解毒护肝方对APAP肝损伤大鼠HSP70蛋白表达的影响

目的:通过检测大鼠血清肝功能指标、血清生物标志物、HSP70蛋白表达,观察解毒护肝方对药物性肝损伤大鼠的干预作用及其机制。方法:将大鼠按体重随机分为正常组,模型组,水飞蓟宾阳性对照组,解毒护肝方高、中、低剂量组。其中正常组和模型组给予生理盐水灌胃,其余各组给予相应药液灌胃,连续给药30天。实验结束时,检测血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(T-BIL)、直接胆红素(D-BIL)、苹果酸脱氢酶(MDH)、谷氨酸脱氢酶(GLDH)、精氨酸酶(ARG)的含量变化,用免疫组化的方法观察热应激蛋白(HSP70)的蛋白表达情况。结果:对乙酰氨基酚大鼠血清AST、ALT、DBIL、ARG、GLDH、MDH含量均显著升高(P0.05,P0.01),解毒护肝方中、低剂量组能明显降低转氨酶活性及胆红素含量(P0.05,P0.01),高剂量组能显著降低肝损伤大鼠血清MDH含量(P0.05),中剂量组明显降低ARG、MDH的含量(P0.05)。肝损伤大鼠HSP70蛋白阳性表达增多;水飞蓟宾对照组以及解毒护肝方高、中、低剂量组阳性表达明显减少(P0.05,P0.01)。结论:解毒护肝方各剂量组均有一定的护肝作用,其作用机制可能是通过降低HSP70蛋白表达来实现的。     

解毒护肝汤对药物性肝损伤大鼠MIP-2和MIP-1β蛋白表达的影响

目的:通过检测大鼠血清肝功能、血清生物标志物,炎性因子以及巨噬细胞炎性蛋白-2(MIP-2),巨噬细胞炎性蛋白-1β(MIP-1β)的表达,观察解毒护肝汤对药物性肝损伤大鼠的干预作用及机制。方法:采用灌服对乙酰氨基酚方法复制药物性肝损伤大鼠模型,将Wistar大鼠按体质量随机分为正常组,模型组,水飞蓟宾组(44. 1 mg·kg~(-1)),解毒护肝汤高、中、低剂量组(63,31. 5,15. 75 g·kg~(-1)),正常组和模型组给予生理盐水灌胃,其余各组给予相应药液灌胃,连续给药30 d。实验结束后,腹主动脉取血分离血清检测天门冬氨酸氨基转移酶(AST),丙氨酸氨基转移酶(ALT),总胆红素(TBIL),直接胆红素(DBIL),苹果酸脱氢酶(MDH),对氧磷酶1(PON1),谷氨酸脱氢酶(GLDH),精氨酸(ARG),嘌呤核苷酸磷酸化酶(PNP),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6)的含量;苏木素-伊红(HE)染色法观察肝组织病理形态改变;免疫组化法观察MIP-1β的蛋白表达情况;用单荧光免疫组化观察MIP-2的蛋白表达情况;用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测肝组织匀浆中TNF-α和IL-6的含量。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清AST,ALT,DBIL,PON1,ARG,GLDH,MDH,PNP,TNF-α含量均明显升高(P 0. 05,P 0. 01),肝组织MIP-2,MIP-1β蛋白阳性表达增多;与模型组比较,解毒护肝汤中、低剂量组能明显降低转氨酶活性及胆红素含量(P 0. 05,P 0. 01),解毒护肝汤高剂量组能明显降低肝损伤大鼠血清PON1,MDH和TNF-α的含量(P 0. 05),解毒护肝汤中剂量组明显降低ARG,MDH的含量(P 0. 05),解毒护肝汤高、中剂量组均能明显降低肝组织MIP-2,MIP-1β蛋白的表达,解毒护肝汤中剂量组效果最优,各给药组对肝细胞病理形态均具有不同程度的保护作用。结论:解毒护肝汤中剂量组的护肝效果较优,且其作用机制可能通过降低TNF-α的含量,进而影响趋化因子MIP-2和MIP-1β对中性粒细胞的趋化,抑制炎性因子的释放,从而预防炎症发生。     

解毒护肝方对药物性肝损伤大鼠TLR3/TNF-α/JNK2信号通路的影响

目的观察解毒护肝方对药物性肝损伤大鼠TLR3/TNF-α/JNK2信号通路的影响。方法采用对乙酰氨基酚灌胃制作大鼠肝损伤模型。将实验大鼠按体质量随机分为正常组、模型组、阳性对照组和解毒护肝方高、中、低剂量组,各给药组给予相应药液灌胃,正常组和模型组给予生理盐水灌胃。生化分析仪检测血清AST、ALT活性和总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)含量;RT-PCR和Western blot分别检测肝组织JNK2基因和蛋白的表达;酶标仪检测肝组织匀浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)含量;免疫组化染色观察Toll样受体3(TLR3)蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠ALT、AST、DBIL、TNF-α水平显著升高(P0.01),JNK2 mRNA和p-JNK2、TLR3蛋白表达显著升高(P0.01);与模型组比较,解毒护肝方中、低剂量组大鼠AST、ALT活性显著降低(P0.05,P0.01),解毒护肝方低剂量组大鼠DBIL含量显著降低(P0.05),解毒护肝方高剂量组大鼠TNF-α含量显著降低(P0.01),解毒护肝方高、中剂量组大鼠JNK mRNA和TLR3蛋白表达均显著下调(P0.05,P0.01),p-JNK2蛋白表达有降低趋势,但差异无统计学意义(P0.05)。结论解毒护肝方对药物性肝损伤大鼠有明显的保护作用,以中、低剂量组效果最为明显,其机制可能与调控TLR3/TNF-α/JNK2信号通路有关。     

解毒护肝方对药物性肝损伤大鼠JAK2/STAT3通路的影响

目的:观察解毒护肝方对药物性肝损伤大鼠JAK2/STAT3通路的干预作用。方法:大鼠随机分为:模型对照组、水飞蓟宾44.1 mg/kg组、解毒护肝方15.8、31.5、63 g/kg组,另设空白对照组。对乙酰氨基酚造模同时,分别灌胃给予相应药物或生理盐水,连续30日,生化法检测血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(T-BIL)、直接胆红素(D-BIL)的变化,用酶标仪检测血清白介素13(IL-13)、白介素22(IL-22)、白介素6(IL-6)的含量;HE染色观察肝组织病理形态;RT-PCR和Western-blot技术检测肝组织中STAT3的基因、蛋白表达情况以及p-STAT3蛋白表达情况;免疫组化法观察肝组织p-JAK2的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清AST、ALT活性及D-BIL含量均显著升高,血清IL-13水平显著升高,肝脏p-STAT3和p-JAK2蛋白表达明显上调。与模型组比较,解毒护肝方15.8 g生药/kg、31.5 g生药/kg组能明显降低血清AST、ALT活性及D-BIL含量,对肝细胞病理形态具有一定的保护作用。解毒护肝方31.5 g生药/kg、63 g生药/kg组能显著下调肝组织p-STAT3和p-JAK2蛋白表达水平。结论:解毒护肝方各剂量组能不同程度地防治对乙酰氨基酚所致的肝损伤,但结合临床安全、有效的用药原则,以31.5 g生药/kg组效果较好,其护肝作用可能通过调节JAK2/STAT3途径来实现。     

解毒护肝方防治APAP致药物性肝损伤作用与肠道微生态的相关性探讨

目的：探讨解毒护肝方防治药物性肝损伤(DILI)的作用与肠道微生态的相关性。方法：60只C57BL/6N小鼠随机分为正常组、模型组、水飞蓟宾组及解毒护肝方低、中、高剂量组。采用对乙酰氨基酚(APAP)药液灌胃复制DILI模型，造模同时给予相应药物治疗，连续14 d。半自动生化仪检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)和直接胆红素(DBIL)的含量或活性，苏木素-伊红(HE)染色法观察肝脏病理形态，16SrRNA测序法分析粪便中肠道菌群组成结构。结果：与正常组比，模型组小鼠血清中ALT、AST、DBIL、TBIL的含量或活性均显著升高(P<0.01),肝细胞内可见大量的嗜酸性变和炎性细胞浸润，Chao1、Observed species、Simpson和Shannon指数均显著降低(P<0.01或P<0.05),厚壁菌门、变形菌门相对丰度以及厚壁菌门/拟杆菌门(F/B)值均明显升高(P<0.01或P<0.05),拟杆菌门相对丰度明显降低(P<0.05)。与模型组比，解毒护肝方能显著改善肝组织病理损伤，显...     

锦灯笼调控PPAR/JNK2通路防治药物性肝损伤的作用机制探讨

目的 基于PPAR/JNK2通路探讨锦灯笼防治药物性肝损伤(DILI)的作用机制。方法 将50只Wistar大鼠随机分为5组：正常组、模型组、水飞蓟宾组(44.1 mg·kg^-1)及锦灯笼高(6.67 g·kg-1)、低(1.67 g·kg-1)剂量组。采用对乙酰氨基酚(APAP,1 000 mg·kg^-1)溶液灌胃复制DILI大鼠模型，同时给予相应药物灌胃，每日1次，连续30 d。检测大鼠血清生化指标：谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、γ干扰素(IFN-γ)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX); HE染色法观察肝组织病理变化；免疫组化法检测肝组织巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP-1β)的表达情况；免疫荧光检测肝组织巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)的表达情况；Western Blot法检测肝组织c-Jun氨基末端激酶2(JNK2)、磷酸化氨基末端激酶2(p-JNK2)蛋白表达情况；qRT-PCR法检...     

对乙酰氨基酚致大鼠肝损伤早期生物标志物水平的变化规律

目的:通过比较对乙酰氨基酚(APAP)致肝损伤模型大鼠传统生物标志物丙氨酸氨基转移酶(ALT),天冬氨酸氨基转移酶(AST),碱性磷酸酶(ALP),总胆红素(TBIL)和潜在生物标志物谷氨酸脱氢酶(GLDH),嘌呤核苷酸磷酸化酶(PNP),α-谷胱甘肽-S-转移酶(α-GST),精氨酸酶1(Arg1)的变化来判断GLDH,PNP,α-GST,Arg1是否可以作为检测药物性肝损伤的早期生物标志物。方法:48只大鼠随机分为2组,分为正常组、模型组,每组24只,雌雄各半。给予模型组灌胃1 250 mg·kg-1APAP溶液复制药物性肝损伤的模型,在给予APAP后3,6,12,24 h,每个时间点每组随机取6只大鼠(雌雄各半),检测血清ALT,AST,ALP,TBIL,GLDH,PNP,α-GST,Arg1水平及肝组织匀浆GLDH,PNP,α-GST,Arg1水平;苏木素-伊红(HE)染色检查肝组织病理学变化。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清和肝组织匀浆的ALT,AST,ALP,TBIL,GLDH,PNP,α-GST,Arg1水平均明显升高(P 0. 05,P 0. 01),表明APAP致药物性肝损伤模型复制成功。模型组大鼠血清和肝组织的GLDH,PNP,α-GST,Arg1水平比ALT,AST水平升高时间早,幅度大。结论:GLDH,PNP,α-GST,Arg1较传统肝功能检测指标具有较好的灵敏性,可以作为早期检测药物性肝损伤的生物标志物。     

锦灯笼对对乙酰氨基酚所致药物性肝损伤大鼠JNK/c-jun/c-fos信号通路的影响

目的:通过检测大鼠血清肝功能指标和肝组织磷酸化的c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)、原癌基因(c-jun)、即早基因(c-fos)、高迁移率族蛋白1(HMGB1)蛋白的表达,观察锦灯笼对对乙酰氨基酚(APAP)所致药物性肝损伤(DILI)大鼠的干预作用及机制。方法:将50只wistar大鼠称重后随机分5组,正常组、模型组、阳性药(水飞蓟宾)对照组以及锦灯笼高、低剂量组。给予各用药组相应药液灌胃给药同时,正常组与模型组则灌饲蒸馏水,共计30 d。实验结束时,用生化分析仪检测血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)活性;用Western-Blot技术检测肝组织中p-JNK的蛋白表达情况;用免疫组化法观察c-jun、c-fos、HMGB1蛋白表达。结果:锦灯笼高、低2个剂量组皆能明显地降低模型大鼠的AST、ALT活性及DBIL、TBIL的含量(P0.05,P0.01),不同程度下调c-jun、c-fos、HMGB1、p-JNK蛋白表达(P0.05,P0.01)。结论:锦灯笼各剂量组对DILI大鼠有明显的保护作用,其作用机制可能与抑制c-fos、c-jun、HMGB1及p-JNK蛋白的表达有关,对APAP所致肝损伤起到保护作用。     

脂肝清胶囊对酒精性肝损伤的保护作用

目的探讨脂肝清胶囊对酒精性肝损伤的保护作用。方法采用白酒复制大鼠肝损伤模型,脂肝清胶囊按高、低剂量灌胃,连续8周,测定血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)及三酰甘油(TG)的含量,并观察肝脏的病理组织学改变。结果脂肝清胶囊高、低剂量组可显著降低大鼠血清AST、ALT及TG含量,与肝损伤模型组比较有显著性差异(P<0.01或0.05);肝组织病理学改变较肝损模型组显著减轻(P<0.05)。结论脂肝清胶囊对大鼠酒精性肝损伤具有保护作用,呈一定的量效关系。     

芍药苷对大鼠慢性肝损伤及肝纤维化的保护作用

目的观察芍药苷(PF)对四氯化碳(CCl4)所致大鼠慢性肝损伤及纤维化的治疗作用。方法将大鼠随机分为6组,利用高脂低蛋白饲料和CCl4制作大鼠肝损伤模型,并同时给予相应药物灌胃,9周后取材送检。血液生化检测肝功能指标:丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBil);放射免疫法测定肝纤维化指标:透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(CⅣ);制备肝干粉,分光光度计检测羟脯氨酸(Hyp)。结果模型组大鼠血清ALT、AST、HA、CⅣ和肝组织中Hyp明显高于正常组(P<0.05或0.01);与模型组比较,芍药苷3个剂量组可明显降低肝纤维化大鼠血清中ALT、AST;芍药苷408,0 mg/kg剂量组可明显降低肝纤维化大鼠血清中HA含量及根据肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量计算的胶原蛋白量(P<0.05和0.01)。结论芍药苷对慢性肝损伤及纤维化有保护作用。     

解毒护肝饮药物血清对异烟肼致HepG2坏死和凋亡的干预

目的 观察解毒护肝饮药物血清对异烟肼致人肝癌细胞株(human hepatocellular carcinoma cell lines,HepG2)病变的干预,并分析其机制。方法 制备解毒护肝饮和甘草酸二铵的药物血清,建立异烟肼致HepG2细胞损伤模型,以解毒护肝饮和甘草酸二铵药物血清加入HepG2培养液,观察对HepG2坏死和凋亡的干预,以及对HepG2 Fas/FasL表达的影响,以评价解毒护肝饮的疗效机制。结果 解毒护肝饮药物血清对异烟肼致HepG2损伤有明显抑制作用,可以减少HepG2细胞凋亡和坏死,并减少其Fas/FasL表达,效果优于甘草酸二铵胶囊组。结论 以清热利湿解毒兼养阴化瘀为治法的解毒护肝饮有确切的减少异烟肼致HepG2坏死和凋亡的作用,其抗细胞凋亡作用与减少HepG2的Fas/FasL的表达有关。     

益脾养肝方对大鼠肝癌癌前病变miR-221表达的影响

目的:探讨益脾养肝方对二乙基亚硝胺诱导大鼠肝癌癌前病变的疗效和对肝细胞中miR-221表达的影响。方法:取180只大鼠随机分为空白组、模型组、护肝片组及益脾养肝方低、中、高剂量组,每组30只。除空白组外,其余各组大鼠构建肝癌癌前病变模型,建模成功后,护肝片组行1 g/ml剂量灌胃治疗,益脾养肝方低、中、高剂量组分别行不同剂量(0.3、0.6、1.2 g/ml)灌胃治疗,空白组和模型组灌胃同等体积生理盐水。采用苏木精-伊红(HE)染色法观察各组肝组织形态变化,免疫荧光染色法检测肝细胞凋亡情况,qRT-PCR法检测肝组织miR-221表达水平。结果:与空白组大鼠比较,其余建模各组大鼠毛色晦暗,动作反应迟缓,益脾养肝方高剂量组和护肝片组上述症状有所改善,模型组和益脾养肝方低剂量组大鼠各死亡1只。HE染色结果显示,与空白组比较,其余建模各组肝组织结构均受到破坏,异型性增生细胞紧密排列,肝细胞胞质水肿。六组肝细胞凋亡阳性细胞数比较,差异具有统计学意义(P<0.05); 与护肝片组比较,益脾养肝方低、中剂量组均升高(P<0.05); 益脾养肝方各剂量组之间比较,益脾养肝方高剂量组均低于低、中剂量组(P<0.05),且益脾养肝方中剂量组低于低剂量组(P<0.05)。六组肝组织miR-221相对表达量比较,差异具有统计学意义(P<0.05); 与护肝片组比较,益脾养肝方低、中、高剂量组均升高(P<0.05); 益脾养肝方各剂量组之间比较,益脾养肝方高剂量组均低于低、中剂量组(P<0.05),且益脾养肝方中剂量组低于低剂量组(P<0.05)。结论:益脾养肝方能够改善肝脏功能,延缓肝癌癌前病变进展,其治疗机制可能与抑制miR-221表达作用有关。     

护肝调脂方对非酒精性脂肪性肝炎血清及肝组织瘦素、脂联素影响的实验研究

目的：研究护肝调脂方对非酒精性脂肪性肝炎（NASH）血清及肝组织瘦素、脂联素的影响。方法：102只雄性 Wistar 大鼠随机分为正常对照组（n ＝20）、模型组（n ＝22）、护肝调脂方高剂量组（n ＝20）、护肝调脂方中剂量组（n ＝20）、护肝调脂方低剂量组（n ＝20）,正常对照组给予基础饲料,其余4组采用改良高脂饮食建立 NASH 大鼠模型,同时给予中药护肝调脂方干预。观察大鼠的一般情况,测量大鼠的体质量、肝重,测定血清 ALT、AST、TC、TG 的水平,测定血清及肝组织瘦素和脂联素的水平。结果：与正常对照组相比,模型组大鼠血清和肝组织瘦素含量显著升高,脂联素含量显著降低（P ＜0．01）;而护肝调脂方治疗各组血清和肝组织瘦素含量显著降低,脂联素含量显著升高（P ＜0．01）,其中中剂量组与低剂量组比较有统计学差异（P ＜0．05）,高剂量组与中剂量组比较无统计学差异（P ＞0．05）。结论：瘦素和脂联素在大鼠 NASH 中发挥着重要作用,护肝调脂方对大鼠 NASH 具有明显的治疗作用,其作用机制可能与调节血清及肝组织中瘦素和脂联素的水平有关。     

保肝汤对小鼠四氯化碳致慢性化学性肝损伤的保护作用

[目的] 研究保肝汤对四氯化碳（CCl₄）致慢性化学性肝损伤的保护作用。[方法] 将84只昆明小鼠随机分为正常组、模型组、护肝片组、保肝汤高、中、低剂量组共6组,每组14只。除正常组外,其余各组分别在实验第1、3、10、16、22、25、28天腹腔注射0.5% CCl₄;于造模后第10天开始灌胃,其中正常组和模型组给予蒸馏水灌胃,护肝片及保肝汤高、中、低剂量组给予灌胃药液。第30天灌胃2 h后称质量、处死,并收集各组肝组织及血清标本,检测指标含量,计算肝脏指数并进行肝组织病理学检查。[结果] 与正常组比较,模型组丙氨酶转氨酶（ALT）、天门冬氨酶氨基转移酶（AST）、丙二醛（MDA）明显升高（P<0.05）。模型组肝组织病理学,可见多处大片肝细胞脂肪变性,并见多处灶状坏死;与模型组比较,保肝汤高、中、低剂量组ALT、AST降低,AST/ALT升高（P<0.05）,保肝汤中、低剂量组MDA降低（P<0.05）;保肝汤各剂量组明显改善肝组织及形态结构。[结论] 保肝汤能够减轻CCl₄对肝细胞的损伤程度,以保肝汤中剂量组作用最优;作用机制与抑制肝损伤后脂质过氧化反应有关。     

黄连解毒汤对脑梗死合并胃损伤大鼠干细胞因子/酪氨酸激酶受体信号通路的影响

目的:探讨黄连解毒汤对脑梗死合并胃损伤大鼠干细胞因子/酪氨酸激酶受体(SCF/C-kit)信号通路的影响。方法:将80只健康10周龄雄性Wistar大鼠随机分为模型组、黄连解毒汤组、奥美拉唑组、假手术组、正常组,以上各组再分设4 d组、7 d组,共10组。采用线栓法建立大脑中动脉梗死模型。黄连解毒汤组给予黄连解毒汤(27 mg/ml)混悬液,奥美拉唑组给予奥美拉唑(15 mg/ml)悬浊液,其余组给予1 ml 0.9%氯化钠溶液灌胃,4 d组连续灌胃4 d,7 d组连续灌胃7 d。采用HE染色法观察大鼠胃组织病理形态学变化,并进行病理损伤评分; 采用实时荧光定量检测大鼠胃组织SCF、C-kit mRNA表达水平; 采用Western blot检测大鼠胃组织中SCF、C-kit蛋白表达水平。结果:与正常组、假手术组比较,模型组、黄连解毒汤组、奥美拉唑组大鼠胃黏膜病理评分均明显升高(4、7 d组均P<0.01),胃组织SCF、C-kit mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.01); 正常组、假手术组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组比较,黄连解毒汤组、奥美拉唑组大鼠胃黏膜病理评分均显著降低(4、7 d组均P<0.01),胃组织SCF、C-kit mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P<0.01)。与奥美拉唑组比较,黄连解毒汤组大鼠胃黏膜病理评分均明显降低(P<0.05),胃组织SCF、C-kit mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P<0.05)。结论:黄连解毒汤对脑梗死合并胃损伤大鼠的胃黏膜具有一定的保护作用,其机制可能与黄连解毒汤升高大鼠胃组织SCF、C-kit mRNA及蛋白的表达水平有关。     

解毒化瘀汤灌洗治疗大鼠慢性骨髓炎的疗效观察

目的：观察解毒化瘀汤灌洗治疗大鼠慢性骨髓炎的疗效。方法：建立慢性骨髓炎动物模型,随机分成３组,中药组、抗菌溶液组及生理盐水组,闭式灌洗治疗１月,按设计分期观察白细胞计数、血清溶菌酶含量、骨Ｘ线、病理组织学等指标。结果：中药组与生理盐水组之间有非常显著性差异（Ｐ〈０．０１）;在血清溶菌酶、骨Ｘ线指标方面,中药组明显优于抗菌溶液组（Ｐ〈０．０５）。结论：解毒化瘀汤有效抑制慢性骨髓炎的发展过程,可能与其     

温阳解毒化瘀颗粒对肝衰竭IETM大鼠TLR4 mRNA,TNF-α及肝细胞凋亡的影响

目的:研究Toll样受体4(TLR4) mRNA及其下游炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与肝衰竭肠源性内毒素血症(IETM)大鼠肝细胞凋亡的关系,并探索温阳解毒化瘀颗粒对内毒素介导的肝细胞凋亡的调控机制。方法:SPF级雄性SD大鼠85只,随机分为正常组,模型组,TLR4单克隆抗体组和温阳解毒化瘀颗粒组(8.925 g·kg^-1)。采用D-半乳糖胺(D-Gal)腹腔注射建立肝衰竭IETM模型,TLR4单克隆抗体组和温阳解毒化瘀颗粒组在造模前5 d给予温阳解毒化瘀颗粒溶液灌胃,正常组、模型组以等容积蒸馏水代替,直至处死。各组分别在24,48,72 h随机处死大鼠并采集标本。检测24,48,72 h各组时间点血清丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理变化,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肝组织TLR4 mRNA表达,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测肝组织TNF-α表达,流式细胞仪检测肝细胞凋亡率。结果:与正常组比较,模型组ALT,AST升高,肝组织病理损伤程度明显加重,TLR4mRNA,TNF-α表达均增高(P<0.05,P<0.01),肝细胞凋亡率明显上升(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,温阳解毒化瘀颗粒组ALT,AST显著降低(P<0.01),肝组织病理损伤程度明显减轻(P<0.05),TLR4 mRNA,TNF-α表达显著下降(P<0.01),肝细胞凋亡率亦显著降低(P<0.01)。结论:TLR4 mRNA,TNF-α在肝衰竭时与肝细胞凋亡呈正相关,温阳解毒化瘀颗粒能够改善肝衰竭IETM大鼠肝功能,减轻肝细胞损伤,减少肝细胞凋亡,其机制可能与其下调肝脏TLR4 mRNA表达,抑制TNF-α释放,降低肝细胞凋亡率有关。     

芒果叶醇提取物对小鼠急性酒精性肝损伤的影响

目的: 研究芒果叶醇提取物(MLE)对小鼠急性酒精肝损伤的影响。 方法: 18~22 g 昆明种小鼠,雌雄各半,随机分为正常组、模型组、阳性药(护肝片1.5 g·kg^-1)组,MLE高、中、低(15.0,5.0,2.5 g·kg^-1)剂量组,每组10只。小鼠1次性灌胃50%乙醇(12 mL·kg^-1)建立急性酒精性肝损伤模型,测定血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、门冬氨酸转氨酶(AST)活性及甘油三酯(TG) 含量,检测肝组织中总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽(GSH)与丙二醛(MDA),并进行肝组织病理切片检查。 结果: 与模型组比较,MLE高、中、低剂量组血清TG与肝组织MDA含量及肝损伤病理积分均明显降低(P<0.05);MLE高、中剂量组小鼠血清ALT与AST活性明显降低(P<0.05),肝组织GSH水平明显升高(P<0.05);MLE高剂量组肝组织T-SOD活性明显升高(P<0.05)。 结论: MLE对小鼠急性酒精肝损伤具有保护作用,可能与其抗脂质过氧化作用相关。     

护肝片对四氯化碳致大鼠慢性肝损伤肝阴虚证的保护作用

目的:研究护肝片对四氯化碳(CCl4)致大鼠慢性肝损伤肝阴虚证的保护作用。方法:将42只Wistar大鼠分为5组:溶剂对照组(n=10)、模型组(n=8)、一贯煎组(相当于生药6.75 g·kg~(-1),n=8)、护肝片高、低剂量组(0.81,0.27 g·kg~(-1),n=8),除溶剂对照组外,其余各组均皮下注射40%CCl4花生油溶液,每次3 m L·kg~(-1),每周2次,连续5周,第6周改为每周注射1次,第5,6周同时灌胃给予温热中药(相当于生药18 g·kg~(-1)),每日1次,造模共6周,建立慢性肝损伤肝阴虚证的大鼠模型。第6周后开始给予相应的药物灌胃治疗,每日1次,连续2周至第8周末。末次给药后处死动物,采集大鼠血清和肝组织标本,检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、醛固酮(ALD)、白蛋白(ALB);肝组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA);肝组织羟脯氨酸(Hyp);HE染色法对肝组织病理学形态检查;Western blot方法检测肝组织中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(NADPH oxidase,NOX)NOX2的蛋白表达。结果:与溶剂对照组比较,模型组大鼠血清ALT,ALD和肝组织Hyp,MDA显著升高(P0.01),血清ALB和肝组织SOD显著降低(P0.01)。与模型组比较,护肝片高、低剂量组均能显著降低大鼠血清ALT水平和肝组织MDA,Hyp的含量(P0.01,P0.05);护肝片高剂量组显著降低血清ALD水平(P0.05),升高血清中ALB含量(P0.05)和肝组织中SOD活性(P0.05),降低肝组织中NOX2的蛋白表达(P0.05)。病理结果显示护肝片高、低剂量组明显减轻慢性肝损伤且一定程度降低纤维化水平。结论:护肝片能保肝降酶,对慢性肝损伤有明显的保护作用。     

黄连解毒汤对营养性肥胖大鼠的毒性研究

目的探讨各剂量黄连解毒汤不同给药时长对营养性肥胖大鼠的毒性。方法雄性SD大鼠100只,按体质量随机分为正常对照组、模型对照组、黄连解毒汤高、中、低剂量组,每组20只,每3日测量一次体质量及摄食量。除正常组外,每组均采用三重喂养法复制大鼠模型。给药22天与42天后各处理10只动物,计算脂肪指数,检测血清Alb、TP、TBIL、GGT、ALT、ALP、Cre和CYP450含量。结果黄连解毒汤能有效降低营养性肥胖大鼠的体质量及脂肪指数,升高血清ALT、GGT、TBIL,降低血清Alb、TP及CYP450,以上结果具有统计学意义(P0.05或P0.01)并与摄食量减少无明显相关性。结论黄连解毒汤可能对营养性肥胖大鼠产生肝、肾毒性并抑制代谢活性,临床应用时建议综合考虑其对机体的影响。