙片,其收益为OR=0.26(95%CI=0.07～0.93),NNT=5(95%CI=2.75～57.14)。     

雷公藤多甙治疗慢性肾脏病Ⅰ期患者的研究

目的观察雷公藤多甙治疗慢性肾脏病(CKD)Ⅰ期患者的临床疗效。方法将CKDⅠ期患者随机分成2组,雷公藤组予雷公藤多甙片60 mg/d,对照组予肌苷片0.6 g/d。2组均治疗6个月,停药观察6个月。观察指标为尿常规2、4 h尿蛋白定量、肌酐清除率(Ccr)、血压、肝功能、血常规、血脂、临床症状等。结果治疗6个月后,雷公藤组尿蛋白减少,且停药6个月后尿蛋白仍稳定。尿蛋白定性由治疗前(+)~(),减为治疗后(-)~(+);镜下血尿也减轻。结论雷公藤多甙能显著降低CKDⅠ期患者蛋白尿与血尿,保护肾功能,有利于患者长期病情稳定。     

痹颗粒对RA-MsPGN大鼠肾组织PTK活性的影响

目的探讨痹颗粒对RA-MsPGN大鼠模型肾组织PTK活性的影响,治疗RA-MsPGN的作用机制。方法按照Phospho Safe TM ExtR Action Reagent试剂盒提取蛋白质,按照K-LISA PTK Screening Kit试剂盒测定蛋白酪氨酸激酶(PTK)活性,并根据检测试剂盒提供的标准品直线回归方程计算PTKs的含量。结果RA-MsPGN模型大鼠与正常组相比肾组织PTK含量显著升高(P<0.001),雷公藤多苷片和痹颗粒各剂量组均能显著降低大鼠肾组织PTK含量(P<0.05或0.01)。结论痹颗粒对RA-MsPGN大鼠肾组织PTK活性有明显抑制作用,其治疗作用有可能是通过对PTK的作用而实现的。