基于PI3K/Akt信号通路探讨甲基莲心碱对HeLa细胞的影响

目的 探讨甲基莲心碱对宫颈癌HeLa细胞凋亡的影响。方法 以不同质量浓度甲基莲心碱(0、10、15、20、25、30μg/mL)处理HeLa细胞，CCK-8法检测细胞活性，在光学显微镜下观察细胞形态，TUNEL法和流式细胞仪检测细胞凋亡情况，Western blot法检测细胞Bax、Bcl-2、cleaved caspase-3、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt蛋白表达。建立裸鼠HeLa细胞移植瘤模型，随机分为对照组、顺铂组和甲基莲心碱低、高剂量组，观察各组移植瘤生长情况，HE染色观察肿瘤组织细胞形态变化，Western blot法检测肿瘤组织蛋白表达。结果 随着甲基莲心碱干预剂量的增加，HeLa细胞逐渐失去正常形态，细胞变圆，贴壁能力降低，透光性增加。与对照组比较，甲基莲心碱组细胞活性降低(P<0.05),细胞凋亡率和Bax、cleaved caspase-3蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01),Bcl-2、p-PI3K、p-Akt蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),并呈时间和剂量依赖性；细胞PI3K、Akt蛋白表达无明显变化(P...     

HERG钾通道表达与小檗碱的抗肿瘤作用的关系

目的：以HERG钾通道为靶点，研究HERG钾通道表达水平与小檗碱的抗肿瘤作用的相关性。方法：采用Westem blot检测了HERG钾离子通道在不同肿瘤细胞的表达情况，经过质粒的分离和纯化、基因转染技术、MTT法研究了HERG钾通道的表达与小檗碱杀伤肿瘤细胞作用的关系，同时通过对细胞粘附能力和明胶酶分泌的测定研究了小檗碱对肿瘤细胞粘附和明胶酶分泌的影响。结果：HERG通道蛋白在不同肿瘤细胞的表达水平高低不同，在HT-29细胞中表达较高，而在A549细胞中基本不表达，在MCF-7、MCF-7／ADM、Bel-7402、PG细胞中表达居中。HERG通道蛋白表达较高的HT-29细胞对小檗碱的敏感性比表达较低的A549细胞弱。将berg基因转染入表达较低的A549细胞后，HERG通道蛋白的表达明显增加，而小檗碱的细胞增殖抑制作用明显降低，IC50值是A549亲本细胞的3．0倍；同时，它还能抑制HT-29细胞对Ⅰ型胶原的粘附和HT1080细胞分泌明胶酶MMP-9，这种抑制作用呈浓度依赖性。结论：小檗碱对肿瘤细胞的杀伤作用可能与HEIRG通道的表达呈负相关，即HERG表达高，杀伤作用较弱，反之，杀伤作用较强。同时，小檗碱可能通过抑制肿瘤细胞的粘附功能和释放明胶酶的功能而影响肿瘤的侵袭和转移。HERG钾通道可能是与肿瘤化疗相关的分子靶点。     

莲心碱对大鼠局灶性脑缺血C-Fos蛋白表达的影响

目的观察莲心碱对大鼠局灶性脑缺血C-Fos蛋白表达的影响并探讨其保护作用机制。方法采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血模型,通过免疫组化法检测脑缺血24 h C-Fos蛋白的表达以及经莲心碱(3 mg/kg)处理后对该蛋白表达的影响。结果脑缺血24 h C-Fos蛋白的表达明显增加,莲心碱可显著抑制脑缺血后C-Fos蛋白表达。结论莲心碱的神经保护机制可能与抑制C-Fos蛋白的表达有关。     

甲基莲心碱对肝星状细胞Collagen-I, TIMP-1及MMP-2的影响

目的: 观察甲基莲心碱对肝星状细胞Collagen-I,TIMP-1及MMP-2 mRNA表达及蛋白分泌的影响。 方法: 体外培养大鼠肝星状细胞株HSC-T6,随机分为5组:对照组、血小板衍生因子(PDGF)组、甲基莲心碱低、中、高剂量组(2,6,10 μmol·L^-1)。分别加入各组药物培养48 h后,收集细胞提取总RNA,采用RT-PCR检测Collagen-I,TIMP-1及MMP-2 mRNA表达,并收集细胞上清液采用ELISA检测3个因子的蛋白含量。 结果: 与对照组相比,PDGF可明显增加肝星状细胞Collagen-I,TMIP-1及MMP2 mRNA表达及蛋白分泌。与PDGF组相比,甲基莲心碱中、高剂量组Collagen-I及TMIP-1 mRNA表达及蛋白分泌明显减少,且随着浓度的增加,减少更明显,而甲基莲心碱低剂量组Collagen-I及TMIP-1 表达及分泌无明显变化。与PDGF组相比,甲基莲心碱3个剂量组的MMP-2 mRNA表达及蛋白分泌均无明显变化。 结论: 甲基莲心碱可抑制PDGF诱导的HSC的Collagen-I和TIMP-1的mRNA表达及蛋白分泌,且随浓度的增加,抑制作用加强,但对MMP-2的表达及分泌无明显影响。     

甲基莲心碱对H202损伤心肌细胞的保护作用

目的：探讨甲基莲心碱（neferine）对氧化损伤的大鼠乳鼠心肌细胞的保护作用。方法：分离培养sD乳鼠心肌细胞,建立心肌细胞过氧化损伤模型,将细胞分为7组,即空白对照组（contr01）、溶剂对照组（DMSO）、氧化损伤组（H202）、氧化损伤加入槲皮素对照组（quercetin＋H202）、氧化损伤加入莲心碱低、中、高浓度组（甲基莲心碱＋H202、甲基莲心碱一M＋H202、甲基莲心碱一H＋H202）。将3001xmol／LH202作用于加入槲皮素及不同浓度甲基莲心碱预培2h的心肌细胞,继续培养24h,以细胞毒四唑盐（MTr）比色试验,乳酸脱氢酶（LDH）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—px）、丙二醛（MDA）、流式细胞凋亡率、Caspase酶活性为检测指标。结果：甲基莲心碱呈剂量依赖性降低H202对心肌细胞活力的影响,降低MDA、LDH量,增加细胞GSH—px活性,并显著抑制Caspase一3和9活性,减少细胞凋亡数量,各指标差异具有统计学意义（P〈0．01）。结论：甲基莲心碱可保护和修复过氧化氢诱导的心肌细胞的损伤,其作用可能是通过抗氧化、增加细胞GSH—px活性,进而抑制Caspase一3和9活性,减少细胞凋亡。     

HPLC测定不同产地莲子心中莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱

目的建立高效液相色谱测定不同产地莲子心药材中3种生物碱的方法。方法采用高效液相色谱法,Polaris C18-A色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),甲醇-0.1%三乙胺水溶液(62∶38)为流动相,检测波长为282nm,体积流量为1.0mL/min。结果 3种生物碱平均回收率为莲心碱96.99%,异莲心碱104.26%,甲基莲心碱100.71%;RSD值分别为0.47%、0.21%、0.16%。结论该方法简便、快速、准确、重现性好,可用于莲子心中3种生物碱的测定。     

甲基莲心碱对H_2O_2损伤心肌细胞的保护作用

目的:探讨甲基莲心碱(neferine)对氧化损伤的大鼠乳鼠心肌细胞的保护作用。方法:分离培养SD乳鼠心肌细胞,建立心肌细胞过氧化损伤模型,将细胞分为7组,即空白对照组(control)、溶剂对照组(DMSO)、氧化损伤组(H2O2)、氧化损伤加入槲皮素对照组(quercetin+H2O2)、氧化损伤加入莲心碱低、中、高浓度组(甲基莲心碱+H2O2、甲基莲心碱-M+H2O2、甲基莲心碱-H+H2O2)。将300μmol/LH2O2作用于加入槲皮素及不同浓度甲基莲心碱预培2 h的心肌细胞,继续培养24h,以细胞毒四唑盐(MTT)比色试验,乳酸脱氢酶(LDH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)、丙二醛(MDA)、流式细胞凋亡率、Caspase酶活性为检测指标。结果:甲基莲心碱呈剂量依赖性降低H2O2对心肌细胞活力的影响,降低MDA、LDH量,增加细胞GSH-px活性,并显著抑制Caspase-3和9活性,减少细胞凋亡数量,各指标差异具有统计学意义(P0.01)。结论:甲基莲心碱可保护和修复过氧化氢诱导的心肌细胞的损伤,其作用可能是通过抗氧化、增加细胞GSH-px活性,进而抑制Caspase-3和9活性,减少细胞凋亡。     

莲心碱体外吸收对Ang Ⅱ诱导血管平滑肌细胞表型转化的影响

目的 通过检测血管平滑肌A7R5细胞内莲心碱的含量,同时测定不同浓度莲心碱对A7R5细胞活力的影响及莲心碱的药效作用,探究莲心碱进入细胞作用的效率与对A7R5细胞表型转换的影响。方法 体外培育大鼠血管平滑肌细胞A7R5细胞株,将其随机分为6组,分别用不同剂量莲心碱干预（0、5、25、50、100、200μg/mL）,采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF/MS）检测不同浓度的莲心碱干预15 min时A7R5细胞质中莲心碱浓度;采用MTT法筛选莲心碱药物浓度后,选择对细胞无伤害的药物浓度,采用血管紧张素Ⅱ（Ang Ⅱ）诱导建立A7R5细胞表型转换模型,将其分为空白对照组（完全培养基）、Ang Ⅱ组(1×10^-6 mol/L Ang Ⅱ)、莲心碱组(1×10^-6 mol/L Ang Ⅱ+10μg/mL莲心碱),干预24 h后,双转盘活细胞共聚焦实时成像分析系统观察A7R5细胞中表型转换标志物α-SMA的蛋白表达情况。结果 通过液质联用可检测到破碎细胞中莲心碱的含量,与干预浓度呈剂量依赖,空白对照和末次清洗细胞的PBS中未检...     

HPLC法测定莲心碱注射液中莲心碱含量及稳定性

采用HPLC测定莲心碱注射液中莲心碱的含量，以甲基莲心碱为内标，流动相为二氯甲烷-异丙醇-二乙胺（75∶25∶0．2），平均回收率为100．5％，并对其进行了光和热稳定性考察，t约为5．8个月，对光不稳定，提示该注射液应在低温、遮光条件下保存。     

影响莲心总碱中甲基莲心碱稳定性因素的试验研究

莲心总碱是从中药莲子心中提取的总生物碱，主要为莲心碱(liensinine)、异莲心碱(isoliensinine)及甲基连心碱(neferine)，其中甲基莲心碱含量最高［1］，它们的主要药理作用有降血压、抗心律失常、抗心肌缺血、抗血小板聚集等［2-4］。近年来许多研究证实，甲基莲心碱具有逆转肿瘤细胞多药耐药的作用［5-8］，这使得对莲子心的研究成为热点。对莲子心有效成分的提取工艺、化学成分、含量测定、药理作用和结构测定与修饰等已有研究报道［9-10］，但未见有对甲基莲心碱稳定性的研究报道，本实验对可能影响甲基莲心碱稳定性的多种因素进行了考察。     

微波消解-电感耦合等离子体质谱法测定脉络宁注射液中25种矿物质元素

目的建立微波消解-电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)直接稀释测定脉络宁注射液中25种矿物质元素(Mg、Ca、Fe、Cu、Zn、Mn、Al、B、Ba、Co、Cr、K、Li、Mo、Na、Ni、P、Pb、Sr、Th、Ti、V、As、Cd和Hg)的方法。方法分别对微波消解条件和测试条件进行考察;样品经微波消解后,采用电感耦合质谱仪测定25种矿物质元素,并对测定方法学进行考察。结果确定最佳消解条件为3步缓慢升温:400 W 80℃升温10 min,保留5 min;600 W 120℃升温10 min,保留5 min;900 W 200℃升温20 min,保留20 min;25种矿物质元素在各自的线性范围内线性关系良好,r≥0.999 6,精密度、稳定性和重复性试验的RSD均符合定量分析要求;加标回收率为94.7%~106.1%,RSD在0.34%~2.79%。脉络宁注射液中检测出Mg、Ca、Fe、Cu、Zn、Mn、Al、B、Ba、Co、Cr、K、Li、Mo、Na、Ni、P、Pb、Sr、Th、Ti、V,未检出As、Cd和Hg。结论该方法简便、迅速、准确,适用于脉络宁注射液中25种矿物质元素的同时测定。     

基于ICP-MS法的麝香保心丸中26种无机元素分析

目的采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法建立麝香保心丸中26种无机元素(Li、Na、Mg、Al、Ca、Ti、V、Cr、Mn、Fe、Co、Ni、Cu、Zn、Ga、As、Se、Sr、Mo、Cd、Sb、Ba、Hg、Tl、Pb、Bi)的测定方法。方法麝香保心丸样品以浓硝酸为消解试剂经微波消解后,以Ge、In元素为内标,以灌木枝叶标准物质作为质控标准物质,采用ICP-MS法测定其中26种无机元素的量。结果待检测的26种元素线性关系良好,相关系数r≥0.999 4,各元素的检出限在0.010~2.987μg/L,定量限在0.035~10.000μg/L,回收率在79.88%~105.76%,RSD≤4.55%。测定的12批样品中Ca、Mg、Na、Fe量较高,均超过1.000 mg/g;Mn、Cu、Zn、Al、Ga量也相对较高,而Sb、Hg、Tl、Bi量相对较低,均在0.050μg/g以下。结论该方法操作简便,分析速度快,灵敏度高,适用于麝香保心丸中无机元素的测定。     

基于ICP-MS法分析九味熄风颗粒中25种重金属及微量元素

目的采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法建立九味熄风颗粒中25种重金属及微量元素(Li、Mg、Cd、Sn、Al、Mn、Fe、Ti、V、Co、Zn、Ga、Cr、Ni、Tl、Pb、Cu、As、Be、B、Sb、Ba、Sr、Hg、Bi)的测定方法。方法九味熄风颗粒样品经微波消解后,以Ge、In元素为内标,以灌木枝叶标准物质作为质控标准物质,采用ICP-MS法进行测定。结果检测的25种元素线性关系良好,相关系数R2≥0.999 2,各元素的检出限在0.009~16.051μg/L,回收率在70.75%~107.66%,RSD≤6.44%。测定的6批样品中Cr、Sn、Hg、Pb均未检出,Tl、Cd、As、Cu的量均较低或未检出,Cd≤0.011μg/g,Cu≤0.373μg/g,Tl≤0.021μg/g,As≤0.571μg/g。结论该方法操作简便,分析速度快,灵敏度高,适用于九味熄风颗粒中重金属及微量元素的测定。     

Die Lateralität und Lateralitätsinstabilität in der Diagnostik und Therapie

The disturbance and instability of laterality are obstacles to diagnostics and therapy. Correction prior to starting therapy is required. They also predispose toward defined health problems and unspecific diseases. Numerous research activities provide evidence of the relevance of undisturbed laterality in diagnostics and therapy. Techniques of testing and therapeutic corrections will allow for optimized therapy success.     

基于ICP-MS法分析银杏叶系列品种中25种无机元素

目的建立银杏叶制剂中25种无机元素的电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)分析方法,并对不同剂型银杏叶制剂中无机元素量进行比较分析。方法样品经微波消解后,采用ICP-MS法测定25种无机元素量,绘制无机元素指纹谱图,并进行方法学考察。结果 25种无机元素在各自的线性范围内线性关系良好,r≥0.950 0,精密度、稳定性和重复性试验的RSD值均符合定量分析要求;加样回收率为91.35%～108.86%,RSD在0.05%～4.45%。银杏叶制剂中检测了25种无机元素量,并绘制无机元素指纹图谱,发现其谱图具有一定的特征性;银杏叶片中元素Hg、Al、Cr的量较高,有害无机元素的量超标应引起关注。结论通过无机元素在银杏叶制剂中的组成分布及其量的变化规律研究,为银杏叶制剂的质量控制及安全性评价提供依据,同时为临床使用提供一定参考。     

Gibt es eine Beziehung zwischen Qigong und Moderner Physik?

Based on the principle of completeness, Qigong is described as a method uniting external and internal paths to insight, and this can be perceived while practicing it. The common principle which we approach in every Qigong exercise is named the Dao. In quantum physics, there are also phenomena showing an underlying unity: entanglement of atomic systems.     

Journal of Acupuncture and Tuina Science Instructions for Authors

The Journal of Acupuncture and Tuina Science, a journal with an international scope （IS SN 1672-3597, CN 31-1908/R, Bimonthly）, is embodied by ＇Springer Verlag＇ Database, Index Copernicus （IC） and Chinese Scientific and Technical Paper and Citations Data （CSTPCD）. You can search full text on http：//www, springerlink, com/content/1672 -3597.     

Yerba Mate or Paraguay Tea

正Beverages based on Ilex paraguariensis A.St.-Hil.are used in the south Brazil and other Latin American countries located at the so-called southern cone.It is known as chimarro or mate in south and southeast Brazil,tererêin     

Biopotency Assays, a Model with Integration Feature for Quality Control Research of CMM

正As known,the development of quality control(QC)and quality assessment(QA)in the products of Chinese materia medica(CMM)is difficult and challenging.Some of the well-known analysis methods,such as IR,UV,HPLC,NMR GC-MS,and LC-MS have been applied in chemical components of the QC of CMMs and have gained significantimpact and advancement in modern analytical fields.In fact,the variables of CMM quality are caused by intrinsic and