复方佛耳草合剂对慢性阻塞性肺疾病大鼠TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的影响

目的 探讨复方佛耳草合剂对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的影响。方法 大鼠随机分为空白组(10只)和造模组(50只),造模组连续12周采用香烟烟雾联合气管注射LPS建立COPD大鼠模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组、地塞米松组(0.5 mg/kg)和复方佛耳草合剂低、中、高剂量组(6.8、13.6、27.2 g/kg),每组10只。给药干预24周后,采用动物肺功能仪检测大鼠肺功能,HE染色法观察肺组织病理变化,ELISA法检测血清TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA水平及SOD活性,RT-qPCR法检测肺组织TLR4、MyD88、NF-κB及caspase-3 mRNA表达,Western blot法检测肺组织TLR4、MyD88、NF-κB及TNF-α蛋白表达。结果 与空白组比较,模型组大鼠存在肺通气功能障碍,肺组织和支气管受损明显,SOD活性降低(P<0.01),血清TNF-α、IL-1β、IL-6及MDA水平升高(P<0.01),肺组织TLR4、MyD88、NF-κB、caspase-3 mRNA表达和TLR4、MyD8...     

云南松松塔对LPS诱导急性肺损伤大鼠炎症和氧化应激的影响

目的考察云南松松塔提取物对脂多糖(LPS)诱导大鼠急性肺损伤的保护作用及其可能的作用机制。方法 SD大鼠随机分为6组,阳性组灌胃给予1.5 mg/kg地塞米松,云南松松塔提取物低、中、高剂量组分别灌胃给予50、100、200 mg/kg云南松松塔提取物,正常组、模型组灌胃给予等容量生理盐水,每天1次,连续4 d。末次给药后1 h,腹腔注射10 mg/kg LPS诱导大鼠急性肺损伤,4 h后处死大鼠取各脏器,计算脏器指数,ELISA测定肺泡灌洗液(BALF)中炎症因子、氧化因子水平,RT-PCR测定肺组织TLR4/NF-κB信号通路分子mRNA相对表达。结果与模型组比较,云南松松塔高剂量组大鼠肺脏炎症因子和氧化因子水平、脾脏指数、肝脏指数和肾脏指数均降低(P0.05,P0.01),胸腺指数升高(P0.01),肺组织肺泡壁和支气管壁炎症细胞数量减少,水肿和充血情况减轻;BALF中炎症细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β、TGF-β水平降低(P0.01),IL-10水平升高(P0.01),SOD活力增加(P0.01),MDA、NO水平降低(P0.01);云南松松塔高、中剂量组大鼠肺组织中TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-1β相对mRNA表达降低(P0.01)。结论云南松松塔提取物可能通过抑制TLR4/NF-κB信号通路减轻LPS诱导的大鼠急性肺损伤。     

宣肺活血汤对内毒素性肺损伤大鼠模型肺功能的保护作用

目的:探究宣肺活血汤对内毒素性肺损伤大鼠模型肺功能的保护作用及其机制。方法:将30只SD大鼠随机分为对照组、模型组和宣肺活血汤组(7.25mg/kg),各10只,采用尾静脉注射脂多糖(LPS)法构建内毒素性肺损伤大鼠模型。采用HE染色观察大鼠肺组织病理变化;观察大鼠肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数和中性粒细胞数目;采用ELISA法检测大鼠超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、白介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量;采用Western blot法检测大鼠肺组织中NF-κB、JNK、p38蛋白的表达。结果:与对照组相比,模型组大鼠BALF中细胞总数、中性粒细胞数目,血清中MDA、IL-6及TNF-α含量,肺组织中NF-κB、JNK、p38蛋白表达均显著上升,血清中SOD的含量显著下降(P0.05);给予宣肺活血汤处理后,大鼠BALF中细胞总数、中性粒细胞数目,血清中MDA、IL-6及TNF-α含量,肺组织中NF-κB、JNK、p38蛋白表达均显著下降,血清中SOD的含量显著上升(P0.05)。结论:宣肺活血汤可以减轻内毒素性肺损伤模型大鼠肺功能障碍,可能通过参与氧化应激和炎症反应途径改善肺损伤。     

虎杖苷对慢性阻塞性肺疾病大鼠气道炎症及TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的:探究虎杖苷对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠气道炎症的缓减作用,并初步探究其作用机制。方法:将大鼠随机分为空白对照组、模型组、虎杖苷30、60、120mg/kg组、地塞米松0.09mg/kg组。采用肺功能检测仪检测用力肺活量(FVC)、第0.1秒用力呼气容积(FEV0.1)、呼气峰流速(PEF)、最大呼吸中段气流(MMF)、肺顺应性(Cldyn);吉姆萨染色法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数及中性粒细胞(PMN)、肺泡巨噬细胞(AM)、淋巴细胞(LYM)比例;酶联免疫吸附法检测BALF中TNF-α、IL-8、IL-1β水平;HE染色观察肺组织病理学变化;高碘酸希夫氏染色(PAS)观察支气管病理学变化;免疫印迹法检测肺组织中TLR4、NF-κB、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9蛋白表达;免疫组化法检测肺组织中TLR4、NF-κB蛋白阳性表达率。结果:与对照组相比,模型组肺组织病理半定量评分显著升高;FVC、FEV0.1、PEF、MMF、Cldyn明显降低,BALF中AM细胞比例明显降低,白细胞总数、PMN、LYM细胞比例明显升高,TNF-α、IL-8、IL-1β水平明显升高,支气管气管壁、平滑肌厚度升高,肺组织中TLR4、NF-κB p65、MMP-2、MMP-9蛋白表达及TLR4、NF-κB p65蛋白阳性表达率明显升高。与模型组相比,虎杖苷各组、地塞米松组肺组织病理半定量评分显著降低。FVC、FEV0.1、PEF、MMF、Cldyn升高,BALF中AM细胞比例显著升高,白细胞总数、PMN、LYM细胞比例显著降低,TNF-α、IL-8、IL-1β水平显著降低,支气管气管壁、平滑肌厚度降低,肺组织中TLR4、NF-κB p65、MMP-2、MMP-9蛋白表达及TLR4、NF-κB p65蛋白阳性表达率显著降低。结论:虎杖苷可改善肺组织、支气管组织形态,降低大鼠气道炎症反应,其机制可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路有关。     

木犀草素对慢性肾衰竭大鼠的保护作用

目的:探讨木犀草素对慢性肾衰竭大鼠的保护作用。方法:采用腺嘌呤法对大鼠进行灌胃,连续30 d,建立大鼠慢性肾衰竭模型,对照组灌胃生理盐水。造模成功后将18只大鼠随机分为模型组、木犀草素高剂量组、木犀草素低剂量组,给予相应药物治疗15 d。观察大鼠体态、毛发颜色及活动状况,ELISA法检测大鼠血清IL-6、TNF-α、BUN、SCr含量,HE染色观察大鼠肾脏组织病理变化,Western blotting法检测大鼠肾脏组织中TLR4、p-p65、p-IκB蛋白表达水平。结果:对照组大鼠毛发有光泽,体态圆润,动作灵敏,肾脏体积正常,颜色为正常的深红色,血清检测指标均正常。与对照组比较,模型组大鼠毛发粗糙无光,且出现秃毛,行动迟缓,血清IL-6、TNF-α、BUN、SCr、UA含量明显升高(P<0.05),肾脏组织体积增大,苍白无血色,出现大量炎性浸润、间质纤维化、肾小囊腔扩张严重,肾脏组织中TLR4、p-p65、p-IκB蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。与模型组比较,木犀草素高剂量组大鼠体型正常,毛发暗淡,无脱毛现象,肾脏组织炎性浸润较少,肾小囊腔呈现轻度扩张,间质纤维化程度较轻,肾脏组织有血色,血清IL-6、TNF-α、BUN、SCr、UA含量明显下降(P<0.05),肾脏组织中TLR4、p-p65、p-IκB蛋白表达水平明显下降(P<0.05)。木犀草素低剂量组大鼠各项指标与模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:高剂量的木犀草素能够改善慢性肾衰竭大鼠肾功能损伤,减轻炎症反应,其机制可能是抑制TLR4/NF-κB信号通路。     

款冬花散对COPD大鼠巨噬细胞极化的影响及其作用机制研究

目的 观察款冬花散对慢性阻塞性肺疾病（COPD）模型大鼠肺巨噬细胞极化的影响及TLR4/NF-κB/NLRP3通路在介导巨噬细胞极化过程中的作用。方法 48只SD大鼠随机分为空白组、模型组、罗红霉素组及款冬花散低、中、高剂量组,每组8只。建立COPD（痰热壅肺证）大鼠模型,采用款冬花散干预,HE染色评估肺组织病理改变,ELISA法对肺泡灌洗液中白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-18(IL-18)水平和肺组织iNOS、CD10水平进行定量检测,通过免疫组化和RT-PCR检测肺组织Toll样受体4(TLR4)、核转录因子-κB(NF-κB)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)的蛋白和mRNA表达水平。结果 与空白组相比,模型组大鼠BALF中IL-1β、IL-18含量升高,肺组织中一氧化氮合酶（iNOS）含量升高、CD10含量降低,肺组织中TLR4、NF-κB、NLRP3蛋白表达上调（P <0.01）,而款冬花散组对COPD（痰热壅肺证）模型大鼠的生物学特征有一定改善作用,在一定程度上改善肺组织炎性改变,降低大鼠BALF中IL-1β、IL-18含量,降低肺组织i...     

葛根素对大鼠急性肺损伤的影响

目的:探讨葛根素对大鼠急性肺损伤的作用机制。方法:将60只Wistar大鼠随机分成正常组,模型组,地塞米松组(3 mg·kg~(-1)),葛根素高、中、低剂量组(10,5,2.5 mg·kg~(-1)),每组10只。ig给药,连续给药7 d。正常组和模型组给予等体积的生理盐水。末次给药30 min后,ip 20%酵母混悬液(5 m L·kg~(-1))1次,注射12 h后再次ip 1次20%酵母混悬液(5 m L·kg~(-1))诱发大鼠急性肺损伤模型。末次给药24 h后,切取肺组织,HE染色后进行病理学观察。测定肺组织的湿干比重。检测大鼠肺组织中超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)的水平。ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6)的含量。Western blot法测定肺组织中核转录因子-κB(NF-κB)的蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠肺组织湿干比重明显升高,MDA,TNF-α,IL-6以及NF-κB的含量明显升高,SOD,GSH-Px的水平明显降低(P0.05,P0.01);与模型组比较,葛根素组的大鼠肺组织湿干比重降低,MDA,TNF-α,IL-6以及NF-κB的含量下降,SOD,GSH-Px的水平明显增加(P0.05)。肺组织出血、细胞浸润减轻。结论:预先给予葛根素可明显减轻急性肺损伤大鼠肺组织炎症反应及肺水肿程度,其机制可能是通过降低TNF-α,IL-6,NF-κB的含量,发挥其抗氧化应激的作用,达到保护作用。     

清肺排毒汤对LPS诱导急性肺损伤小鼠炎症的作用

目的 探讨清肺排毒汤对脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤(ALI)小鼠的抗炎作用及其机制。方法 小鼠随机分为对照组、模型组、地塞米松组及清肺排毒汤低、高剂量组,除对照组外,其余各组采用气管穿刺注射LPS建立ALI模型,造模成功后给予相应药物干预7 d。记录小鼠存活率、肺湿干重比,HE染色观察肺损伤程度,吉姆萨染色法及血液分析仪分类计数肺泡灌洗液(BALF)中炎性细胞,RT-qPCR法检测肺组织TLR4、MyD88、NF-κB mRNA表达,ELISA法检测小鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平,Western blot法检测肺组织TLR4、MyD88、p-NF-κB p65、p-IκBα蛋白表达。结果 与模型组比较,清肺排毒汤高剂量组小鼠肺水肿和损伤程度,血清、BALF中炎性细胞因子和炎性细胞数量,肺组织TLR4、MyD88、NF-κB mRNA表达和肺组织TLR4、MyD88、p-NF-κB p65,p-IκBα蛋白表达均有不同程度降低(P<0.05,P<0.01)。结论 清肺排毒汤可能通过调控TLR4/MyD88/NF-κB信号通路抑制炎症因子和介质释放,减轻LPS诱...     

姜黄素对急性肺损伤小鼠炎症反应的改善作用

目的考察姜黄素对急性肺损伤小鼠炎症反应的改善作用。方法 50只小鼠随机分为对照组、急性肺损伤组、姜黄素干预组(200 mg/kg)、TLR4激动剂组和TLR4抑制剂组,采用腹腔注射脂多糖(5 mg/kg)建立脓毒性休克致急性肺损伤小鼠模型。24 h后, ELISA检测血清炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6水平,以及肺组织TLR4、MyD88、NF-κB水平,HE染色观察肺组织病理学形态,并计算肺损伤评分。结果与对照组比较,急性肺损伤组小鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平,肺组织TLR4、MyD88、NF-κB表达,肺组织病理学评分显著升高(P0.01);与急性肺损伤组比较,姜黄素干预组小鼠上述指标均显著降低(P0.01);与姜黄素干预组比较,TLR4激动剂组小鼠上述指标均显著升高(P0.01),而TLR4抑制剂组则显著降低(P0.01)。结论姜黄素可通过TLR4/MyD88/NF-κB信号通路来改善急性肺损伤小鼠炎症反应。     

水飞蓟素通过调控TLR/NF-κB信号通路改善急性肺损伤大鼠肺功能作用研究

目的观察水飞蓟素对急性肺损伤(ALI)大鼠肺功能的保护作用并探讨其机制。方法采用脂多糖制备ALI模型大鼠,随机分为ALI组、地塞米松(0.9 mg/kg)组、低(15 mg/kg)、中(30 mg/kg)、高(60 mg/kg)剂量水飞蓟素组、TLR4抑制剂TAK-242(0.5 mg/kg)组,对照组(等体积生理盐水)及ALI组(等体积生理盐水)。灌胃给药24 h后,分析各组大鼠动脉血气指标;苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织形态;酶联免疫吸附(ELISA)法检测肺泡灌洗液中单核细胞趋化因子(MCP-1)、白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;蛋白印迹(WB)法检测肺组织Toll样受体4(TLR4)、核转录因子-κB(NF-κB)表达情况。结果与对照组比较,ALI组大鼠W/D、Pa CO_2水平增高、Pa O_2水平明显下降(P 0.05);肺组织现细胞破碎等病变;肺泡灌洗液中SOD、MPO活性降低(P 0.05),MCP-1、IL-1β、TNF-α水平增高(P 0.05);肺组织TLR4表达上调、NF-κB核移位增加(P 0.05)。与ALI组比较,低、中、高剂量水飞蓟素组和TAK-242组大鼠大鼠W/D、PaCO_2水平降低、Pa O_2水平明显增高(P 0.05),肺组织病变减轻,肺泡灌洗液中SOD、MPO活性升高(P 0.05),MCP-1、IL-1β、TNF-α水平降低;肺组织TLR4表达下调、NF-κB核移位减少(P 0.05)。结论水飞蓟素可能通过调控TLR4/NF-κB通路抑制氧化应激反应和炎症反应,保护急性肺损伤大鼠肺功能。     

中药黄龙汤对CPL大鼠回肠组织中TLR4/NF-κB信号通路调控的实验研究

目的:通过检测中药黄龙汤干预后CPL模型大鼠中血清中IL-1β、TNF-α含量,回肠组织TLR4、Myd88、NF-κB表达水平,探讨中药黄龙汤通过调控TLR4/NF-κB通路途径的抗炎作用机制。方法:SD大鼠70只,采用盲肠结扎穿孔术复制CPL大鼠模型,并经口给予中药黄龙汤干预,连续干预3 d。末次给药后1 h,采集全血,分离血清,同时取回肠组织冻存。采用ELISA法检测各组大鼠血清中IL-1β、TNF-α含量;Western-blot法检测回肠组织中TLR4、Myd88、NF-κB表达水平。结果:与假手术组比较,模型对照组大鼠血清IL-1β、TNF-α含量显著升高,回肠组织中TLR4、Myd88、NF-κB表达水平显著上调;与模型对照组比较,西药组和黄龙汤联合西药组大鼠血清IL-1β、TNF-α含量显著降低,回肠组织中TLR4、Myd88、NF-κB表达水平显著下调;与西药组比较,黄龙汤联合西药组大鼠血清IL-1β、TNF-α含量及回肠组织中TLR4、Myd88、NF-κB表达水平显著下调,差异有统计学意义。结论:黄龙汤联合西药美罗培南对CPL模型大鼠具有抗炎作用,能够显著抑制血清IL-1β、TNF-α的表达,该作用可能是通过调控回肠组织中TLR4/NF-κB信号通路活化实现的。     

肺康颗粒通过TLR4/NF-κB信号通路干预COPD大鼠炎症的相关机制

目的观察肺康颗粒对Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)信号通路的影响,探讨其干预慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠炎症的机制。方法将60只SD大鼠随机分成6组:正常组,模型组,肺康颗粒低、中、高剂量组(10.11,20.22,40.44 g·kg~(-1),以生药量计),地塞米松组(1 mg·kg~(-1))。采用持续熏烟(20周)联合气管滴注脂多糖(LPS)法建立大鼠COPD模型。第5周开始,灌胃给予肺康颗粒进行干预,连续给药16周。采用苏木素-伊红(HE)染色观察COPD模型大鼠肺脏组织病理变化;检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数及其种类;酶联免疫吸附法(ELISA)测定大鼠BALF中炎症细胞因子IL-1β、TNF-α、IL-6及IL-17含量;qRT-PCR法检测肺组织中TNF-α、IL-6、TLR4 mRNA表达;Western Blot法检测肺组织细胞胞浆蛋白TLR4、p-IκB、IκB及胞核蛋白NF-κB p65的蛋白表达。结果与模型组比较,肺康颗粒各剂量组治疗后肺泡结构均有所恢复;肺康颗粒中、高剂量组的IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-17含量明显降低(P0.01);肺康颗粒各剂量组的白细胞总数明显降低(P0.01),肺康颗粒中、高剂量组的中性粒细胞及高剂量组的淋巴细胞亦明显减少(P0.05,P0.01);肺康颗粒中、高剂量组肺组织中TNF-α、IL-6 mRNA的表达量均明显下调(P0.05,P0.01),而TLR4 mRNA表达则明显上调(P0.01);肺康颗粒各剂量组的TLR4、IκB蛋白表达明显上调(P0.05,P0.01),胞核蛋白p65的表达明显下调(P0.01),肺康颗粒高剂量组的p-IκB蛋白表达亦显著下调(P0.01)。结论肺康颗粒可能通过TLR4/NF-κB信号转导通路干预炎症基因的表达,减轻COPD大鼠的炎症反应。     

通腑泻肺法对ALI/ARDS大鼠炎症反应的调控作用

目的探讨通腑泻肺中药对ALI/ARDS大鼠炎症反应的可能作用机制。方法 27只大鼠随机分为空白组、模型组、中药组,每组9只。模型组与中药组尾静脉注射内毒素8 mg/kg,空白组大鼠静脉注射生理盐水。中药组在造模完成后给予通腑泻肺中药灌胃,每次0.01 m L/g,每日1次,共7 d,空白组与模型组予等量生理盐水灌胃。通过ELISA法检测大鼠血清及BALF中TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10表达,免疫组化染色及Real-Time PCR方法检测肺组织PPARγ、NF-κB p65、TLR4蛋白及其m RNA表达。结果模型组大鼠肺组织中NF-κB p65和TLR4的m RNA表达升高,PPARγ的m RNA表达下降(P0.05),炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10显著升高(P0.05);与模型组相比,中药组NF-κB p65、TLR4的m RNA表达降低,PPARγ的m RNA表达升高(P0.05),炎症因子显著降低(P0.05)。结论通腑泻肺中药可以上调ALI/ARDS状态下PPARγ的表达,降低TLR4及NF-κB表达,减轻TLR4介导的炎症反应。     

鬼针草总黄酮对新生大鼠高氧肺损伤的影响

目的:观察鬼针草总黄酮(TFB)对新生大鼠高氧肺损伤的保护作用并探讨其作用机制.方法:80只新生SD大鼠随机分为正常对照组、高氧肺损伤组、高氧肺损伤+ TFB组,每组20只.常压高氧仓内制备肺损伤模型,给药处理后,处死大鼠,观察每组大鼠肺泡灌洗液白细胞和蛋白含量及肺组织NF-κB表达以及肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素(IL-6)、白细胞介素(IL-10)、超氧化物歧化酶( SOD)、丙二醛(MDA)含量.结果:与对照组比较,高氧肺损伤组大鼠肺泡灌洗液白细胞、蛋白含量明显增加,肺组织NF-κB表达增强,MDA、TNF-α、IL-6含量显著增加(P＜0.01),IL-10含量显著降低(P＜0.01);与高氧肺损伤组比较,TFB组IL-10含量明显升高,其余指标明显降低(P＜0.05-P＜0.01).结论:鬼针草总黄酮能通过抑制NF-κB表达,进而抑制炎性因子的表达,提高抗氧化能力来减轻高氧肺损伤.     

苦参素对感染性休克大鼠肺组织NF-κB等细胞因子的影响

目的：观察苦参素（oxymatrine，OMT）对感染性休克大鼠肺组织NF-κB等细胞因子的影响。方法：采用大鼠盲肠节扎穿孔法（CLP）复制大鼠感染性休克模型，随机将56只大鼠分为假手术组、OMT对照组、模型（CLP）组、CLP＋OMT高、中、低剂量组、阳性对照（CLP＋地塞米松）组。采用免疫组化法检测肺组织NF-κB（p65）及IkB-α的活性；放射免疫分析法测定肺组织匀浆中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及白细胞介素-6（IL-6）的含量改变。结果：OMT能显著抑制肺组织NF-κB（p65）及IkB-α的活性（P〈0．05），降低肺组织匀浆中TNF-α及IL-6的含量（P〈0．05），并提高动脉血PaO2，SaO2含量，降低PaCO2，HCO3^-含量；降低肺组织W／D比值及肺系数（PWI）。结论：OMT能通过抑制诱导NF-κB的激酶（NF-κB-inducing Kinase，NIK）的活化从而抑制细菌、病毒等对NF-κB的激活作用，减少TNF-α，IL-6等促炎因子的表达，进而对感染性休克大鼠肺损伤性病变发挥治疗作用。     

基于TLR3/TAK/NF-κB信号通路探究壮宣饮对H1N1流感病毒性肺炎大鼠肺损伤的保护作用

目的 探讨壮宣饮对H1N1流感病毒性肺炎大鼠肺损伤及TLR3/TAK1/NF-κB信号通路的影响。方法 将大鼠随机分为对照组、模型组、奥司他韦组(13.5 mg/kg)和壮宣饮高、中、低剂量组(14.0、7.0、3.5 g/kg),每组12只。采用甲型流感病毒H1N1滴鼻法建立流感病毒性肺炎大鼠模型,造模24 h后灌胃给予相应剂量药物。给药5 d后观察大鼠一般状态变化,检测大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中TNF-α、IFN-γ、IL-6水平,计算肺湿/干重比,HE染色观察大鼠肺组织病理学变化,RT-qPCR法检测肺组织H1N1病毒载量,Western blot法检测肺组织TLR3/TAK1/NF-κB信号通路相关蛋白表达。结果 与对照组比较,模型组大鼠精神萎靡、毛色无光泽、呼吸加快、行动迟缓、体质量下降,肺湿/干重比值和BALF中TNF-α、IFN-γ、IL-6水平升高(P<0.01),肺组织病理学评分、H1N1病毒载量、TLR3、p-IκBα蛋白表达及p-TAK1/TAK1、p-NF-κB p65/NF-κB p65比值升高(P<0.01),IκBα蛋白表达降低(P&l...     

邓氏清霾汤对PM2.5致急性肺损伤大鼠炎症反应的作用及机制探讨

目的观察和探讨邓氏清霾汤对PM2.5诱导急性肺损伤(ALI)大鼠的保护作用及抑制炎症反应作用机制。方法 SD雄性大鼠72只,随机分为正常对照组、模型对照组、地塞米松组、邓氏清霾汤低剂量组、邓氏清霾汤中剂量组、邓氏清霾汤高剂量组,每组12只。造模开始后第1、8、15、22、28天除正常对照组采用生理盐水进行鼻腔滴注(100μL/只)外,其余各组同于上述几天滴注PM2.5混悬液(每只0.5mg/100μL)制备ALI模型。自造模之日起连续4周,正常对照组、模型组经口灌胃生理盐水3ml/只/天,地塞米松组以0.02mg/ml地塞米松溶液灌胃3ml/只/天,邓氏清霾汤低、中、高剂量分别以浓度0.73、1.45、2.29g/ml中药溶液灌胃,3ml/只/天。各组大鼠于最后一次滴鼻染毒后48 h内处死。HE染色光镜下观察肺组织病理学改变,ELISA法检测肺泡灌洗液(BALF)中白介素-1β(IL-1β)、白介素-10(IL-10)的含量,肺组织湿重/干重(W/D)比值及肺组织中NF-κB p65蛋白含量。结果鼻腔滴注PM2.5混悬液成功建立大鼠肺损伤模型,除正常对照组外,各组大鼠肺组织病理切片均可见不同程度的肺组织病理损害,邓氏清霾汤中、高剂量组、地塞米松组大鼠的肺组织病变明显减轻,肺组织W/D比值,BALF中IL-1β、IL-10含量,肺组织中NF-κB p65蛋白含量显著降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论邓氏清霾汤可通过有效减轻肺组织及气管周围炎性细胞浸润,降低ALI大鼠肺组织W/D比值,BALF中IL-1β、IL-10含量及ALI大鼠肺组织胞核内NF-κB p65蛋白含量起到对PM2.5诱导ALI大鼠肺组织预防保护作用,且存在着一定的剂量-效应反应关系。并同时发现中药减轻炎症反应是通过抑制NF-κB通路激活而实现。     

加味小青龙汤对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织核转录因子-κB、锌指蛋白A20表达的影响

目的:观察加味小青龙汤对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织核转录因子-κB 65(NF-κB65)、锌指蛋白A20蛋白及其基因表达的影响。方法:Wistar大鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、地塞米松和加味小青龙汤组。采用脂多糖气管滴注联合烟熏方法建立COPD大鼠模型,检测支气管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1β含量,检测肺组织NF-κB65、A20蛋白及其基因表达,观察加味小青龙汤对上述指标及肺组织病理形态学变化的影响。结果:与正常组比较,模型组TNF-α、IL-1β、NF-κB和A20蛋白及其基因表达均明显上调;与模型组比较,加味小青龙汤组TNF-α、白介素-1β、NF-κB蛋白表达明显降低,加味小青龙汤组A20基因表达显著上调。病理观察结果显示,与正常组比较,模型组肺组织炎症细胞浸润,管腔中有大量中性粒细胞及黏液聚集,管壁明显增厚,胶原染色显示肺间质纤维组织大量增生;加味小青龙汤组肺组织病理改变明显轻于模型组,加味小青龙汤组肺组织少数呈轻度间质性肺炎,仅见少量的纤维组织增生。结论:加味小青龙汤能够减轻COPD模型大鼠肺组织损伤,对COPD模型肺组织有保护作用,其机理可能与其降低TNF-α和白介素-1β含量、下调NF-κB蛋白表达、上调A20基因表达有关。     

复方丹参注射液对重症急性胰腺炎肺损伤大鼠CYLD/NF-κB信号的影响

目的探究复方丹参注射液对重症急性胰腺炎(SAP)肺损伤(ALI)大鼠肺组织的改善作用,并探究其可能的作用机制。方法将SD大鼠分为假手术组、模型组、复方丹参注射液(SM)低、中、高剂量组、地塞米松组,每组12只大鼠,HE染色观察胰腺、肺组织损伤情况;测量腹水量、肺组织干、湿质量;测定肺泡灌洗液(BAL)中中性粒细胞(PMN)数量以及动脉血中血气指标;蛋白免疫印迹(WB)、免疫组化法分析CYLD/NF-κB通路蛋白表达;酶联免疫吸附法检测BAL中炎性细胞因子水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠胰腺、肺组织病理评分、腹水量、胰腺、肺组织W/D、PMN、PaCO2、p-p65、p-IκBα蛋白表达、TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA升高,PaO2、OI、CYLD蛋白表达、SOD水平降低(P 0.05)。与模型组相比,SM组、地塞米松组胰腺、肺组织病理评分、腹水量、胰腺、肺组织W/D、PMN、PaCO2、p-p65、p-IκBα蛋白表达、TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA均降低,PaO2、OI、CYLD蛋白表达、SOD水平均升高(P 0.05)。结论复方丹参注射液可缓解SAP-ALI大鼠炎症损伤,可能与激活肺组织CYLD、抑制/NF-κB信号通路激活有关。     

抗炎合剂对脓毒症急性肺损伤TLR4/MyD88信号通路的干预研究

目的观察抗炎合剂对脓毒症急性肺损伤大鼠TLR4/MyD88/NF-кB信号通路的影响。方法清洁级健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、抗炎合剂组、清开灵组。采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症急性肺损伤模型,分别于造模后24 h处死动物,并进行肺组织HE染色,测定大鼠肺组织TRL4、MyD88、NF-κB表达及血清IL-1、IL-6、TNF-α含量。结果模型组大鼠肺组织损伤程度、肺组织TRL4、MyD88、NF-κB表达及IL-1、IL-6、TNF-α含量较假手术组明显增高,而抗炎合剂组、清开灵组上述指标较模型组有不同程度的降低,且抗炎合剂组优于清开灵组。结论抗炎合剂能减少炎症因子释放,减轻大鼠肺损伤程度,机制可能为通过抑制TLR4/MyD88信号通路减少炎症因子释放。