麦粒灸对Lewis荷瘤小鼠Th1/Th2型细胞因子的影响

目的:探讨麦粒灸对Lewis荷瘤小鼠血清Th 1型细胞因子白介素2(IL-2)/血清Th 2型细胞因子IL-10的影响,为麦粒灸在今后肿瘤治疗方案中的运用提供实验依据。方法:30只雄性C 57BL/6J小鼠随机分为麦粒灸组、荷瘤组、空白组,每组10只。采用Lewis肿瘤细胞悬液皮下接种复制Lewis荷瘤小鼠模型。麦粒灸组予麦粒灸治疗"后三里",治疗10次后,观察各组小鼠一般状况,采用MTT法检测刀豆蛋白刺激的小鼠脾淋巴细胞增殖能力,以双抗体夹心ELISA法测定血清IL-2、IL-10的表达水平。结果:麦粒灸组荷瘤小鼠与荷瘤组小鼠瘤体体积与体质量差异无统计学意义(P0.05);与空白组比较,荷瘤组血清Th 1型细胞因子IL-2表达降低(P0.05),血清Th 2型细胞因子IL-10增加(P0.05);与荷瘤组比较,麦粒灸组荷瘤小鼠T淋巴细胞增殖能力增加(P0.05),血清Th 1型细胞因子IL-2表达增加(P0.05),血清Th 2型细胞因子IL-10表达降低(P0.05)。结论:麦粒灸可有效调节荷瘤小鼠的免疫功能,促进荷瘤小鼠Th 1型细胞因子的产生,有效纠正荷瘤导致Th 1/Th 2的失衡,增强机体的抗肿瘤免疫功能。     

麦粒灸对Lewis肺癌小鼠炎性微环境中白介素-6及信号转导蛋白和转录激活因子3的影响

目的:观察麦粒灸对Lewis肺癌小鼠炎性微环境中血清白介素-6(IL-6)及瘤体信号转导蛋白和转录激活因子3(STAT 3)的影响,探讨麦粒灸对Lewis肺癌的作用机制。方法:将C 57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组和治疗组,每组10只。皮下注射Lewis肺癌细胞悬液建立Lewis肺癌小鼠模型。成瘤后治疗组予以麦粒灸治疗,取双侧"后三里"穴,每穴5壮,1次/d,共10d。观察各组小鼠的体质量、生存状态积分、瘤体体积和生存率,采用ELISA法检测血清IL-6的表达水平,采用Western blot法检测瘤体中STAT 3的表达水平。结果:与空白组比较,模型组小鼠体质量明显升高(P0.05)。模型组和治疗组小鼠瘤体体积逐渐增大,治疗8、10d时治疗组小鼠瘤体体积明显小于模型组(P0.05)。模型组小鼠生存状态恶化、生存率降低,治疗6、8、10d时治疗组小鼠生存状态积分明显高于模型组(P0.05)。与空白组比较,模型组小鼠血清IL-6和瘤体中STAT 3表达水平均明显升高(P0.001);与模型组比较,治疗组小鼠血清IL-6和瘤体中STAT 3表达水平均明显下降(P0.001)。结论:麦粒灸可提高Lewis肺癌小鼠生存状态,降低死亡率,控制瘤体生长速度,其机制可能与调节肿瘤炎性微环境、抑制信号因子IL-6及STAT 3持续活化有关。     

健脾解毒中药对Lewis肺癌小鼠脾脏CD4~+CD25~+Treg细胞免疫调节的影响

目的:研究健脾解毒中药方对Lewis肺癌小鼠脾脏淋巴细胞增殖及CD4+CD25+Treg细胞的影响,探讨健脾解毒中药治疗肺癌的机理。方法:将18只C57BL/6纯系小鼠右腋皮下接种Lewis肺癌细胞0.2ml,随机分为中药组和模型组,并设6只正常鼠对照观察。造模后第5天开始给药,中药组灌服健脾解毒方0.4ml/只,模型组予生理盐水。第14天处死小鼠,CCK-8法检测脾淋巴细胞增殖,流式细胞术检测小鼠脾脏CD4+CD25+Treg细胞含量。结果:荷瘤中药组和荷瘤模型组与正常组比较,脾淋巴细胞增殖功能均有降低,三组差别有统计学意义(P<0.05);荷瘤中药组和荷瘤模型组脾细胞中CD4+CD25+Treg细胞占CD4+T细胞的比例明显高于正常组,三组差别有统计学意义(P<0.05)。结论:实验证实,Lewis肺癌荷瘤环境下,脾细胞的CD4+CD25+Treg细胞的数量增多,脾淋巴细胞增殖低下。健脾解毒中药可增强荷瘤鼠细胞免疫功能。     

麦粒灸对荷瘤小鼠肿瘤组织中Bax和Bcl-2表达的影响

目的：观察麦粒灸对荷瘤小鼠肿瘤组织中B细胞淋巴相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)表达水平的影响,从肿瘤细胞凋亡角度探讨麦粒灸治疗肿瘤的作用机制。方法：将40只C57BL/6小鼠皮下接种Hepa1-6肿瘤细胞,建立荷瘤小鼠模型,随机分为对照组、麦粒灸组、环磷酰胺(CTX)组、麦粒灸+CTX组,每组10只。对照组给予腹腔注射生理盐水0.2ml/d,1次/d,连续3d;CTX组、麦粒灸＋CTX组按荷瘤小鼠体质量给予腹腔注射CTX 30mg/kg,1次/d,连续3d;麦粒灸组、麦粒灸＋CTX组给予麦粒灸“足三里”(双侧)、“三阴交”(双侧)、“大椎”,每穴5壮,1次/d,连续10d。每日观察并记录小鼠干预前后的一般情况;检测瘤体质量及抑瘤率;HE染色法观察肿瘤形态变化;实时荧光定量PCR法和Western blot法检测肿瘤组织中Bax、Bcl-2 mRNA及蛋白表达水平。结果：经治疗后,麦粒灸组、CTX组、麦粒灸＋CTX组抑瘤率分别为23.9%、45.9%、67.1%。与对照组比较,麦粒灸组、CTX组、麦粒灸+CTX组肿瘤组织Bax mRNA及蛋白表达水平均升高(P＜0.01,P＜0.05)、Bcl-2 mRNA及蛋白表达水平均降低(P＜0.01,P＜0.05),麦粒灸组肿瘤坏死区明显增多;与CTX组比较,麦粒灸＋CTX组肿瘤组织Bax mRNA及蛋白表达水平显著升高(均为P＜0.05)、Bcl-2 mRNA及蛋白表达水平显著降低(均为P＜0.05),肿瘤细胞核分裂明显减少。结论：麦粒灸能够明显减轻Heap1-6荷瘤小鼠的瘤体质量,对肿瘤的生长有抑制作用;与CTX合用,抑瘤作用更有效,其机制可能与调节Bax、Bcl-2的表达水平有关。     

麦粒灸后三里穴对环磷酰胺化疗肿瘤小鼠免疫功能的影响

目的：观察麦粒灸后三里穴对环磷酰胺（CTX）化疗肿瘤小鼠免疫相关指标的影响。方法：40只小鼠随机选取30只制备荷瘤小鼠模型,并给予化疗药物CTX进行干预,其余10只小鼠作为正常对照组。将制备好的模型小鼠随机分为荷瘤对照组和麦粒灸治疗组,麦粒灸治疗组给予麦粒灸治疗,其他处理同荷瘤对照组。治疗结束后,观察各组小鼠的胸腺指数、脾指数、CD4/CD8比值、CD4＋CD25＋Foxp3＋比例、肿瘤的体积以及生存天数等指标。结果：经过CTX化疗的肿瘤小鼠免疫功能出现降低。与荷瘤对照组比较,麦粒灸治疗组小鼠胸腺指数、脾指数、CD4/CD8比值、CD4＋CD25＋Foxp3＋比例等指标均有一定程度的改善,生存天数亦明显提高。结论：麦粒灸后三里穴对化疗后肿瘤小鼠的免疫功能具有一定的调节作用,主要表现在对T细胞亚群的改善方面。     

苏木、苏木+黄芪对荷瘤小鼠CD4~+ CD25~+调节性T细胞及相关调控分子的干预作用

目的:观察苏木、苏木+黄芪对荷瘤小鼠脾CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)表达及相关调控分子的干预作用。方法:复制C57BL/6小鼠Lewis肺癌动物模型,动态观察苏木、苏木+黄芪抑瘤率、肺转移抑制率,流式细胞术检测小鼠脾CD4+CD25+Treg表达,免疫磁珠分选小鼠脾CD4+CD25+细胞,RT-PCR检测小鼠脾CD4+CD25+细胞和瘤组织Foxp3、CTLA-4mRNA表达。结果:苏木组6d、苏木+黄芪组10d瘤重低于荷瘤对照组(P0.05);苏木+黄芪组20d肺转移抑制率为77.75%;15d苏木+黄芪组小鼠脾CD4+CD25+细胞表达低于荷瘤对照组(P0.05);苏木+黄芪组荷瘤小鼠瘤组织CTLA-4、Foxp3mRNA表达及脾CD4+CD25+分选后细胞Foxp3 mRNA表达低于荷瘤对照组(P0.05)。结论:益气活血中药组方苏木+黄芪可调节荷瘤小鼠脾Treg及相关调控分子表达,并且在淋巴组织和肿瘤微环境中都表现出作用。     

悬灸与直接灸治疗类风湿关节炎小鼠的对比研究

目的:比较悬灸与直接灸对类风湿关节炎小鼠治疗作用的异同。方法:DBA/1J小鼠36只随机分为正常组、模型组、不治疗组、悬灸组、直接灸组和安慰治疗组。复制Ⅱ型胶原诱导的小鼠类风湿关节炎模型并予以艾灸治疗,观察悬灸与直接灸对关节肿胀、关节滑膜病理表现的影响,流式细胞术分析Th17、Treg细胞变化,ELISA检测相关细胞因子IL-1β/IL-6/IL-10/IL-17/TGF-β的含量。结果:经两次免疫后,小鼠足踝关节及脚掌、足趾关节出现红肿,CIA模型成功建立。治疗15天后,悬灸组小鼠关节肿胀有明显消退,关节评分低于模型组、不治疗组、直接灸组、安慰治疗组(P 0. 05)。病理表现上,悬灸组小鼠病变关节面粗糙较前缓解,滑膜层较治疗前变厚,与正常组病理表现较为接近;直接灸组关节面有一定恢复,但较悬灸组差;不治疗组及安慰治疗组无明显变化。ELISA检测发现CIA模型小鼠脾脏中IL-1β、IL-6、IL-17等致炎细胞因子表达增高、抑炎因子IL-10、TGF-β表达降低(均P 0. 01);悬灸和直接灸治疗后致炎因子含量与模型组比较相应降低、抑炎因子含量明显提高(均P 0. 01),且两组之间无统计学差异(均P 0. 05)。流式细胞术显示:与正常小鼠相比,CIA模型小鼠调节性T细胞下降,而Th17细胞则上升(均P 0. 01);治疗后悬灸组Treg细胞的数量显著上升、Th17细胞的数量显著下降(均P 0. 01);而直接灸组、不治疗组、安慰治疗组Treg细胞、Th17数量与模型组比较无显著统计学差异(P 0. 05)。结论:悬灸、直接灸均能减轻CIA小鼠关节滑膜病变、下调炎症因子和上调抗炎细胞因子含量;但与悬灸治疗比较,直接灸治疗对CIA小鼠关节肿胀度和脾Treg/Th17细胞失衡状态无显著作用。直接灸治疗CIA小鼠的疗效及作用机理还需进一步研究。     

枸杞多糖对H22荷瘤小鼠脾脏有核细胞CD11c+、CD80+表达的影响

目的观察枸杞多糖(LBP)对H22荷瘤小鼠脾脏有核细胞CD11c 、CD80 表达的影响。方法建立H22荷瘤小鼠模型,用LBP连续灌胃治疗两周后,小鼠脱颈处死,分离各组小鼠脾脏有核细胞,流式细胞仪检测CD11c 、CD80 的表达情况。结果肿瘤模型组及荷瘤LBP用药组,CD11c 、CD80 及双阳性细胞比例均较正常对照组升高,其中CD80 及双阳性细胞比例升高,差异具有显著性;双阳性细胞比例升高在荷瘤LBP高剂量组与肿瘤模型组间亦具有显著性差异。正常用药组与正常对照组比较,CD80 表达升高,差异具有显著性。结论LBP可以增强H22荷瘤小鼠脾脏中以DC细胞为主的抗原递呈细胞的功能,提示其抗肿瘤免疫作用机制可能与此有关。     

针灸对CTX化疗荷瘤小鼠脾脏指数影响的研究

目的:观察针灸对CTX化疗荷瘤小鼠脾脏指数的影响,揭示针灸改善荷瘤小鼠化疗所致免疫功能损伤的机制之一。方法:成功植瘤后,按照荷瘤小鼠体重及白细胞数随机分为荷瘤模型组、荷瘤针刺组、荷瘤艾灸组,1次性腹腔注射150 mg/kg CTX溶液,制备CTX荷瘤小鼠模型;荷瘤空白组腹腔注射同等剂量的生理盐水。模型成功后,分别对荷瘤针刺组、荷瘤艾灸组进行针刺、艾灸治疗,荷瘤空白组、荷瘤模型组每日陪同抓取固定,不治疗。治疗3 d、5 d后的第2天取出脾脏,称重。结果:治疗3 d、5 d后,除荷瘤空白组外,其余各组荷瘤小鼠脾脏指数均降低,有显著性差异(P<0.05),与荷瘤模型组比,荷瘤针刺组、荷瘤艾灸组脾脏指数较高,有显著性差异(P<0.05)。结论:CTX化疗导致小鼠免疫功能损伤,脾脏指数降低,针刺和艾灸可以提高CTX化疗荷瘤小鼠的脾脏指数,对小鼠脾脏起到修复和保护作用,进而改善因CTX化疗后引起的免疫功能损伤。     

麦粒灸对小鼠运动疲劳后心肌细胞凋亡的影响

目的:通过观察艾灸对小鼠运动疲劳后心肌细胞凋亡相关因子的影响及组蛋白乙酰化酶p300(histone acetyltransferases p300,p300)、CREB结合蛋白(CREB biding protein,CBP)与细胞凋亡的关系,探讨p300、CBP在艾灸抗心肌细胞凋亡中的作用。方法:清洁级雄性昆明种小鼠60只随机分为对照组、运动组、麦粒灸组,每组20只。各组相同环境饲养,对照组不运动,不施灸;运动组及麦粒灸组进行无负重游泳训练,训练时间由每天30 min逐步延长至90 min,持续21d。麦粒灸组于每天游泳后1h取"足三里""关元"进行麦粒灸治疗,每穴灸5壮,每日1次,共21d。末次游泳结束24h后,取各组小鼠心脏采用免疫组化法检测心肌细胞凋亡因子Fas(factor associated suicide,Fas)、B淋巴细胞瘤-2基因(B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl-2)及p300、CBP的表达。结果:与对照组比较,运动组小鼠心肌细胞凋亡率显著升高(P<0.01),视野内可见密集分布的凋亡小体,且着色较深,心肌细胞中Fas蛋白的表达显著增加(P<0.01),Bcl-2、p300蛋白、CBP表达减弱(均P<0.01);麦粒灸组可见均匀分布的凋亡小体,但着色较浅。与运动组比较,麦粒灸组小鼠心肌细胞凋亡率下降(P<0.05),小鼠Fas蛋白表达降低(P<0.05),心肌细胞中Bcl-2、p300蛋白、CBP表达增强(均P<0.05)。结论:艾灸可以通过促进小鼠疲劳运动后心肌细胞中p300、CBP的表达,抑制细胞凋亡过程的启动,从而减少大运动量后的小鼠心肌细胞的凋亡,保护心脏功能。     

调气消积汤对Lewis肺癌小鼠免疫功能影响的实验研究

[目的]探讨调气消积汤对Lewis肺癌小鼠免疫功能的影响。[方法]C57BL/6小鼠常规接种Lewis肺癌,随机分为:荷瘤对照组(MG)、调气消积汤组(TG)、顺铂组(DG)、综合组(ZG);健康的小鼠组成空白对照组(CG),每组10只。观察各组对脾脏指数的影响,计数小鼠外周血T淋巴细胞转化率及脾T淋巴细胞的增殖情况,检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达。[结果]调气消积汤可使荷瘤小鼠的脾脏指数降低并趋向正常,与空白组比较无差异(P>0.05)。从小鼠T淋巴细胞转化率及增殖活性来看,调气消积汤组比荷瘤对照组明显升高,差异显著(P<0.01)。调气消积汤组移植瘤TNF-α蛋白的表达,与荷瘤对照组比较无明显差异(P>0.05)。[结论]调气消积汤对Lewis肺癌小鼠的免疫器官(脾)有一定的保护作用;可以通过提高荷瘤小鼠外周血T淋巴细胞转化率、脾T淋巴细胞增殖活性,来增强荷瘤小鼠的免疫功能;对肿瘤组织中TNF-α蛋白的表达无明显促进和抑制作用。     

麦粒灸对肿瘤患者生活质量及其外周血中IL-10表达的影响

目的通过对临床肿瘤Ⅲ~Ⅳ期患者QLQ-C30生活量表与对照组比较来观察施用麦粒灸治疗后两组不同中医证型患者生活质量的不同及其IL-10表达的差异,以此来探寻在肿瘤Ⅲ~Ⅳ期治疗中麦粒灸的治疗是否能改善患者的生活质量,调节肿瘤相关免疫,提高带瘤生存率。方法将42例肿瘤患者随机分为治疗组和对照组,并进行中医辨证分型,治疗组在常规中西医结合治疗的基础上加用2星期麦粒灸治疗,对两组患者治疗前及治疗后分别进行QLQ-C30生活量表评分,并留取外周血标本进行IL-10检测。结果麦粒灸治疗能改善患者生活质量,尤其以乏力及纳差改善明显;麦粒灸治疗后IL-10的表达较治疗前有所下降。结论麦粒灸能改善肿瘤患者生存质量,下调IL-10的表达。     

泽漆汤对小鼠Lewis肺癌抑制作用及survivin蛋白表达的影响

目的:观察泽漆汤对Lewis肺癌荷瘤小鼠瘤体的抑制作用及其对survivin蛋白表达的影响,探讨其作用机理。方法:C57BL/6小鼠在右前腋皮下接种Lewis肺癌细胞造模,观察低、中、剂量泽漆汤对荷瘤小鼠抑瘤率、胸腺指数和肿瘤细胞增殖周期的影响,并通过免疫组化染色观察泽漆汤对Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤组织sur-vivin蛋白的表达。结果:低、中、高剂量泽漆汤对Lewis肺癌荷瘤小鼠的瘤重抑制率分别为24.55%、28.74%和35.93%;与模型组比较,泽漆汤能抑制肿瘤细胞的增殖周期,下调Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤组织凋亡抑制蛋白survivin的表达水平(P0.01)。结论:泽漆汤在体内具有明显的抗肿瘤作用,这一作用可能与其能下调肿瘤细胞的凋亡抑制蛋白survivin的表达相关。     

魔芋葡甘露聚糖对荷Lewis肺癌小鼠脾细胞TGF-βmRNA、IL-10 mRNA表达的影响

目的:观察中药蛇六谷主要化学成分—魔芋葡甘露聚糖(Konjac glucomannan, KGM)对荷Lewis肺癌小鼠脾细胞转化生长因子-β(Transforming grwoth factor-β,TGF-β)mRNA、白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10) mRNA表达的影响。方法:建立Lewis肺癌小鼠动物模型,随机分成5组:KGM高、中、低剂量组、生理盐水对照组及环磷酰胺(CTX)组,每组10只。建模第2天起,KGM高、中、低剂量组按300、200、100 mg/(kg·d)连续灌胃KGM 13 d,生理盐水组以等剂量灌胃13 d,环磷酰胺组按30 mg/kg每周2次腹腔注射给药,共4次。第14天处死小鼠,取出脾脏,以实时定量PCR法,检测小鼠脾细胞TGF-βmRNA、IL-10 mRNA的表达。结果:与对照组比较,KGM3组荷瘤小鼠脾脏细胞中TGF-βmRNA、IL-10 mRNA表达量明显降低,差异均有统计学意义(P0.01),且高剂量KGM组与CTX组比较,无统计学差异(P0.05)。结论:中药蛇六谷主要化学成分—魔芋葡甘露聚糖可以下调荷Lewis肺癌小鼠脾细胞TGF-βmRNA、IL-10mRNA的表达而产生抗肿瘤作用。     

针灸对荷瘤小鼠免疫抑制效应的影响

目的:观察电针及艾灸疗法对肿瘤免疫抑制的影响.方法:将48只雄性Balb/c小鼠随机分为电针组、艾灸组、荷瘤组和正常组,每组12只.成功建立肿瘤模型后,电针组及艾灸组分别予以电针、艾灸大椎治疗.治疗6次后,观察各组小鼠生存率、抑瘤率、脾脏指数、胸腺指数.采用AlamarBlue法检测ConA刺激的小鼠脾淋巴细胞增殖能力,以RT-PCR法检测脾淋巴细胞Foxp3 mRNA、Stat5a mRNA、Stat5bmRNA以及胸腺Foxp3 mRNA表达.结果:艾灸组荷瘤小鼠生存率高于荷瘤组,但差异无统计学意义;电针组与艾灸组荷瘤小鼠脾脏指数较荷瘤组升高(P＜0.05);电针组与艾灸组荷瘤小鼠胸腺指数较荷瘤组胸腺指数升高,但差异无统计学意义.电针组、艾灸组、荷瘤组小鼠脾淋巴细胞增殖还原值均高于正常组(P＜0.05);艾灸组还原值显著高于荷瘤组(P＜0.05);荷瘤组小鼠脾淋巴细胞Foxp3 mRNA、Stat5a mRNA、Stat5b mRNA表达较正常组明显增高(P＜0.05);艾灸组、电针组小鼠脾淋巴细胞Foxp3 mRNA、Stat5amRNA、Stat5b mRNA较荷瘤组表达降低(P＜0.05);荷瘤组小鼠胸腺Foxp3 mRNA表达较正常组增高(P＜0.05);艾灸组小鼠胸腺Foxp3mRNA表达较荷瘤组降低(P＜0.05);电针组小鼠胸腺Foxp3 mRNA表达较荷瘤组降低,但差异无统计学意义.结论:电针和艾灸干预均能提高荷瘤小鼠脾脏指数、增强小鼠脾淋巴细胞增殖能力;针灸调节肿瘤免疫抑制效应可能与下调荷瘤小鼠脾淋巴细胞Foxp3mRNA、Stat5amRNA、Stat5bmRNA表达及胸腺Foxp3 mRNA表达有关.     

三叶青黄酮干预荷癌小鼠Treg细胞生成及其CD152表达的研究

目的:研究三叶青黄酮对荷Lewis肺癌模型小鼠脾脏Treg细胞生成及其CD152表达的影响。方法:将小鼠随机分为非造模组、生理盐水组、塞来昔布组、三叶青黄酮高、中、低剂量组,除非造模组外,其它各组皮下接种法建立Lewis肺癌小鼠模型,接种24 h后开始灌胃给药,每天1次,非造模组不灌胃。分别于给药14、23天后,处死半数动物,取脾脏,分离单个核细胞,流式细胞术测定脾脏单个核细胞中Treg细胞比例及CD152表达。结果:第23天时,与生理盐水组比较,塞来昔布组、三叶青黄酮高、中剂量组小鼠的瘤体明显减小,差异均有统计学意义(P0.01)。三叶青黄酮各剂量组间瘤体比较存在差异(P0.05),瘤体大小依次为:三叶青黄酮高剂量组三叶青黄酮中剂量组三叶青黄酮低剂量组;塞来昔布组抑瘤效果与中剂量组相近(P0.05)。与非造模组比较,其它各组小鼠Treg细胞比例和CD152的表达均明显升高,差异均有统计学意义(P0.01)。第23天时,与生理盐水组比较,各给药组小鼠Treg细胞比例和CD152的表达均明显降低,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。三叶青黄酮各剂量组间Treg细胞比例比较存在差异(P0.01),Treg细胞比例依次为:三叶青黄酮高剂量组三叶青黄酮中剂量组三叶青黄酮低剂量组;塞来昔布组Treg比例与中剂量组相近(P0.05)。塞来昔布组下调CD152表达效果最佳,与三叶青黄酮中、低剂量组比较有显著差异(P0.05),三叶青黄酮各剂量组间无明显差异(P0.05)。结论:三叶青黄酮的抑瘤效果可能与下调Treg细胞比例和CD152表达有关,逆转免疫抑制,从而起到抗肿瘤的作用     

针灸及其血清对荷瘤小鼠CD4~+CD25~+Treg细胞体外增殖的影响

目的:观察针灸治疗对H_(22)荷瘤小鼠CD4~+CD25~+Treg细胞(CD4~+CD25~+regulatory T cells)体外增殖的影响和针灸血清刺激下的CD4~+CD25~+Treg细胞的体外增殖变化,探讨针灸及其血清对荷瘤小鼠免疫调节细胞的干预作用。方法:48只小鼠随机分为电针治疗组、艾灸治疗组、肿瘤对照组、正常对照组。采用H_(22)肿瘤细胞移植性实体瘤模型,电针和艾灸"大椎"治疗后,磁珠分离CD4~+CD25~+Treg细胞,氚标记胸腺嘧啶核苷掺入法观察不同组小鼠CD4~+CD25~+Treg细胞体外增殖能力和针灸血清对CD4~+CD25~+ Treg细胞体外增殖的影响。结果:肿瘤对照组CD4~+CD25~+Treg细胞增殖水平比正常对照组明显增高(P<0.05);电针治疗组和艾灸治疗组CD4~+CD25~+Treg细胞增殖水平与肿瘤对照组比较均明显降低(P<0.01)。电针治疗组和艾灸治疗组1:1、1:8稀释度血清刺激正常小鼠CD4~+CD25~+Treg细胞体外增殖,较正常对照、肿瘤对照组血清显著增高(P<0.05),各组1:16、1:32稀释度血清对Treg细胞作用的差别无统计学意义(P>0.05)。结论:针灸治疗能下调荷瘤小鼠CD4~+CD25~+Treg细胞体外增殖能力。不同浓度针灸血清体外刺激CD4~+CD25~+Treg细胞增殖表现出不一致的效应。     

益气温阳法联合顺铂对荷瘤小鼠调节性T细胞的影响

目的:研究益气温阳法联合顺铂对Lewis肺癌小鼠调节性T(T Regulatory,Treg)细胞的影响。方法:建立40只近交系C57BL/6纯系雄性小鼠Lewis肺癌细胞皮下移植瘤模型后,将40只造模后的小鼠随机分为模型组、中药组、顺铂组及联合用药组,每组10只,单笼饲养。模型组以0.4 mL生理盐水连续灌胃12 d;中药组以0.4 mL中药液连续灌胃12 d(20 g生药/kg);顺铂组以0.2 mL顺铂溶液腹腔注射,分别在第1天、第3天、第5天腹腔注射顺铂溶液(4 mg顺铂/kg);联合用药组以0.4 mL中药液连续灌胃12 d(20 g生药/kg),在第1天、第3天、第5天腹腔注射顺铂溶液0.2 mL(4 mg顺铂/kg)。给予药物干预12 d后,用流式细胞术检测各组小鼠脾脏组织Treg细胞的比例。结果:流式细胞术结果表明,益气温阳法治疗可显著降低Lewis肺癌小鼠脾脏组织Treg细胞,与模型组比较,中药组、顺铂组和联合用药组小鼠脾脏组织内CD4+CD25+Treg细胞比例与CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例均显著降低(P<0.05)。结论:益气温阳法通过降低Treg细胞的水平增强机体的抗肿瘤免疫应答而发挥抑瘤作用。     

肺积方联合化疗对Lewis肺癌移植小鼠免疫逃逸相关细胞因子及CD_4~+ CD_(25)~+ Treg细胞的影响

目的:通过观察肺积方联合化疗对Lewis肺癌移植小鼠肿瘤生长情况及脾脏CD4+ CD25+ Treg细胞、IL-2、IL-4、IL-10、TNF-β、IFN-r变化的影响,探讨肺积方联合化疗抗肺癌免疫逃逸的作用机制,为肺积方的临床应用提供客观依据。方法:采用随机对照研究方法,将64只Lewis肺癌移植小鼠经随机分为对照组、化疗组、肺积组、综合组(肺积方联合化疗),并分别以肺积方、肺积方联合DDP、DDP药物干预,观察小鼠瘤体变化,并以ELISA法检测小鼠外周血细胞因子IL-2、IL-4、IL-10、TNF-β、IFN-r变化,以流式细胞术检测小鼠脾脏CD4+ CD25+ Treg细胞含量。结果:化疗组、肺积组、综合组瘤体、瘤重均小于对照组(P0.05),肺积组瘤体、瘤重大于化疗组(P0.05),综合组瘤体、瘤重均小于化疗组和肺积组(P0.01);综合组IL-2、IL-4水平明显高于其他3组(P0.05),综合组IL-10、IFN-r、TNF-β水平低于其他3组(P0.05),肺积组IL-2、IL-4、TNF-β水平与化疗组比较无差异(P0.05),肺积组IL-10、IFN-r水平高于化疗组(P0.05);对照组、化疗组、肺积组、综合组第7天脾脏CD4+ CD25+ Treg细胞占CD4+T细胞比值无差异(P0.05);第14天对照组脾脏CD4+ CD25+ Treg细胞占CD4+T细胞比值仍明显高于其他3组(P0.05);综合组第14天脾脏CD4+ CD25+ Treg细胞占CD4+T细胞比值明显低于化疗组及肺积组(P0.01);化疗组脾脏CD4+ CD25+ Treg细胞占CD4+T细胞比值低于肺积组(P0.05)。结论:肺积方联合化疗具有抗Lewis肺癌移植小鼠肿瘤生长的作用,此种作用与其下调CD4+ CD25+ Treg细胞含量,上调IL-2、IL-4,下调IL-10、TNF-β相关。     

天灸抗小鼠移植性肿瘤作用及对免疫功能的影响

目的：观察天灸疗法对抗小鼠移植性肿瘤作用并从免疫学角度探讨其作用机制。方法：昆明种健康小鼠30只随机分为正常对照组,肿瘤对照组、天灸组。将S180瘤株接种于肿瘤对照组和天灸组小鼠右腋部皮下,观察各组动物的胸腺指数,脾脏指数,淋转及NK细胞活性。结果：天灸能明显抑制S180实体瘤的生长,抑瘤率达38.52%,荷瘤小鼠脾脏重量增加,胸腺重量减小;天灸能进一步增加荷瘤小鼠脾脏和胸腺重量,荷瘤小鼠脾T淋巴细胞对ConA的增殖反应能力,NK细胞的杀伤活性均大大降低。而天灸能明显提高T淋巴细胞的应答能力和NK细胞的杀伤活性。结论：调节机体的免疫功能是天灸抗肿瘤作用的机制之一。