四种实验室检测技术对利福平和异烟肼耐药性检测的临床价值

目的 探讨微孔板法、实时荧光PCR熔解曲线技术(简称“熔解曲线法”)、多色巢式实时荧光定量PCR技术(简称“Xpert 法”)和罗氏药物敏感性试验(L-J药敏试验,简称“比例法”)用于快速筛查耐多药结核病(MDR-TB)的临床价值。方法 从医院信息系统(hospital information system,HIS)连续收集2014年7月至2018年3月重庆市公共卫生医疗救治中心收治的确诊为结核病,且具有微孔板法、比例法、熔解曲线法、Xpert 法检测MTB对利福平、异烟肼耐药性诊断结果的2792例患者资料;其中微孔板法、比例法采用阳性分离菌株检测,熔解曲线法和Xpert 法采用患者标本直接检测。纳入同时具有微孔板法和比例法耐药性检测结果的1488例患者作为研究对象,其中341例行微孔板法+比例法+Xpert法检测利福平耐药性,87例行微孔板法+比例法+熔解曲线法检测利福平耐药性,66例行微孔板法+比例法+熔解曲线法检测异烟肼耐药性。以比例法为标准,采用SPSS 13.0软件分别计算微孔板法、熔解曲线法、Xpert法检测利福平和(或)异烟肼耐药性的敏感度、特异度、符合率、Kappa值等。结果 以比例法为标准,微孔板法、Xpert法、熔解曲线法检测利福平耐药性的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、符合率、Kappa值分别为97.2%(731/752)、96.9%(713/736)、96.9%(731/754)、97.1%(713/734)、97.0%(1444/1488)、0.94,97.2%(140/144)、94.9%(187/197)、93.3%(140/150)、97.9%(187/191)、95.9%(327/341)、0.92,97.1%(33/34)、84.9%(45/53)、80.5%(33/41)、97.8%(45/46)、89.7%(78/87)、0.79;微孔板法和熔解曲线法检测异烟肼耐药性的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、符合率、Kappa值分别为94.8%(751/792)、95.7%(667/697)、96.3%(751/780)、94.2%(667/708)、97.9%(1418/1448)、0.91, 97.3%(36/37)、86.2%(25/29)、90.0%(36/40)、96.2%(25/26)、92.4%(61/66)、0.84。结论 微孔板法、熔解曲线法、Xpert 法检测利福平和(或)异烟肼耐药性均具有较高的敏感度和特异度,适合快速筛查耐多药结核病;微孔板法还能获得各药物最低药物浓度,为临床用药剂量的选择提供参考依据。     

结核分枝杆菌德拉马尼和PA-824耐药相关机制研究进展

结核病仍是全球十大死因之一,而耐药结核病的出现,给全球结核病的防控工作带来了极大的困难与挑战。德拉马尼和PA-824(Pretomanid)同为硝基咪唑类抗结核药物,对耐多药结核病及广泛耐药结核病均有较好的疗效,尤其是PA-824与贝达喹啉和利奈唑胺组成的BPaL方案对高度耐药的结核病患者具有更高的治愈率。但近年来有研究表明,结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, MTB)对德拉马尼和PA-824已经出现了耐药现象。准确及时的对德拉马尼和PA-824耐药菌株进行检测,可有效避免耐药现象的加剧并提高药物的临床应用效果。本文综述了MTB对德拉马尼和PA-824耐药的机制及相关基因突变情况,以期为今后德拉马尼和PA-824耐药株的快速检测及其在临床上的合理应用提供参考。     

结核分枝杆菌贝达喹啉和氯法齐明耐药及其交叉耐药机制研究进展

目前,全球结核病耐药现象严重,给结核病的防控工作带来了极大的困难与挑战,并亟需新型抗结核药物来阻止耐药结核病的蔓延.贝达喹啉和氯法齐明分别是世界卫生组织推荐的A组和B组核心抗结核药物,主要用于耐多药结核病的治疗且疗效较好.但近年来贝达喹啉和氯法齐明耐药的现象也时有报道,且二者存在交叉耐药的情况.本文综述了与结核分枝杆菌...     

结核分枝杆菌异烟肼和丙硫异烟胺耐药及其交叉耐药相关机制研究进展

结核病是一种严重危害人类健康的呼吸道传染病。据世界卫生组织估算,2018年全球耐多药结核病患者数为48.4万。异烟肼是重要的一线抗结核药物,但其目前耐药情况比较严重。丙硫异烟胺,作为异烟肼耐药患者的替代治疗药物,与异烟肼存在部分的交叉耐药性。本文综述了异烟肼和丙硫异烟胺交叉耐药的相关机制,为异烟肼耐药及耐多药结核病患者的治疗提供科学依据。     

重庆市结核病患者利福平耐药与耐多药的相关性分析

目的 了解重庆市结核病患者利福平（rifampicin, RFP）耐药与耐多药的相关程度,为重庆市RFP耐药及耐多药结核病患者的准确诊断和及时治疗提供科学依据。方法 收集重庆市公共卫生医疗救治中心2017—2019年收治的培养阳性且鉴定为结核分枝杆菌的患者菌株,进行以下十种抗结核药物的药敏试验：RFP、异烟肼（isoniazid, INH）、链霉素、乙胺丁醇、氧氟沙星、卡那霉素、阿米卡星、卷曲霉素、对氨基水杨酸和丙硫异烟胺。共收集菌株937例,分析其RFP和INH耐药情况。结果 937例菌株中,RFP耐药菌株288例,RFP耐药INH敏感菌株比例为20.14%（58/288）;RFP敏感菌株为649例,其中INH耐药菌株占比7.09%（46/649）。重庆市耐多药患者比例为24.55%,广泛耐药肺结核患者占比2.99%。无论RFP耐药还是RFP敏感菌株中,INH耐药或敏感的患者在年龄、性别和治疗史方面差异均无统计学意义。结论 重庆市RFP耐药结核病患者中有较高比例为异烟肼敏感患者,RFP耐药不适合作为重庆地区耐多药患者确诊的指标,应采取有效手段同时检测RFP和INH耐药情况,以指导临床医生为结核病患者制定合理的化疗方案,推动重庆市结核病防治工作的进展。     

40株耐多药结核分枝杆菌临床分离株对利奈唑胺及特地唑胺药物敏感性的研究

为比较分析耐多药结核分枝杆菌(MDR-MTB)对利奈唑胺(Lzd)和特地唑胺(Tzd)的药物敏感性,笔者采取直接抽选法选取2018年1—11月间重庆市公共卫生医疗救治中心中心实验室培养分离并经药物敏感性试验(简称“药敏试验”)鉴定为MDR-MTB的40株菌株,采用微孔板法测定Lzd和Tzd的最低抑菌浓度(MIC),并分析相关结果。结果发现,Lzd对MDR-MTB的MIC的中位数(四分位数)为0.500(0.500,1.000)mg/L,其中87.5%(35/40)的菌株MIC处于0.500~1.000mg/L;Tzd对MDR-MTB的MIC的中位数(四分位数)为0.250(0.250,0.250)mg/L,其中87.5%(35/40)的菌株MIC处于0.125~0.250mg/L。Lzd对MDR-MTB的MIC₅₀和MIC₉₀分别为0.500、1.000mg/L;Tzd对MDR-MTB的MIC₅₀和MIC₉₀均为0.250mg/L。Tzd的MIC明显小于Lzd的MIC,差异有统计学意义(Z=-5.51,P<0.001)。参照比例法药敏试验结果,40株MDR-MTB临床分离株可分为13株MDR-MTB,20株前广泛耐药结核分枝杆菌(pre-XDR-MTB)和7株广泛耐药结核分枝杆菌(XDR-MTB)。Lzd对MDR-MTB、pre-XDR-MTB、XDR-MTB菌株的MIC中位数(四分位数)均为0.500(0.500,1.000)mg/L;Tzd对MDR-MTB、pre-XDR-MTB菌株、XDR-MTB菌株的MIC中位数(四分位数)均为0.250(0.250,0.250)mg/L,差异均无统计学意义(Lzd:H=0.84,P=0.659;Tzd:H=0.59,P=0.746)。 可见,Lzd和Tzd对MDR-MTB菌株均有很好的杀菌效果,Tzd具有较Lzd更好的抗结核效果。     

重庆市流行非结核分枝杆菌菌种鉴定及感染人群特征

目的 了解重庆地区非结核分枝杆菌（NTM）流行的优势菌种和NTM感染人群的特征。方法 回顾分析2016年7月—2017年12月在重庆市公共卫生医疗救治中心就诊,并经分枝杆菌菌种PCR-反向点杂交法鉴定为NTM和NTM混合感染的患者资料。结果 95例NTM感染病例,单一NTM感染共 80例,其中快生长分枝杆菌（RGM）2种,脓肿分枝杆菌31例（38.75%）,偶发/猪分枝杆菌14例（17.50%）;慢生长分枝杆菌（SGM）5种,胞内分枝杆菌25例（31.25%）,鸟分枝杆菌5例（6.25%）,戈登分枝杆菌3例（3.75%）,堪萨斯分枝杆菌2例（2.50%）;分枝杆菌混合感染共15例,其中TB和NTM 混合感染11例, NTM混合感染4例。单一NTM感染病例中,男性多于女性,胞内分枝杆菌感染者男性比例最高。而NTM混合感染者中,性别比例均接近1∶1。单一NTM感染者主要集中于20~<30岁和40~<60岁之间,而TB和NTM混合感染者在30~<50岁之间最多。脓肿分枝杆菌感染者主要在20~59岁之间,胞内分枝杆菌感染者主要分布于40~<79岁之间,偶发/猪分枝杆菌的患者集中于60岁以下。结论 重庆市NTM的主要流行优势种类以脓肿分枝杆菌和胞内分枝杆菌为主,感染者男性多于女性,以20~<30岁和40~<60岁之间最多,对于不同种类的NTM,感染者的年龄分布和性别比例有所不同。     

杜氏盐藻叶绿体转化载体pUC-chlN1622-CAT的构建

目的:构建杜氏盐藻叶绿体转化载体pUC-chlN1622-氯霉素乙酰转移酶(CAT)。方法:以光非依赖性的原叶绿素酸酯还原酶chlN基因为同源片段,以CAT抗性基因为选择标记,构建盐藻叶绿体转化载体pUC-chlN1622-CAT,并通过电击法转入野生型盐藻细胞,筛选转化藻株。结果:在氯霉素浓度为300mg/L的选择压力下,野生型盐藻10d左右死亡,转化藻仍正常生长,得到表达氯霉素抗性的盐藻转化株。结论:以chlN基因作为同源片段构建盐藻叶绿体转化载体是可行的。     

重庆市耐多药结核分枝杆菌对贝达喹啉和德拉马尼的药物敏感性研究

目的 分析重庆市耐多药结核分枝杆菌(multidrug-resistant Mycobacterium tuberculosis,MDR-TB)对贝达喹啉(bedaquiline,Bdq)和德拉马尼(delamanid,Dlm)的药物敏感性,以期为临床上Bdq和Dlm的合理使用提供参考。方法 收集2017年11月至2018年11月间经重庆市公共卫生医疗救治中心鉴定为MDR-TB的菌株,采用微孔板法测定Bdq和Dlm的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration, MIC),并对相关结果进行分析。结果 所收集的111例MDR-TB临床分离株进行Bdq的药敏检测结果显示, MIC₅₀和MIC₉₀分别为0.016 mg/L和0.125 mg/L;109例MDR-TB菌株的Dlm药敏结果显示,MIC₅₀和MIC₉₀分别为0.016 mg/L和0.063 mg/L。各有5株菌株对Bdq和Dlm耐药,耐药率分别为4.50%和4.59%。不同耐药情况分组对Bdq和Dlm的耐药率与MDR-TB菌株对Bdq和Dlm的耐药率之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 重庆市大部分MDR-TB菌株对这两种新的抗结核药物非常敏感,但不应忽视原发耐药,在制定临床治疗方案时,仍需重视对新药的药敏检测。