天然冰片在小鼠组织内的GC-MS测定法和组织分布研究

目的:建立天然冰片在小鼠组织内含量测定的GC-MS法并进行组织分布研究,初步探索天然冰片的归经特征.方法:采用DB-5MS弹性毛细管色谱柱(0.25mm×30m×0.25μm);电子轰击(EI)电离方式,轰击能量为70eV,倍增电压1100V;选择性离子检测(SIM),天然冰片m/z 95,内标萘m/z128;小鼠组织样品用生理盐水匀浆后,加入萘作为内标,用正己烷振荡萃取,取上清液进样测定.组织分布研究以天然冰片的CMC-Na溶液给小鼠灌胃,在不同时间点分批处死小鼠后取各组织样本,经处理后用GC-MS法测定组织中的天然冰片含量.结果:本研究建立的天然冰片GC-MS测定方法,在22ng·mL-1～22μg·mL-1范围内响应信号(Y)与天然冰片浓度(X)呈良好线性关系,Y=0.000486X+0.00036,R2=0.999(n=3),最低检测限为10ng·mL-1,定量下限为22ng·mL-1,日内精密度为3.72～6.11%,日间精密度为7.29～17.6%,相对回收率和提取回收率分别为85.95～107.93%和93.04～103.03%.组织分布研究结果表明,天然冰片分布于大部分组织,单个组织内天然冰片浓度随时间延长呈现多峰现象;天然冰片在肝脏内含量最高,在心、脑、肾等重要组织内的含量也较高.结论:本研究建立的GC-MS测定方法准确、可靠,可用于天然冰片在动物体内的定量分析;天然冰片在不同组织内的分布有明显差异,肝、肾、心、脑中分布含量较高;天然冰片的归经特征中有归心经的趋势.     

GC-FID法测定人含服速效救心丸后血浆中冰片的浓度

目的：采用GC—FID法测定人含服速效救心丸后血浆中冰片（龙脑、异龙脑）的浓度。方法：建立测定人体血浆中冰片的GC—FID法，采用HP-5石英弹性毛细管柱，柱温85℃，进样口温度230℃，气化室温度240℃，载气为氮气，流速为8．3ml／min，萘为内标。结果：冰片血药浓度在50～800ng/ml范围内线性关系良好，C=0．047112A-0．159928（r=0．9943），测得平均回收率为98．53％，日内RSD为2．51％，日间RSD为3．64％。结论：建立的GC—FID测定法简单、快速、准确，适用于冰片制剂临床血药浓度监测和药动学研究。     

中药冰片在动物体内转化为樟脑的研究

目的：给小鼠等动物灌服冰片后，对冰片在其体内转化为樟脑的情况进行初步的定性研究。方法：将天然冰片、冰片（合成龙脑）和异龙脑配成混悬液后，给小鼠灌服，30min后处死小鼠，取肝脏和血浆，经过（肝脏匀浆、）萃取、离心等处理后，取上清液注入GC—MS进行定性分析；给小鼠、大鼠、家兔灌服天然冰片后，在不同时间点取样，经处理后对樟脑进行分析。结果：GC—MS法可很好的分离和定性龙脑、异龙脑和樟脑等成分；小鼠灌服天然冰片、冰片（合成龙脑）和异龙脑后30min，小鼠体内均检测到樟脑色谱峰；灌服天然冰片后在不同动物体内樟脑的含量基本都随着时间的延长而呈一定规律性的变化。结论：冰片（天然冰片、冰片（合成龙脑））和异龙脑在小鼠、大鼠、家兔体内有转化为樟脑的趋势，动物体内的樟脑含量随时间而呈规律性变化。     

气相色谱法测定脑通注射液中冰片的含量

目的用气相色谱法同时测定冰片中异龙脑和龙脑的含量。方法以萘为内标物，采用内标物预先加入法，弹性石英毛细管柱DB—WAX（30m×0．32mm，0．25μm），FID检测器，氮气为载气，柱温为110％。结果在该色谱条件下，异龙脑和龙脑及内标物萘均得到良好的分离，冰片的回收率为96．58％（RSD=1．01％）。结论该法灵敏、准确，重复性好，可用于控制该制剂的质量。     

复方丹参滴丸中冰片的生物体液的含量测定

以GC－MS联用技术测定大鼠灌服复方丹参滴丸后其血清中的冰片含量,冰片浓度在0．00505－40．1ug/ml范围内线性关系良好,血中回收率达72．82－86．77％,最低检测浓度为1ng/mL,本方法以萘为内标,SIM方式检测,定量准确,干扰少,日内及日间的RSD小于2．76％和1．93％。结果表明本方法可应用于复方丹参滴丸所含冰片的药代动力学等的进一步的研究。     

气相色谱法测定藿香正气水中乙醇的含量

目的：建立气相色谱法测定藿香正气水中乙醇的含量。方法：色谱柱为phenomenex毛细管柱zebron ZB—waxplus（30m×0．25mm，0．25μm）；氮气为载气，流速为0．5mL·min^-1，分流比为30：1；进样口温度为90℃；柱温为85℃；FID检测器，温度为200℃；进样量1．1μL；正丙醇为内标物。结果：在该色谱条件下，藿香正气水中乙醇和内标物得到良好的分离，乙醇在0．010-0．1mL·mL^-1。范围内线性良好（r=0．9995，n=7）；平均回收率为100．0％，RSD为1．18％（n=6）。结论：该法灵敏、准确，重复性好，可用于测定该制剂的乙醇含量。     

液质联用研究骨碎补提取物给予大鼠后柚皮苷及其代谢物柚皮素的药动学行为

目的：建立超高效液相色谱一串联质谱法（UPLC—MS／MS）研究柚皮苷及其代谢物柚皮素在大鼠体内的药动学行为。方法：骨碎补药材中加入50％乙醇加热回流1h，提取物用50％PEG400制成混悬液灌胃给予大鼠。血浆样品处理采用液液萃取法，以乙酸乙酯为提取试剂，对乙酰氨基酚为内标。色谱条件采用ACQurrYUPLCTMBEHC18色谱柱，流动相为乙腈-0．4％冰醋酸（80：20，v／v），流速为0．25mL．min-1，柱温为25℃；质谱条件采用ESI源，负离子检测方式，多反应监测（MRM）。用于定量分析的离子反应分别为m／z578．4→270．7（柚皮苷）、m／z270．7→150．7（柚皮素）和m／z149．9→106．6（内标）。结果：柚皮苷和柚皮素的Gmax分别为（2．56±0．77）×103ng·mL-1和222±45ng·mL-1，Tmax分别为0．67±0．20h和8．0±1．3h，AUC0-t分别为（3．23±0．54）×103ng·mL-1．h和（1．57±0．37）×103ng·mL-1h，AU0-分别为（3．29±0．54）×103ng·mE-1．h和（1．79±0．43）×103ng·mL-1h，柚皮苷的咖为4．1±0．8h，且在其药时曲线8h处出现另一微小的峰。结论：所建立的UPLC—MS／MS方法符合生物样品分析要求，药动学研究结果为骨碎补的临床应用提供了参考。     

关于HPLC对小儿止咳剂中盐酸麻黄碱的含量的测定

文章中采用内标法来对含量进行测定，内标物质为盐酸苯丙醇胺。色谱条件为：Shim—paekVP—ODS柱（150mm×4．6mm，5μm）；流动相：甲醇-水相（22：78）（0．05mol·L-1磷酸二氢钾溶液磷酸调pH值=3．0）；流速1．0mL·min^-1；检测波长205nm。结果显示盐酸麻黄碱在12．106～72．636mg·L^-1范围内线性关系良好（r=-0．9998），平均回收率为100．41％，RSD=2．58％（n=5）。可以看出该方法简便、灵敏、准确，重现性好，可用于该制剂的含量测定和质量控制。     

GC测定痛瘀消散贴中冰片和樟脑的含量

目的：采用GC测定痛瘀消散贴中冰片和樟脑的含量。方法：石英毛细管色谱柱（30m&;#215;0．28mm，0．32μm，聚甲基硅油，HP-5），FID检测器，检测温度250℃，进样口温度200℃，分流比10．0：1。结果：冰片以龙脑计，龙脑在0．0897-0．5384μg范围内，龙脑与内标物的峰面积比值呈良好线性关系（r=0．9999，n=6），平均回收率为96．47％；樟脑在0．0950-0．5702μg范围内，樟脑与内标物的峰面积比值呈良好线性关系（r=0．9999，n=6），平均回收率为100．02％。结论：该方法简单、快速、准确，可用于该制剂的质量控制。     

胡黄连苷Ⅱ在大鼠体内的药代动力学

目的：研究胡黄连苷Ⅱ在大鼠体内的药代动力学。方法：大鼠单剂量静注给予胡黄连苷Ⅱ后，采用HPLC-MS法测定大鼠血浆、组织、粪便、尿液及胆汁中的胡黄连苷Ⅱ。色谱柱为Hypersil ODS2柱，（5μm，150mm×4．6mm），流动相为甲醇：水（47：53），内标为替硝唑。ESI选择正离子检测：检测离子为[M＋Na]^＋m/z535．00（胡黄连苷Ⅱ）、[M＋H]^＋m／z247．90（内标）。结果：血浆样品中，胡黄连苷Ⅱ的线性范围为0．05．20．0μg·mL^-1（r=0.9998）；各浓度的提取回收率均大于76％；最低定量限为0．05μg·mL^-1。静注给予2.5、5.0、10.0mg·kg^-1后，大鼠体内胡黄连苷Ⅱ浓度快速降低，平均消除半衰期仅为19．6min。AUC与剂量呈现良好的线性相关性，提示胡黄连苷Ⅱ在大鼠体内的处置属于线性动力学。静脉注射给药后胡黄连苷Ⅱ广泛分布于各组织，其中肾和肝组织中浓度最高。胡黄连苷Ⅱ主要通过尿液和胆汁排泄，在尿液中的平均累积排泄百分率为11．79％；胆汁中平均累积排泄百分率为7．80％；粪便中未检测出胡黄连苷Ⅱ。胡黄连苷Ⅱ平均血浆蛋白结合率为30．0％。结论：静注给药后，胡黄连苷Ⅱ迅速从大鼠体内消除，并可在体内广泛分布。有约19．59％以原型形式从胆汁和尿液排泄。     

中药冰片在动物体内转化为樟脑的研究

目的:给小鼠等动物灌服冰片后,对冰片在其体内转化为樟脑的情况进行初步的定性研究.方法:将天然冰片、冰片(合成龙脑)和异龙脑配成混悬液后,给小鼠灌服,30min后处死小鼠,取肝脏和血浆,经过(肝脏匀浆、)萃取、离心等处理后,取上清液注入GC-MS进行定性分析;给小鼠、大鼠、家兔灌服天然冰片后,在不同时间点取样,经处理后对樟脑进行分析.结果:GC-MS法可很好的分离和定性龙脑、异龙脑和樟脑等成分;小鼠灌服天然冰片、冰片(合成龙脑)和异龙脑后30min,小鼠体内均检测到樟脑色谱峰;灌服天然冰片后在不同动物体内樟脑的含量基本都随着时间的延长而呈一定规律性的变化.结论:冰片(天然冰片、冰片(合成龙脑))和异龙脑在小鼠、大鼠、家兔体内有转化为樟脑的趋势,动物体内的樟脑含量随时间而呈规律性变化.     

液质联用色谱法同时测定微透析样品中尼古丁与氘代尼古丁的含量

目的建立液质联用法同时测定微透析样品中尼古丁与稳定同位素氘取代尼古丁的含量。方法色谱采用Hypersil Gold C18柱(150mm×2.1mm,3μm);流动相:甲醇-2mmol·L-1乙酸铵(70:30);流速:0.21mL·min-1;质谱条件:大气压电喷雾离子源(ESI),正离子模式,选择离子反应监测;定量离子对分别是:尼古丁m/z163/130,氘代尼古丁m/z166/130。结果尼古丁在0.140-53.085ng、氘代尼古丁在0.148-50.19ng范围内线性关系良好,定量下限分别为尼古丁0.140ng(S/N>10),氘代尼古丁0.148ng(S/N>10);日内、日间精密度均小于15%。结论本方法灵敏度高、专属性好,操作简便、快速,适于微透析样品中尼古丁与氘取代尼古丁含量的测定。     

天然冰片与合成冰片对戊巴比妥钠所致小鼠睡眠时间的影响

目的：观察天然冰片与合成冰片对戊巴比妥钠所致小鼠睡眠间的影响。方法：选择ICR小鼠,随机分为空白组、溶剂对照组、天然冰片组、合成冰片组4组。天然冰片组与合成冰片组两组为实验动物组,经灌胃途径给药,分别按0．4g/k剂量给予天然冰片与合成冰片,连续灌胃给药7d,空白组实验动物给予相同体积的蒸馏水,溶剂对照组给予等体积的3％的吐温-80。4组实验动物于末次给药30min后,经腹腔注射给予50mg／kg的戊巴比妥纳,以翻正反射为观察指标,分别记录其睡眠潜伏时间、睡眠持续时间。结果：空白组、溶剂对照组、天然冰片组和合成冰片组小鼠的睡眠潜伏期分别（5．47±2．47）min、（5．17±2．22）min、（7．14±1．45）min、（7．37±2．34）min。睡眠时间分别为（38．25±14．59）min、（37．02±7．38）min、（18．05±7．64）min、（27．86±16．60）min。与空白组相比溶剂对照组的睡眠潜伏期没有显著性差异,天然冰片组与合成冰片组睡眠潜伏期延长P〈0．05有显著性差异。与空白组相比溶剂对照组的睡眠时间没有显著性差异,天然冰片组睡眠时间缩短P〈0．001有极显著性差异,合成冰片组睡眠时间虽然呈现缩短的趋势,但是没有显著性差异。结论：天然冰片与合成冰片都能延长对戊巴比妥钠所致小鼠的睡眠潜伏期;天然冰片与合成冰片都能缩短对戊巴比妥钠所致小鼠的睡眠时间,与空白对照组相比合成冰片组睡眠时间成缩短的趋势．但没有显著性差异。     

天然冰片对小鼠脑内氨基酸类神经递质含量的影响

目的研究小鼠口服天然冰片后脑内冰片含量的变化以及对氨基酸类神经递质含量的影响。方法小鼠灌胃天然冰片,于给药前及给药后0.083,0.167,0.25,0.333,0.5,0.75,1,1.5,2,2.5,3,4 h分别取脑,采用GC-MS法测定冰片含量,HPLC-FLD法测定氨基酸类神经递质含量。结果小鼠口服天然冰片1.2 g/kg后5 min开始出现兴奋症状,持续10~15 min转为抑制状态。天然冰片给药后5 min即可在脑内测得,60 min达到峰值,消除半衰期1.66 h,AUC为326.7μg.h.g-1。脑内天门冬氨酸从给药后0.083 h至1 h含量显著增加,谷氨酸在给药后0.333 h含量显著增加,在给药后1.5 h至4 h含量显著降低,γ-氨基丁酸从给药后0.167 h至4 h含量均显著增加,甘氨酸含量无明显变化。结论天然冰片对中枢神经系统具有兴奋/抑制的双向作用,其作用机制与其对中枢兴奋/抑制性氨基酸类神经递质释放的调控作用有关。     

冰片经鼻给药对鼻黏膜纤毛传输系统功能的影响

目的：通过糖精试验研究冰片对人鼻黏膜纤毛传输系统功能的影响,并探讨冰片经鼻引药上行与鼻黏膜纤毛传输系统的关系。方法：健康受试者30例,均分次行空白糖精试验以及用生理盐水,5%乙醇、低、中、高剂量冰片混悬液（分别含冰片2.5mg·ml^-1、5mg·ml^-1、10mg·ml^-1）喷鼻后间隔5min行糖精试验,比较6次试验的黏膜纤毛传输速率。结果：中剂量冰片混悬液喷鼻后黏膜纤毛传输速率最小（7.36±2.43mm·min^-1）,且显著小于空白糖精试验（10.78±3.17mm·min^-1）以及用生理盐水（（11.19±4.27mm·min^-1）和5%乙醇（（8.86±2.51mm·min^-1）喷鼻后的黏膜纤毛传输速率（均为P〈0.05）。结论：冰片对人鼻黏膜纤毛传输系统功能有抑制作用,提示若经鼻给药结合冰片喷鼻可减缓鼻黏膜纤毛传输系统对药物的清除,延长药物在鼻黏膜的滞留时间,增加药物经鼻吸收。这可能是冰片引药上行作用的机制之一。     

气相色谱法测定喉康散中龙脑与薄荷脑的含量

目的建立以气相色谱法测定喉康散中龙脑和薄荷脑含量的方法。方法色谱柱为Supel CO WAX-10石英毛细管色谱柱(30 m×0.32 mm,0.5μm),载气为N2,检测器为FID,进样口温度为200℃,检测器温度为250℃,内标物为水杨酸甲酯。结果龙脑在0.02975～0.47701 mg·mL-(1r=0.999949),薄荷脑在0.04824～0.77083 mg·mL-(1r=0.99998)范围内同各自峰面积与内标峰面积比值呈良好的线性关系;二者回收率分别为100.77%和101.62%,RSD分别为1.35%和1.38%(n=6)。结论本法操作简便、快速,结果准确、可靠,可用于喉康散的质量控制。     

反相高效液相色谱法测定香青兰中槲皮素的含量

目的：建立测定香青兰中槲皮素含量的方法。方法：色谱柱为Kromasil C18（4．6×150mm，5um），流动相为乙腈-5％甲酸（31：69），检测波长：280nm，流速：1.0mL·min^-1，柱温：30℃。结果：香青兰中槲皮素的线性关系良好，其线性范围为0．02mg·mL^-1～0．10mg·mL^-1（r=0．9990）。其回收率为97．2％（RSD=1．2％）。结论：所建方法准确、简便，为科学评价香青兰的质量提供了依据。     

高效液相色谱法测定不同色泽荜茇中胡椒碱含量

目的：采用HPLC方法测定荜茇灰色、黑色、棕色胡椒碱含量。方法：色谱柱Q（4．6×150mm，5μm）；流动相：甲醇-水（77：23）；流速：1mL·min^-1；柱温30℃；测定波长：343nm。结果：胡椒碱9．2～46．0μg·mL^-1成线性关系（r=0．999）；回收率为100．4％；RSD=2．5％；荜茇灰色、黑色、棕色胡椒碱含量分别为15．00、16．35、10．28mg·g^-1。结论：灰色、黑色荜茇胡椒碱含量高于棕色荜茇胡椒碱含量。     

HPLC测定前列安通胶囊中芍药苷和盐酸小檗碱的含量

目的：建立高效液相色谱法测定前列安通胶囊中芍药苷和盐酸小檗碱含量的方法。方法：采用ZOR-BAXSB-C18色谱柱,流动相为乙腈-0．05mol·L^-1磷酸二氢钾溶液（磷酸调pH值至3．0）（16：84）（A）-乙腈（B）采用梯度洗脱（0—10min,A100％;10—20min,A100％。90％;20。30min,A90％-85％;30．35min,A85％）;检测波长：230nm;流速：1．0mL·min^-1。结果：芍药苷在7．7—192μg·mL^-1线性关系良好（r=0．9999）,平均回收率为99．6％,RSD=1．1％;盐酸小檗碱在7．2—180μg·mL^-1线性关系良好（r=0．9999）,平均回收率为99．8％,RSD=0．5％。结论：实验结果准确,重现性好,可用于前列安通胶囊的质量控制。