氨基胍、水飞蓟素、山莨菪碱对糖基化产物 培养下周细胞增殖和胞浆钙改变的保护作用

目的探讨氨基胍(aminoguanidine,AG)水飞蓟素(silymarin,Sil )和山莨菪碱(anisodamine,Ani)对糖基化产物培养下视网膜微血管周细胞(pericytes,PC) 的保护作用。方法MTT比色测定结合³H-TdR掺入和Fura-2A M,观察三种药物对早期糖基化产物(early glycation products of albumin,EGs)和糖基化终产物(advanced glycation end products of albumin AGEs)培养的PC增生、DNA合成和胞 浆[Ca²⁺] i 水平改变的影响。 结果 EGs培养下,AG组和Sil组MTT测定A 值和³H-TdR掺入量均较对照组增高(P<0.01),而两组胞浆[Ca²⁺] i 水平较对照组减低(P<0.01和0.05),两组比较差异具有显著性的意义;AGEs培养下,仅AG组MTT A 值和³H-TdR掺入量较对照组增高(P<0.01),胞浆[Ca²⁺] i 水平较对照组减低(P<0.05)。结论AG能有效保护PC免受EGs所致的增生和抑制胞浆[Ca²⁺] i 水平增 高,并对AGEs所致的上述改变亦有一定的保护效应。Sil仅对EGs所致的PC增生抑制和胞浆[Ca²⁺] i 水平改变有一定的保护作用;Ani对EGs和AGEs所致的PC上述改变均无明显保护作用。(中华眼底病杂志,2001,17:192-194)     

腺苷抑制P2X7和N-甲基-D-天冬氨酸受体诱导的视网膜神经节细胞死亡

目的研究腺苷（adenosine）对嘌呤受体P2X₇和谷氨酸N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体激活诱导的大鼠视网膜神经节细胞（RGC）死亡的神经保护作用。方法（1）对新生Long-Evan大鼠进行上丘注射荧光标记物荧光金（aminostilbamidine）以标记RGC，检测P2X₇激动剂BzATP（50 μmol/L）、谷氨酸NMDA受体激动剂（100 μmol/L）和腺苷（300 μmol/L）对体外培养RGC存活率的影响;（2）体外培养未经荧光金标记的新生大鼠RGC，以10 μmol/L 钙离子（Ca²⁺ ）荧光染料Fura-2乙酸甲酯（Fura-2 Am）标记后，利用Ca²⁺影像测定仪分别测定BzATP、NMDA和腺苷对RGC内Ca²⁺浓度的影响。结果BzATP和NMDA均可引起体外培养的RGC死亡，BzATP在50 μmol/L、NMDA在100 μmol/L 浓度下，均杀死约30%RGC。而300 μmol/L 腺苷则可明显减轻两者对RGC的毒性作用，使RGC 存活率分别从68.9%±2.3%、69.9%±3.2% 提高至91.2%±3.5%（P＜0.001）、102.1%±3.9%（P＜0.001）。BzATP可引起RGC内Ca2+持续升高，在50 μmol/L浓度下可使细胞内Ca²⁺升高至（1183±109） nmol/L。在300 μmol/L腺苷作用下，BzATP介导的Ca²⁺升高幅度显著降低，仅升高为（314±64）nmol/L（P＜0.001）。结论腺苷能阻止P2X⁷受体和NMDA受体激活诱导的RGC死亡和细胞内钙离子浓度升高，具有神经保护作用。（中华眼底病杂志，2007，23：133-136）     

糖基化产物对牛视网膜微血管周细胞增生和胞浆[Ca~(2 )]i水平的影响

目的　探讨糖基化产物对牛视网膜周细胞 (pericyte ,PC)增生和胞浆 [Ca2 ]i水平的影响。　方法　采用细胞计数结合噻唑蓝比色测定 ,氚标胸腺嘧啶核苷 (3H thymidine ,3H TdR)掺入和钙荧光探剂 (Fu ra 2Acetoxymethylester,Fura 2AM) ,研究PC在牛血清白蛋白早期糖基化产物 (earlyglycationpro ductsofbovineserumalbumin ,EG BSA)和牛血清白蛋白糖基化终产物 (advancedglycationendproductsofbovineserumalbumin ,AGE BSA)培养下 ,PC增生数、DNA合成量及胞浆 [Ca2 ]i水平的改变。　结果　培养 4d后 ,细胞计数法 :EG BSA和AGE BSA组PC数分别为 17.87± 2 .36 ,14 .77± 3 .72 ,较其对照组 (2 0 .5 4± 0 .82 ,2 0 .31± 0 .93)减少13 .0 0 %和 2 7.0 0 % (P <0 .0 1) ;MTT法 :EG BSA和AGE BSA组分别为 0 .46 19± 0 .0 946 ,0 .3884± 0 .10 13 ,较其对照组 (0 .5 2 36± 0 .0 5 39,0 .5 2 2 7± 0 .0 5 19)减少 12 .0 0 %和 2 5 .70 % (P <0 .0 1) ;3H TdR掺入量 :EG BSA和AGE BSA组分别为 3945 0 .16± 8870 .6 8,336 6 7.85± 10 5 81.70 ,较其对照组 (5 6 373 .6 3± 2 317.97,5 6 5 42 .0 4±196 1 2 3)减少 30 .0 0 %和 40 46 % (P <0 0 1) ;胞浆 [Ca2 ]i水平 :EG BSA和AGE BSA组分别为 (12 9.     

Effect of Thiazolidinedione on the Proliferation of Bovine Retinal Endothelial Cells Stimulated by Vascular Endothelial Cell Growth Factor

Purpose To investigate the effect of troglitazone, an antidiabetic drug, on the cytosolic Ca²⁺ concentrations ([Ca²⁺]i) and the cell cycles of bovine retinal endothelial cells (RECs) stimulated with vascular endothelial growth factor (VEGF). Methods The changes in [Ca²⁺]i were monitored using microfluorometry with Fura-2. The phase of the cell cycle was examined by an immunocytochemical analysis using monoclonal antibodies against cell cycle-specific nuclear antigens. Results In the presence of extracellular Ca²⁺, VEGF-induced transient [Ca²⁺]i elevation followed by continuous steady-state elevation resulted in cell cycle progression in RECs. The removal of extracellular Ca²⁺ inhibited the continuous component, but transient [Ca²⁺]i elevation was still observed. These results are compatible with the hypothesis that a continuous steady-state elevation of [Ca²⁺]i may be mediated mainly through the influx of extracellular Ca²⁺. Pretreatment with 10 μM troglitazone prevented the transient and continuous steady-state elevation of [Ca²⁺]i, resulting in an inhibition of the cell cycle in RECs stimulated with VEGF. Conclusions These data suggest that troglitazone inhibits VEGF-induced cell cycle progression through the inhibition of [Ca²⁺]i in RECs. Jpn J Ophthalmol 2007;51:21–26 ? Japanese Ophthalmological Society 2007     

糖尿病视网膜病变与红细胞胰岛素酶活性的关系

目的 探讨非胰岛素依赖型糖尿病(non-insulin-dependent diabetes mellitus,NIDDM)患者糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)与红细胞胰岛素酶活性(insulinase activity of erythrocytes,EIA)的关系。 方法 对有DR的NIDDM患者42例，无DR的NIDDM患者44例以及正常对照者55例，分别检测EIA、空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)、空腹血浆胰岛素(fasting plasma insulin,FINS)及糖基化血红蛋白(glycosylated hemoglobin,HbA1c)。 结果 有DR的NIDDM患者EIA为(694.54±126.84)pmol·s^-1·g^-1，无DR的NIDDM患者EIA为(828.80±107.31)pmol·s^-1·g^-1；有DR的NIDDM患者病程更长，FPG、HbA_1c更高(P值均小于0.05)。在DR患者中，增殖型DR患者EIA为(63788±13559)pmol·s^-1·g^-1，单纯型DR患者EIA为(731.22±118.93)pmol·s^-1·g^-1(P<0.05)。 结论 胰岛素酶在DR的发生、发展中可能起着一定的作用。 (中华眼底病杂志,1998,14:132-134)     

糖尿病视网膜病变患者红细胞膜ATPase活力及红细胞内离子水平临床研究

测定非胰岛索依赖型糖尿病(NIDDM)视网膜病变(DR组)患者20例红细胞膜ATPase活力及红细胞内离子水平，并与无急慢性并发症的单纯性NIDDM(DMt组)患者和健康志愿者(C组)各20例比较．结果DR组Na⁺- K⁺-ATPase和Ca²⁺-ATPase活力明显低于正常C组，红细胞内Na⁺和Ca²⁺明显高于正常C组，Mg²⁺明显低于C组，Mg²⁺-ATPase及K⁺与C组比较差别不显著。上述变化在DM组亦有表现，但在DR组更为明显，其中Mg²⁺在DR组明显低于DM组(P<0.05)。上述变化在DM组亦有表现，但在DR组更为明显，其中Mg²⁺在DR组明显低于DM组（P<0.05）。 （中华眼底病杂志，1994，10：11-13）     

区域折射型多焦点人工晶状体SBL-3植入术后视觉质量分析

目的：观察区域折射型多焦点人工晶状体(MIOL)SBL-3植入术后视觉质量。

方法：回顾性对照研究南昌大学第二附属医院2019-09/2020-07收治的57例68眼白内障患者。其中植入区域折射型MIOL SBL-3者33例36眼(SBL-3组)，植入非球面单焦点人工晶状体(SIOL)ZCB00者24例32眼(ZCB00组)，对比两组术后3mo裸眼和矫正远、中、近视力、离焦曲线、OPDIII客观视觉质量、QoV问卷调查、患者满意度及术后脱镜率。

结果：术后3mo SBL-3组和ZCB00组裸眼和矫正远视力LogMAR值(0.13±0.09 vs 0.10±0.08，0.06±0.06 vs 0.08±0.08，均P>0.05)无显著差异，裸眼远视力均较术前有显著改善(P<0.05)。SBL-3组裸眼及最佳矫正远视力下的中、近视力明显优于ZCB00组(0.10±0.14 vs 0.27±0.10，0.05±0.16 vs 0.35±0.17，0.11±0.14 vs 0.26±0.11，0.03±0.17 vs 0.35±0.17，均P<0.05)。在所评估的各个空间频率上患者对比敏感度的比较中ZCB00组均优于SBL-3组(P<0.05)。SBL-3组总像差、总高阶像差、彗差、三叶草差均大于ZCB00组且有显著差异(P<0.05)，SBL-3组平均SR值小于ZCB00组(P<0.05)。术后3mo SBL-3组出现眩光1例，光晕1例，视远模糊4例。SBL-3组和ZCB00组患者表示非常满意者分别占82%、88%。两组间满意度比较无显著差异(P>0.05)，脱镜率(94% vs 67%)比较有显著差异(P<0.05)，且SBL-3组脱镜率更高。

结论：新型区域折射型MIOL SBL-3提供了良好的全程视力，术后不良视觉症状少，满意度和脱镜率高。     

应用Fura—2/AM测定兔视网膜细胞内游离钙的方法

目的：建立适宜条件下，用荧光指示剂Fura—2测定乳兔视网嘻细胞内游离钙(简称Ca2+)的方法． 方法：用酶解制备视网膜细胞悬液．Fura-2/AM负载进行荧光测定． 结果：经0.05%胰蛋白酶消化10分钟，可使细胞存活率达90%以上．在37°C条件下与Fura-2/AM温育40分钟，于30分钟内测定为最佳条件。 结论：酶息状态下[Ca2+]i水平为(223±27)nmol/L，其值在文献报道范围内．高钾去极化，在K+为25mmol/L和50mmol/L时．分别使[Ca2+]i增加了59%和148%．由此证明视网膜细胞悬液制备和测定方法是可行的． （中华眼底病杂志，1996，12：108-110）     

培养人视网膜色素上皮细胞增生的抑制与Ki-67表达

目的 探讨柔红霉素对视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞增生的抑制及其与Ki-67表达的关系。 方法 用180μg/L柔红霉素作用培养的人RPE细胞12h，之后24 h用氚-标记脱氧胸苷(tritium-labelled thymidine deoxyribose,³H-TdR)掺入法测定DNA合成抑制率，免疫细胞化学染色和定量分析观察Ki-67表达，流式细胞术检测细胞周期变化。 结果 培养人RPE细胞DNA合成抑制率与柔红霉素剂量成正比，对照组和柔红霉素组Ki-67阳性细胞率分别为89.3%和45.6%(P＜0.01)，两组中阳性细胞胞核积分光密度值分别为68.1±6.2和27.3±5.5 (P＜0.01)。柔红霉素组^G₂期细胞比例由8.9%增至29.5%。 结论 柔红霉素使培养人RPE细胞阻滞于^G₂期，抑制了细胞增生；Ki-67表达可以反映RPE细胞的增生抑制。（中华眼底病杂志，2000，16：1-70）     

伏格特-小柳-原田综合征患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的比例变化

目的 观察伏格特-小柳-原田（VKH）综合征患者治疗前以及治疗1个月后外周血中CD4⁺CD25⁺FOXP3⁺ T细胞的比例变化。方法 采集15例VKH综合征患者治疗前以及系统的糖皮质激素治疗1个月后的外周血，分离淋巴细胞。采用细胞表面标志物CD4、CD25以及特征性的细胞核内转录因子叉状头/翅膀状螺旋转录因子(FOXP3)的抗体标记CD4⁺CD25⁺调节性T细胞，流式细胞仪检测CD4⁺CD25⁺FOXP3⁺ T细胞的比例，并与15例以健康志愿者为正常对照组的外周血中的该亚群细胞水平进行比较。结果 外周血中CD4⁺CD25⁺FOXP3⁺ T细胞占CD4⁺细胞的比例，治疗前患者组为（0.30±0.19）%，正常对照组为（1.41±0.52）%，二者比较，差异有统计学意义（t＝7.665，P＜0.01）；治疗1个月后，患者组为（1.28±0.54）%，接近正常对照组。另有2例患者在治疗1个月后外周血中CD4⁺CD25⁺ T细胞比例异常升高。结论 VKH综合征患者外周血中CD4⁺CD25⁺FOXP3⁺ T细胞的比例治疗前显著低于正常对照组，治疗后与正常对照组接近，表明VKH综合征的发病可能与患者外周血中天然性CD4⁺CD25⁺调节性T细胞的比例下降有关。     

代谢性酸中毒诱导新生大鼠视网膜 新生血管的实验研究

目的了解代谢性酸中毒诱导新生大鼠视网膜病变的发展进程，探讨其发生与血管内皮生长因子（VEGF）的关系。方法实验组新生Sprague-Dawley大鼠425只。从大鼠出生后第2天开始按535 mg/kg的剂量管饲NH₄Cl(浓度为50 mg/ml)，每天2次，管饲6 d，然后进入恢复期。另选150只新生大鼠未进行管饲，作为对照组。两组大鼠分别于出生后3、5、8、10、13、20 d处死。取出双眼进行视网膜铺片和二磷酸腺苷酶染色，对视网膜血管进行评估；用酶联免疫分析法进行VEGF的测定。结果实验组鼠在出生后3、5、8、10、13、20 d的新生血管（NV）发生率分别为0%、9%、26%、55%、19%、0%。出生后第3天，实验组鼠VEGF的蛋白水平［（101.1±14.2 ） pg/mg］比对照组［（133.2±15.9） pg/mg下降（P＝0.004），出后生第8天，实验组鼠VEGF蛋白水平［(98.4±19.2) pg/mg］比对照组［（78.1±8.7）pg/mg］升高（P=0.028)；出生后第5、10、13、20天，两组差异无统计学意义（P>0.05）。结论代谢性酸中毒可能损害了正在发育的视网膜血管而引起新生血管；酸中毒引起的视网膜新生血管与VEGF有关。(中华眼底病杂志,2005,21:296-299)     

CDK抑制剂对糖尿病大鼠视网膜Müller细胞胶质增殖及新生血管形成的抑制作用

目的　探讨CDK抑制剂对糖尿病大鼠视网膜Müller细胞胶质增殖及新生血管形成的影响。方法　雄性SD大鼠30只，随机分成对照组、糖尿病组、治疗组(CDK抑制剂SCH727965)，每组各10只。后两组大鼠采用单次腹腔注射55 mg·kg^-1链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)的方法诱导糖尿病模型。模型诱导成功后，治疗组玻璃体内注射SCH727965 8 μL(3 nmol·L^-1)。12周后，免疫荧光检测三组大鼠视网膜胶质纤维酸性蛋白质(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达，免疫组织化学检测视网膜色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)表达，Western blot检测GFAP、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、PEDF蛋白相对表达量。结果　与对照组GFAP (100.00±0.00)%、VEGF(100.00±0.00)%、PEDF(38.26±0.52)%、PCNA(9.34±0.47)%表达相比，糖尿病组GFAP(168.24±2.72)%、VEGF(156.79±1.75)%、PCNA(16.11±0.34)%表达均明显增加，PEDF(23.72±0.71)%表达明显降低(均为P<0.01)；而与糖尿病组相比，治疗组GFAP(124.37±3.01)%、VEGF(118.36±1.98)%、PCNA(12.05±0.67)%表达均明显降低，PEDF(8.22±0.36)%表达明显增加(均为P<0.05)。结论　SCH727965可下调大鼠糖尿病状态下视网膜GFAP、VEGF、PCNA表达，上调PEDF表达，进而抑制Müller细胞增殖及新生血管形成。     

图像分析与人工计数视网膜神经节细胞方法的比较

目的 探讨图像分析仪计数视网膜神经节细胞（retinal ganglion cell，RGC）的特点和实际应用的可能性。 方法 自眶内切断18只成年大鼠左眼视神经，近侧断端留置浸有5％荧光金的明胶海绵。分别于手术后2、7、14 d处死动物，每一时间点各6只。取左眼视网膜经后固定平铺于载玻片上，荧光显微镜下分别以人工视网膜分区取样估测法和Quantimet 570图像分析仪计数荧光金逆行标记的RGC。 结果 RGC数目随手术后存活时间延长而下降，手术后2、7、14 d图像分析仪和人工计数法计数的RGC总数分别为(120 663±9 089)、(59 285±17 071)、(17 802±1 984)个/mm2和(118 237±7 898)、(57 648±14 533)、(18 070±1 461)个/mm2，同一时间点两组间计数结果差异无显著性的意义（P＞0.05）。 结论 图像分析仪计数RGC具有较为简便、客观和可重复计数的特点，可用于计数RGC的实验研究。 （中华眼底病杂志，2003，19：333-404）     

视盘出血在正常眼压青光眼中的形态学分析

目的 对正常眼压性青光眼（NTG）患者，前瞻性评估视盘出血和视网膜神经纤维层缺损及盘周萎缩弧之间的形态学关系。 方法 患者行每月1次眼底照相，眼底立体照相和计算机图像分析系统定性及定量评估视盘出血与神经纤维层缺损及萎缩弧的关系。 结果 NTG出血组37位患者42只眼有50处眼底视盘出血，出血眼中有35只有神经纤维层缺损，发生率83.3%（35/42）。非出血组35位患者40只眼中神经纤维层局限缺损为21个，发生率52.5%（21/40），两组间神经纤维缺损发生率无统计学意义（χ2=1.403, P=0.236，P＞0.05）。出血组和非出血组两组间β区萎缩弧的发生率差异有统计学意义（χ2=7.008, P=0.008，P＜0.01)，出血组β区萎缩弧面积(2.05±0.88) mm2，非出血组β区面积(1.42±0.53) mm2，两组比较有统计学意义（t=-2.785, P=0.008）。β区萎缩弧范围在出血组：(164.00±49.87)°，非出血组(128.42±40.04)°，两组间比较有统计学意义（t=-2.618, P=0.012，P＜0.05)。随诊中出血组和非出血组盘沿丢失发生率组间比较有统计学意义（χ2=5.802, P=0.016，P＜0.01），但组间比较随诊视野损害的发生率则无统计学意义。 结论 NTG中视盘出血和神经纤维层缺损及萎缩弧之间有密切的关系。随诊中发现出血组较非出血组有更多的盘沿丢失和萎缩弧面积改变，提示NTG视盘出血是疾病进展的危险因素。 (中华眼底病杂志, 2006, 22: 232-235)     

糖基化终末产物对牛视网膜毛细血管周细胞增殖及转化生长因子-β表达的影响

目的 研究糖基化终产物（AGEs）对体外培养的牛视网膜毛细血管周细胞的增殖、细胞周期和转化生长因子β（TGF-β）表达的影响。 方法 分别应用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色分析法检测周细胞的增殖、流式细胞术分析细胞周期、免疫荧光染色法观察TGF-β蛋白的表达。 结果 AGEs能抑制体外培养的牛视网膜毛细血管周细胞的增殖；并可使细胞周期阻滞于S期，凋亡细胞数显著增多（P<0.01）；能促进周细胞TGF-β蛋白的表达。 结论 AGEs可通过抑制周细胞增殖，促进周细胞的凋亡而导致周细胞数量的减少；并可能促进周细胞分泌TGF-β而进一步加速糖尿病视网膜病变。 (中华眼底病杂志, 2006, 22: 20-23)     

抑制JAK/STAT信号通路对糖尿病早期大鼠视网膜Müller细胞的保护作用及对谷氨酸转运蛋白表达的影响

目的　探讨JAK/STAT信号通路对糖尿病早期大鼠视网膜Müller细胞及对谷氨酸转运蛋白（glutamate transporter，GLAST）表达的影响。方法　雄性SD大鼠30只，随机分成对照组、糖尿病组、AG490组，每组10只。后两组大鼠采用单次腹腔注射链脲佐菌素（streptozotocin，STZ） 50 mg·kg^-1诱导糖尿病模型。模型诱导成功后，AG490组给予AG490 10 μL（17 mmol·L^-1）玻璃体内注射给药。注射1个月后，利用试剂盒检测3组大鼠视网膜中谷氨酸含量变化，免疫荧光检测视网膜GLAST表达，免疫组织化学检测视网膜p-JAK2表达，Western blot检测视网膜GLAST、p-JAK2及p-STAT3蛋白相对表达量。结果　与对照组GLAST相对表达量（65.35±0.66）%、p-JAK2相对表达量（32.80±0.40）%、p-STAT3相对表达量（17.62±1.09）%、谷氨酸含量（23.93±0.67）μmol·g^-1相比，糖尿病组视网膜p-JAK2相对表达量（52.16±0.62）%、p-STAT3相对表达量（47.41±0.95）%及谷氨酸含量（44.88±0.27）μmol·g^-1均明显增加，GLAST相对表达量（32.96±0.64）%明显下降（均为P<0.01）；而与糖尿病组相比，AG490组p-JAK2相对表达量（13.67±0.45）%、p-STAT3相对表达量（14.47±0.25）%及谷氨酸含量（25.18±0.66） μmol·g^-1均明显降低，GLAST相对表达量（49.48±0.32）%明显增加（均为P<0.01）。结论　糖尿病早期大鼠视网膜GLAST表达明显降低，抑制JAK/STAT通路的活化可上调视网膜GLAST表达，降低视网膜谷氨酸含量，这可能有助于减轻糖尿病状态下视网膜Müller细胞的损伤。     

重组碱性成纤维细胞生长因子通过Notch1信号通路对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞的保护作用

目的　探讨重组碱性成纤维细胞生长因子(recombinant basic fibroblast growth factor,rbFGF)通过Notch1信号通路对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞(retinal ganglion cell，RGC)的保护作用。方法　雄性SD大鼠40只，随机分成对照组、糖尿病组、rbFGF组、rbFGF+DAPT组(DAPT为Notch1通路的特异性拮抗剂)，每组10只。后三组大鼠采用单次腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ) 诱导糖尿病模型。模型诱导成功后，rbFGF组给予rbFGF 10 μL(200 U)玻璃体内注射给药，rbFGF+DAPT组在给予rbFGF基础上加用DAPT(10 μmol·L^-1)。注射12周后，HE染色检测RGC密度，免疫组织化学染色检测神经元再生相关蛋白GAP-43、Notch1蛋白表达，Western blot检测GAP-43、Notch1蛋白及凋亡相关蛋白Caspase-3相对表达量。结果　与对照组RGC密度(433.49±6.02)个·mm^-2，GAP-43荧光强度(8.96±0.26)%、Notch1阳性率(45.04±0.46)%及Caspase-3 (27.91±0.63) %蛋白表达相比，糖尿病组RGC密度(328.35±6.43)mm^-2，Notch1荧光强度(31.66±0.40)%蛋白表达明显降低，GAP-43荧光强度(13.66±0.52)%、Caspase-3 (48.91±0.64)%蛋白表达明显增加(均为P<0.05)；而与糖尿病组相比，rbFGF组RGC密度(425.30±7.98)个·mm^-2，Notch1阳性率(41.76±0.62)% 及GAP-43荧光强度(33.05±0.37)%蛋白表达明显增加，Caspase-3 (28.86±0.71)%蛋白表达明显降低(均为P<0.05)；而rbFGF+DAPT组RGC密度(324.91±8.22)个·mm^-2，GAP-43荧光强度(14.27±0.64)%、Notch1阳性率(30.40±0.82)%及Caspase-3 (47.63±0.68)%蛋白表达均无明显变化(均为P>0.05)。结论　rbFGF可上调糖尿病状态下视网膜GAP-43蛋白表达，下调Caspase-3蛋白表达，进而提高RGC的存活，其机制可能与激活Notch1信号通路有关。     

Bax过表达诱导培养的人视网膜色素 上皮细胞凋亡观察

目的研究外源性促凋亡基因bax过表达对培养人的视网膜色素上皮（retinal pigment epithelium ,RPE）细胞凋亡的影响。 方法通过脂质体Lipofectin介导法用含人全长bax 基因片段的真核表达载体P^MDNA3-hbax质粒转化体外培养的RPE细胞,用流式细胞仪检测细胞周期的变化,提取实验组细胞DNA进行DNA梯度电泳。结果Zn^2+可诱导P^MDNA3-hbax转化组RPE细胞出现明显的凋亡峰 ,凋亡峰位于单倍体和二倍体之间,凋亡率为36%,DNA电泳可见DNA梯状条带,P^MDNA3空载体组及未转染组RPE细胞未见亚二倍峰和DNA梯状条带出现。结论外源性促凋亡基因bax过表达可诱导RPE细胞凋亡。(中华眼底病杂志,2001,17:132-134)     

半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶在视网膜毛细血管周细胞凋亡中的活性及意义

目的探讨糖基化终产物（AGE）在糖尿病视网膜病变（DR）发生中的作用。方法培养的牛视网膜毛细血管周细胞分别与不同浓度（0．47、1．88、7．50μmol／L）的AGE共同培养4d后,分别检测细胞凋亡、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（caspase-3）活性及caspase-3抑制剂Z—DEVD-fmk对周细胞凋亡及凋亡调节基因Bcl-2／Bax比率的影响。结果AGE能以剂量依赖的方式诱导培养的牛视网膜毛细血管周细胞凋亡（r=0．867,P〈0．01）、增加细胞内caspase-3的活性,而选择性caspase-3抑制剂Z—DEVD—fmk能明显抑制AGE作用下的周细胞凋亡及提高凋亡调节基因Bcl-2／Bax的比率。结论凋亡是DR中视网膜毛细血管周细胞选择性丧失的机制之一,caspase-3活性的增加是AGE诱导周细胞发生凋亡的关键因素。