15-脂氧合酶-1在胃癌中的表达及其临床意义

目的检测15-脂氧合酶-1（15-LOX-1）mRNA及蛋白在胃癌及癌旁正常组织中的表达，并探讨15-LOX-1表达与胃癌临床病理因素的关系。方法采用RT-PCR、westernblot和免疫组织化学方法检测胃癌组织及相匹配的癌旁正常组织中15-LOX-1 mRNA和蛋白的表达。结果15-LOX-1 mRNA及蛋白在胃癌组织中的表达均显著低于癌旁正常组织（P＜0．05）。15-LOX-1蛋白表达水平与胃癌中肿瘤大小、淋巴结转移和TNM分期呈明显的负相关（P＜0．05）。结论15-LOX-1蛋白可能对胃癌的发生发展有一定抑制作用。检测胃癌中15-LOX-1的表达情况对评估患者的预后可能具有意义。     

胃癌组织中5-脂氧合酶的表达及其与磷酸化Akt相的关性

目的: 检测5-脂氧合酶(5-lipoxygenase,5-LOX)在胃癌组织中的表达,并探讨5-LOX对磷酸化Akt(phosphorylatedAkt,p-Akt)表达的影响.方法: 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测30例新鲜胃癌及癌旁正常组织标本中5-LOX mRNA表达水平;免疫印迹法(Westernblot)检测5-LOX和p-Akt蛋白的表达水平.结果: 5-LOX在胃癌组织中的表达显著高于癌旁正常组织(76.7% vs 40%,P＜0.05,mRNA水平;56.7%vs30%,P＜0.05,蛋白水平).p-Akt蛋白在胃癌组织中的表达也显著高于癌旁正常组织(56.7%vs26.7%,P＜0.05).相关性分析表明,胃癌组织中5-LOX蛋白表达和p-Akt水平间无明显相关性(r=0.186,P＞0.05).结论: 5-LOX蛋白对胃癌的发生、发展有一定促进作用,但与PI3-K/Akt信号通路无关.     

胃癌组织中5-脂氧合酶的表达及其与磷酸化Akt相的关性

目的:检测5-脂氧合酶(5-lipoxygenase,5-LOX)在胃癌组织中的表达,并探讨5-LOX对磷酸化Akt(phosphorylatedAkt,p-Akt)表达的影响.方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测30例新鲜胃癌及癌旁正常组织标本中5-LOXmRNA表达水平;免疫印迹法(Westernblot)检测5-LOX和p-Akt蛋白的表达水平.结果:5-LOX在胃癌组织中的表达显著高于癌旁正常组织(76.7%vs40%,P<0.05,mRNA水平;56.7%vs30%,P<0.05,蛋白水平).p-Akt蛋白在胃癌组织中的表达也显著高于癌旁正常组织(56.7%vs26.7%,P<0.05).相关性分析表明,胃癌组织中5-LOX蛋白表达和p-Akt水平间无明显相关性(r=0.186,P>0.05).结论:5-LOX蛋白对胃癌的发生、发展有一定促进作用,但与PI3-K/Akt信号通路无关.     

蛋白激酶B在胃癌中的表达及其生物学意义

目的研究丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶（Akt）在胃癌中的表达、活化情况及其与血管内皮生长因子C（VEGF—C）的关系，以初探Akt表达和活化的生物学意义及其可能的机制。方法采用RT—PCR法检测20例新鲜胃癌及癌旁正常组织标本中Akt1、Akt2和Akt3 mRNA的表达；Western印迹法检测Akt和磷酸化Akt（pAkt）蛋白的表达；免疫组化检测pAkt蛋白和VEGF-C在55例胃癌配对组织中的原位表达。结果20例胃癌及相应癌旁正常组织中Akt1、2、3mRNA的表达阳性率皆为100％，且三者在癌和正常组织中的表达水平差异无统计学意义（P〉0．05）。Western印迹显示Akt蛋白在胃癌组织中的表达水平为正常组织的2．7倍（P〈0．001），而pAkt蛋白的表达水平为癌旁正常组织的4．1倍（P％0．01）。免疫组化分析表明，pAkt表达于67．3％（37／55）的胃癌组织，且较高表达于组织分化较差（X^2=9．751，P％0．01）和TNM分期较晚（X^2=7．684，P〈0．05）者；VEGF—C在胃癌组织中的表达阳性率为61．8％（34／55），其表达与肿瘤的TNM分期（X^2=9．298，P〈0．01）及淋巴结转移（X^2=7．605，P〈0．05）密切相关，统计分析表明，pAkt与VEGF—C的表达呈显著性正相关（Pearson r=0．524，P〈0．05，Spearman，rho=0．747，P〈0．01）。结论Akt及pAkt蛋白特异性过表达于胃癌组织，可能是蛋白翻译水平和（或）代谢水平改变的结果。Akt蛋白的磷酸化可能促进胃癌细胞的恶性转化和淋巴结转移，VEGFC可能在其中发挥重要的介导作用。     

VEGF-C及其受体FLT-4 mRNA的表达在胃癌淋巴转移中的作用

目的研究血管内皮生长因子C（vascular endothelial growth factor C,VEGF-C）及其受体VEGFR-3（FLT-4）mRNA在胃癌、癌旁组织及正常组织中的表达。方法采用RT-PCR技术对34例胃癌的癌组织和癌旁组织及16例正常胃组织中VEGF-C及FLT-4 mRNA的表达进行检测。结果VEGF-C及FLT-4在胃癌和癌旁组织中都有表达;VEGF-C及FLT-4在胃癌、癌旁组织和正常胃组织中的表达有明显差异（PVEGF-C〈0.05,PFLT-4〈0.05）;VEGF-C及FLT-4在胃癌组织中的表达有明显相关性（r=0.6729,P〈0.05）;有淋巴结转移的胃癌与癌旁组织中VEGF-C的表达有明显差异（r=0.5189,P〈0.05）;VEGF-C在中、低分化和高分化胃癌组织中的表达有明显差异（P〈0.05）;BorrmannⅠ、Ⅱ型分别与Ⅲ、Ⅳ型胃癌组织中VEGF-C的表达有明显差异（P〈0.05）,而Ⅰ、Ⅱ型之间的差异无统计学意义（P〉0.05）,Ⅲ、Ⅳ型之间的差异无统计学意义（P〉0.05）。结论VEGF-C及其受体FLT-4在胃癌的生长中起作用;VEGF-C及其受体FLT-4 mRNA的高表达可促进胃癌淋巴管的形成和淋巴结的转移。     

15-羟基前列腺素脱氢酶与胃癌发生关系的研究

NAD依赖性15-羟基前列腺素脱氢酶（15-PGDH）是前列腺素和相关廿烷类生物降解、灭活的关键酶，其表达缺失或减低可能与一些恶性肿瘤的发生、发展密切相关。目的：探讨15-PGDH在胃癌组织和癌旁组织中的表达及其与临床病理特征的关系，初步评价15-PGDH在胃癌发生、发展中的作用及其意义。方法：随机收集30例胃癌患者的癌组织、癌旁3cm和6cm的对照组织，以及10例胃息肉、萎缩性胃炎和健康志愿者正常胃黏膜组织标本，以免疫组化和Western blot法检测15-PGDH蛋白表达，半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测其mRNA表达，并分析其临床病理特征。结果：癌组织中15-PGDH蛋白和mRNA表达显著低于癌旁3cm、癌旁6cm对照组织和正常胃黏膜（P均〈0.01），约1／3癌组织中15-PGDH表达缺失，胃息肉和萎缩性胃炎组织显著低于正常胃黏膜（P均〈0．01）；癌组织中15-PGDH蛋白表达量较癌旁3cm和6cm对照组织分别平均降低5．7倍和8．3倍，胃息肉和萎缩性胃炎组织较正常胃组织分别平均降低2．0倍和2．1倍；黏液腺癌中15-PGDH蛋白量显著低于高分化腺癌（只〈0．05），印戒细胞癌中15-PGDH蛋白和mRNA的表达均缺失：伴有远处转移组15-PGDH蛋白和mRNA表达显著低于无远处转移组（P〈0．05和P〈0．01）；Ⅳ期胃癌组织15-PGDH蛋白表达量显著低于Ⅰ期（P〈0．01），其mRNA表达在Ⅲ、Ⅳ期胃癌组织中显著低于Ⅰ、Ⅱ期胃癌（P均〈0．01）。结论：15-PGDH在胃癌组织中表达减少甚至缺失，在癌旁组织和胃癌前状态中表达减少；15-PGDH表达缺失或减少可能是胃癌发生、发展．以及胃癌浸润转移的重要机制之一。     

15-脂氧合酶-1 mRNA、Podoplanin在食管鳞癌中的表达及临床意义

目的 探讨15-脂氧合酶-1(15-LOX-1)和Podoplanin在食管鳞癌(ESCC)中的表达及其与肿瘤淋巴结转移的关系.方法 RT-PCR法测定45例ESCC患者癌组织和相邻癌旁正常组织中15-LOX-1 mRNA的表达,免疫组化法检测Podoplanin的表达,计数淋巴管密度(LVD).结果 15-LOX-1 mRNA在45例ESCC的表达率为28.9%(13/45),明显低于相应癌旁正常组织73.3%(33/45),P<0.05.Podoplanin特异表达于淋巴管内皮,多位于癌巢周围间质中.40例ESCC中,淋巴结转移组LVD均值高于无淋巴结转移组(P=0.019).15-LOX-1 mRNA和LVD均值与肿瘤分化程度、淋巴结转移有关.结论 15-LOX-1表达下调与食管鳞癌分化程度和病期进展有关.肿瘤内部存在的新生淋巴管可能参与了肿瘤淋巴道转移.Podoplanin是较特异的淋巴内皮标志物,通过检测Podoplanin的表达,评价淋巴管生成,可能成为预测患者淋巴结转移和病情进展的手段之一.     

5-LOX表达与胃癌淋巴结转移的关系及AA861对其表达的影响

目的探讨5-脂氧合酶（5-Lipoxygenase，5-LOX）在胃癌组织中的表达及其与肿瘤淋巴结转移的关系，以及5-LOX选择性抑制剂AA861对其表达的影响。方法采用RT-PCR方法检测30例胃癌标本及相匹配的癌旁组织中5-LOX mRNA的表达；用免疫组织化学方法检测了40例胃癌石蜡标本及30例癌旁组织石蜡标本中5-LOX蛋白的表达；免疫细胞技术和图象分析软件检测胃癌AGS细胞中5-LOX蛋白的表达水平及AA861对其表达的影响。结果胃癌组织中5-LOX蛋白和mRNA水平的表达均显著高于癌旁组织（P〈0．05）。伴淋巴结转移者5-LOX mRNA及蛋白表达高于无转移者（P〈0．05）。AA861干预组与对照组5-LOX蛋白表达无明显改变（P〉0．05）。结论5-LOX基因在胃癌中表达增高并与淋巴结转移明显相关，AA861对5-LOX蛋白表达无明显影响。     

基质金属蛋白酶-2和环氧合酶-2在胃癌中的表达及意义

目的探讨环氧合酶-2（COX-2）和基质金属蛋白酶-2（MMP-2）在胃癌组织中的表达以及相互关系。方法收集外科胃癌手术患者30例，标本分别取自胃癌组织、癌旁3cm和6cm组织，同时取10例胃镜检查正常者的胃黏膜组织作为对照，用免疫组化法检测组织中COX-2和MMP-2蛋白的表达情况。结果30例胃癌组织中，26例COX-2表达呈阳性，而10例正常组织则无表达，两者间差异有统计学意义（P〉0．01）。30例胃癌组织中MMP-2的表达阳性率为83．33％（25／30），癌旁3cm组织为66．7％（20／30），癌旁6cm组织为3．3％（9／30），10例正常组织中仅2例有表达，癌旁6cm组织与正常组织比较差异无统计学意义（P〉0．05），胃癌和癌旁3cm组织与正常组织比较差异有统计学意义（P〈0．05）。在胃癌患者的癌旁3cm组织中，MMP-2、COX-2蛋白表达之间存在显著正相关（P〈O．01）。结论胃癌组织中有COX-2、MMP-2的高表达，且两者之间的表达强度具有等级相关性。COX-2蛋白可能通过诱导MMP-2蛋白的表达上调，增加胃癌细胞的侵袭力，从而成为其促进胃癌浸润、转移的途径之一。     

DKK1在胃癌患者癌组织及血清中的表达及临床意义

目的探讨分泌型蛋白Dickkopf-1（DKK1）在胃癌诊断中的价值。方法采用半定量RT-PCR法检测25份胃癌及15份癌旁组织中DKK1 mRNA表达水平;采用Western blot法检测17份胃癌和15份癌旁组织DKK1蛋白表达水平;采用ELISA法检测34份胃癌患者及38份健康人血清中DKK1蛋白含量。结果与癌旁组织相比,有24%（6/25）的胃癌组织DKK1 mRNA表达上调,4%（1/25）的胃癌组织中DKK1 mRNA表达下降,P均〈0.05;72%的胃癌组织DKK1 mRNA表达与癌旁组织无显著差异;5.88%（1/17）的胃癌组织DKK1蛋白表达上调,11.76%（2/17）的胃癌组织中DKK1蛋白表达下降,P均〈0.05,82.36%胃癌组织DKK1蛋白表达与癌旁组织无显著差异;胃癌患者血清中DKK1蛋白含量明显低于健康人,P〈0.01;当确定DKK1蛋白含量阈值为3.539 0μg/L时,其诊断敏感性为61.8%,特异性为84.2%。结论胃癌患者血清DKK1蛋白含量明显低于健康人,其可能作为胃癌的血清学诊断指标,但有待大样本进一步验证。     

15-LOX-1基因表达对胃癌细胞增殖的抑制作用

目的研究15-LOX-1基因对人胃癌细胞增殖的影响。方法通过脂质体介导瞬时转染15-LOX-1基因于培养的胃癌细胞株（AGS）中，以转染空载体pcDNA3．1（＋）的细胞及未转染质粒的细胞作为对照；用RT—PCR和Westernblot检测人胃癌细胞的15-LOX-1mRNA及蛋白表达；倒置显微镜观察转染前后AGS形态变化；用MTT法比较转染前后AGS的增殖水平，流式细胞术检测转染后AGS细胞周期的变化。结果胃癌细胞系巾未检测到15-LOX—1mRNA和蛋白的表达，转染后的AGS表达有15-LOX—1的mRNA及蛋白。转染重组质粒绀细胞增殖显著低于未转染组及空质粒转染组（P〈0．05），转染后AGS细胞G0／G1期细胞明显增加，S期细胞明显减少，与未转染组及空质粒转染组相比均有显著性差异（P〈0．05）。结论15-LOX-1基因能抑制胃癌细胞的增殖，为进一步探讨胃痛的发病机制及治疗提供实验依据。     

巨噬细胞游走抑制因子通过PI3K／Akt信号通路调控人结肠癌细胞株HT-29增殖和血管生成因子表达

背景：巨噬细胞游走抑制因子（MIF）是-种多功能细胞因子,其在结直肠癌发生、发展中的作用机制尚不明确。目的：探讨MIF是否通过P13K／Akt信号通路调控人结肠癌细胞增殖和血管生成因子表达。方法：人结肠癌细胞株HT-29分为对照组（RPMI-1640）、重组人MIF（rhMIF）组、PI3K抑制剂LY294002组和LY294002预处理联合rhMIF组,并予相应干预。以甲基噻唑基四唑（MTT）法检测HT-29细胞增殖状态,分别以逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和酶联免疫吸附测定（ELISA）检测血管内皮生长因子（VEGF）、白细胞介素-8（IL-8）mRNA表达和蛋白分泌,蛋白质印迹法检测Akt和磷酸化Akt（p—Akt）蛋白表达。结果：rhMIF对HT-29细胞具有促增殖作用,能增加细胞VEGF、IL-8 mRNA表达和蛋白分泌,并促进Akt蛋白磷酸化（P＜0．05）;而先予LY294002预处理可显著抑制rhMIF的上述作用．HT-29细胞增殖显著受抑（P＜0．05）,VEGF、IL-8mRNA表达、蛋白分泌以及p-Akt蛋白水平与对照组相比无明显差异。各组总Akt蛋白水平均无明显差异。结论：MIF诱导人结肠癌细胞增殖和血管生成因子表达可能是通过活化PI3K／Akt信号通路实现的。     

15-PGDH在食管癌中的表达

目的研究NAD+依赖性15-羟基前列腺素脱氢酶(15-PGDH)在食管癌组织及癌旁6 cm处非肿瘤对照组织中的表达,探讨15-PGDH在食管癌中的表达情况及其与食管癌的关系。方法本实验采用免疫组化SP法检测食管癌组织和癌旁6 cm处非肿瘤对照组织中15-PGDH的表达情况。结果免疫组化结果提示:40例食管癌组织中有5例(12.5%)15-PGDH呈强阳性染色,8例(20.0%)15-PGDH呈弱阳性染色,27例(67.5%)15-PGDH表达缺失;40例癌旁6 cm处对照组织中,13例(32.5%)15-PGDH呈强阳性染色,25例(62.5%)15-PGDH呈弱阳性染色,2例(5.0%)15-PGDH染色阴性(P0.05)。15-PGDH在食管癌组织(32.5%)的阳性表达率显著低于癌旁6 cm处非肿瘤对照组织(95.0%)的阳性表达率,15-PGDH的表达差异有统计学意义(P0.05)。15-PGDH蛋白表达与食管癌患者的性别、年龄、分化程度无关(P0.05)。15-PGDH蛋白表达与食管癌患者有无淋巴结转移有关(P0.05)。结论 15-PGDH在食管癌组织中表达缺失或减少,15-PGDH可能是食管癌发生发展中的重要抑制因子。     

SIRT1在胃癌组织、细胞中的表达及意义

目的观察SIRTl在胃癌组织及胃癌细胞中的表达情况,探讨SIRTl同胃癌临床病理特征之间的关系。方法应用Real．timePCR方法检测SIRTlmRNA在21例新鲜胃癌及癌旁组织中的表达情况;应用Westernblot和Real．timePCR方法在蛋白和mRNA水平检测SIRT1在胃癌、胃黏膜上皮细胞中的表达;应用免疫组织化学染色法检测130例胃癌组织及癌旁正常组织中SIRT1蛋白的表达,分析SIRTl蛋白表达与胃癌临床病理特征的关系。结果SIRTImRNA在新鲜胃癌组织中较正常癌旁组织表达增高（P〈0．05）,SIRT1mRNA及蛋白在胃癌细胞中均比正常胃黏膜上皮细胞中表达增高（P均〈0．05）。免疫组化染色结果表明,SIRTl蛋白在胃癌组织中较正常癌旁组织表达增高（P〈0．05）。SIRT1蛋白表达水平同胃癌患者的年龄及肿瘤浸润深度、淋巴结转移、TNM分期、大小有关（P均〈0．05）,同生存时间呈负相关（r=-0．5023,P〈0．05）。结论SIRT1在胃癌组织和胃癌细胞中呈高表达,其在胃癌发生中充当癌基因的角色。     

LOX、VEGF在胃癌进展中的作用关系

目的探讨赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase,LOX)、血管内皮因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在胃癌进展中的作用关系。方法收集手术切除的新鲜胃癌组织65例,采用Western blotting方法检测胃癌组织中的LOX、VEGF蛋白表达,并比较二者在T1T2与T3T4胃癌组织、有无淋巴结转移胃癌组织中的关系。结果 (1)LOX在T3T4胃癌中的相对表达量为0.6003±0.1279,在T1T2胃癌中的相对表达量为0.4278±0.1437,差异有统计学意义(P0.05);(2)VEGF在T3T4胃癌中的相对表达量为0.6975±0.1639,在T1T2胃癌中的相对表达量为0.4263±0.1128,差异有统计学意义(P0.05);(3)LOX在伴有淋巴结转移的胃癌中的相对表达量为0.6827±0.1987,在无淋巴结转移的胃癌中的相对表达量为0.4235±0.1763,差异有统计学意义(P0.05);(4)VEGF在伴有淋巴结转移的胃癌中的相对表达量为0.6769±0.1659,在无淋巴结转移的胃癌中的相对表达量为0.4128±0.1471,差异有统计学意义(P0.05);(5)在T1T2和T3T4胃癌组织中,LOX与VEGF的表达水平呈正相关(r=0.735,P0.05),在有淋巴结转移和无淋巴结转移的胃癌组织中,LOX与VEGF的表达水平也呈正相关(r=0.914,P0.05)。结论 T3T4胃癌中LOX与VEGF的表达水平明显高于T1T2胃癌,在有淋巴结转移的胃癌组织中,LOX与VEGF的表达水平明显高于无淋巴结转移的胃癌组织中,且LOX与VEGF表达呈正相关;LOX与VEGF在胃癌的进展中有促进作用,并且相互协同。     

Paxillin、FAK和PTEN在胃腺癌组织中的表达及其临床意义

背景：研究表明Paxillin、黏着斑激酶（FAK）和PTEN在许多肿瘤的发生、发展、侵袭、转移中发挥重要作用,但联合检测三者在胃癌中表达的报道罕见。目的：研究正常胃黏膜和胃腺癌组织中Paxillin、FAK和PTEN的表达及其临床意义。方法：以免疫组化SP法分别检测40例正常胃黏膜组织和88例胃腺癌组织中Paxillin、FAK和PTEN表达,并分析其与胃腺癌临床病理特征的关系以及Paxillin与PTEN表达之间的相关性。结果：与正常胃黏膜组织相比,胃腺癌组织Paxillin（65．9％对32．5％,P〈0．05）、FAK（56．8％对17．5％,P〈0．05）阳性表达率显著增高,PTEN阳性表达率显著降低（47．7％对100％,P〈0．05）。Paxillin、FAK和PTEN表达与胃腺癌分化程度、浸润深度、淋巴结转移和TNM分期有关（P〈0．05）．与性别和年龄无关。胃腺癌组织中Paxillin表达与PTEN表达呈显著负相关（r=-0．369,P〈0．05）。结论：Paxillin、FAK高表达和PTEN低表达可能与胃腺癌的浸润、淋巴结转移等恶性生物学行为相关,联合检测三者可能有助于判断胃腺癌恶性程度和患者预后。     

缺氧诱导因子-1α在胃癌组织中的表达及其与胃癌侵袭性的关系

目的 研究缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）在胃癌组织中的表达及其与胃癌侵袭性的关系.方法 应用免疫组织化学S-P法检测102例胃癌患者病变组织及50例癌旁正常组织中HIF-1α的表达,并分析其与胃癌侵袭性的关系.结果 HIF-1α阳性表达与癌组织浸润深度、淋巴结转移与否有明显的相关性（P〈0.01）,但与胃癌病理类型及组织分化程度无关（P〉0.05）.结论 HIF-1α可作为反映胃癌恶性生物学行为的指标之一.     

胃腺癌血管活性肠肽受体mRNA表达的研究

目的研究血管活性肠肽受体mRNA在胃腺癌组织和AGS人胃腺癌细胞中的表达情况,探讨其在胃腺癌发病过程中的作用。方法采用RT-PCR方法,检测24例胃腺癌组织、24例正常胃腺组织及不同传代AGS人胃腺癌细胞中VIPR mRNA的表达。结果胃腺癌患者组VIPR1 mRNA表达率为45.00%(9/24),低于正常对照组的83.33%(20/24)(P0.05);VIPR2 mRNA表达率在胃腺癌患者组和正常对照组分别为50.00%(10/24)和66.67%(16/24),差异无统计学意义(P0.05)。与正常胃窦黏膜比较,VIPR1 mRNA的表达量下降(P0.05),但VIPR2 mRNA的表达量和正常胃窦黏膜差异无统计学意义(P0.05)。不同传代AGS人胃腺癌细胞中均有VIPR mRNA的表达,但传代细胞之间差异无统计学意义(P0.05)。结论VIPR mRNA的低表达可能与胃腺癌的发生发展有关,检测VIPR mRNA表达对胃腺癌的诊断具有一定的指导意义。