慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞表型及抗原提呈能力与HBV载量的关系

目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血树突状细胞(DCs)表型及抗原提呈能力与HBV载量的关系.方法采集23例CHB患者和8例健康人的抗凝外周静脉血,分离外周血单个核细胞(PBMCs),在重组人白细胞介素4和重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的作用下培养使DCs增殖、成熟,以间接免疫荧光流式细胞技术分别检测DCs表面CD80、CD86、HLA-DR及ICAM-1的表达;将培养成熟的DCs与HBsAg共同孵育,用丝裂霉素C处理后再与自体PBMCs共同培养,在培养结束前12 h加入^3H-TDR,收集细胞,以β液闪计数仪测定cpm值;同期用定量聚合酶链反应技术测定CHB患者外周血HBV载量.结果患者DCs表面CD86、HLA-DR和ICAM-1的表达水平及DCs的抗原提呈能力均显著低于健康对照组;CD80、CD86、HLA-DR及ICAM-1的表达与HBV载量呈显著负相关(分别为P＜0.01,P＜0.01,P＜0.001和P＜0.001);DCs的抗原提呈能力也与HBV载量呈显著负相关(为P＜0.001).结论CHB患者外周血DCs的成熟和功能存在障碍,DCs的抗原提呈能力与血液中HBV的载量密切相关,并可能对HBV的清除产生重要的影响.     

树突状细胞的抗原递呈及临床应用前景

树突状细胞(dendriticcells,DCs)因其成熟时伸出许多树突样或伪足样突起而得名。目前一致认为,具有典型树突状形状,膜表面高表达MHCⅡ类分子,能移行至淋巴器官和刺激初始型T细胞增殖活化,并具有一些相对特异性表面标志的一类细胞,方能称之为DCs。有髓系来源DCs与淋巴系干细胞来源DCs之分,大多数DCs来源于骨髓,DCs前体细胞由骨髓进入外周血,再分布到全身各组织。DCs是目前已知的功能最强的抗原递呈细胞,参与抗原的识别、加工处理和提呈,是机体免疫反应的始动者,在免疫应答的诱导中具有独特地位,其研究进展很快,成为当今国际上的研究…     

贝氏柯克斯体重组膜蛋白抗原激活树突状细胞诱导特异性免疫应答

目的分析贝氏柯克斯体(Coxiella burnetii,Cb)膜蛋白抗原对树突状细胞(dendritic cells,DCs)的激活作用,筛选能有效激活DCs的蛋白抗原,探讨该蛋白抗原间接激活T细胞的作用。方法从健康成年人外周血中分离单核细胞,加入GM-CSF和IL-4体外培养单核细胞成未成熟DCs;分别用Cb的5种重组膜蛋白IcmO、EnhA、SecB、Lo1A、HspB刺激DCs;用流式细胞仪(fluorescence activated cell sorter,FACS)检测刺激后DCs表面分子表达。结果 SecB刺激的DCs表达CD83,CD86,CD80,CD54,CD58,和CD40水平显著高于其它4种蛋白;将SecB激活DCs或SecB激活DCs培养上清刺激T淋巴细胞,FACS检测显示刺激后CD4+和CD8+细胞高水平表达的T淋巴细胞活化标志CD69以及细胞因子IFN-γ和TNF-α。结论 SecB膜蛋白抗原能有效激活DCs和它所激活DCs能够诱导特异性细胞免疫应答,为贝氏柯克斯体潜在保护性抗原。     

吸入过敏原前后支气管哮喘患者可溶性CD86的变化及意义

嗜酸粒细胞(EOS)可作为抗原提呈细胞参与过敏性支气管哮喘(简称哮喘)的发病过程，而EOS要提呈抗原必须表达Ⅱ类主要组织相容性复合体基因编码的蛋白分子和协同刺激分子。CD86是重要的协同刺激分子之一。体外实验已证实EOS可表达一定水平的CD86。本组研究中，我们观测了过敏性哮喘患者吸入过敏原前、后痰液和血清可溶性CD86(sCD86)水平的变化，探讨EOS在哮喘发病机制中可能的作用。     

共刺激分子OX40／OX40L和哮喘

在过敏性哮喘的发病机制中，CD4^ T细胞以其分泌的Th2类细胞因子参与了慢性气道炎症的启动和持续过程，成为介导嗜酸粒细胞炎症和气道高反应的主要炎性细胞。CD4^ T细胞的增殖活化需要两个刺激信号：由T细胞受体(TCR)与抗原提呈细胞(APC)提呈的MHC-抗原肽复合物相结合所产生的第一信号(识别信号)，和由APC表面的共刺激分子与T细胞表面对应受体分子相结合产生的第二信号(共刺激信号)。     

CpG ODN对食管癌细胞RNA转染的脐血树突状细胞诱导CTL抗肿瘤功能的影响

目的探讨食管癌细胞RNA转染脐血树突状细胞（DCs）对细胞毒性T淋巴细胞（CTL）特异性抗肿瘤作用的影响,以及CpG寡脱氧核糖核苷酸（CpG ODN）的免疫佐剂作用。方法分离脐血单个核细胞,经SCF、GM-CSF和IL-4诱导和食管癌RNA转染形成成熟DCs,加入CpG ODN,检测DCs表面标志及DCs诱导的T细胞增殖、CTL杀伤活性。结果食管癌RNA转染后DCs高表达抗原提呈分子、协同刺激分子和黏附分子,对T细胞的促增殖作用和CTL杀伤活性显著增强（P〈0.01）,CpG ODN能显著促进DCs功能。结论CpG ODN具有增强食管癌细胞RNA转染的DCs对T细胞的促增殖作用和促CTL杀伤活性的作用。     

树突细胞及其调节细胞免疫功能的作用

<正>早在19世纪70年代,Steinman等~〔1〕分离出一类细胞,与粒细胞、巨噬细胞和淋巴细胞的形态和功能都不同,由于这类细胞在成熟时会有许多树突样或伪足样突起伸出,故被命名为树突细胞(DCs)。DCs是目前已知的机体抗原提呈功能最强的专职抗原提呈细胞,在体内捕获抗原并将其提呈给辅助性T淋巴细胞(Th)从而发挥免疫防御的功能~〔2〕。DCs分布比较广泛,肝、脾、淋巴组织、血液、皮肤黏膜等组织均有,能够活化介导适     

CTLA-4及其衍生物和支气管哮喘

在过敏性哮喘的发病机制中,Th1/Th2亚群数目和(或)功能比例失衡是哮喘最重要的免疫学异常,其中CD4+T细胞在启动抗原特异性免疫应答过程中起重要作用,它的增殖活化需要两个刺激信号:第一信号(识别信号)由T细胞受体(TCR)与抗原提呈细胞(APC)提呈的MHC-抗原肽复合物相结合所产生,第二信号(共刺激信号)由APC表面的共刺激分子与T细胞表面对应受体分子相结合产生。目前认为CD28和CTLA-4是一对具有正负调节功能的重要共刺激分子,细胞毒性T细胞相关性抗原-4(CTLA-4)和CD28竞争性结合B7分子从而下调或终止T细胞反应。CTLA4-Ig能有效…     

哮喘小鼠骨髓树突状细胞的表型及共刺激分子研究

目的 探讨哮喘小鼠骨髓来源树突状细胞（DCs）的表型及共刺激分子在哮喘发病中的影响。方法 用卵清蛋白建立哮喘模型，利用rmGM-CSF和rmIL-4体外诱导骨髓细胞分化为DCs，流式细胞仪检测DCs表面共刺激分子的表达，混合淋巴细胞反应检测DCs刺激同种异体的T淋巴细胞增殖的能力。结果 在两种细胞因子的作用下，从骨髓中可以诱导出大量的DCs；且均表达DCs的表面标志（33D1）。哮喘组DCs表达CD86分子的水平高于对照组。而CD40、CD80在两组之间没有差异；哮喘组与对照组DCs均能强烈刺激同种异体T淋巴细胞的增殖，哮喘组DCs的刺激能力明显强于对照组。结论 哮喘组DCs的抗原递呈能力增强，表明DCs在哮喘的发病中可能起着重要作用。     

香烟烟雾暴露对哮喘大鼠树突状细胞共刺激分子CD80、CD86表达的影响及意义

目的通过研究香烟烟雾对支气管哮喘(简称哮喘)大鼠骨髓来源的树突状细胞(dendriticcells,DCs)表面共刺激分子CD80、CD86表达的影响,探讨吸烟加重哮喘的免疫学机制。方法雄性Wistar大鼠40只随机分为对照组、哮喘组、烟雾暴露组、哮喘+烟雾暴露组。建立动物模型,培养各组大鼠骨髓来源DCs及脾脏来源淋巴细胞,用流式细胞仪检测DCs表面共刺激分子CD80和CD86的表达。同时进行混合淋巴细胞反应,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞上清中IFN-γ和IL-4含量,MTT法检测淋巴细胞增殖活性。结果①哮喘+烟雾暴露组大鼠DCs表面共刺激分子CD80和CD86的表达低于哮喘组,差异有统计学意义(P值均<0.01)。哮喘+烟雾暴露组大鼠DCs表面共刺激分子CD80表达低于对照组,哮喘组大鼠DCs表面共刺激分子CD86表达高于对照组,差异有统计学意义(P值均<0.01)。②哮喘组大鼠DCs刺激同种异体淋巴细胞增殖能力高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。哮喘+烟雾暴露组大鼠DCs刺激同种异体淋巴细胞增殖能力低于哮喘组和对照组,差异有统计学意义(P值均<0.01)。③烟雾暴露+哮喘组和哮喘组DCs的IFN-γ表达低于对照组,IL-4表达高于对照组,差异有统计学意义(P值均<0.01),烟雾暴露+哮喘组DCs的IFN-γ表达低于哮喘组,IL-4表达高于哮喘组,差异有统计学意义(P值均<0.01)。④DCs表面共刺激分子CD80与IFN-γ表达、淋巴细胞增殖活性呈显著正相关(分别r=0.659、0.394,P<0.01和P<0.05),与IL-4表达呈显著负相关(r=-0.421,P<0.01),共刺激分子CD86的表达与淋巴细胞增殖活性呈显著正相关(r=0.712,P<0.01)。结论香烟烟雾暴露可以降低哮喘大鼠DCs表面共刺激分子CD80、CD86的表达,进而减弱DCs活化淋巴细胞的能力,这可能在吸烟影响哮喘气道炎症和免疫平衡中发挥了一定作用。     

内皮细胞穿越模型中系统性红斑狼疮患者树突状细胞分化及功能状态的初步研究

目的利用已经成功构建的内皮细胞穿越模型研究系统性红斑狼疮(systemiclupusery-thematosus,SLE)患者的单核细胞起源的树突状细胞的分化和功能状态(膜表面分子和刺激功能及细胞因子分泌等)。方法构建内皮细胞穿越模型;分别诱导正常人单核细胞和SLE患者单核细胞在模型中分化为树突状细胞(dendriticcells,DCs);电子显微镜观察其形态特征;流式细胞术检测其表型[人类白细胞抗原(HLA)-DR、CD80、CD86],混合淋巴细胞反应检测DCs刺激异源T细胞活化的能力,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测DCs分泌的干扰素(IFN)-!。结果正常人和SLE患者单核细胞在内皮细胞穿越模型中能分化成树突状细胞形态。正常人单核细胞来源的DCs(normalMonocyte-derivedDCs,NMDCs)和SLE患者单核细胞来源的DCs(SLEMonocyte-derivedDCs,SMDCs)都高表达HLA-DR;SMDCs的协同刺激分子CD80和CD86的表达水平明显高于NMDCs;刺激异源T淋巴细胞增殖的能力,SMDCs和NMDCs差异无统计学意义;SMDCs分泌IFN-!的水平明显低于NMDCs。结论SLE患者单核细胞异常分化为树突状细胞,这种异常涉及树突状细胞协同刺激分子CD80和CD86的表达升高以及细胞因子IFN-!分泌降低。     

以Candin为佐剂的人乳头瘤病毒多肽疫苗对树突状细胞抗原递呈相关分子表达的影响

目的探讨包含佐剂Candin和人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)多肽疫苗对树突状细胞(Dendritic cell,DCs)抗原递呈相关分子表达的影响。方法取健康人外周血白细胞,用淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMCs),用磁珠分选系统分选CD14+细胞,经细胞因子rhGM-CSF(1 000IU/ml)、rhIL-4(1 000IU/ml)、TNF-α(10ng/ml)诱导后获得DCs。分别用佐剂Candin(150μl/ml),HPV16E7多肽(10μmol/L),以及包含佐剂Candin(150μl/ml)和HPV16E7多肽(10μmol/L)的疫苗刺激DCs 24h,以PBS处理的DCs为阴性对照,采用流式细胞术检测DCs表面抗原递呈相关分子CD40、CD80、CD86、HLA-DR的表达。结果与阴性对照组比较,佐剂Candin及疫苗(Candin/HPV多肽)均能刺激DCs高表达HLA-DR,差异均具有统计学意义(P0.05)。佐剂Candin及疫苗(Candin/HPV多肽)均能刺激细胞高表达CD40、CD86,与阴性对照组比较,仅疫苗(Candin/HPV多肽)组结果差异具有统计学意义(P0.05)。佐剂Candin及疫苗(Candin/HPV多肽)均能增加细胞表达CD80,但差异均无统计学意义(P0.05)。结论以Candin为佐剂的人乳头瘤病毒多肽疫苗能刺激DCs高表达抗原递呈相关分子。     

HBV抗原基因修饰树突状细胞疫苗体外抗HBV的作用

目的：探讨腺病毒载体介导HBV抗原基因修饰的树突状细胞(DCs)诱导抗HBV特异性CTL反应方法：制备携带HBsAg、HBeAg和HBcAg基因的3种重组腺病毒Ad-HBs,Ad-HBe,Ad- HBc,分别转染自脐带血体外诱导培养的DCs,观察腺病毒转染DCs效率和DCs中HBV抗原的表达；混合淋巴细胞反应(MLR)测定HBV抗原基因修饰DCs刺激同种异体T淋巴细胞增殖能力；乳酸脱氢酶释放法检测特异性CTL细胞对HepG_222．1．5靶细胞的杀伤能力．结果：腺病毒载体能够高效介导HBV三个抗原基因在DCs中表达,90%以上DCs表达示踪基因EGFP,且DCs细胞形态完整：感染后72 h HBsAg和HBeAg含量分别为0．919和0．328(吸光度A值)．MLR实验显示,HBV抗原基因修饰DCs仍然具有刺激同种异体T细胞的增殖能力,Ad-HBs转染DCs组、Ad-HBe转染DCs组、Ad-HBc转染DCs组和未转染DCs组之间刺激T细胞的增殖水平无明显差异(F=1．194,P=0．389)；在E：T比例为2：1,10：1和25：1时,Ad-HBs转染DC组、Ad-HBe转染DCs组和Ad-HBc转染DCs组对HepG_222．1．5细胞的杀伤率均明显高于未转染DCs组(P＜0．001)；以Ad- HBc转染DC组对HepG_222．1．5细胞杀伤率最高．结论：HBV抗原基因修饰DCs疫苗具有刺激同种异体T细胞增殖能力,同时能增强抗HBV特异性CTL反应的能力,可能发展为一种新型抗病毒疫苗．     

共刺激分子OX40/OX40L和哮喘

在过敏性哮喘的发病机制中,CD+4T细胞以其分泌的Th2类细胞因子参与了慢性气道炎症的启动和持续过程,成为介导嗜酸粒细胞炎症和气道高反应的主要炎性细胞。CD+4T细胞的增殖活化需要两个刺激信号:由T细胞受体(TCR)与抗原提呈细胞(APC)提呈的MHC抗原肽复合物相结合所产生的第一信号(识别信号),和由APC表面的共刺激分子与T细胞表面对应受体分子相结合产生的第二信号(共刺激信号)。许多研究表明,除了B7CTLA4/CD28和CD40/CD40L(CD154)两对共刺激分子外,OX40及其配体OX40L是又一对在T细胞初次和再次应答中发挥重要作用的共刺激分…     

树突状细胞在HIV-1感染中的作用

树突状细胞(dendritic cells,DC)为体内重要的专职抗原提呈细胞(APC),是机体T细胞特异免疫应答的直接启动和调控者。近年来,树突状细胞的分化发育、抗原加工提呈机制及其在肿瘤、感染、自身免疫性疾病和移植排斥中的作用,已经成为免疫学的前沿领域,DCs在生产与控制适宜的免疫反应中扮演了十分重要的角色。未成熟DCs(iDCs)广泛地分布于体内并占据了组织中的“哨所”位置,并     

自身免疫病与树突状细胞免疫调控

树突状细胞（dendriti cells，DCs）是已知功能最强的专职抗原提呈细胞（professional antigen-presenting cells，APC）。DCs活化静止性T细胞的效率是其他APC（如巨噬细胞等）的1000倍。同时，作为APC，它能惟一激活初始型T细胞（naive T cells）致敏，产生初次免疫应答。成熟DCs联合抗原作用可加强免疫应答，而不成熟DCs又可诱导抗原特异性T细胞克隆清除（无能）或产生调节T细胞（Tr），产生免疫抑制或免疫耐受。因此，DCs被视为重要的免疫调节工具。有望应用于自身免疫病、慢性病毒感染和肿瘤等一系列疾病的临床治疗。本文就DCs免疫凋控与自身免疫病关系综述如下。     

多房棘球蚴病患者血源树突状细胞形态观察和表型检测

目的了解多房棘球蚴病患者血源树突状细胞(DCs)形态和表型特点。方法分别收集多房棘球蚴病病例(AE组) 10例、汉族健康志愿者(HH组) 10人、藏族健康志愿者(TH组) 10人的外周血,分离单核细胞贴壁培养,应用重组人集落刺激因子和重组人白细胞介素-4诱导获得DCs。分别收集各组培养第1、 3、 5和7天的DCs,采用倒置显微镜和扫描电镜观察细胞形态。3组DCs诱导培养至第7天时,流式细胞术检测细胞表面标志分子的阳性表达率,采用SPSS 22.0统计学软件进行分析。结果体外诱导培养第1天, AE组、 HH组和TH组DCs大部分呈单个圆形、边界清晰、细胞质透亮、体积较小,浮于细胞液中。诱导培养第3天, 3组DCs聚集呈半悬浮状,细胞变大呈不规则形态。诱导培养第5天, 3组DCs形成集落,多数DCs边缘不光滑呈毛刺状。诱导培养至第7天, 3组DCs呈半悬浮生长,边缘具有丝状刺突; AE组中诱导分化的DCs与HH组和TH组相比所形成的集落数量相对较少,细胞胞体所形成的不规则突起不明显且细胞表面树突状突起较少,呈非典型的DCs形态; AE组诱导分化的DCs表面协同共刺激分子CD1a、 CD80和CD86阳性表达率分别为12.73%±1.73%、 12.41%±2.83%和16.34%±3.59%,与HH组和TH组相比差异有统计学意义(P 0.05),而HH组(18.40%±1.20%、 20.77%±3.40%、 31.78%±5.02%)和TH组(17.50%±1.44%、 23.75%±5.33%、 33.20%±2.47%)相比差异无统计学意义(P 0.05)。结论AE组诱导分化的DCs形态不典型、其重要细胞表面标志分子阳性表达率降低,表现为成熟障碍。     

慢性乙型肝炎患者CD11c+髓样树突状细胞数量和功能的变化

BV形成免疫耐受是其持续感染的主要原因.树突状细胞(DC)作为体内最强的抗原递呈细胞,在诱导HBV特异性细胞毒T淋巴细胞反应中起重要作用[1].其中外周血DCs前体CD11c+髓样树突状细胞(mDC)主要发挥抗原提呈功能,促进Th1细胞极化和细胞免疫的发生[2].     

NLRP3炎症小体与自身免疫甲状腺炎研究进展

<正>1炎症小体概述炎症小体是固有免疫系统的关键组成部分，是一类位于胞浆中的高分子蛋白复合体，主要位于抗原提呈细胞，可以将刺激信号提呈至T淋巴细胞启动适应性免疫应答。固有免疫系统由模式识别受体(pattern-recognition receptors,PRRs)来识别微生物基序从而启动免疫应答。模式识别受体可以识别病原相关分子模式(pathogen associated molecular patterns,PAMPs)、损伤相关分子模式(danger associated molecular patterns,DAMPs)以及稳态改变分子模式(homeostasis-altering molecular processes,HAMPs)^[1]。PRRs包括Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)、C型植物凝集素受体(C-type lectin receptors,CLRs)、NOD样受体(NOD-like receptors,NLRs)等。     

树突状细胞在抗肿瘤免疫中的研究进展

恶性肿瘤的发生发展与机体免疫功能改变有着密切的联系,随着对免疫功能机制研究的深入,发现抗原提呈细胞(APC)能摄取、加工、处理抗原并将抗原信息提呈给T淋巴细胞,在机体的免疫应答过程中起着十分重要的作用。抗原提呈细胞多指的是单核-巨噬细胞、树突状细胞、B淋巴细胞等能表达MHCⅡ类分子的细胞,即所谓的专职性的抗原提呈细