抗体介导的阿霉素白蛋白免疫毫微粒的抗人肝癌作用研究

本研究将人肝癌特异性抗体ＨＡｂ18同载阿霉素 (ＡＤＲ)人血清白蛋白毫微粒 (ＡＤＲ ＨＳＡ ＮＰ)交联构建了阿霉素白蛋白免疫毫微粒 (ＨＡｂ18 ＡＤＲ ＨＳＡ ＮＰ) ,本文报道了该免疫毫微粒对培养细胞的特异性结合 ,杀伤作用及在裸鼠体内的分布 ,抗人肝癌作用。一、材料和方法1.主要材料 :ＡＤＲ ＨＳＡ ＮＰ ,本室自制 ;ＨＡｂ18单抗 ,第四军医大学陈志南教授提供 ;ＨＡｂ18 ＡＤＲ ＨＳＡ ＮＰ ,采用异型双功能交联剂ＳＰＤＰ将ＨＡｂ18抗体同ＡＤＲ ＨＳＡ ＮＰ交联制备[1] ;人肝癌细胞株ＳＭＭＣ 772 1为本室保种传代 ;ＢＡＬＢ/Ｃ裸…     

由丙型肝炎病毒引起但在病毒清除后持续存在的Ⅱ型自身免疫性肝炎

丙型肝炎病毒(ＨＣＶ)可能与抗肝、肾微粒体Ⅰ型抗体(抗ＬＫＭ1)有关。这些抗体为Ⅱ型自身免疫性肝炎的标志,能识别细胞色素Ｐ450ⅡＤ6,但ＨＣＶ是否与Ⅱ型自身免疫性肝炎有关还不清楚。同时,迄今为止,尚未见ＨＣＶ感染后引发自身免疫性肝病的报告。本文报告1例29岁护士,在1989年12月护理1例ＨＣＶ感染病人时,不慎被针刺伤,当时,其血清转氨酶和γ球蛋白水平均正常,ＨＣＶ抗体、抗核抗体(ＡＮＡ)、抗平滑肌抗体(ＡＳＭＡ)和抗ＬＫＭ1抗体以及ＨＣＶＲＮＡ(ＲＴＰＣＲ)均阴性。1990年3月,ＨＣＶ抗体及血清ＨＣＶＲＮＡ转为阳性,谷草转氨酶(Ａ…     

丙型肝炎患者外周B淋巴细胞系及HCV的形态学研究

研究ＨＣＶ对人Ｂ淋巴细胞的感染 ,建立ＨＣＶ感染的丙型肝炎患者Ｂ淋巴细胞模型 (ＣＢＣＬ) ,并进行ＨＣＶ的形态学研究 ,观察ＨＣＶ在其中的复制及ＨＣＶ形态学及超微结构。用ＥＢ病毒转化Ｂ细胞建立Ｂ细胞系 ,以逆转录聚合酶链反应 (ＲＴ ＰＣＲ)、免疫组织化学、原位杂交方法检测Ｂ细胞系上清液及细胞内的ＨＣＶ抗原及ＨＣＶＲＮＡ ,并通过电镜对ＨＣＶ进行形态学研究。用ＥＢ病毒转化丙型肝炎患者Ｂ淋巴细胞传代培养 ,使其成为永生细胞系。用抗ＨＣＶ ＮＳ3、ＮＳ5、ＣＯＲＥ单克隆抗体检测ＣＢＣＬ中ＨＣＶ抗原 ,发现阳性颗粒主要见于…     

应用长片段PCR扩增全长HIV— 1DNA的研究

目的 探讨长征段ＰＣＲ（ＬＤ－ＰＣＲ）扩增特点,并将它用于对全长ＨＩＶ ＤＮＡ的研究。方法 应用ＬＴＤ（Ｕ５）／ＬＴＤ（Ｒ）,ＣＬ－ＮＳＣ／ＣＬ－ＮＥＦ和ｇａｇＡｌ／ｇａｇＡ２等不同引物,＾３２Ｐｇａｇ,ｐｏｌ,ｎｅｆ和ｔａｔ等为片段探针,对克隆有ＨＩＶ－１完整基因片段,部分基因片段的质粒和ＨＶＩ感染者外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）中的ＨＩＶ－１ ＤＮＡ进行扩增。结果 ＬＤ－ＰＣＲ对０．４－９ｋｂ的第     

慢性乙型肝炎患者血清及肝组织中乙型肝炎病毒核心基因的研究

３６例肝穿刺诊断为慢性乙型肝炎患者的肝组织及血清，用ＨＢＶ全基因核酸杂交法及聚合酶链反应（ＰＣＲ）法扩增了病毒的ＰｒｅＣ／Ｃ区基因片段。发现ＰＣＲ法扩增后再经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ吸印转移及核酸杂交（ＰＣＲ－ＳＢＨ）可显著提高检出ＨＢＶ基因的敏感性。对５例无任何血清ＨＢＶ标记者证实在其肝内存在ＨＢＶ基因。用ＡｖａⅡ，ｓａｕ３ＡＩ，ＸｍｎＩ，ＢｓｔＮＩ及ＴａｑＩ酶切图谱分析上述病例的ｃ基因，与ｐＡＤＲ－１Ｃ基因比较，有４例（５份标本）有Ｓａｕ３ＡＩ的异常酶切位点，提示ＨＢＶ不仅ＰｒｅＣ区存在变异株，Ｃ基因中亦可有变异。     

佛山地区存在经输血传播病毒(TTV)感染

我们应用Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ法检测了４５例甲到戊型标志物均阴性的肝炎患者和４４例献血员血清中的ＴＴＶＤＮＡ。资料与方法：４５例肝炎患者均为我院传染科或门诊病人,血清经ＥＬＩＳＡ法检测抗－ＨＡＶ,ＨＢｓＡｇ,ＨＢｃＡｂ,抗－ＨＣＶ,抗－ＨＥＶ均阴性,ＰＣＲ检测ＨＢＶＤＮＡ,ＨＣＶＲＮＡ均阴性。４４例某院献血员检测抗－ＨＡＶ,ＨＢｓＡｇ,ＨＢｃＡｇ,ＨＢｃＡｂ,抗－ＨＣＶ,抗－ＨＥＶ为阴性,肝功能正常。抽提标本血清ＤＮＡ进行Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ：以ＲＤ０３７和ＲＤ０３８为引物进行第一次ＰＣＲ,再以Ｒ…     

健康人、肝病患者和危险人群中肠外传播HGV病毒血症现病率

为确定庚型肝炎病毒(ＨＧＶ)的现病率和分布,作者对有或无血液病毒传播危险因素而血液有肝炎生化指征的病人进行检测。无危险因子的健康者用作对照,并对ＨＧＶ与ＨＣＶ的ＰＣＲ结果作了比较。在德国汉堡收集777份血清,用逆转录ＰＣＲ检测ＨＧＶ,其中154份病人血清谷丙转氨酶(ＡＬＴ)升高。肝炎病毒ＡＥ和ＨＩＶ试验阴性,366例具肠外病毒传播危险因素,包括:静注药瘾者(ＩＶＤＵ),接受输血或血制品病人,血透病人,感染ＨＩＶ或ＨＣＶ的病人。275名ＡＬＴ正常且无危险因子的健康者作为对照组。ＲＮＡ用硫氰酸酚氯仿法从血清中分离使用来自ＨＧ…     

医院用血液制品HCV污染情况的调查

目的调查医院治疗用血液制品ＨＣＶ污染情况．方法临床治疗所用的血液制品，在输完后留容器之残液备检．采用酶标免疫法（ＥＬＩＳＡ）检测．对ＥＬＩＳＡ检测之阳性标本及在阴性标本中随机抽取９份，采用逆转录双ＰＣＲ方法检测ＨＣＶ＿ＲＮＡ．结果血浆白蛋白抗＿ＨＣＶ阳性率４５８％，新鲜血浆阳性率２６％．两种方法检测同一标本，ＥＬＩＳＡ检测阳性的血液制品中，用ＰＣＲ证实，并非都有病毒复制；而在ＥＬＩＳＡ检测的阴性标本中，仍旧有较高的ＰＣＲ阳性检出．结论血液制品存在着ＨＣＶ污染，抗＿ＨＣＶ对于ＨＣＶ感染的诊断价值很高．检测血液制品中的抗＿ＨＣＶ，合理使用血液成份，可防止ＨＣＶ在医院内传播．     

PCR-SSCP银染技术筛检HBV基因突变实验方法的建立

为了对乙肝患者ＨＢＶ基因突变进行大样本大面积筛检,我们建立了良好简便快速的ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染色筛检ＨＢＶ基因突变的实验方法,结果显示本法具有很高的特异性和较高的敏感性,ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染技术筛检出的ＨＢＶ基因突变的阳性标本经直接测序证实全部存在ＨＢＶ基因突变,并证实该方法能特异性的检出１８９８位或１９０１位发生了Ｇ→Ａ出现了ＴＡＧ终止密码的突变,具有一定的推广应用价值。     

病毒性肝炎血清HBV DNA和HCV RNA同时检测的探索

本文对ＨＢＶ ＤＮＡ和ＨＣＶ ＲＮＡ用ＰＣＲ方法一次性同时检测技术进行了探索，经过９２例患者血清的检测的结果显示，与同份血清单一ＰＣＲ方法所检测的ＨＢＶ和ＨＣＶ感染阳性总鹰率为９８．１６％，说明此种多重套式ＰＣＲ方法对临床诊断ＨＢＶ和ＨＣＶ感染具有实用价值。     

山东地区输血后丙型肝炎患者HGV感染状况及HGV部分核酸序列测定

了解山东地区输血后丙型肝炎 (ＰＴＨ Ｃ)患者庚型肝炎病毒 (ＨＧＶ)感染的状况及ＨＧＶ部分基因核苷酸序列。应用ＲＴ ＰＣＲ法检测ＨＧＶＲＮＡ ,并对阳性扩增的产物采用ＰＣＲ技术片段直接克隆法测定。结果表明 ,从86例ＰＴＨ Ｃ患者血清中检出ＨＧＶＲＮＡ阳性者 31例 ( 36.0 % ) ,其中 1例患者ＨＧＶＮＳ5区部分核苷酸序列与美国原始株 (ｕ4 4 40 2 )和另 1例日本株 (ｄ872 55)核苷酸同源性比较分别为 86.0 %和 84 .0 %。山东地区ＰＴＨ Ｃ患者存在着ＨＧＶ感染和ＨＧＶ/ＨＣＶ混合感染 ,是否该地区存在着不同亚型或ＨＧＶＲＮＡ阳性携…     

丙型肝炎患者中各型肝炎病毒混合感染状况研究

１资料与方法：用ＲＴ－ＰＣＲ和ＥＩＡ（ＥＬＩＳＡ）方法对昆明地区８２例丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染的肝炎患者血清中ＨＣＶＲＮＡ和抗一ＨＣＶ,并对甲型肝炎病毒（ＨＡＶ）,乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）,丁型肝炎病毒（ＨＤＶ）,戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）和庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）的感染标志物进行了检测分析研究。２．结果：其它５型肝炎病毒均可同ＨＣＶ混合感染,并且同一患者可混合感染３种或４种其它型肝炎病毒。在这８２例患者中,２６．８％为单一ＨＣＶ感染,３２．９％为ＨＣＶ同ＨＡＶ混合感染,４５．ｌ０为ＨＣＶ同ＨＢＶ混合…     

重叠HAV感染患者HBV前C／C区基因变异

用聚合酶链反应与酶切技术相结合，对１０例重叠甲型肝炎病毒感染的慢性乙型肝炎病毒感染者进行前Ｃ区Ａ１８９６终止变异和Ｃ区Ｌ９７变异的动态检测。结果；重叠感染组第一次ＰＣＲ检测ＨＢＶＤＮＡ和Ａ１８９６，Ｌ９７变异检出率分别为１０％，１７％和１０％，明显低于单独ＨＢＶ感染组的６５％，６８％和５４％，结果提示，重叠ＨＡＶ感染可对ＨＢＶ产生抑制作用，肝损害主要与ＨＡＶ感染有关。     

凝因因子V多态性,活性与冠心病关系的研究

探讨凝血因子Ｖ（ＦＶ）与冠心病（ＣＨＤ）发病的关系。方法在１４１例ＣＨＤ和１４５例健康人作对照组,运用多聚酶链反应－变性梯度凝胶电泳技术（ＰＣＲ－ＤＧＧＥ）筛查ＦＶ基因全部外显子,随机对其中５５例ＣＨＤ和５５例健康人对照进行ＦＶ活性和ＡＦＰＣ抵抗（ＡＰＣＲ）的测定,并统计分析。     

肾综合征出血热合并高渗性非酮症性糖尿病昏迷32例

我院于 1989年 7月～ 1999年 7月共收治肾综合征出血热 (ＨＦＲＳ) 1184例 ,并发高渗性非酮症糖尿病昏迷(ＮＨＤＣ) 32例 ,现就其临床特征 ,发病的有关因素和转归报道如下。临床资料一、一般资料ＨＦＲＳ并发ＮＨＤＣ 32例患者中男 17例 ,女 15例。年龄 46～ 70岁 ,平均 5 8.5岁。全部病例均按卫生部 1987年颁发的ＨＦＲＳ防治方案的标准诊断和分型 ,并经抗汉坦病毒 (ＨＶ) ＩｇＭ或双份血清抗 ＨＶ ＩｇＧ检测确诊。ＮＨＤＣ诊断标准 :高血糖 (>33.3ｍｍｏｌ/Ｌ) ,高血浆渗透压 (>35 0ｍＯｓｍ/Ｌ) ,有或无高血钠 (>15 0ｍｍｏｌ/Ｌ)而缺…     

艾滋病感染人群中HIV抗性基因的分析及其意义

研究ＨＩＶ 1相关等位基因ＣＣＲ5、ＣＣＲ2ｂ和ＳＤＦ1在性病、艾滋病感染人群中的分布 ,为分析这些宿主遗传因素在ＨＩＶ 1感染、艾滋病发病进程中的作用提供理论依据。收集我国某地区近年来性病 ( 2 15例 )、艾滋病感染者 ( 2 17例 )的血液标本共 4 32份 ,提取基因组ＤＮＡ。经ＰＣＲ或ＰＣＲ ＲＦＬＰ分析 ,计算突变基因频率。采用 χ2 检验或ｔ检验进行群体分布的拟合度和差异的显著性分析。结果表明 ,ＣＣＲ2ｂ 64Ｉ和ＳＤＦ1 3′Ａ的突变频率较高。 2 15例性病患者和 2 17例艾滋病感染者ＣＣＲ2ｂ 64Ｉ的突变频率分别为 18.60 %和 19…     

NIDDM致病候选基因的分子流行病学研究进展

综述了ＮＩＤＤＭ致病候选基因的分子流行病学研究近况。其中，己糖激酶Ⅱ（ＨＫⅡ）基因，激素原转化酶３（ＰＣ３）基因被认为不大可能是ＮＩＤＤＭ的主要致病基因；线粒体ｔＲＮＡ（ｍｔＲＮＡ）基因突变与ＮＩＤＤＭ的一个亚型有关；ｒａｄ基因与ＮＩＤＤＭ有关，但有争议；β细胞ＡＴＰ敏感钾通道（ＡＴＰ－Ｋ＋）基因的ＢＩＲ和ＳＵＲ亚单位与日本人ＮＩＤＤＭ遗传易患性无关，ＳＵＲ基因缺陷可能是北欧白人ＮＩＤＤＭ发病的主要遗传基础；胰高血糖素受体（ＧＣ）基因突变与法国人ＮＩＤＤＭ有关     

人巨细胞病毒感染与脑血栓形成关系的研究

采用高敏感性ＥＬＳＡ法和ＰＣＲ技术分别检测５８例脑血栓病人的血清特异性ＨＣＭＶ－ＩｇＡ、ＩｇＭ及悄ＨＣＭＶ－ＤＮＡ。结果显示，脑血栓病人活动性ＨＣＭＶ感染率（ＩｇＭ／ＩｇＡ）和尿ＨＣＭＶ ＤＮＡ阳性率分别为２４．１４％和８．６２％，而对照组为２．７８％和０，两组有显著性差异（Ｐ〈０．０１）提示ＨＣＭＶ活动性感染与脑血栓形成有关。     

丙型肝炎病毒及乙型肝炎病毒联合基因免疫实验研究

为ＨＣＶ/ＨＢＶ重叠或混合感染的防治寻求新的高效联合基因免疫策略 ,分别将与ＨＣＶ核心区基因互补的ｃＤＮＡ和ＨＢＶ核心区基因克隆于具有两套独立表达单元的真核表达载体 ｐＲＳＣ的巨细胞病毒启动子和ＲＳＶ启动子下游 ,称为ｐＲＳＣ ＨＢＶ/ＨＣＶ ,转染ＳＰ2 / 0细胞 ,通过免疫荧光和Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法观测蛋白的表达 ,免疫ＢＡＬＢ/ｃ小鼠 ;用酶联免疫法、ＭＴＴ法及荷瘤试验观察小鼠体液免疫应答及细胞免疫应答。结果表明 ,ｐＲＳＣ ＨＢＶ/ＨＣＶ转染ＳＰ2 / 0细胞可见ＨＢｃＡｇ及ＨＣＶ核蛋白染色阳性荧光细胞 ,相对分子质…     

丙型肝炎病毒体外感染成年树鼩肝细胞的初步研究

探索原代培养树肝细胞对ＨＣＶ的易感性 ,旨在建立较为稳定实用的细胞感染模型。感染血清与细胞共同孵育后 ,并在不同时相点收集标本 ,用逆转录聚合酶链反应 (ＲＴ ＰＣＲ)、免疫组织化学、原位杂交分别检测细胞内或上清液中正负链ＲＮＡ ,细胞内ＨＣＶＮＳ3、ＮＳ5、ＣＰ10 3种抗原的表达情况 ,以及原位检测ＨＣＶ负链ＲＮＡ。结果表明 :( 1)接种感染血清后第 3～ 5ｄ ,即可在细胞内或培养上清液中间断检出ＨＣＶＲＮＡ ;( 2 )ＨＣＶＮＳ3、ＮＳ5、ＣＰ10可在感染细胞内表达 ,阳性物质位于胞浆中 ;( 3)原位杂交法证实细胞内存在负链ＲＮ…