论肾上腺髓质素与肝藏象的相关性

通过论述肾上腺髓质素(ADM)在体内调节与代谢中的作用,探讨ADM与中医肝藏象的内在相关性,提出ADM在体内表达的正常与否可能是肝开窍于目、女子以肝为先、肝阳上亢等分子水平基础之一。因此通过研究ADM的表达和调节机制,对于揭示和丰富中医藏象理论的实质和内涵具有重要的意义,同时也为治疗肝郁、肝阳上亢等病证提供了新线索。     

硒化壳聚糖通过下调核因子КB途径增强ST1571对耐药K562/ADM细胞敏感性

目的研究硒化壳聚糖增强ST1571对多药耐药白血病K562/ADM细胞敏感性的作用,并进一步探讨其耐药逆转机制。方法应用MTT法检测ST1571单独和联合硒化壳聚糖对K562/ADM细胞增殖的影响,计算逆转倍数;应用流式细胞法检测细胞凋亡;应用免疫印迹法检测核因子КB(NF-КB)蛋白的改变。结果单独应用1μmol·L-1ST1571作用12,24,36 h,对K562/ADM细胞增殖抑制率分别为(19.15±1.64)%、(24.35±2.37)%和(26.37±2.39)。1μmol·L-1ST1571联合25~400 mg·L-1硒化壳聚糖作用K562/ADM细胞,随着硒化壳聚糖浓度和作用时间的增加,对细胞增殖抑制率也相应增加,呈剂量时间效应关系。硒化壳聚糖能够对K562/ADM细胞耐ST1571产生一定的逆转作用,明显增强ST1571对K562/ADM细胞的诱导凋亡作用(P0.05,P0.01),下调NF-КB蛋白表达(P0.01)。结论硒化壳聚糖能够增强K562/ADM细胞对ST1571的敏感性,其部分机制可能是通过诱导细胞凋亡,抑制细胞mdr-1基因表达,阻断细胞NF-КB信号通路来实现的。     

白藜芦醇通过下调 mdr1/P - gp表达逆转 K562/ADM细胞凋亡抑制

目的：研究白藜芦醇对多药耐药K562/ADM细胞的诱导凋亡效应及其分子机制。方法：以白血病多药耐药细胞K562/ADM为白藜芦醇作用的靶细胞,用MTT比色法检测细胞增殖活性,形态学和DNA片段化观察细胞凋亡;RT-PCR检测mdr1基因和Caspase-3基因mRNA的表达;FCM测定P-gp蛋白表达水平;比色法测定Caspase-3活性。结果：白藜芦醇显著抑制K562/ADM细胞增殖,白藜芦醇诱导后K562/ADM细胞出现典型的凋亡形态学变化和DNA片段化等特征性改变。白藜芦醇下调K562/ADM细胞mdr1基因表达、抑制P-gp合成,并上调caspase-3基因表达、增强caspase-3活性。结论：白藜芦醇通过下调mdr1/P-gp表达逆转K562/ADM多药耐药细胞的凋亡抑制。     

肺腺癌多药耐药细胞株SPCA1／ADM的建立及中药方剂提取物A2的逆转作用研究

目的：研究中药方剂提取物A2与肿瘤多药耐药之间的关系。方法：建立多药耐药细胞系SPCA1／ADM，通过MTT法测定细胞耐药性及耐药性的逆转作用，用流式细胞技术性的逆转作用，用流式细胞技术检测P－糖蛋白（－glycoprotein,P-gp)的表达，用荧光法测定细胞内ADM的积累。结果：A2本身具有抑癌作用，且其无或低细胞毒浓度（50μg/ml、100μg/ml）可增加SPCA1／ADM对阿霉素的敏感性29．5倍及40．5倍。10μg/mlA2 异搏定（Verapamil,VLP)10μg/ml，使SPCA1／ADM的敏感性收29．5倍增至45．5倍。提示两者有协同作用。A2可抑制P－gp的表达，并明显增加SPCA1／ADM细胞中浓度来逆转SPCA1／ADM的多药耐药。     

铁皮枫斗颗粒对化疗药的增效解毒作用

铁皮枫斗颗粒由铁皮石斛、三七、薏苡仁等中药组成,具有益气活血、养阴生津等功效,药理研究表明具有增强荷瘤小鼠免疫功能的作用[1].为探讨其在肿瘤治疗中的作用,本文采用小鼠移植性动物模型,观察了铁皮枫斗颗粒对化疗药CTX、5-FU、ADM的增效减毒作用,现将结果报道如下.     

解毒祛瘀方对乳腺癌细胞MCF-7/ADM的耐药逆转作用

目的:研究解毒祛瘀方对人乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADM耐药逆转的作用及机制。方法:以MCF-7/ADM细胞为研究对象,利用噻唑蓝(MTT)比色法检测解毒祛瘀方对人乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADM生长的影响;应用流式细胞术检测肿瘤细胞内罗丹明123(Rh-123)的含量;分别利用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肿瘤细胞内多药耐药蛋白1(MDR1),乳腺癌耐药相关蛋白(BCRP)mRNA及蛋白表达变化。结果:与空白组比较,经1.25,2.5 g·L~(-1)解毒祛瘀方作用后,阿霉素对人乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADM的逆转倍数(RF)分别提升1.7倍和3.0倍(P0.05);人乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADM中Rh-123含量分别提高了1.8倍和2.5倍(P0.05),MDR1和BCRP蛋白和mRNA表达水平明显下降(P0.05),1.25,2.5 g·L~(-1)解毒祛瘀方MDR1 mRNA表达分别降低35.5%和56.0%(P0.05),BCRP mRNA表达分别降低41.6%和49.5%(P0.05)。结论:解毒祛瘀方可提高人乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADM对阿霉素的敏感性,逆转该细胞对阿霉素的耐药性,其机制可能与降低MDR1和BCRP蛋白和mRNA的表达,抑制细胞药物外排作用相关。     

硒化壳聚糖对K562/ADM细胞生物学行为的影响

目的 观察硒化壳聚糖对体外培养慢性粒细胞白血病多药耐药细胞株K562/ADM细胞生物学行为的影响.方法 硒化壳聚糖作用K562/ADM细胞12～24 h,应用流式细胞法检测细胞凋亡,软件拟合计算细胞周期;应用免疫印迹法检测P-gp的表达;应用RT-PCR法检测mdr-1 mRNA水平.结果 硒化壳聚糖能够明显增强ADM对K562/ADM细胞的诱导凋亡作用,阻滞细胞周期于G1期(P＜0.05,P＜0.01),下调P-gp表达和mdr-1mRNA水平(P ＜0.05,P＜0.01),硒化壳聚糖浓度越高,作用效果越明显.结论 硒化壳聚糖能够通过下调mdr-1基因和P-gp蛋白表达,阻滞细胞于G1期诱导凋亡来对体外培养的K562/ADM细胞耐药生物学行为产生影响.     

白花蛇舌草和半枝莲乙醇提取物逆转耐阿霉素肝细胞癌的耐药机制研究

目的研究白花蛇舌草(Od)和半枝莲(Sb)乙醇提取物对耐阿霉素肝细胞癌(HepG2/ADM)增殖和凋亡的作用。方法 (1)体外实验:采用CCK-8法检测不同浓度的Od-Sb对HepG2/ADM的影响;克隆形成实验检测Od-Sb对HepG2/ADM克隆形成能力的影响;流式细胞术检测Od-Sb对HepG2/ADM凋亡的影响;Western blot检测Od-Sb对HepG2/ADM中Ki-67、Bcl-2蛋白表达的影响。(2)体内实验:以裸鼠HepG2/ADM皮下移植瘤为模型,观察Od-Sb对瘤体的作用,并采用免疫组化法检测Ki-67、Bcl-2蛋白的表达。结果 (1)体外实验显示,与对照组比较,Od-Sb可以抑制HepG2/ADM细胞的增殖,抑制HepG2/ADM细胞的克隆形成,促进其凋亡,并下调Ki-67、Bcl-2蛋白的表达(P0.05)。(2)体内实验显示,与对照组比较,Od-Sb可以抑制裸鼠HepG2/ADM皮下移植瘤瘤体的生长,下调Ki-67、Bcl-2蛋白的表达(P0.05,P0.001)。结论 Od-Sb可下调HepG2/ADM中Ki-67、Bcl-2蛋白的表达,抑制HepG2/ADM的生长,并促进其凋亡;Od-Sb通过增殖-凋亡调控机制部分逆转HepG2/ADM的耐药。     

槲皮素和山柰酚逆转白血病细胞系K562/A02多药耐药性的机制及相关基因表达谱的研究

目的研究槲皮素(quercetin,Que)及山柰酚(kaempferol,Kae)单用及联合应用时对K562/A02细胞系多药耐药的影响及机制。方法体外培养K562和K562/A02细胞经Que及Kae处理,采用噻唑蓝(MTT)法计算药物单独及联合作用后细胞的生长抑制率及对多柔比星(adriamycin,ADM)的增敏倍数;流式细胞术检测药物作用后细胞内ADM浓度的变化;Annexin V/PI法观察细胞凋亡情况;Real-time PCR基因芯片检测药物转运蛋白及凋亡相关基因表达的变化。结果药物作用48 h后,Que及Kae在5～160μmol.L-1时对K562和K562/A02细胞均有剂量依赖性的生长抑制作用,K562/A02对ADM的敏感性显著增强,二者联用效果有协同性;在ADM为5μmol.L-1时,药物与细胞共培养2 h即可检出Que能增加细胞内ADM的浓度,而Kae则对ADM浓度无明显影响,两药联合作用的效果不及Que单独作用。Que和Kae均可剂量依赖性地诱导K562和K562/A02细胞的凋亡。二者可影响ABC、SLC家族等药物转运蛋白相关基因的表达,并可调节Bcl-2、TNF等凋亡相关基...     

硒化壳聚糖逆转K562/ADM细胞多药耐药的实验研究

目的:研究硒化壳聚糖对人慢性粒细胞白血病耐阿霉素细胞株( K562/ADM) mdr-1基因/P-糖蛋白(P-gp)表达及功能的影响,为逆转肿瘤多药耐药提供新的途径.方法:硒化壳聚糖100,200 mg·L-1作用K562/ADM细胞24 h,应用RTPCR法和免疫印迹法检测mdr-1/P-gp表达的改变;应用高效液相色谱法检测细胞内阿霉素积聚浓度;应用MTT法检测阿霉素对K562/ADM细胞增殖的影响.结果:硒化壳聚糖可增强K562/ADM细胞对阿霉素的敏感性,增加细胞内阿霉素集聚浓度,200 mg·L-1硒化壳聚糖作用效果显著强于100 mg·L-1硒化壳聚糖(P＜0.01);硒化壳聚糖能明显抑制K562/ADM细胞mdr-1/P-gp的表达(P＜0.01),100 mg·L-1硒化壳聚糖可使mdr-1/P-gp表达分别下降(40.87 -3.19)％和(35.08±0.09)％,200 mg·L-1硒化壳聚糖可使mdr-1/P-gp表达分别下降(78.24±3.42)％和(79.61±0.23)％.结论:硒化壳聚糖可明显抑制K562/ADM细胞mdr-1/P-gp表达,增加细胞内阿霉素含量,恢复细胞对化疗药物敏感性,逆转mdr-1编码蛋白P-gp介导的多药耐药.     

川芎嗪逆转HepG2/ADM细胞多药耐药性的体外研究

目的 :研究川芎嗪对人肝癌多药耐药细胞系HepG2/ADM多药耐药性的逆转效应及对P-gp170表达的影响 ,深入探讨川芎嗪逆转肿瘤细胞多药耐药的机理。方法 :应用细胞培养、细胞毒实验、RT-PCR、流式细胞仪等方法 ,观察川芎嗪对体外培养HepG2/ADM细胞的逆转作用。结果 :川芎嗪可以使细胞膜表面的P-gp170表达减弱 ,增加阿霉素对HepG2/ADM细胞的毒性 ;RT-PCR结果表明川芎嗪可以使HepG2/ADM细胞的mdr1基因表达减弱 ;流式细胞仪检测结果表明川芎嗪可以使HepG2/ADM细胞内罗丹明 123的浓度增加 ,从而增加阿霉素对HepG2/ADM细胞的毒性。结论 :川芎嗪具有在体外逆转HepG2/ADM细胞多药耐药的效应 ,具有临床应用前景。     

全真一气汤对肾不纳气证COPD模型大鼠血清ADM水平的影响

[目的]探讨全真一气汤对肾不纳气证模型大鼠血清ADM水平的影响。[方法]SO2熏吸+腺嘌呤饲料饲养复制肾不纳气证COPD大鼠模型。中药组用全真一气汤进行治疗,西药组用氨茶碱治疗,实验结束后测定大鼠血清中的肾上腺髓质素(ADM)含量。[结果]与西药组、模型组比较,中药组大鼠ADM含量升高(P<0.05或<0.01)。[结论]全真一气汤能够维持ADM水平,延缓COPD的进展,这是该方剂对COPD起效的治疗机制之一。     

中药逆转MCF-7/ADM细胞多药耐药机制的研究进展

乳腺癌细胞(MCF-7/ADM)的多药耐药性(MDR)是导致抗肿瘤药物临床化疗失败的主要原因。现认为细胞中的P-gp、Bcl-2、GST-π、TopoⅡ等蛋白可能与乳腺癌的多药耐药相关。近年来研究发现,不少中药能够下调MDR1 mRNA和/或P-gp的表达,从而逆转MCF-7/ADM细胞对抗肿瘤药物的多药耐药性,提高耐药细胞对化疗药物敏感性。主要对MCF-7/ADM细胞的多药耐药机制及有逆转MCF-7/ADM多药耐药作用的中药进行了综述。     

中药功劳木对乳腺癌耐药MCF7/ADM逆转MDR1的作用研究

目的：研究中药功劳木对乳腺癌耐药MCF7/ADM逆转MDR1的作用。方法：应用台盼蓝拒染试验测试应用功劳木后ADM对MCF7/ADM的活细胞率：MTT法测试功劳木的细胞毒性及对ADM的增效;Rh123荧光技术检测应用功劳木对耐药细胞内药物浓度的影响,流式细胞仪检测功劳木对MDR1的影响。结果：实验组浓度为10 mg/L以及20mg/L时对MCF7/ADM的抑制分别为（0.218±0.081）,（0.202±0.033）,均明显高于对照组（0.146±0.062）,（0.153±0.018）,差异有统计学意义（P〈0.05）。实验组对MCF-7/S以及MCF7/ADM的抑制分别为（0.204±0.076）,（51.08±0.63）,明显高于对照组的（0.075±0.032）及（36.55±0.53）,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：GLM对乳腺癌耐药MCF7/ADM逆转MDR1具有抑制作用。     

中药A2化疗并用治疗耐药性晚期性肿瘤60例

经实验研究表明,中药A2具有多药耐药(MDR)逆转作用[1].笔者于2000年1月～2001年6月,对60例化疗效果差的恶性实体肿瘤患者进行了以ADM或DDP为主的联合化疗,其中30例患者在联合化疗同时加用中药A2内服,以观察单纯化疗和化疗与中药联合应用对各种耐药性晚期恶性肿瘤的治疗效果.     

天佛参逆转K_(562)/ADM细胞株耐药性的作用及机制探讨

目的 :研究复方天佛参口服液 (TFS)逆转人红白血病耐药细胞株K56 2 /ADM耐药性的作用 ,探讨该药对K56 2 /ADM细胞膜P -糖蛋白 (P -gp)的功能及表达的影响。方法 :体外培养K56 2 /ADM细胞 ,分别用MTT法、流式细胞仪、免疫组化法等方法观察TFS对K56 2 /ADM细胞生长的抑制作用 ,检测K56 2 /ADM细胞膜上P -gp的功能及表达情况。结果 :TFS在非毒性浓度以下能逆转细胞耐药 ,与ADM合用能抑制K56 2 /ADM细胞生长 (P <0 .0 0 5 ) ;K56 2 /ADM细胞内药物浓度升高 ;K56 2 /ADM细胞上P -gp的高表达 ,经TFS作用后其表达下降 ,且 48h后完全消失 ,呈时间依赖性。结论 :TFS能逆转K56 2 /ADM耐药性 ,其机制与抑制K56 2 /ADM细胞膜上P -gp高表达有关。     

漏芦抽提剂对人乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADR的耐药逆转作用研究

目的:研究漏芦抽提剂逆转肿瘤耐药的作用。方法:用漏芦抽提剂及其含药血清处理人乳腺癌耐药细胞株(MCF-7/ADR),以MTT法测定漏芦抽提剂及其含药血清对MCF-7/ADR细胞系的耐药逆转作用。结果:漏芦抽提剂对MCF-7/ADR细胞系具有很强的细胞毒作用,与ADM合用培养96 h细胞死亡率平均为ADM组的1.63倍,与耐药逆转剂维拉帕米(VRP)相比(ADM+VRP组为ADM的1.78倍),无显著性差异(P>0.05)。漏芦抽提剂含药血清(大剂量)和ADM合用时,培养96 h细胞死亡率平均为ADM的1.70倍,这一结果与耐药逆转剂维拉帕米作用结果相似。结论:漏芦抽提剂在逆转肿瘤多药耐药方面可能具有良好的应用前景。     

苦参碱对人膀胱癌BIU-87/ADM细胞多药耐药的影响

目的探讨苦参碱对人膀胱癌BIU-87/ADM细胞多药耐药逆转作用的机制。方法 MTT法检测细胞生长抑制率;荧光分光光度计检测阿霉素(ADM)的蓄积和外排;免疫印迹法检测P-糖蛋白(P-gp)表达;P-gp-GloTMAssay System试剂盒检测P-gp ATP酶活性。结果经ADM作用后,与敏感细胞株BIU-87存活率比较,耐药细胞株BIU-87/ADM存活率明显增加(P0.001),苦参碱呈剂量依赖地降低BIU-87/ADM细胞存活率(P0.01),而对敏感细胞株BIU-87细胞存活率无显著影响。苦参碱呈剂量依赖地增加ADM在BIU-87/ADM细胞中蓄积水平,抑制ADM细胞内外排。苦参碱明显抑制P-gp蛋白表达,降低P-gp ATP酶活性。结论苦参碱通过抑制BIU-87/ADM细胞P-gp蛋白和ATP酶活性,减弱P-gp外排功能,增加细胞内ADM蓄积,从而发挥对人膀胱癌BIU-87/ADM细胞多药耐药的逆转作用。     

西黄丸逆转三阴性乳腺癌多药耐药的作用机制研究

目的:探索西黄丸对三阴乳腺癌耐药株MDA-MB-231/ADM多药耐药的逆转作用及其机制。方法:细胞实验:采用MTT法检测不同浓度西黄丸作用于MDA-MB-231、MDA-MB-231/ADM细胞48 h后肿瘤细胞的生长抑制率,以生长抑制率低于20%的药物浓度作为非细胞毒性浓度;MTT法检测非细胞毒性浓度西黄丸对MDA-MB-231/ADM细胞多药耐药的逆转作用,计算耐药倍数;采用Western Blot法检测西黄丸对MDA-MB-231/ADM细胞P-gp、P-Akt、AKt、PTEN蛋白的表达的影响,RT-PCR法检测西黄丸干预后的MDA-MB-231/ADM细胞耐药基因的表达。结果:西黄丸对MDA-MB-231及MDA-MB-231/ADM细胞均有抑制增殖作用,且呈剂量依赖性,并选取4mg/ml和6mg/ml作为西黄丸的非细胞毒性浓度;非细胞毒性浓度的西黄丸联合ADM作用于MDA-MB-231/ADM细胞后,能明显降低ADM对MDA-MB-231/ADM的IC50值,西黄丸在4mg/ml和6mg/ml浓度下,逆转倍数分别为1.82和2.19倍;Western-blot结果显示,西黄丸能降低MDA-MB-231/ADM细胞中P-gp蛋白表达及PI3K/Akt信号通路中的p-AKt蛋白表达,增高PTEN蛋白水平表达,总Akt蛋白表达量的变化不明显。RT-PCR结果显示,西黄丸能明显降低耐药基因P-gp及MRP1的表达。结论:西黄丸能有效逆转三阴乳腺癌多药耐药株MDA-MB-231/ADM的耐药性,从而增强耐药株对化疗药物ADM的敏感性,与化疗药物ADM联用后具有化疗增效作用,其机制可能是通过抑制PI3K/AKT信号通路发挥作用。     

黄连解毒汤中黄酮成分逆转 K562/ADM多药耐药的实验观察

目的:观察黄连解毒汤中黄酮成分逆转肿瘤多药耐药的作用,探讨本方逆转肿瘤多药耐药的物质基础。方法:以人慢性粒细胞白血病红白血病细胞株K562的耐阿霉素(adriamycin,ADM)细胞株(K562/ADM)为细胞系,通过MTT实验观察黄芩苷、京尼平苷对K562/ADM细胞ADM的敏感性的影响,计算细胞增殖抑制率、半数抑制浓度(IC50)及耐药逆转倍数,并对细胞内ADM浓度变化进行测定。结果:黄芩苷、京尼平苷均能部分逆转K562/ADM细胞。黄芩苷、京尼平苷的IC50值分别为5.06,6.74 mg.L-1。黄芩苷、京尼平苷的耐药逆转倍数分别为1.95,1.46倍。与相应的对照组相比,K562/ADM细胞经黄芩苷(50 mg.L-1)、京尼平苷(100 mg.L-1)作用后,细胞内ADM的荧光强度高于对照组,其中黄芩苷组提高到3.6%,京尼平苷组提高到1.7%。结论:黄连解毒汤逆转肿瘤多药耐药的物质基础可能与其含有的黄芩苷、京尼平苷有关。