当归补血汤对移植肌卫星细胞γ射线照射小鼠早期造血重建作用的影响

目的观察当归补血汤对移植骨骼肌卫星细胞的受体小鼠早期造血功能重建的影响。方法分离培养雄性同系小鼠的肌卫星细胞并鉴定。经8Gy137Cs-γ射线照射的雌性昆明种受体鼠随机分为6组:空白对照组、移植肌卫星细胞组、当归补血汤不同剂量(1,3,5,10倍灌胃7 d)干预的移植肌卫星细胞4组。观察移植后8周内受体鼠存活率、外周血血常规、脾脏指数、脾形态学的变化,并采用PCR方法鉴定其造血重建的来源。结果培养的肌卫星细胞呈desmin染色阳性;当归补血汤各剂量组受体鼠脾脏指数、脾结节数、白细胞数、血小板数、血红蛋白数、8周内存活数均高于空白对照组和移植肌卫星细胞组,特别是给药3组及4组(P<0.05);对移植的存活小鼠进行Y染色体PCR分析,证实重建雌性受体鼠造血功能的细胞来自雄性供体。结论经当归补血汤干预后,肌卫星细胞能使受体鼠早期造血功能得以重建。     

基于Notch4和Delta4研究当归补血汤协同肌源性干细胞移植促造血重建的作用

目的:基于Notch4和Delta4探讨当归补血汤(Danggui Buxue Decoction,DBD)协同肌源性干细胞(Musclederived stem cells,MDSCs)向造血方向调控的作用机制。方法:将雌性昆明小鼠随机分成6组,分别为照射模型组、骨髓移植组、MDSCs移植组、等效剂量DBD预处理+MDSCs组(给药1组)、3倍DBD预处理+MDSCs组(给药2组)和5倍DBD预处理+MDSCs移植组(给药3组)。照射前各组分别给予生理盐水和不同剂量DBD灌胃1周,经8Gy~(137)Cs-γ射线照射后,尾静脉分别移植骨髓细胞和MDSCs。用real-time PCR检测3周末时小鼠骨髓中CD34、Notch4和Delta4 mRNA表达量。结果:与照射模型组比,干预组中CD34 mRNA上调(P0.05),且以给药3组上调幅度最大;Notch4 mRNA下调(P0.05),且给药1组下调幅度最大;除骨髓移植组外,其余各组Delta4 mRNA均上调(P0.05),且给药3组上调幅度最大。结论:当归补血汤协同肌源性干细胞移植能促进受照射小鼠造血重建,且5倍当归补血汤协同MDSCs移植效果最佳。Notch4和Delta4在骨髓造血干细胞移植和MDSCs移植中的作用不同,其促进骨髓造血干细胞、MDSCs向造血细胞分化的具体调控机制尚待深入探索。     

当归补血汤对~(60)Co-γ射线辐照小鼠造血功能损伤的防护作用

目的:观察当归补血汤对~(60)Co-γ射线辐照小鼠造血功能损伤的防护作用。方法:将健康SPF级昆明种雄性小鼠随机分为5组(正常对照组、模型组、当归补血汤低、中、高剂量组),除正常对照组外,采用~(60)Co-γ射线辐射各组小鼠建立急性辐射损伤模型,测定各组小鼠外周血平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、骨髓有核细胞数(BMC)、骨髓细胞DNA含量,并在光镜下观察小鼠骨髓组织形态学变化。结果:受~(60)Co-γ射线照射后,小鼠MCHC、BMC、骨髓细胞DNA含量均明显减少,骨髓组织形态变化明显。低、中、高剂量当归补血汤均可提高辐射损伤后小鼠MCHC、BMC及骨髓细胞DNA含量,促进辐照小鼠骨髓造血组织损伤的恢复,且高、中剂量当归补血汤对其造血系统的保护作用效果更明显。结论:当归补血汤对辐射小鼠造血系统的损伤有保护和促修复作用,且与剂量相关。     

当归补血汤干预NRF2-Notch信号调控辐射旁效应“毒损髓络”的机制研究

目的探讨当归补血汤干预NRF2-Notch信号调控辐射旁效应"毒损髓络"的机制。方法将72只BALB/c小鼠随机分成正常对照组,全身辐射组,半身辐射组,给药1、2、3组。4Gy137Cs-γ射线照射辐射各组小鼠,除全身辐射组外均仅照射小鼠上半身,给药各组并用不同剂量的当归补血汤灌胃1周,处死小鼠取脾和骨髓。观察各组小鼠生存状态改变,并检测体重和脾指数的变化;cck8法检测骨髓细胞的增殖活力;realtime RT-PCR、Western-blot技术检测小鼠骨髓的NRF2-Notch通路相关基因蛋白的表达变化。结果同正常对照组相比:仅辐射各组小鼠生存状态明显弱于给药各组,小鼠骨髓细胞增殖活力降低(P0.05);骨髓细胞NRF2、Notch1、Jagged1及PCNA基因mRNA表达下调(P0.05);骨髓细胞Jagged1、HES1及PCNA蛋白表达下调,全身辐射组尤为明显。服药1周后,除给药1组外,给药各组骨髓细胞活力增加(P0.05),且具有剂量依赖性;骨髓细胞NRF2 mRNA表达增加,激活Notch通路,其下游节点基因HES1表达上调(P0.05),靶基因PCNA表达增加(P0.05);骨髓细胞Jagged1、HES1及PCNA蛋白表达量均增加,且具有剂量依赖性,实验各组小鼠骨髓细胞Cleaved Notch1的表达成阴性。结论当归补血汤可能通过上调NRF2基因的表达,激活Notch通路,促进辐射小鼠骨髓细胞的增殖分化,缓解电离辐射靶效应或旁效应造成的骨髓抑制,促进造血免疫系统重建。     

Notch2、Notch3、Jagged2和Hes3在当归补血汤协同肌源性干细胞移植鼠骨髓中的表达和作用

目的探讨Notch2、Notch3、Jagged2和Hes3在当归补血汤(Danggui Buxue Decoction,DBD)协同肌源性干细胞(Muscle-derived stem cells,MDSCs)移植小鼠骨髓中的表达和作用。方法将雌性昆明小鼠随机分为6组:照射模型组、骨髓移植组、MDSCs移植组和当归补血汤不同剂量(1、3和5倍)预处理+MDSCs移植组。各组分别给予生理盐水和不同剂量DBD灌胃1周后,经8Gy~(137)Cs-γ射线照射,尾静脉分别移植骨髓细胞和MDSCs。用Real-time PCR分别检测3周和8周末时小鼠骨髓中Notch2、Notch3、Jagged2和Hes3 mRNA表达量。结果 3周末,骨髓移植组和MDSCs移植组Notch2mRNA上调,给药组下调,组间比较无统计学差异(P0.05)。Notch3 mRNA均下调(P0.05),且给药2组下调幅度最大;8周末,除MDSCs移植组外,其余各组Notch2 mRNA均下调(P0.05),且以给药2组下调幅度最大。各干预组Notch3 mRNA均下调(P0.05),其中骨髓移植组下调幅度最小;Jagged2和Hes3 mRNA均未见表达。结论 Jagged2配体和Hes3靶基因既不参与造血干细胞向造血前体细胞分化过程,也不参与MDSCs向造血干细胞分化、增殖过程。而Notch2受体和Notch3受体在这些过程中扮演不同的角色。在造血重建后期,5倍当归补血汤可通过上调Notch2和Notch3表达来促进淋巴细胞的发育。     

当归补血汤干预移植肌卫星细胞受体小鼠造血功能重建的研究

目的 观察当归补血汤对移植骨骼肌卫星细胞（muscle satellite cell,MSC）受体小鼠造血功能重建的影响。方法 分离雄性同系小鼠的MSC并培养鉴定。经8Gy137Cs γ射线照射的雌性昆明种受体鼠随机分为6组：空白对照组、移植MSC组、当归补血汤不同剂量（1、3、5、10倍临床等效剂量灌胃7天）干预的移植雄性MSC 4组。观察移植后1、2、3周受体鼠脾集落形成单位（colony forming unit spleen,CFU S）数、外周血白细胞（WBC）、血红蛋白（Hb）、血小板（PLT）的变化,3周存活率等指标,并采用PCR方法鉴定其造血重建的来源。结果 培养的MSC呈desmin染色阳性;第2周时移植MSC各组WBC明显升高（P<005）,给药2、3、4组Hb明显回升（P<005）;第3周时与移植MSC组比较,给药3、4组WBC及Hb升高明显（P<005）,给药4组PLT恢复显著（P<005）。第2周时与空白对照组比较,给药3、4组CFU S明显增多（P<005）,对移植的存活小鼠进行Y染色体PCR分析,证实重建雌性受体鼠造血功能的细胞来自雄性供体。结论 当归补血汤干预有助于移植MSC的受体鼠造血功能重建。     

熟地黄多糖对血虚模型小鼠的影响

目的 :观察熟地黄多糖 (RGP)对模型小鼠外周血象、骨髓造血干细胞、骨髓有核细胞的影响。方法 :各组小鼠连续灌胃 8～ 9d ,腹腔注射环磷酰胺 (CY)致化学损伤血虚模型 ,取全血测外周血象、骨髓有核细胞计数 ;各组小鼠尾静脉注射同种供体小鼠骨髓细胞悬液 ,取脾脏固定 ,观察外源性脾结节形成 ,各组小鼠以⁶⁰Coγ全身照射7.25Gy ,取脾脏观察内源性脾结节形成 ;各组小鼠⁶⁰Coγ全身照射 7.5Gy ,复制出放射性损伤模型 ,测外周血象和骨髓有核细胞数量。结果 :RGP各组对CY血虚模型小鼠外周血象、骨髓有核细胞下降均有拮抗作用 ,与模型组比较 ,有显著差异。对小鼠脾结节的形成有明显的促进作用 (P<005,P<001) ,对于小鼠外周血象的放射性损伤 ,RGP高剂量组可明显抑制小鼠全血细胞减少 (P<005) ,RGP低剂量组虽可提高损伤小鼠血细胞数量 ,但无统计学意义。结论 :熟地黄多糖对于不同血虚模型小鼠外周血象、骨髓有核细胞下降均有拮抗作用 ,对小鼠造血干细胞具有促进增殖、分化作用。     

当归多糖对放射损伤小鼠骨髓单个核细胞黏附分子表达及黏附功能的影响

目的:研究当归多糖(APS)对小鼠骨髓单个核细胞(BMNC)黏附分子表达及黏附功能的影响,旨在为阐明APS防护辐射性造血损伤的分子机制提供实验依据.方法:BALB/c小鼠随机分为正常对照组、生理盐水(NS)组和APS组.NS组和APS组小鼠全身均匀照射X射线,照射后腹腔注射给药NS和8mg/kg APS,0.2mL/(...     

当归多糖干预调节再生障碍性贫血小鼠骨髓单个核细胞线粒体自噬稳态的实验研究

目的 探讨当归多糖对再生障碍性贫血(AA)小鼠骨髓单个核细胞(BMMNCs)线粒体自噬造成的影响。方法 选取50只小鼠,按照体质量利用均衡随机法将小鼠随机分为正常组、模型组、当归多糖低剂量组、当归多糖中剂量组、当归多糖高剂量组,每组10只。除正常组外,其余组均采用化学方法制备AA小鼠模型。证实成模后,正常组、模型组小鼠每天给予0.2 mL生理盐水灌胃1次;当归多糖低、中、高剂量组分别每天给予当归多糖40 mg/kg、200 mg/kg、400 mg/kg灌胃1次。各组均连续灌胃14 d,观察各组小鼠外周血白细胞(WBC)、血红蛋白(Hb)、血小板(Plt)、BMMNCs计数和BMMNCs线粒体膜电位及骨髓细胞线粒体自噬情况。结果 模型组小鼠外周血WBC、Hb、Plt、BMMNCs计数和BMMNCs线粒体膜电位均明显低于正常组(P均0.05);当归多糖各剂量组各指标均明显高于模型组(P均0.05),且高剂量组明显高于中、低剂量组(P均0.05),中剂量组明显高于低剂量组(P均0.05)。电镜下观察,模型组小鼠骨髓细胞内线粒体损伤,存在过度自噬现象;而当归多糖各剂量组小鼠骨髓细胞内线粒体损伤明显较模型组减轻,自噬泡数量较模型组明显减少。结论 当归多糖能够促使AA小鼠骨髓造血功能的恢复,线粒体自噬的改变可能是其机制之一。     

当归多糖的免疫活性和对造血功能影响

目的 :研究当归多糖灌服对免疫和造血功能的影响。方法 :分别采用DTH、血清溶血素抗体生成实验及内源性脾结节法、3 H TdR掺入骨髓有核细胞法、测定外周血Hb进行研究。结果 :当归多糖灌服对体液免疫有较强促进作用 ,大剂量对细胞免疫有促进作用 ;对溶血性血虚模型小鼠 ,当归多糖能显著升高外周血红蛋白 ,并能促进60 Coγ射线照射后小鼠内源性脾结节生成及骨髓细胞DNA合成。结果 :当归多糖有免疫促进作用 ,并能促进脾脏和骨髓造血功能。     

当归多糖对顺铂化疗H22腹水瘤小鼠所致肝脏损伤的影响

目的:研究当归多糖对顺铂化疗H22腹水瘤小鼠所致肝脏损伤的影响。方法:从90只雄性SPF级昆明小鼠中随机选取12只小鼠设为空白组,剩余小鼠全部腹腔注射H22细胞,7天后腹水瘤模型制备成功,剔除腹水过多和过少的腹水瘤小鼠后,随机分为模型组、顺铂治疗组、顺铂联合当归多糖低剂量组(25mg/kg)、顺铂联合当归多糖中剂量组(50mg/kg)、顺铂联合当归多糖高剂量组(100mg/kg),每组12只。每3天腹腔注射一次0.2ml/只顺铂(2.0mg/kg),当归多糖每天灌胃1次,每只0.4ml;每2天测量并记录各组小鼠体重,3周后,采血并处死小鼠。检测各组小鼠肝脏指数、肝脏功能、血常规的变化,倒置显微镜观察各组小鼠肝脏病理变化,并进行病理评分,Western Blot检测各组小鼠肝脏组织中凋亡相关蛋白Bax以及Bcl-2的表达情况。结果:与空白组和模型组小鼠比较,顺铂治疗组小鼠的体重及肝脏指数降低,AST、ALT含量升高,WBC、RBC、PLT明显降低,Bax表达明显上调,Bcl-2的表达显著下调;HE染色可见肝细胞核固缩,肝细胞核缩小、部分消失。与顺铂治疗组小鼠比较,顺铂联合当归多糖低剂量组(25mg/kg)、顺铂联合当归多糖中剂量组(50mg/kg)、顺铂联合当归多糖高剂量组(100mg/kg)小鼠的体重及肝脏指数有所升高,AST、ALT含量降低,WBC、RBC、PLT明显升高,Bax表达下调,Bcl-2表达升高;HE染色可见到固缩的肝细胞核减轻,细胞排列逐渐接近正常。结论:当归多糖可减轻顺铂化疗H22腹水瘤小鼠时所致的肝脏损伤,其机制可能是通过升高WBC、RBC、PLT来改善肝脏功能、并降低蛋白Bax、升高Bcl-2的表达来实现的。     

当归对X线辐射损伤小鼠造血功能恢复的影响

目的观察当归对Χ线辐射损伤小鼠造血功能恢复的影响。方法用100%当归浸出液定期给小鼠灌胃,5d后,用Χ线照射0.11 CGY,1次/d,共照射5次,检测小鼠骨髓细胞增殖和抗体的产生。结果用药组小鼠骨髓细胞增殖和抗体产生有显著增强作用,与照射组相比均有非常显著性差异(P<0.001)。结论当归有明显抗X线辐射、促进小鼠骨髓细胞增殖和抗体产生的作用。     

当归补血汤含药血清对血虚小鼠骨髓造血功能的影响

目的:观察当归补血汤含药血清对血虚模型小鼠骨髓造血功能的影响,阐述当归补血汤补气生血作用机理。方法:连续4天腹腔注射环磷酰胺30mg/kg复制化学性血虚小鼠模型;灌胃给予15g/kg、7.5g/kg、3.75g/kg当归补血汤水煎液,一日两次,第4天腹主动脉取血,分离含药血清;将各剂量当归补血汤含药血清加入到血虚模型小鼠骨髓细胞的培养体系中,观察各组含药血清对骨髓造血祖细胞CFU-GM、CFU-E、CFU-B及骨髓有核细胞DNA合成的影响。结果:当归补血汤15g/kg含药血清5%组、10%组,当归补血汤7.5g/kg含药血清10%组、15%组,以及当归补血汤3.75g/kg含药血清15%组对血虚小鼠骨髓CFU-GM的集落生成均具有促进作用;当归补血汤15g/kg含药血清10%组、20%组,当归补血汤7.5g/kg含药血清20%组、30%组可明显升高骨髓CFUE和BFU-E集落个数;当归补血汤15g/kg含药血清0.5%组,7.5g/kg含药血清1%组、2%组及3.75g/kg含药血清1%组、2%组对血虚小鼠骨髓有核细胞DNA的合成具有促进作用。结论:当归补血汤含药血清能够促进骨髓粒系、红系造血祖细胞的增殖与分化,促进骨髓有核细胞DNA的增殖,达到其补气生血的功效。     

黑果枸杞对辐射损伤小鼠造血系统的保护作用

目的:探讨黑果枸杞对辐射损伤小鼠造血系统的防护作用。方法:昆明种小鼠分为正常对照组、辐射模型组、氨磷汀组及黑果枸杞高(8 g/kg)、中(4 g/kg)、低(2 g/kg)剂量组,于辐射后第3天进行实验,同法分组分别于辐射后第7、14天进行实验。给药组灌胃给予黑果枸杞水提取液,正常对照组与模型组给予等体生理盐水,连续14 d,氨磷汀组于辐射前30 min腹腔注射氨磷汀。除正常对照组外各组小鼠接受X射线一次性全身照射。辐射后第3、7、14天分别观察各组小鼠血象、脏器指数、骨髓DNA含量、血清Caspase-3、Caspase-6含量及小肠隐窝上皮细胞P53含量变化情况。结果:黑果枸杞能升高辐射后小鼠红细胞计数和血红蛋白含量(P0.05),升高小鼠胸腺指数及脾脏指数(P0.05),显著提高辐射小鼠骨髓DNA含量(P0.05),降低小鼠血清Caspase-3、Caspase-6含量及小肠隐窝上皮细胞P53蛋白的表达。结论:黑果枸杞水提取液对辐射损伤小鼠造血系统有一定保护作用。     

当归补血汤促进小鼠骨髓移植后造血组织重建的研究

目的:探讨当归补血汤对小鼠同基因骨髓移植(BMT)后骨髓造血组织重建的影响。方法:建立典型同基因BMT小鼠模型,随机分成BMT模型对照组和BMT+当归补血汤组,另取正常小鼠外周血及骨髓作空白对照。分别给以生理盐水、当归补血汤10g·kg^-1·d^-1灌胃治疗。于BMT后第1,11,22天观察外周血细胞、骨髓单个核细胞(BMMNC),镜下观察小鼠骨髓切片。结果:BMT+当归补血汤组第11,22天外周血白细胞、红细胞、血小板、BMMNC水平均显著高于BMT模型对照组(P<0.05或P<0.01),骨髓造血组织学情况也明显好于对照组。结论:当归补血汤有促进造血组织重建的作用。     

参附汤对移植小鼠造血干细胞归巢干预作用的研究

目的:观察参附汤对移植后小鼠造血干细胞归巢的影响。方法:以转GFP基因的Balb/c荧光小鼠作为供鼠,以普通Balb/c小鼠为受鼠,进行造血干细胞移植,移植后抽取4只小鼠作为单纯照射组以观察照射剂量是否充足外,其余小鼠随机分为参附组和空白组,参附组给予参附汤,空白组给予0.9%生理盐水灌胃,分别于移植后+3、+7、+14天随机抽取骨髓标本,用激光共聚焦显微镜观察荧光细胞的归巢数量,流式细胞仪检测骨髓单个核细胞的sca-1+细胞的表达率。结果:激光共聚焦显微镜检测显示,参附组小鼠造血干细胞归巢的数量较空白组增多,并随移植时间的推移,呈逐渐增多的趋势。流式检测显示,骨髓单个核细胞的sca-1+细胞+3、+7、+14天的表达率分别为(5.36±1.27)%、(5.77±1.14)%、(5.42±1.14)%,与空白组相比,二者间有显著性差异(P<0.05)。结论:具有温阳补肾作用的参附汤能促进自体移植小鼠造血干细胞的归巢。     

肉苁蓉多糖对骨髓抑制性贫血小鼠造血调控的实验研究

目的：观察肉苁蓉多糖对骨髓抑制贫血小鼠造血功能的影响,探讨其造血调控作用机制。方法：采用Co^60照射和注射环磷酰胺复合制备贫血小鼠模型。应用流式细胞术（FCM）检测肉苁蓉多糖对骨髓抑制贫血小鼠骨髓细胞周期的影响,采用造血祖细胞培养术观察三系造血祖细胞集落数。结果：低剂量和高剂量肉苁蓉多糖能明显促进骨髓G0/G1期细胞向S期细胞以及S期细胞向G2/M期细胞的转化,G2/M期细胞比例明显升高,增殖指数（PI）也明显升高。给药组CFU-E,BFU-E,CFU-MeG与贫血对照组集落数有显著差异。结论：肉苁蓉多糖可能通过促使骨髓抑制贫血小鼠骨髓细胞细胞周期的转化,促进骨髓造血功能的恢复,并促进红系巨核系造血。     

制黄精水煎剂对环磷酰胺致造血功能抑制小鼠骨髓基质细胞的影响研究

目的:观察制黄精水煎剂对造血功能抑制小鼠骨髓基质细胞(BMSC)的影响,探讨其促进造血恢复的机制。方法:观测腹腔注射环磷酰胺后灌胃制黄精水煎剂小鼠骨髓基质细胞的形态、80%的贴壁时间及成纤维细胞集落形成单位(CFU-F)数和BMSC生长曲线。结果:灌胃制黄精水煎剂后BMSC生长达80%的贴壁时间较灌胃NS组和未灌胃的空白组相比显著缩短(P0.01);CFU-F数目显著多于NS组和空白组(P0.01);第5天、第6天、第7天,药物组的细胞数较NS组和空白组显著增加(P0.01)。结论:制黄精水煎剂可促进环磷酰胺致造血抑制小鼠骨髓基质细胞增殖及CFU-F形成,这可能是其促进造血功能抑制小鼠造血恢复的途径之一。     

当归多糖对放射损伤小鼠红细胞免疫粘附功能和外周血象的影响

目的 :进一步了解当归多糖的药用价值。方法 :本实验将小鼠分为正常对照组、照射对照组、当归多糖治疗组 ,检测三组的红细胞 C3b受体花环率和外周血象。结果 :照射对照组红细胞 C3b受体花环率和外周血白细胞、血小板数明显低于正常对照组 ,而当归多糖治疗组的红细胞 C3b受体花环率和外周血白细胞、血小板数显著高于照射对照组 (P<0 .0 1) ,有统计学意义。结论 :当归多糖能显著促进放射损伤小鼠的红细胞免疫粘附功能和造血功能     

补康灵对辐射损伤小鼠造血功能的影响

目的:探讨补康灵对辐射损伤小鼠造血功能的影响。方法:50只小鼠被随机分为5组:正常对照组、辐射对照组、补康灵低、中、高剂量组。实验组小鼠在60Coγ射线4 Gy照射后,补康灵组分别灌胃9,18,36 g.kg-1,其余2组给予生理盐水,连续给药10 d,照射后第5,10天检测血象。10 d后处死小鼠,观察补康灵对骨髓DNA含量、骨髓有核细胞数、脾结节的影响。结果:60Coγ射线照射后小鼠外周白细胞、血小板数减少,补康灵给药后,中、高剂量组小鼠外周白细胞、血小板数升高,中、高剂量组骨髓DNA含量吸光度(A)为(1.05±0.27),(1.22±0.26);骨髓有核细胞数为(5.12±1.22),(6.01±1.35)×106/L,脾结节(7.67±1.56),(8.52±2.12)个,均比辐射对照组明显增加(P<0.05)。结论:补康灵照射后给药能促进辐射损伤小鼠造血功能的恢复。