黄连水提物对秀丽隐杆线虫毒性效应评价

目的评价不同质量浓度黄连水提物对秀丽隐杆线虫的毒性效应。方法制备黄连水提物,以秀丽隐杆线虫为模式生物,通过测定不同质量浓度的黄连水提物对秀丽隐杆线虫死亡率、最长寿命与半数致死时间、个体发育、产卵数和运动行为的影响,评价黄连水提物对秀丽隐杆线虫的毒性效应。结果与对照组相比,黄连水提物0.5、1.0、2.5 mg/mL可使秀丽隐杆线虫的死亡率显著提高(P0.01),最长寿命与半数致死时间显著降低(P0.01);在个体发育方面,黄连水提物1.0、2.5 mg/mL能显著抑制线虫生长(P0.01);生殖行为方面,3个质量浓度的黄连水提物均能显著降低秀丽隐杆线虫产卵数(P0.001),且具有一定的浓度依赖性;在运动行为方面,3个质量浓度的黄连水提物均能显著降低秀丽隐杆线虫头部摆动频率(P0.01),黄连水提物0.5、1.0 mg/mL组线虫身体弯曲频率无显著性差异,黄连水提物2.5 mg/mL组线虫身体弯曲频率极显著降低(P0.01);3个质量浓度的黄连水提物组线虫向前摆动、向后摆动和Omega/U摆动频率均无显著性差异。结论黄连水提物对秀丽隐杆线虫具有明显的毒性作用,为以秀丽隐杆线虫为模式生物评价黄连不同炮制品毒性提供了依据,为中药毒性的生物评价提供了新的思路和方法。     

六味地黄丸方对秀丽隐杆线虫寿命及daf-2 mRNA、daf-16 mRNA表达的影响

目的：观察六味地黄丸方对秀丽隐杆线虫寿命、生殖力、运动能力的影响并探讨其可能的分子机制。方法：秀丽隐杆线虫分为空白对照组、六味地黄丸方高、中、低剂量组（160、80、40mg?mL^-1）。寿命实验观察各组线虫平均寿命;生殖能力测试中,计数各组总子代数目;运动能力实验测试各组线虫20s内身体弯曲的次数。实时荧光定量PCR（Real-Time PCR）方法检测空白组和六味地黄丸方中剂量组的daf-2 mRNA、daf-16 mRNA表达变化。结果：与空白组比较,六味地黄丸方中、低剂量组均能延长线虫的平均寿命（P<0.01）,以中剂量组更为显著,并可明显提高线虫生殖高峰期及末期的生殖能力。与空白组比较,各剂量组均使线虫运动能力明显减缓（P<0.01）;用药组daf-2 mRNA表达明显下调（P<0.05）;daf-16 mRNA表达明显上调（P<0.05）。结论：六味地黄丸方能明显延长秀丽隐杆线虫寿命,其机制可能与下调daf-2基因和上调daf-16基因表达有关。     

蜜环菌菌索多糖延缓秀丽隐杆线虫衰老机制研究

目的 探讨蜜环菌菌索多糖（AMP）延缓秀丽隐杆线虫衰老的作用机制。方法 以模式生物秀丽隐杆线虫作为活体模型,测定其在正常培养条件下的生存期与后代平均数量,氧化应激条件下的存活率和热休克蛋白16.2（HSP-16.2）、超氧化物歧化酶-3（SOD-3）的表达。结果 在正常培养条件下,蜜环菌菌索多糖（AMP-1、AMP-2）显著延长秀丽隐杆线虫的生存期,对其生殖力没有损害;在氧化应激条件下,显著提高秀丽隐杆线虫HSP-16.2和SOD-3的表达。结论 提高秀丽隐杆线虫的氧化应激能力可能是AMP延缓秀丽隐杆线虫衰老的作用机制。     

东莨菪碱诱导秀丽线虫痴呆模型的特点探析

目的:研究东莨菪碱诱导秀丽隐杆线虫痴呆的造模方法和评价指标。方法:选用生殖后期N2野生型线虫,实验分为空白对照组、氢溴酸东莨菪碱7.5μg/mL、15μg/mL、30μg/mL剂量组,每组420条,20℃培养48 h后,检测不同给药组对线虫形态、体长、体宽、摆动次数以及记忆时程的影响。结果:与空白对照组相比,东莨菪碱15μg/mL组线虫的生理指标(体长、体宽、运动)均明显降低(P<0.05),线虫长期记忆的学习指数明显降低(P<0.05)。结论:东莨菪碱通过影响N2野生型线虫的生理、认知学习能力导致痴呆发生,为东莨菪碱致学习和记忆丧失的神经退化过程提供证据。     

茯苓多糖在秀丽隐杆线虫中的抗氧化和抗衰老作用及其作用机制

目的 分析茯苓多糖成分对秀丽隐杆线虫体内抗氧化和抗衰老作用的影响,并阐明其潜在机制。方法 将L4期线虫随机分为低、中、高剂量（10、20、40 μg/mL）的茯苓多糖组和空白组进行培养;采用百草枯抗氧化实验、寿命实验、脂褐素测定实验、应激实验（紫外/高温）、生理功能实验（吞咽频率/摆动次数/产卵量）探究茯苓多糖对野生型秀丽隐杆线虫抗氧化和抗衰老作用;将突变体线虫分为茯苓多糖组（40 μg/mL）和空白组,采用应激实验、寿命实验、线虫BZIP结构域蛋白1（protein skinhead-1,skn-1）绿色荧光蛋白的细胞定位检测、qRT-PCR实验、活性氧（reactive oxygen species,ROS）检测探究茯苓多糖的抗衰老的作用机制。结果 茯苓多糖显著延长线虫的寿命,减少脂褐素的产生,增强对紫外线和热胁迫的抵抗力,提高咽部泵血频率和运动能力,显示出显著的抗衰老生物活性。茯苓多糖的抗衰老作用是通过skn-1信号通路介导的,而不依赖于胰岛素样受体β亚基（insulin-like receptor subunit beta,daf-2）和神经元乙酰胆碱受体亚基eat-2（neuronal acetylcholine receptor subunit eat-2,eat-2）信号通路。茯苓多糖增加了线虫中skn-1转录因子的核定位,上调了下游抗氧化基因谷胱甘肽S-转移酶4（glutathione S-transferase 4,gst-4）和gst-7的转录水平,并显著降低了细胞内ROS水平。然而,在skn-1突变体蠕虫中未观察到这些效应。结论 茯苓多糖在秀丽隐杆线虫中表现出抗氧化和抗衰老的作用,其机制涉及调控skn-1转录因子及其下游抗氧化基因,最终降低ROS水平,增强机体的抗氧化应激能力。     

铁皮石斛多糖的分离纯化及抗衰老活性研究

目的：分离纯化铁皮石斛多糖（DOP）,得到纯化后的铁皮石斛多糖DOP-1,并以秀丽隐杆线虫为模式生物,研究DOP-1的抗衰老作用。方法：以铁皮石斛鲜品为原料,经提取、浓缩、乙醇沉淀和真空干燥后,得到铁皮石斛粗多糖,铁皮石斛粗多糖经DEAE-Sepharose Fast Flow层析柱和HW-55F凝胶柱洗脱后获得纯品铁皮石斛多糖DOP-1,通过高效凝胶渗透色谱法测定其纯度及相对分子质量等参数,同时研究不同浓度DOP-1（100 μg/mL、200 μg/mL、400 μg/mL）对秀丽隐杆线虫寿命、生殖能力、抗高温损伤、氧化应激损能力及脂褐素的影响。结果：分离纯化后的DOP-1为均一性多糖,其相对分子质量为3.260×105,不同浓度DOP-1均可以显著延长秀丽隐杆线虫的寿命（P<0.05或P<0.01）,其中以200 μg/mL DOP-1作用最为明显,与对照组比较,寿命延长了43.37%,DOP-1对高温损伤和氧化应激损伤有一定的抵御作用,能有效降低秀丽隐杆线虫体内脂褐素的积累,并对其生殖能力无明显影响。结论：分离纯化后的DOP-1为均一性多糖,并具有较显著的抗衰老作用,可对其结构与抗衰老活性之间关系的研究提供参考。     

邻甲氧基肉桂酸抗衰老活性及机制研究

目的 基于秀丽隐杆线虫（以下简称线虫）模型研究邻甲氧基肉桂酸（OMA）体内抗衰老活性及机制。方法 研究OMA对野生型线虫体长、头部摆动频率、脂褐素含量、抗氧化应激能力的影响,评价其体内抗衰老活性;利用线虫转基因株系TJ356和CF1553模型,通过衰变加速因子-16（DAF-16）核转位实验、超氧化物歧化酶-3（SOD-3）融合绿色荧光蛋白（GFP）荧光检测实验探究OMA抗衰老作用的分子信号通路。结果 与对照组比较,OMA可以抑制线虫的体长（P<0.001）、降低其头部摆动频率、减缓线虫体内脂褐素沉积（P<0.001）、提高线虫在氧化应激条件下的寿命（P<0.05）;同时能激活DAF-16转录因子,促进线虫DAF-16核转位,上调线虫体内SOD-3蛋白表达水平（P<0.001）。结论 OMA具有良好的抗衰老活性,其作用机制可能与胰岛素/胰岛素样生长因子-1（IIS）信号通路有关,通过增强DAF-16活性并上调其下游SOD-3蛋白的表达发挥抗衰老作用。     

黄连-吴茱萸药对组分溶出规律的研究

目的：考察黄连-吴茱萸药对中主要成分随黄连一吴茱萸配比变化的溶出规律。方法：黄连-吴茱萸（1：0，1：1，1：2，1：6，6：1，2：1，0：1）的半仿生提取液在优化好的RP-HPLC条件下进行分析，吸收指纹图谱能够反映化学成分全貌的优点引入相对定量，同时对小檗碱等主要成分进行含量测定，将相对定量和绝对定量结合起来分析色谱数据，以研究药对成分的溶出规律。结果：考察了药对的17个组分与黄连-吴茱萸配伍之间的关系。来自吴茱萸药材的8个成分随着配伍黄连比例的增大溶出增加，但与黄连的比例不成线性关系；来自黄连药材的峰7、9、10随着配伍吴茱萸比例的增大溶出增加，与吴茱萸的比例不成线性关系；来自黄连药材的小檗碱型化合物随着配伍吴茱萸比冽的增大溶出减少，且与吴茱萌的比例有线件趋势,结论：黄连-吴茱萸药对的不同比例配伍对各主要组分溶出的影响不同。     

用秀丽隐杆线虫观察43种中药的体内抗菌药效

目的 以秀丽隐杆线虫细菌感染模型评价中药的体内抗菌作用,为发现新的抗菌先导物奠定基础.方法 用铜绿假单孢菌、金黄色葡萄球菌分别感染秀丽隐杆线虫,用培养液配制不同浓度的中药提取物药液,将线虫置入药液培养,5 d后观察,根据成活率、线虫体内细菌数判断药效.结果 水麻叶、黄连、大接骨丹、知母、茯苓、当归、桃仁、山豆根、白虎汤对感染细菌的秀丽隐杆线虫显示出较好的保护效果,其中水麻叶作用最强;对9种提取物做体外抑菌实验,除黄连具有较弱的抗菌效果外,其它8种提取物当浓度为1 600 μg·ml-1时均无抗菌活性,但在较低浓度时(100～800 μg·ml-1)对线虫产生体内抗菌作用,与阴性对照比,降低线虫体内细菌数10～100倍.结论 秀丽隐杆线虫易于培养,可感染多种细菌,具有免疫系统,繁殖成本低,适宜用于体内抗菌药物的筛选.     

黄连与茱萸配伍比例对黄连生物碱含量的影响

目的　探讨黄连与吴茱萸配伍后黄连生物碱含量的变化规律。方法　黄连、吴茱萸分别按１：１、１：２、１：４、１：８、１：１６、１：３２比例配伍,水煎制得水提液,用柱层析－紫外分光光度法测定配伍方剂水提液中黄连生物碱的含量,实验数据进行配伍比例与黄连生物碱含量的变化之间的相关分析。结果　黄连配伍吴茱萸可引起其生物碱含量的减少,其损失率与吴茱萸的配伍剂量线性相关,经统计学检验 Ｐ ＜０．０１。结论　在现代制药工艺设计中应考虑黄连、吴茱萸的配伍对黄连生物碱的影响。     

珍珠母超微粉蛋白及寡肽对小鼠镇静安眠作用比较

目的比较珍珠母超微粉蛋白、寡肽对小鼠镇静安眠作用。方法利用PCPA制造小鼠失眠模型,观察小鼠的自主活动情况,ELISA法测小鼠血中ATCH含量并计算脑及脑系数。结果阳性对照组、寡肽组小鼠的自主活动次数显著降低,小鼠血中ACTH的含量增加,但脑干系数无影响。结论超微粉寡肽类成分(MCP)镇静安眠活性最强,为镇静安眠主要活性部位,调节ACTH可能是其镇静安眠机制。     

丁香苦苷不同给药途径的药物动力学研究

目的:研究并比较丁香苦苷单体两种给药途径在家兔体内的药物动力学过程,考察丁香苦苷单体口服后的绝对生物利用度。方法:家兔静脉注射丁香苦苷注射液和灌胃给予丁香苦苷水溶液,采集血样,固相萃取小柱活化方法处理血浆后高效液相色谱法测定丁香苦苷血浆浓度,采用药动学软件3P97进行数据处理,确定药动学参数。结果:丁香苦苷静脉给药后在体内符合二室模型分布,其主要药动学参数分别如下:T1/2α为2.41min,T1/2β为15.38min。灌胃给药后丁香苦苷的药动学行为符合一级吸收二室模型,Cmax为17.91min,T1/2(α)为9.642min,T1/2(β)31.748min。绝对生物利用度为35.9%。结论:丁香苦苷单体经口服和静脉两种给药途径给药后,吸收和消除均较快。     

病性变化和转化的哲理数学原理

病性的变化和转化以及疾病的传变是中医病理学的2个核心问题。它们可分别从阴阳五行数学的公理1和公理2、3得到圆满的解释。病性变化,其症结在于主导属性明晰度的大小发生变化;病性转化,其症结则在于主导属性明晰度的正负号发生变化。     

《老老恒言》论老年养生

简要论述了《老老恒言》中有关老年养生的思想和方法 ,认为饮食以调理脾胃为要 ,应注意饮食有节、五味调和、清淡为补 ;起居以养静为要 ,应注意调顺四时、起居有常、静养与导引相结合 ;养性以安命为要 ,应注意清心寡欲、修心养性     

Evaluation of estrogenic activity of alcoholic extract of rhizomes of Curculigo orchioides

The rhizomes of Curculigo orchioides Gaertn. (Amaryllidacea) is an important Ayurvedic as well as Unani drug. It is present in several drug formulations used in the treatment of menorrhagia and other gynecological problems. In this study, we conducted a comparative study of estrogenic activity of alcoholic extract of Curculigo orchioides with diethylstilbestrol in bilaterally ovariectomized young albino rats. Bilaterally ovariectomized albino rats were divided into five groups (n=9) receiving different treatments, consisting of vehicle (0.6% w/v sodium carboxy methyl cellulose), ethanolic extract of rhizomes of Curculigo orchioides at three different doses (viz., 300, 600, 1200 mg/kg body weight) and standard drug diethylstilbestrol (DES) at a dose of 2 mg/kg body weight. All these were administered orally daily for 7 days. Estrogenic activity was assessed by taking percentage vaginal cornification, uterine wet weight, uterine glycogen content and uterine histology as parameters of assessment. Alcoholic extract of Curculigo orchioides showed a significant increase in percentage vaginal cornification, uterine wet weight (P<0.001), uterine glycogen content (P<0.001) and a proliferative changes in uterine endometrium compared to the control.     

中药产业竞争力提升战略研究

本文运用了竞争力理论与战略理论，分析了中药产业竞争力提升的环境与条件，提出了提升中药产业竞争力的三大战略目标、三大总体战略、四条战略举措及三个实施阶段与重点任务。     

对中医学科建设与学科带头人培养的思考

通过中医学术发展的历史沿革回顾,提出了中医药学科建设的总体构思,指出要发展一个大的一级学科,首先要有教育,这是发展学科的基础;其次是科研来提高教育水平,并指导临床;再次是临床;三者缺一不可。同时提出了学科带头人应具备的条件及如何培养学科带头人。     

胃脘痛证候量化诊断的探讨

目的:探讨胃脘痛证候的量化诊断规律。方法:以因子分析方法对808例胃脘痛患者的临床四诊信息进行分析。结果:因子分析从胃脘痛临床症状中提取12个因子,分别代表脾胃湿热、脾胃虚寒、肝胃气滞、气阴两虚、胃热炽盛、胃阴亏虚、肝胃郁热、脾胃气虚等8个证候,同时对各个证候进行量化。结论:因子分析所得的胃脘痛的常见证候分类及量化诊断为临床辨证提供客观依据。     

中医方剂学考试改革的探索与实践

传统的闭卷考试不能很好地反映方剂学教学的效果,因此,我们试行了以多种形式相结合的考试改革,考试成绩由笔试、机试、平时3个方面组成。结果大大提高了学生分析问题和解决问题的能力,激发了学生学习的兴趣,提高了教师教学水平,带动了教学改革和教学研究的全面进行。     

中药产业竞争力提升战略研究

本文运用了竞争力理论与战略理论,分析了中药产业竞争力提升的环境与条件,提出了提升中药产业竞争力的三大战略目标、三大总体战略、四条战略举措及三个实施阶段与重点任务。