羟基红花黄色素A与芍药苷联用对脑缺血再灌注大鼠脑组织p-AKT蛋白的影响北大核心CSCD

目的探讨羟基红花黄色素A(HSYA)与芍药苷(PF)联用对脑缺血再灌注大鼠脑组织磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)的影响。方法将160只SD大鼠随机分成HSYA组(5 mg·kg^(-1))、PF组(5 mg·kg^(-1))、预防治疗组(HSYA+PF,各5 mg·kg^(-1))、治疗组(HSYA+PF,各5 mg·kg^(-1))、银杏内酯组(5 mg·kg^(-1))、模型组、假手术治疗组(HSYA+PF,各5 mg·kg^(-1))、假手术空白组。采用右侧大脑中动脉线栓法(MACO)复制急性局灶性脑缺血再灌注模型,预防治疗组从造模前3 d开始通过尾静脉注射给药,余各组造模后连续给药7 d。再灌注6 h后及取材前进行神经行为评分;氯化三苯基四氮唑(TTC)染色观察并测定脑梗死面积百分比;HE染色观察各组大鼠海马区病理组织学变化;免疫组化法检测脑组织皮层区p-AKT蛋白表达情况。结果与假手术组比较,其余各组首次神经行为评分均显著增加(P<0.05);与模型组比较,预防治疗组首次神经行为评分显著降低(P<0.05),各给药组治疗后神经行为评分显著降低(P<0.05)。与假手术组比较,模型组脑梗死面积百分比显著增大(P<0.05);与模型组比较,各给药组脑梗死面积百分比显著减小(P<0.05)。与模型组比较,预防治疗组、治疗组、银杏内酯组的脑组织皮层内p-AKT阳性细胞表达率显著升高(P<0.05),而HSYA组、PF组与模型组的差异无统计学意义(P>0.05);与治疗组比较,预防治疗组的p-AKT阳性细胞表达明显增加(P<0.05)。结论 HSYA与PF联用较单用对脑缺血再灌注损伤有更强的保护作用,这可能与其上调PI3K/AKT通路中p-AKT蛋白的表达量有关,且预防用药的保护作用更强。     

岭南地区子宫内膜异位症与体质相关性研究

目的观察败酱总黄酮对局灶性脑缺血再灌注大鼠的神经保护作用及炎症因子的影响。方法将98只Wistar大鼠随机分为假手术组,模型组,尼莫地平组(20 mg·kg~(-1)),脑络通组(500 mg·kg~(-1)),败酱总黄酮高、中、低剂量组(200、100、50 mg·kg~(-1))。灌胃体积为20 mL·kg~(-1),每天给药1次,连续给药7 d。末次给药后采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。采用ELISA法检测脑组织匀浆中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)水平;氯化三苯基四氮唑(TTC)染色观察并测定脑梗死面积百分比;免疫组织化学法检测脑组织中神经生长因子(NGF)、核因子(NF)-κBp65表达情况。结果与假手术组比较,模型组大鼠脑组织脑梗死面积百分比、ICAM-1、IL-6、IL-1β、TNF-α、Bax、Bcl-2、Caspase-3水平以及NGF、NF-κBp65免疫阳性表达水平显著升高(P 0.01)。与模型组比较,败酱总黄酮各剂量组的大鼠脑组织ICAM-1、IL-6、IL-1β、Bax、Caspase-3含量水平均显著降低(P 0.05,P 0.01),Bcl-2含量水平及NGF免疫阳性表达水平均显著升高(P 0.01);败酱总黄酮高、中剂量组的大鼠脑梗死面积百分比、TNF-α含量水平及NF-κBp65免疫阳性表达水平均明显降低(P 0.05,P 0.01)。结论败酱总黄酮对局灶性脑缺血再灌注损伤有较好的保护作用,可以减少脑梗死面积,保护脑组织免受炎症因子的损伤,增加神经细胞营养因子保护神经元,减少神经细胞的凋亡,激活脑细胞自我保护,减少脑缺血再灌注损伤。     

败酱总黄酮对局灶性脑缺血再灌注大鼠的神经保护作用及炎症因子的影响

目的观察败酱总黄酮对局灶性脑缺血再灌注大鼠的神经保护作用及炎症因子的影响。方法将98只Wistar大鼠随机分为假手术组,模型组,尼莫地平组(20 mg·kg~(-1)),脑络通组(500 mg·kg~(-1)),败酱总黄酮高、中、低剂量组(200、100、50 mg·kg~(-1))。灌胃体积为20 mL·kg~(-1),每天给药1次,连续给药7 d。末次给药后采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。采用ELISA法检测脑组织匀浆中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)水平;氯化三苯基四氮唑(TTC)染色观察并测定脑梗死面积百分比;免疫组织化学法检测脑组织中神经生长因子(NGF)、核因子(NF)-κBp65表达情况。结果与假手术组比较,模型组大鼠脑组织脑梗死面积百分比、ICAM-1、IL-6、IL-1β、TNF-α、Bax、Bcl-2、Caspase-3水平以及NGF、NF-κBp65免疫阳性表达水平显著升高(P 0.01)。与模型组比较,败酱总黄酮各剂量组的大鼠脑组织ICAM-1、IL-6、IL-1β、Bax、Caspase-3含量水平均显著降低(P 0.05,P 0.01),Bcl-2含量水平及NGF免疫阳性表达水平均显著升高(P 0.01);败酱总黄酮高、中剂量组的大鼠脑梗死面积百分比、TNF-α含量水平及NF-κBp65免疫阳性表达水平均明显降低(P 0.05,P 0.01)。结论败酱总黄酮对局灶性脑缺血再灌注损伤有较好的保护作用,可以减少脑梗死面积,保护脑组织免受炎症因子的损伤,增加神经细胞营养因子保护神经元,减少神经细胞的凋亡,激活脑细胞自我保护,减少脑缺血再灌注损伤。     

HSYA与芍药苷联用对脑缺血再灌注大鼠脑组织p-Akt 蛋白的影响

目的：探讨羟基红花黄色素A（HSYA）与芍药苷联用对脑缺血再灌注大鼠脑组织磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）的影响。方法：将160只SD大鼠随机分成HSYA组,芍药苷组（5 mg·kg-1）,预防治疗组,治疗组(HSYA 芍药苷,各5 mg·kg-1),银杏内酯组(5 mg·kg-1),模型组,假手术治疗组(HSYA 芍药苷,各5 mg·kg-1),假手术空白组;采用右侧大脑中动脉线栓法（MACO）复制急性局灶性脑缺血再灌注模型,预防治疗组从造模前3天开始通过尾静脉注射给药,余各组造模后连续给药7天,免疫组化法检测脑组织皮层区p-Akt蛋白表达情况。结果：与假手术组比,其余各组首次神经功能缺失评分均显著增加,与模型组比较,预防治疗组首次神经功能缺失评分显著降低（P<0.05）,各用药组用药后神经功能缺失评分显著降低（P<0.05）;与假手术空白组比较,模型组梗死面积百分比显著增加（P<0.05）,海马区神经细胞损伤较重;与模型组相比,各用药组梗死面积百分比显著减少（P<0.05）,海马区神经细胞损伤轻;免疫组化结果显示,各组的皮层均可见p-Akt的阳性表达,与模型组比,预防治疗组、治疗组和银杏内酯组Akt磷酸化表达明显增加（P<0.05）;与治疗组相比,预防治疗组Akt磷酸化表达明显增加（P<0.05）。结论：HSYA与芍药苷联用对急性脑缺血再灌注损伤有一定保护作用,其作用机制可能与提高Akt磷酸化的水平有关,且预防治疗用药保护作用更强。     

益气活血药抗气虚血瘀型脑缺血大鼠的最佳配比优选

目的 探讨黄芪、灯盏细辛注射液联用对气虚血瘀型脑缺血大鼠的最佳配比。方法 复制气虚血瘀脑缺血再灌注大鼠模型,分黄芪∶灯盏细辛(0∶10、2∶8、4∶6、6∶4、8∶2、10∶0)6个配比组,同时设模型组与假手术组。各配比组造模后即时、24 h后腹腔注射药液(2ml·kg~(-1)·d~(-1)),模型组与假手术组给予相应体积生理盐水,再灌注48 h行神经行为学评分,取脑行TTC染色计算脑梗死率,取脑行HE染色,同时免疫组化测定脑组织中AKT、p-AKT表达。结果 各组均能明显降低模型大鼠神经学评分及脑梗死率(P0.05或P0.01),除黄芪组外,各组均能升高AKT、p-AKT蛋白表达(P0.05或P0.01),且均以4∶6作用显著。结论 益气活血药联用抗气虚血瘀脑缺血损伤大鼠最佳配比为4∶6。     

凌霄花总黄酮对脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用

目的:研究凌霄花总黄酮对脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用,并探讨其作用机制。方法:SPF级Wistar大鼠60只,随机分为假手术组,模型组,阳性药组(阿司匹林片,50 mg·kg~(-1)),凌霄花总黄酮高、低剂量组(200,100 mg·kg~(-1)),除假手术组外,建立短暂性大脑中动脉阻塞大鼠模型(t MCAO),采用神经缺损评分(NDS)法评价行为学的改变、苏木素-伊红(HE)染色法评价脑组织病理形态的改变、酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清中神经元特异性烯醇化酶(NSE)的水平及脑组织中细胞因子白细胞介素-10(IL-10),转化生长因子-β_1(TGF-β_1)的水平,探讨凌霄花总黄酮对脑缺血再灌注损伤的保护作用。结果:与假手术组比较,模型组大鼠神经缺损评分明显升高(P0.01),脑组织病理损伤严重,血清NSE水平明显升高(P0.01),脑组织中IL-10,TGF-β_1水平明显降低(P0.01);与模型组比较,凌霄花总黄酮高剂量组可明显改善模型大鼠的神经缺损症状,降低神经缺损评分(P0.05);凌霄花总黄酮高、低剂量组和阿司匹林组能明显减轻脑组织病理损伤程度(P0.01,P0.05),降低血清中NSE水平(P0.05),升高脑组织中IL-10,TGF-β_1水平(P0.01,P0.05)。结论:凌霄花总黄酮对短暂性脑缺血再灌注大鼠有一定的保护作用,可能与降低NSE水平,升高抗炎细胞因子IL-10,TGF-β_1的水平,减轻炎症损伤有关。     

Ento-Ⅰa涂膜剂经皮给药对小鼠急性不完全性脑缺血的保护作用

目的:通过复制小鼠急性不完全性脑缺血模型,研究Ento-Ⅰa涂膜剂对脑缺血的保护作用。方法:140只小鼠分为2批进行实验,每批70只。将70只小鼠随机分为7组,每组10只,分别为假手术组、Ento-Ⅰa涂膜剂组(37.50mg·kg~(-1)、18.75mg·kg-1、9.38mg·kg~(-1))、生理盐水模型组、基质模型组、尼莫地平组(18mg·kg~(-1),ig)。Ento-Ⅰa涂膜剂预防给药7 d后,测定小鼠结扎双侧颈总动脉带迷走神经后的存活时间及其脑组织SOD活性、MDA含量、EB含量。结果:Ento-Ⅰa涂膜剂在剂量为18.75 mg·kg~(-1)时,可以明显延长小鼠结扎双侧颈总动脉带迷走神经后的存活时间(P0.05),延长率为39.55%;在剂量为37.50mg·kg~(-1)时效果最佳(P0.01),小鼠存活时间的延长率为45.15%,与阳性药尼莫地平(18 mg·kg~(-1),延长率43.96%)相当。与基质模型组比较,Ento-Ia涂膜剂18.75、37.50 mg·kg~(-1)剂量组均可提高脑组织内SOD活性并能减少MDA含量(中剂量组,P0.05;高剂量组P0.01);同时,Ento-Ia涂膜剂能显著降低小鼠急性不全性脑缺血小鼠脑组织EB含量(P0.05)。结论:Ento-Ia涂膜剂经皮给药可对小鼠急性不完全性脑缺血诱发的脑损伤有明显的保护作用,其机制可能通过干预脑缺血后脑组织的氧化应激及其保护血脑屏障有关。     

原花青素对实验性脑出血大鼠的保护作用

目的:探讨原花青素对脑出血大鼠的脑保护作用及其可能机制.方法:采用Ⅶ型胶原酶诱导大鼠脑出血,建立脑出血模型.54只健康SD大鼠随机分为假手术组、脑出血模型组、原花青素低剂量组(50 mg·kg~(-1))、中剂量组(100 mg·kg~(-1))、高剂量组(200 mg·kg~(-1))及尼莫地平组(10 mg·kg~(-1)).术后4,8,12,24 h观察神经缺损症状并根据Bederson方法评分;出血后24 h取血与脑组织,检测血清磷酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)的水平,丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;干湿比重法测定脑组织含水量;HE染色观察脑组织病理学改变.结果:与模型组比较,原花青素低、中、高剂量组的神经行为学评分显著降低(P＜0.05或P＜0.01),血清CK,LDH的水平明显降低(P＜0.05或P＜0.01),脑组织SOD活性显著升高(P＜0.05),MDA含量明显降低(P＜0.05或P＜0.01),脑组织含水量显著下降(P＜0.05或P＜0.01).HE结果显示,与模型组相比,原花青素各个剂量组的组织与神经细胞损伤程度有所减轻,病理学变化有所改善.结论:原花青素能够保护脑出血大鼠,其机制可能与改善脂质过氧化、减少自由基生成有关.     

HSYA与芍药苷联用对脑缺血再灌注损伤大鼠PI3K、Akt mRNA表达的影响

目的:探讨羟基红花黄色素A(HSYA)与芍药苷联合用药对急性局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠PI3K/Akt信号通路中PI3K、Akt mRNA表达的影响。方法:SPF级雄性SD大鼠60只,随机分为6组,每组10只,分别为模型组、假手术组、HSYA组、芍药苷组、银杏内酯组、合用组。复制脑缺血再灌注模型。脑缺血1 h再灌注6 h后尾静脉注射相应的药物7天,每天1次。HSYA组灌胃HSYA溶液5.0 mg/(kg·d);芍药苷组灌胃芍药苷溶液5.0 mg/(kg·d);合用组是HSYA与芍药苷联合用药,灌胃HSYA溶液和芍药苷溶液各5.0 mg/(kg·d);银杏内酯组灌胃银杏内酯注射液5.0 mg/(kg·d);模型组和假手术组灌胃等量生理盐水。末次给药2 h后采集相应标本保存,qRT-PCR法检测大鼠海马组织PI3K、Akt mRNA的表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠PI3K mRNA表达量显著减少,差异有统计学意义(P0.01)。与模型组比较,HSYA组、芍药苷组、合用组、银杏内酯组大鼠海马组织中PI3K mRNA的表达显著降低,差异均有统计学意义(P0.05)。与合用组比较,HSYA组、银杏内酯组大鼠PI3K mRNA的表达量较高,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:HSYA与芍药苷联合用药对脑缺血再灌注损伤模型大鼠的保护机制可能与显著调节PI3K/Akt信号通路中PI3K mRNA过表达,微调Akt mRNA过表达有关。     

精芪双参胶囊对脑缺血再灌注损伤及其作用机制的探讨

目的:观察精芪双参胶囊对大鼠大脑的保护作用,为精芪双参胶囊的开发和应用提供药效学依据。方法:(1)ICR小鼠50只,随机分为空白组,盐酸氟桂利嗪组(3mg·kg~(-1)),精芪双参高、中、低剂量组,通过小鼠耳后断头法记录小鼠断头后的呼吸次数及呼吸维持时间。(2)SD大鼠90只,随机分为假手术组,模型对照组,盐酸氟桂利嗪组(2mg·kg~(-1)),精芪双参高、中、低剂量组,通过线栓法大鼠脑缺血再灌注制造大鼠脑缺血模型,按z-Longa评分法和氯化三苯四氮唑(TTC)染色法评价大鼠行为学和梗死面积,ELISA法检测血清TNF-α、IL-1β,脑组织匀浆中SOD、MDA和LDH活性测定。结果:(1)盐酸氟桂利嗪组(3mg·kg~(-1))可以明显延长小鼠存活时间及断头后的喘息次数,并能降低脑指数及脑含水量的增加,与空白对照组有显著意义(p0.05);精芪双参胶囊中剂量组(1080mg·kg~(-1))可显著延长小鼠存活时间及断头后的喘息次数,与空白组比较有非常显著意义(p0.01);而精芪双参胶囊高剂量组(1800mg·kg~(-1))可延长小鼠存活时间及有效抑制脑指数的增长,与空白组比较有显著意义(p0.05)。(2)神经行为学评分:盐酸氟桂利嗪组(2mg·kg~(-1))、精芪双参胶囊高剂量组、中剂量组(1000、500mg·kg~(-1))与模型对照组比较有明显的差异(p0.05,p0.01);盐酸氟桂利嗪组(2mg·kg~(-1))、精芪双参胶囊高、中剂量组(1000、500mg·kg~(-1))可降低IL-1β、TNF-α在大鼠血清中含量,与模型对照组比较有显著意义(p0.05,p0.01,p0.001);盐酸氟桂利嗪组(2mg·kg~(-1))及精芪双参胶囊高、中剂量组(1000、500mg·kg~(-1))可明显抑制大鼠脑组织中LDH和MDA含量的释放,并提高SOD活力,与模型对照组比较显著差异(p0.05,p0.01);模型对照组脑缺血面积明显增加,盐酸氟桂利嗪组(2mg·kg~(-1))及精芪双参胶囊高、中剂量组(1000、500mg·kg~(-1))脑梗死面积缩小,具有显著性差异(p0.05,p0.001)。结论:精芪双参胶囊降低脑出血再灌注后的损伤,对脑部有很好的保护作用。     

月季花总黄酮对局灶性脑缺血再灌注模型大鼠的影响

目的:通过研究月季花总黄酮对大鼠局灶性脑缺血再灌注模型的影响,探讨其作用机制。方法:将大鼠随机分为假手术组、模型组、月季花总黄酮高、中、低剂量组(200,100,50 mg·kg~(-1))及阳性组[尼莫地平组(20 mg·kg~(-1)),脑络通组(500 mg·kg~(-1))]。预先连续给药7 d,末次给药1 h后,复制大鼠大脑中动脉局灶性栓塞(MCAO)模型。造模2 h后再灌注22 h,对死亡率、神经功能缺失评分,检测血清中S-100β;脑组织中丙二醛(MDA),超氧化物歧化酶(SOD),一氧化氮(NO),一氧化氮合酶(NOS),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β),细胞间黏附分子-1(ICAM-1),三磷酸腺苷(ATP)酶;并观察脑组织形态学改变。结果:大鼠局灶性脑缺血再灌注模型复制成功。与模型组比较,月季花总黄酮高、中、低剂量组均可显著降低大鼠神经功能缺失的评分(P0.01),显著降低血清中的S-100β含量(P0.01),显著降低脑组织中MDA,NO,NOS活性(P0.01),显著升高脑组织中SOD活性(P0.01),显著升高脑组织中Na~+K~+-ATP酶,Mg~(2+)-ATP酶,Ca~(2+)-ATP酶活性(P0.01),显著降低脑组织中的TNF-α,IL-1β,ICAM-1含量(P0.01);显著改善脑组织的损伤(P0.01)。结论:月季花总黄酮对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其作用机制可能与其抗自由基,减轻脑组织的炎症反应及改善脑缺血再灌注损伤后脑组织的能量代谢有关。     

桃叶鸦葱黄酮对脑缺血再灌注大鼠的保护作用

目的:探讨桃叶鸦葱总黄酮对脑缺血-再灌注大鼠的保护作用。方法:72只清洁级雄性健康SD大鼠,随机分成假手术组、模型组、模型+桃叶鸦葱总黄酮高剂量组(400 mg·kg~(-1)),模型+桃叶鸦葱总黄酮中剂量组(200 mg·kg~(-1)),模型+桃叶鸦葱总黄酮低剂量组(100 mg·kg~(-1)),模型+尼莫地平组(10.8 mg·kg~(-1)),每组12只。模型组和用药组采用大脑中动脉线栓法制备大鼠脑缺血-再灌注损伤模型,在缺血2 h后再灌注,连续给药20 d,对各组大鼠进行神经行为学评分、脑组织含水量测定、通过HE染色观察其脑组织病理形态学改变、通过免疫组织化学联合图像分析方法检测其海马区水通道蛋白4(AQP4)的表达。结果:模型组大鼠均表现出明显的神经功能缺损症状,神经行为学评分升高,而桃叶鸦葱高、中剂量组及尼莫地平组大鼠症状改善,神经行为学评分降低(P0.05)。大鼠脑含水量实验表明,模型组大鼠脑含水量显著高于假手术组(P0.01),桃叶鸦葱总黄酮高、中剂量组和尼莫地平组大鼠脑含水量显著低于模型组(P0.05)。HE染色结果显示,模型组大鼠海马区神经元细胞脱失明显,而高、中剂量桃叶鸦葱总黄酮及尼莫地平可减轻这种形态学改变;免疫组织化学分析结果提示,模型组中AQP4表达明显高于假手术组(P0.01)。结论:在脑缺血-再灌注损伤过程中,AQP4水平的增高可能引起细胞对水的通透性增加,从而造成细胞损伤,导致大鼠出现神经功能缺损症状,高、中剂量桃叶鸦葱总黄酮及尼莫地平可以通过降低海马区AQP4的表达,减轻脑水肿程度,保护神经元细胞,改善大鼠神经功能损害。     

灯盏细辛和赤芍配伍组方对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及对NF-κB通路的影响

目的:探讨灯盏细辛和赤芍配伍组方(辛芍)对大鼠中动脉阻断(MCAO)局灶脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法:随机将SPF级SD大鼠分为假手术组、模型组、尼莫地平组(12.6 mg·kg~(-1))和辛芍组(12.5 g·kg~(-1))。给药组连续灌胃给药3 d,然后选用改良Zea Longa方法建立大鼠局灶脑缺血再灌注损伤模型,术后再连续给药7 d。采用Zea Longa5分制法对各组大鼠进行神经行为学判别;用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法测定脑梗死面积;用酶联免疫吸附法(ELISA)测定白细胞介素-6(IL-6),白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;并用蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测p65和IκBα的磷酸化水平。结果:与假手术组比较,模型组出现明显神经功能缺失体征(P0.01),脑梗死面积明显增加(P0.01),说明大鼠局灶脑缺血再灌注损伤模型构建成功。与模型组比较,辛芍组方能明显改善脑缺血再灌注损伤模型大鼠的神经行为功能(P0.05),明显降低脑梗死面积比(P0.05),显著降低IL-6,IL-1β和TNF-α的水平(P0.01),并显著降低p65和IκBα的磷酸化水平(P0.01)。结论:辛芍具有减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的作用,其作用机制可能与抑制核转录因子-κB(NF-κB)通路激活相关。     

丹参、红花有效组分配伍对缺血性脑卒中大鼠脑组织致炎因子的作用机制

目的:本研究拟通过神经病理学——分子神经生物学——功能行为学等多个层面,研究丹参、红花有效组分配伍对大鼠脑缺血再灌注损伤相关致炎因子的调控作用及其机制。方法:将32只SD大鼠随机分为假手术组,模型组,丹参、红花有效组分配伍(丹红配伍,720 mg·kg~(-1))组、尼莫地平(0.5 mg·kg~(-1))组,每组8只。除假手术组,其余各组采用改良MCAO法制备缺血性脑卒中损伤的相关模型,分别于再灌0,6 h灌胃给药。采用苏木素-伊红(HE)染色观察各组缺血性损伤引起的脑组织病理学改变,免疫组化及实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠脑组织中相关致炎因子白细胞介素-1β(IL~(-1)β)和核转录因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白及mRNA的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠脑组织中Nrf2蛋白表达,探讨其抗脑缺血损伤炎症反应的作用机制。结果:HE染色结果显示,与假手术组比较,模型组大鼠脑组织正常表达的神经元计数显著减少(P0.01);与模型组比较,丹红配伍组和尼莫地平组大鼠脑组织存活神经元计数明显升高(P0.05,P0.01)。免疫组化和Real-time PCR结果显示,与假手术组比较,模型组大鼠脑组织中IL~(-1)β和Nrf2蛋白阳性及mRNA表达显著增加(P0.01);与模型组比较,丹红配伍组和尼莫地平组IL~(-1)β和Nrf2蛋白阳性及mRNA表达明显降低(P0.05,P0.01)。Western blot结果显示,与假手术组相比较,模型组大鼠的脑组织中Nrf2蛋白表达显著升高(P0.01);与模型组比较,丹红配伍组和尼莫地平组大鼠脑组织中Nrf2蛋白表达显著降低(P0.01)。结论:丹参、红花有效组分配伍能明显下调IL~(-1)β和Nrf2蛋白表达,其机制是激活炎症通路的蛋白表达,减少神经细胞凋亡,最终达到抑制缺血性脑卒中损伤过程中的相关炎症反应。     

熊果酸对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的:研究熊果酸对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用并探讨其作用机制。方法:120只清洁级雄性SD大鼠随机分为假手术组、局灶性脑缺血再灌注模型组、熊果酸(20,40,80,120 mg·kg-1)治疗组,每组20只。采用颈内动脉线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,术后通过尾静脉注射给药。6 h后,盲法行神经功能评分,测定脑梗死体积及脑组织含水量,测定血清中肌酸激酶(CK),乳酸脱氢酶(LDH),丙二醛(MDA)含量以及总抗氧化能力(T-AOC);检测脑组织中超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),过氧化氢酶(CAT)活性及MDA含量;通过苏木精-伊红(HE)染色法观察脑组织病理形态学改变。结果:与假手术组比较,局灶性脑缺血再灌注模型组大鼠出现明显的行为障碍,血清中CK,LDH,MDA含量显著降低(P0.01),T-AOC显著降低(P0.01),脑梗死体积和脑组织含水量显著升高(P0.01),脑组织中SOD,GSH-Px,CAT活性显著升高(P0.01),并且脑组织出现明显的病理性改变;与脑缺血再灌注模型组相比,熊果酸(40~120 mg·kg-1)治疗组大鼠行为障碍显著好转(P0.05,P0.01),血清中CK,LDH,MDA含量显著降低(P0.05),T-AOC显著升高(P0.05,P0.01);熊果酸(80,120 mg·kg-1)治疗组脑梗死体积和脑组织含水量显著降低(P0.05,P0.01),脑组织中SOD,GSH-Px,CAT活性显著升高(P0.05,P0.01),MDA含量显著降低(P0.05);脑组织病理形态学改变明显减轻,其中以熊果酸120 mg·kg-1治疗组效果最为显著。结论:熊果酸对大鼠脑缺血再灌注损伤具有剂量依赖性的保护作用,该作用可能与熊果酸有效改善抗氧化酶系统活性、减轻自由基损伤有关。     

银杏二萜内酯葡胺注射液对大鼠局灶性脑缺血的保护作用

探讨银杏二萜内酯葡胺注射液对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤(MCAO)的保护作用,并探讨其可能的作用机制。雄性SD大鼠140只,随机分为假手术组、模型组、银杏提取物注射液(金纳多,1.0 m L·kg~(-1))、尼莫地平注射液(0.2 mg·kg~(-1))组、银杏二萜内酯葡胺注射液(5.2,2.6,1.3 mg·kg~(-1))组;所有动物手术前4 d尾静脉注射给药(模型组及假手术组给予生理盐水)。除假手术组,其他动物通过右侧大脑中动脉线栓塞法(MCAO)制作局灶性脑缺血再灌注模型。缺血3 h后,所用动物再次尾静脉注射给药。大鼠缺血再灌注后进行神经行为学评分并采用TTC染色法观察脑组织梗死率;测定脑组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、乳酸(LA)含量及脑脊液中Ca~(2+),谷氨酸(Glu),天冬氨酸(Asp)以及磷酸肌酸激酶(CK-BB)和乳酸脱氢酶(LDH)含量的变化。与假手术组相比,模型组大鼠脑梗死率显著增加,神经严重缺损;脑组织匀浆中MDA、LA含量升高,GSH、SOD含量降低;脑脊液中Ca~(2+)浓度降低,Glu和Asp的含量及CK-BB、LDH含量显著升高。与模型组相比,银杏二萜内酯葡胺注射液高、中剂量组能显著减少脑梗死率,改善脑神经功能缺损症状;提高SOD、GSH活性,减少血清中MDA、LA含量;升高脑脊液中Ca~(2+)浓度,减低神经递质Glu和Asp的含量及CK-BB、LDH的含量。银杏二萜内酯葡胺注射液能明显改善模型动物的神经功能缺损,其机制可能与修复血脑屏障,减少自由基,减少细胞外游离钙内流,降低脑脊液中兴奋性氨基酸含量等有关,从而保护脑缺血。     

3′-甲氧基葛根素对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用研究

目的:观察3'-甲氧基葛根素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的脑梗死体积、自由基变化的影响,探讨3'-甲氧基葛根素对脑缺血损伤的保护作用.方法:采用线栓法诱导大鼠大脑中动脉栓塞建立局灶性脑缺血再灌注模型,分假手术组、模型组、3'-甲氧基葛根素2个剂量组(5,10 mg·kg~(-1)·d~(-1))和尼莫地平组(5 mg·kg~(-1)·d~(-1)).观察行为学的改变,脑梗死体积和测定超氧化物歧化酶(SOD)活力及丙二醛(MDA)含量.结果:3'-甲氧基葛根素具有显著减轻神经功能缺损症状,减少梗死体积,显著提高脑缺血再灌注损伤大鼠脑皮质SOD活力和降低MDA含量,其中10 mg·kg~(-1)的3'-甲氧基葛根素作用尤为显著.结论:3'-甲氧基葛根素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有保护作用.     

灯盏花素对大鼠脑缺血再灌注损伤相关CYP4A的作用机制

目的:研究灯盏花素对大鼠脑缺血再灌注损伤相关细胞色素(cytochrome,CYP)4A1,CYP4A3,CYP4A8的作用机制。方法:采用SD雄性大鼠193只,制备大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,在脑缺血2 h,再灌注术后立即尾静脉注射给予灯盏花素注射剂(12,6,3 mg·kg~(-1)),每日1次,连续7 d,末次给药后,断头取右脑组织,用实时荧光定量PCR法检测脑组织内的CYP基因CYP4A1,CYP4A3,CYP4A8的表达情况,用酶联反应吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测大鼠内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,e NOS)含量。结果:与假手术组比较,模型组大鼠脑损伤168 h后的死亡率、脑梗死体积、行为学评分显著升高(P0.01),大鼠脑组织CYP4A3,CYP4A8显著上调(P0.01),e NOS含量显著增加(P0.01)。与模型组比较,灯盏花素(12,6 mg·kg-1)组可降低的大鼠脑损伤168 h的死亡率、脑梗死体积(P0.05),降低24 h后行为学评分(P0.01),下调大鼠脑组织CYP4A3,CYP4A8表达和血清e NOS含量(P0.05,P0.01);灯盏花素(3 mg·kg~(-1))组对降低大鼠脑损伤168 h后死亡率和脑梗死体积不明显,可明显降低120 h时行为学评分(P0.05),显著下调CYP4A3,CYP4A8表达和脑组织e NOS含量(P0.01)。结论:大鼠脑缺血再灌注损伤会加重大鼠死亡率、脑梗死体积、行为学评分,上调脑组织CYP4A3,CYP4A8的表达和增加脑组织及血清e NOS的含量。灯盏花素可降低大鼠脑缺血再灌注损伤大鼠死亡率和行为学评分,可能是通过下调脑组织CYP4A3,CYP4A8的表达来改善大鼠脑缺血再灌注损伤。     

三七总皂苷合用黄芪总皂苷对MCAO再灌注大鼠脑组织NF-κB表达的抑制作用

目的:研究三七总皂苷(PNS)合用黄芪总皂苷(TSA)对大鼠大脑中动脉阻塞模型(MCAO)脑组织NF-κB,I-κBα表达的影响.方法:制作MCAO再灌注大鼠模型,分别在缺血2 h、再灌注14 h腹腔注射三七总皂苷(PNS)80 mg·kg~(-1),PNS-TSA 56 mg·kg~(-1)和112 mg·kg~(-1),再灌注22 h,Western blot半定量检测缺血脑组织中I-κBα,p-I-κBα,免疫组化法检测NF-κB的表达.结果:与假手术组比较,模型组缺血区皮层NF-κB免疫反应阳性颗粒在细胞中大量表达,在细胞核中也表达广泛,阳性表达面积、累积吸光度明显增加(P<0.01).与模型组比较,PNS-TSA 56,112 mg·kg~(-1)组和PNS组NF-κB免疫反应阳性表达物多在胞浆,阳性表达面积、累积吸光度明显降低(P<0.01).PNS-TSA 56 mg·kg~(-1)组与PNS组比较,阳性表达面积、累积吸光度明显降低(P<0.05或0.01).与假手术组比较,模型组脑组织中p-IκBa蛋白表达量显著增加(P<0.01),IκBα蛋白表达量显著减少(P<0.01);与模型组比较,PNS-TSA 56,112 mg·kg~(-1)组和PNS组p-IkBα蛋白表达量显著降低(P<0.05-0.01),而IκBa蛋白表达量显著增加(P<0.01).结论:PNS能抑制缺血再灌注脑组织中NF-κB的活化,该作用与其抑制IκBα的磷酸化有关;PNS合用TSA后,抑制NF-κB活化的作用增强.     

山楂叶总黄酮对脑缺血再灌注损伤大鼠神经元凋亡和c-fos, c-jun表达的影响

目的:观察山楂叶总黄酮(TFHL)对脑缺血再灌注损伤大鼠神经元凋亡及c-fos,c-jun基因表达的影响。方法:80只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、TFHL 70,140 mg·kg-1组和银杏叶片3.5 mg·kg-1组,每组16只。四血管阻断法建立全脑缺血再灌注损伤模型,穿梭箱实验检测学习记忆能力;分光光度比色法检测血清超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的含量;免疫组化法检测c-fos及c-jun的表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠学习记忆能力显著降低,大鼠主动逃避反应率明显降低(P0.01),脑组织凋亡细胞显著增多(P0.01);c-fos与c-jun基因表达明显增强(P0.01);与模型组比较,TFHL及银杏叶片组大鼠主动逃避反应率增高(P0.05),SOD活性明显升高(P0.05),MDA含量显著降低(P0.05),凋亡细胞明显减少(P0.05),c-fos与c-jun基因表达显著降低(P0.05)。结论:TFHL可通过降低脑缺血再灌注损伤脑组织c-fos与c-jun基因表达、抑制神经元凋亡、改善脑缺血再灌注损伤大鼠的神经功能,提高大鼠的学习记忆能力。