补肾中药对体外培养成骨细胞增殖和功能的影响

目的:观察补肾中药活性成分对体外培养成骨细胞增殖和功能的影响.方法:体外培养成骨细胞,观察补肾中药含药血清对成骨细胞增殖率和ALP活性的影响.结果:补肾中药含药血清对成骨细胞增殖能力和ALP活性有增强作用.结论:补肾中药活性成分对体外培养成骨细胞的增殖和功能有促进作用.     

骨碎补总黄酮含药血清对成骨细胞增殖、分化、周期及调亡的影响

目的:观察含骨碎补总黄酮大鼠血清对体外培养SD大鼠成骨细胞增殖、分化、周期及凋亡的影响.方法:取新生的SD大鼠的颅骨,胶原酶法培养成骨细胞.应用MTT法、对硝基苯磷酸盐法(PNPP)及流式细胞术观察不同浓度的含骨碎补总黄酮大鼠血清在不同时段对体外培养成骨细胞的光密度D(λ)值、碱性磷酸酶(ALP)活性及细胞周期和凋亡的影响.结果:不同浓度的骨碎补总黄酮大鼠含药血清均可促进成骨细胞增殖、分化,使处于DNA合成期细胞比例增加,使早期和晚期凋亡细胞比例减少,与对照组比较均具有统计学意义(P＜0.05). 结论: 骨碎补总黄酮含药血清具有促进体外成骨细胞增殖、分化,抑制成骨细胞凋亡的作用,即具有抗骨质疏松活性.     

骨碎补总黄酮对成骨细胞体外培养作用的机制研究

目的:研究骨碎补总黄酮不同剂量组对成骨细胞体外培养的作用机理.方法:购买UMA-106-01成骨细胞株进行成骨细胞培养,观察碱性磷酸酶(ALP)活性和3H-TdR掺入的情况.结果:骨碎补总黄酮能提高用UMR-106细胞培养的细胞内ALP活性,并且在不同时间24、48、72h有相应变化,有一定的量效、时效关系,以48h最为理想.骨碎补总黄酮对3H-TdR的掺入48h比24h有明显增加,有时效关系.结论:骨碎补总黄酮对成骨细胞分化和增殖均有促进作用.     

生骨注射液对体外培养大鼠成骨细胞增殖和分化影响的实验研究

目的探讨生骨注射液对体外培养的大鼠成骨细胞增殖和分化的影响，及探讨生骨注射液促进骨折愈合的细胞机制。方法体外培养大鼠成骨细胞，应用MTT法、对硝基苯磷酸盐法观察生骨注射液对体外培养成骨细胞的增殖、ALP表达的影响。结果生骨注射液对成骨细胞具有明显的促增殖、分化作用。结论生骨注射液具有刺激体外培养成骨细胞增殖、分化的功能．这可能是生骨注射液促进骨折愈合的机制之一。     

阿胶强骨口服液含药血清对大鼠成骨细胞的影响

目的:探讨喂饲阿胶强骨口服液大鼠的血清对体外培养的成骨细胞的生物学作用。方法:在新生SD大鼠头颅骨第2代成骨细胞培养液中加入不同浓度(低、中、高)的阿胶强骨口服液血清,并与空白组对照,分别观察成骨细胞的增殖、分化和矿化功能。结果:阿胶强骨口服液血清具有刺激成骨细胞增殖的作用,可提高碱性磷酸酶活性并增加矿化结节形成的数量。结论:阿胶强骨口服液血清具有刺激体外培养的成骨细胞增殖及分化成熟的功能。     

补肾活血方对成骨细胞增殖等生物学特性影响的实验研究

目的:观察中药补肾活血方对体外培养SD大鼠成骨细胞增殖、分化、矿化的的影响.方法:取新生的SD大鼠的颅骨,胶原酶法培养成骨细胞.应用MTT法,对硝基苯磷酸盐法(PNPP)及茜素红染色方法观察补肾活血方对体外培养成骨细胞的增殖、碱性磷酸酶(ALP)活性及矿化结节形成的影响.结果:补肾活血方具有刺激成骨细胞增殖,提高碱性磷酸酶活性及矿化结节形成的数量的作用(P＜0.01或P＜0.05).结论:补肾活血方具有促进成骨细胞的增殖、分化及矿化作用.     

丹仙康骨胶囊对培养成骨细胞增殖分化的影响

目的 :为了解补肾活血中药丹仙康骨胶囊对体外培养成骨细胞的作用。方法 :应用MTT ,对硝基苯磷酸盐法及骨钙素含量放免测定法 ,观察丹仙康骨胶囊对成骨细胞增殖与分化作用的影响。结果 :丹仙康骨胶囊刺激成骨细胞增殖 ,提高ALP活性及骨钙素含量。结论 :丹仙康骨胶囊具有刺激体外成骨细胞增殖分化的功能     

补肾活血方对大鼠成骨细胞增殖、分化及矿化的影响

目的观察中药补肾活血方对体外培养SD大鼠成骨细胞增殖、分化及矿化的影响。方法取新生的SD大鼠的颅骨,胶原酶法培养成骨细胞：应用MTT法,对硝基苯磷酸盐法（PNPP）及茜素红染色方法观察不同浓度补肾活血方对体外培养成骨细胞在24、48、72h不同时段的增殖、碱性磷酸酶（ALP）活性及矿化结节形成的影响。结果不同浓度的补肾活血方均可促进成骨细胞增殖率提高,以中、高浓度组的作用较为明显（P〈0．01）;不同浓度补肾活血方可使ALP活性增强（P〈0．01）;中、高浓度组补肾活血方矿化结节数量,显著多于对照组（P〈0．01）。结论补肾活血方具有促进成骨细胞的增殖、分化及矿化的作用。     

六种黄酮对成骨细胞体外培养作用的比较研究

目的:通过成骨细胞体外培养技术,对6种植物黄酮进行对体外骨细胞培养作用的比较研究.方法:采用UMA-106-01成骨细胞株进行成骨细胞培养,观察ALP活性和3H-TdR掺入的情况.结果:24h,培养液中骨碎补总黄酮ALP活性高于对照组.细胞内骨碎补总黄酮、柚皮苷、陈皮苷、淫羊藿总黄酮ALP活性显著增加.48h,培养液中骨碎补总黄酮、淫羊藿总黄酮、菟丝子总黄酮ALP活性高于对照组.细胞内骨碎补总黄酮、淫羊藿总黄酮、菟丝子总黄酮ALP活性显著增加.骨碎补总黄酮、柚皮苷、淫羊藿总黄酮,24h,3H计数显著高于对照组.骨碎补总黄酮、淫羊藿总黄酮、柚皮苷、菟丝子总黄酮、陈皮苷对成骨细胞均有一定作用.结论:6种黄酮类补肾中药对体外培养的成骨细胞,除槲皮素外均有一定的作用,以骨碎补总黄酮作用最为广泛和明显.     

羊胎素对体外骨髓基质细胞的增殖和向成骨细胞分化的影响

目的探讨羊胎素对体外培养的SD大鼠骨髓基质细胞(Marrow Stroma Cells,MSCs)的影响。方法用MTT法检测MSCs的增殖;PNPP偶氮法检测MSCs碱性磷酸酶(ALP)的活性;细胞ALP染色观察成骨细胞的形成。结果在含羊胎素原液的0.625%,1.25%,2.5%和5%时对体外培养的SD大鼠MSCs有明显的促进增殖的作用(P<0.01);在含羊胎素原液的2.5%及5% 成骨诱导剂时,ALP的活性明显高于诱导剂对照组(P<0.05),而在含羊胎素原液的2.5%和5%浓度组,ALP的活性明显高于空白对照组及诱导剂对照组(P<0.001);细胞ALP染色呈强阳性,加药组颜色明显深于对照组和诱导剂对照组。结论羊胎素对体外培养的SD大鼠MSCs的增殖和向成骨细胞分化具有明显的促进作用。     

阳和汤体外对大鼠成骨细胞及破骨细胞增殖的影响

目的探讨阳和汤含药血清对成骨细胞、破骨细胞的影响作用。方法 SD大鼠连续7 d灌胃阳和汤,腹主动脉采血,制备含药血清。分离并培养原代成骨细胞、成骨细胞株UMR106、原代破骨细胞、破骨前体细胞RAW264.7。随机分为阳和汤含药血清低剂量组、中剂量、高剂量,空白血清组,各组加入相应含药血清进行培养,分别于24、48、72h收获细胞,采用MTT法测定药物对细胞增殖的影响;比色法测定破骨细胞TRAP酶活性。结果阳和汤含药血清中剂量、高剂量组在24、48、72h均能提高成骨细胞的增殖率,与空白血清组比较有显著差异;阳和汤含药血清低剂量组在48、72h也能明显提高细胞增殖率,与空白血清组比较有显著差异;阳和汤含药血清低剂量组对破骨前体细胞RAW264.7增殖率24、48、72h均没有影响,与空白血清组比较差异均无统计学意义;阳和汤含药血清中、高剂量组破骨前体细胞RAW264.7增殖率均低于空白血清组,24、48、72h比较差异有统计学意义;阳和汤含药血清低剂量组对破骨细胞的TRAP活性24、48 h影响不大,但72h TRAP活性低于空白血清组;阳和汤含药血清中、高剂量组48、72h破骨细胞TRAP活性均显著低于空白血清组。结论阳和汤能抑制体外培养的破骨前体细胞增殖,降低破骨前体细胞TRAP活性,对成骨细胞的增殖有促进作用。     

仙人掌粉对大鼠血脂的调节作用及其机制的探讨

目的:观察仙人掌粉对大鼠血脂的调节作用,并探讨其作用机制。方法:分别以基础饲料、基础饲料加高、中、低剂量仙人掌粉饲喂正常大鼠,观察仙人掌粉对正常大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL C),低密度脂蛋白胆固醇(LDL C)、动脉硬化指数(AI),血清丙二醛(MDA),超氧化物歧化酶(SOD)等指标的影响。将造模成功的高血脂大鼠随机分为4组:分别为模型对照组和仙人掌粉高、中、低3剂量组,后者按高、中、低3种剂量给予样品。以上各组继续喂饲高脂饲料,3周后分别取血测定上述指标。结果:仙人掌粉对正常大鼠血清TC有降低作用,但与正常饲料组比较无显著差异(P>0.05),对正常大鼠TG,HDL C无影响。能明显降低正常大鼠MDA含量,升高SOD活性,与对照组比较,差异均有显著性意义。对于实验性高脂血症大鼠,仙人掌粉高、中、低3剂量组均能显著降低血清TC,LDL C,AI(P<0.01),TG(P<0.05),且其降脂作用与给药剂量有关。结论:仙人掌粉对正常大鼠及实验性高脂血症大鼠血脂均有调节作用,而对后者作用更为显著。     

含骨松宝的老龄大鼠血清对兔成骨细胞增殖作用的实验研究

目的：观察骨松宝对体外培养成骨细胞增殖和代谢的影响。方法：给18月龄老年大鼠灌胃骨松宝1．5g／kg体重,每日2次,连续3天,末次灌胃后1h取血分离血清,用D8900培养基分别配成含药鼠血清7．5％和15％的培养基,并用于培养成骨细胞24h,同时以加有7．5％和15％未用药老龄大鼠血清的D8900培养基、含20μmol／L氟化钠(NaF)的D8900无血清培养基及D8900无血清培养基作对照,用MTT法检测细胞增殖,并测定培养基上清液中Ca^2+浓度及碱性磷酸酶(ALP)的含量变化。结果：与加有相同浓度鼠血清的D8900培养基组、D8900培养基加NaF组和D8900培养基组比较,含药鼠血清组的成骨细胞增殖明显,差异有显著性(P<0．01),培养基中的Ca^2+消耗量明显增加(P<0．05,P<0．01),ALP浓度明显升高(P<0．05,P<0.01)。结论：骨松宝能促进成骨细胞DNA合成和提高对Ca2^2+的利用,促进成骨细胞的生长增殖。     

基于肾主骨理论观察肾小球系膜细胞对成骨细胞增殖及功能的影响

目的:研究肾小球系膜细胞对成骨细胞的影响。方法:应用体外细胞培养法,将成骨细胞分为正常血清组和系膜细胞组。检测培养24h、48h7、2h、120h后的成骨细胞增殖情况,并在72h后检测碱性磷酸酶(ALP)及骨桥蛋白(OPN)浓度。结果:系膜细胞组上清液的成骨细胞增殖要明显高于正常血清组,在72h后系膜细胞组上清液的AKP及OPN浓度要明显高于正常血清组。结论:肾系膜细胞能直接作用于成骨细胞,促进成骨细胞的增殖及功能,为中医"肾主骨"理论体系提供了新的实证。     

益骨汤含药血清对大鼠成骨细胞骨保护蛋白mRNA表达的影响

目的:观察益骨汤含药血清对大鼠成骨细胞BMP-mRNA表达的影响。方法:制备益骨汤含药血清,取不同浓度剂量来干预体外培养的成骨细胞中BMP-mRNA的相对表达量。结果:益骨汤含药血清能明显增加成骨细胞BMP-mRNA的表达量。结论:益骨汤含药血清能促进成骨细胞表达BMP的作用,从而提高对骨吸收环节抑制作用。     

复元活血汤含药血清对大鼠成骨细胞功能的影响

目的：探讨复元活血汤含药血清对大鼠成骨细胞功能的影响及其作用机制。方法：取2月龄SD雄性大鼠12只,随机分为2组,每组6只,分别给予20 g.kg-1复元活血汤生药灌胃（含药血清组）和同等量的生理盐水灌胃（空白血清组）,每天2次,14 d后腹主动脉采血。取新生SD大鼠2只,采用二次酶消化法消化幼鼠颅盖骨获取成骨细胞,采用血清药理学方法,分别采用含胎牛血清的培养液（胎牛血清组）、含复元活血汤生药灌胃大鼠血清的培养液（含药血清组）和含生理盐水灌胃大鼠血清的培养液（空白血清组）培养成骨细胞。分期测定体外培养的大鼠成骨细胞的增殖功能、分化功能、矿化功能及碱性磷酸酶含量。结果：①成骨细胞增殖功能。时间效应F=381.260,P=0.000;组别效应F=1 071.170,P=0.000;时间与组别交互效应F=22.500,P=0.000。②成骨细胞分化功能。时间效应F=159.950,P=0.000;组别效应F=62.120,P=0.000;时间与组别交互效应F=2.400,P=0.029。③成骨细胞矿化功能。时间效应F=115.500,P=0.000;组别效应F=4.370,P=0.082;时间与组别交互效应F=56.300,P=0.000。④成骨细胞碱性磷酸酶含量。时间效应F=2 175.670,P=0.000;组别效应F=1 201.370,P=0.000;时间与组别交互效应F=428.870,P=0.000。结论：复元活血汤能明显地促成骨细胞的增殖和分化功能,其作用可能与成骨细胞合成和分泌碱性磷酸酶有关。     

生三七及其不同炮制品对血瘀模型大鼠的影响

目的:评价生三七及其不同炮制品对急性血瘀模型大鼠药效作用,比较三七炮制前后在破瘀功效上的差异。方法:给大鼠皮下注射大剂量的肾上腺素,再以冰水浸泡制备急性血瘀模型,灌胃给予生三七水提物、生三七醇提物、蒸三七水提物、蒸三七醇提物、油炸三七水提物、油炸三七醇提物。测定给药后血液流变学指标(全血黏度、血浆黏度)、凝血时间、出血时间及尾部微循环血流量等指标。结果:生三七水提和醇提物都能降低大鼠低切变率下全血黏度和血浆黏度、延长大鼠凝血时间;生三七水提和醇提物、蒸三七醇提物、油炸水提物能增加大鼠微循环血流量。结论:生三七在改善血黏度、抗凝具有较好作用,炮制后作用减弱。生三七可能具有较优的破瘀效果。     

健骨二仙丸提取物对大鼠体外培养成骨细胞增殖作用的研究

目的:探讨健骨二仙丸提取物对大鼠体外培养成骨细胞的作用效果及对成骨细胞增殖的作用机理。方法:采用新生大鼠颅骨进行成骨细胞分离,并在含10%的胎牛血清DMEM中进行体外培养,分别加入高、低剂量的健骨二仙丸提取物并与高、低剂量Premarin组、阴性组、Tamoxifen对照组、Tamoxifen阻断对照组进行对照,用MTT法进行成骨细胞增殖和活性检测。结果:在培养24h后,健骨二仙丸提取物对培养成骨细胞增殖有明显的促进作用,培养到48h促进作用更为明显,表现出一定的时间相关性,且其作用不能被Tamoxifen阻断或完全阻断。结论:健骨二仙丸提取物可促进成骨细胞增殖,且其对骨代谢的影响不通过或者主要不是通过雌激素样作用生效。     

降糖防聋方对体外高糖培养成骨细胞骨钙素分泌的影响

目的:探讨降糖防聋方对体外高糖培养成骨细胞骨钙素的影响.方法:采用改良的组织块法分离培养新生大鼠颅骨成骨细胞,用不同浓度的降糖防聋方含药血清及不含降糖防聋方含药血清的α-MEM培养液加入到成骨细胞高糖(糖终浓度为300 kg·L-1)培养体系,作用不同时间,应用放免法测定细胞骨钙素(BGP)的水平.结果:100,50,10 mg·L-1的降糖防聋方含药血清对体外高糖培养成骨细胞具有明显的促进作用(P＜0.05),在较高浓度对对成骨细胞增殖无明显抑制效应.结论:降糖防聋方含药血清对高糖培养成骨细胞骨钙素有不同程度调节改善作用.