玻璃化冷冻法冻融经植入前遗传学诊断后囊胚的应用初探

目的:探讨玻璃化冷冻技术冻融经卵裂球活检后囊胚的可行性。方法:将活检后剩余的可移植囊胚用玻璃化冷冻保存,并在冷冻前人工皱缩囊胚腔,在需要移植时予以解冻囊胚进行移植。结果:24例共进行24个活检周期,活检了159个胚胎,活检后胚胎囊胚形成率60.38%(96/159)。有17个周期共移植26枚新鲜可用囊胚,成功种植13个(50.0%),11例获得临床妊娠(64.71%),7个周期因无可移植胚胎或卵巢过度刺激等因素而取消移植。10例患者(10个周期)有30个可移植囊胚进行了玻璃化冷冻保存,其中6例患者因未成功生育要求解冻其囊胚进行移植。共解冻8枚囊胚,全部存活并移植,5例获单胎妊娠;2例已分娩正常婴儿,3例继续妊娠中。结论:玻璃化冷冻技术结合人工皱缩囊胚腔能冷冻保存经卵裂球活检后的囊胚。     

人工皱缩后玻璃化冷冻小鼠扩张囊胚的效果观察

目的:观察冷冻前人工皱缩小鼠扩张期囊胚的囊胚腔,冻融后小鼠扩张期囊胚的存活率及体外和体内继续发育能力。方法:冻前先应用自制的玻璃微细管人工皱缩小鼠囊胚腔后,再应用冷冻环进行玻璃化冷冻小鼠扩张期囊胚150个。冻融后培养3h观察胚胎存活情况,以新鲜扩张囊胚为对照,并将存活胚胎及新鲜未冻囊胚移植受体孕鼠子宫内,观察胚胎的妊娠率和产仔率。结果:人工皱缩后小鼠扩张囊胚的存活率及孵出率均显著高于未皱缩组(P<0.05),皱缩组与对照组无显著差异(P>0.05)。移植后皱缩组的妊娠率及产仔率均显著高于未皱缩组(P<0.05),皱缩组与对照组无显著差异(P>0.05)。结论:冻前人工皱缩小鼠扩张期囊胚的囊胚腔后,再应用冷冻环进行玻璃化冷冻是个行之有效的方法,能明显提高囊胚的玻璃化冷冻效率。     

人工皱缩囊胚腔对囊胚玻璃化冷冻后妊娠结局的影响

目的 探讨人工皱缩囊胚腔对囊胚玻璃化冷冻的效果、妊娠结局及新生儿的影响.方法 2006年1月至2009年12月,选择在广西壮族自治区妇幼保健院生殖医学中心接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)或卵母细胞胞质内单精子注射(ICSI)治疗的患者,新鲜胚胎移植妊娠失败后要求行冻融囊胚移植的342个周期,其中,314个周期的囊胚在玻璃化冷冻前,用显微注射针刺入囊胚腔内抽出囊胚液使之皱缩,然后以玻璃微细管为载体行玻璃化冷冻(皱缩组),28个周期未行囊胚腔人工皱缩(未皱缩组).比较两组经冷冻、复苏及移植后的胚胎存活率、种植率、临床妊娠率和取消移植率等.在已妊娠者中,比较两组的流产率、活胎分娩率、分娩孕周、新生儿出生缺陷发生率、新生儿平均出生体质量等,并与同期新鲜移植周期(新鲜周期组,520个周期)进行比较.结果 皱缩组胚胎存活率、种植率及临床妊娠率分别为95.3%(403/423)、38.0%(153/403)、44.6%(140/314),未皱缩组分别为64.3%(27/42)、7.4%(2/27)、7.1%(2/28),分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);皱缩组取消移植率为0,未皱缩组为25.0%(7/28),两组比较,差异也有统计学意义(P＜0.05).皱缩组的流产率[18.2%(10/55)]、活胎分娩率[80.0%(44/55)]、分娩孕周[(38.2±1.3)周]、新生儿出生缺陷发生率[2.1%(1/47)]、新生儿平均出生体质量[(2989±640)g]与新鲜周期组[17.5%(91/520)、74.0%(385/520)、(37.9±2.3)周、1.7%(8/479)、(2856±640)g]比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 人工皱缩囊胚腔能明显提高囊胚玻璃化冷冻效果,并且新生儿先天异常发生率无明显升高.     

人卵裂期胚胎和囊胚玻璃化冷冻妊娠结局分析

目的探讨人卵裂期胚胎和囊胚玻璃化冷冻解冻后复苏效果及妊娠结局。方法回顾性分析434个卵裂期胚胎（卵裂组）和102个囊胚解冻周期（囊胚组）的临床资料,比较采用玻璃化冷冻解冻后的复苏率及妊娠结局。结果囊胚组患者的临床妊娠率和胚胎种植率分别为63.73%（65/102）和45.79%（87/190）,卵裂组分别为42.82%（185/432）和24.17%（241/997）,两组比较,差异均有统计学意义（P均〈0.05）;囊胚组患者的复苏率、流产率和异位妊娠率分别为98.45%（190/193）、12.31%（8/65）和0（0/65）,卵裂组分别为97.55%（997/1 022）、13.51%（25/185）和2.16%（4/185）,两组比较,差异均无统计学意义（P均〉0.05）。卵裂组中,卵裂球完全存活患者的临床妊娠率和胚胎种植率分别为44.62%（170/381）和25.57%（224/876）,非完全存活者分别为29.41%（15/51）和14.05%（17/121）,两组比较,差异均有统计学意义（P均〈0.05）。结论囊胚解冻移植的妊娠结局优于卵裂期胚胎,卵裂期胚胎解冻后胚胎的完整性影响胚胎种植。     

囊胚玻璃化冷冻复融移植的临床效果分析

目的:探讨全囊胚玻璃化冷冻的临床价值。方法:回顾分析2010年1月至2012年12月在河南省人民医院生殖医学研究所行体外受精-胚胎移植(IVF-ET),且因OHSS高危倾向行全胚玻璃化冷冻复融移植周期的不孕患者的临床资料。根据冷冻和培养方式分为A组(复融胚胎移植,784例)、B组(复融囊胚移植,199例)和C组(复融胚胎行囊胚培养后移植,124例)。比较3组患者的基本资料、IVF治疗的妊娠结局。结果:C组患者中3例因未形成囊胚而取消周期,其余121例患者移植后有33枚囊胚需再次冷冻。3组患者的平均移植胚胎数、种植率、临床妊娠率、多胎率、早期流产率比较,差异显著(P0.05)。B、C组患者的种植率、妊娠率、多胎率均显著高于A组(P0.05),平均移植胚胎数、早期流产率均显著少于A组(P0.05)。结论:对可能发生OHSS的全胚冷冻患者,胚胎个数较多时,行囊胚培养后玻璃化冷冻,择期复融移植能提高患者的种植率和妊娠率,同时也减少了患者的费用,是目前最佳的冷冻策略和最有益的冷冻方案。     

冻融囊胚移植在卵巢高反应患者中的应用价值

目的探讨冻融囊胚移植在卵巢高反应患者中的应用价值。方法回顾性分析2012年4月至2013年4月349例卵巢高反应患者的临床资料,按移植方案不同分为新鲜胚胎组（84例）、新鲜囊胚组（53例）、冻融胚胎组（102例）和冻融囊胚组（i10例）4组。比较4组患者的促排卵、胚胎质量、妊娠率、着床率和多胎率等。结果新鲜胚胎组、新鲜囊胚组、冻融胚胎组和冻融囊胚组患者移植优质胚胎率分别为73．37％（135／184）、71．70％（38／53）、70．50％（184／261）和68．27％（142／208）,4组比较,差异均无统计学意义（P〉0．05）。4组患者的着床率分别为16．85％（31／184）、39．62％（21／53）、19．92％（52／261）和47．12％（98／208）;临床妊娠率分别为30．95％（26／84）、37．74％（20／53）、44．12％（45／102）和69．09％（76／110）,4组比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）。4组患者的流产率分别为15．38％（4／26）、15．00％（3／20）、11．11％（5／45）和11.84％（9／76）,4组比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。新鲜周期组移植后中重度卵巢过度刺激综合征（OHSS）发生率为（9．49％,13／137）。而冻融周期组移植无OHSS发生。两囊胚组异位妊娠率（1．04％,1／96）与两胚胎组（8．45％,6／71）比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论卵巢高反应患者冻融囊胚移植在保证较高妊娠率的同时减少了OHSS及异位妊娠的发生。     

慢速程序化冷冻与玻璃化冷冻对第3天分裂期胚胎发育潜能的影响

目的比较慢速程序化冷冻法（慢速法）和玻璃化冷冻法（玻璃化法）对第3天分裂期胚胎发育潜能的影响。方法选择因输卵管阻塞或男性少弱精因素行体外受精（IVF）或卵母细胞胞质内单精子注射（ICSI）治疗的患者,挑选在行IVF或ICSI后第3天剩余优质胚胎数目超过4个者80例进入本研究。随机将每例患者的2个胚胎用玻璃化法冷冻,另外2个用慢速法冷冻;冷冻复苏后随机抽取40例患者移植慢速法冷冻的胚胎,另40例患者移植玻璃化法冷冻的胚胎,比较2种冷冻方法对胚胎发育潜能的影响。结果冷冻复苏后待移植的胚胎共160个,其中慢速法冷冻80个,复苏后存活73个（91％,73／80）,移植后40例患者中15例（38％,15／40）获得临床妊娠,其中3例（20％,3／15）为双胎妊娠,余为单胎妊娠,胚胎着床率为25％（18／73）;玻璃化法冷冻胚胎80个,复苏后存活71个（89％,71／80）。移植后40例患者中19例（48％,19／40）获得临床妊娠,其中9例（47％,9／19）为双胎妊娠,余为单胎妊娠,胚胎着床率为39％（28／71）,与慢速法相比,玻璃化法的临床妊娠率和双胎妊娠率均有提高,但差异无统计学意义（P〉0．05）,而胚胎着床率则显著提高,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论玻璃化法能够更好地保存胚胎复苏后的发育潜能,更适合第3天分裂期胚胎的冷冻保存。     

单囊胚移植在全胚冷冻患者中的临床应用

目的 探讨全胚冷冻后冻融胚胎移植（FET）周期第3天(D3)卵裂期胚胎,第5、6天双囊胚及单囊胚移植的临床效果分析。方法 回顾性分析2010年1月至2012年12月在河南省人民医院生殖医学研究所行体外受精-胚胎移植（IVF-ET）的不孕患者,以全胚玻璃化冷冻FET周期的患者为研究对象,根据患者的意愿分为D3胚胎移植组（A组,n=456）;双囊胚移植组（B组,n=106）;单囊胚移植组（C组,n=402）。比较3组之间基本资料、IVF治疗的妊娠结局。结果 与A组比较,B、C两组患者平均冷冻胚胎数、平均移植胚胎数少,移植周期率低,而种植率高,差异有统计学意义（P＜0.05）;C组平均移植胚胎数亦少于B组,而B组临床妊娠率、最初周期妊娠率高于A、C两组,C组多胎率低于A、B两组,差异均有统计学意义（P＜0.05）;C组早期流产率显著性低于A组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 对于全胚冷冻患者,当D3可利用胚胎个数≥4时,囊胚培养后玻璃化冷冻,择期FET周期选择性单囊胚移植是目前最佳的冷冻策略和最有益的临床处理方案。     

融合期胚胎和囊胚移植的探讨

目的：探讨融合期胚胎和囊胚单胚胎移植的可行性.方法：选取苏北人民医院生殖医学中心冷冻胚胎解冻移植231个周期的患者为研究对象,比较卵裂期胚胎移植组、融合期胚胎移植组和囊胚移植组的胚胎种植率、临床妊娠率以及多胎的发生率.结果：融合期胚胎移植组平均移植胚胎数低于卵裂期胚胎移植组,差异有统计学意义[（1.35±0.50） 个vs.（1.73±0.59） 个,t=-4.902,P＜0.001],但其胚胎种植率和临床妊娠率高于卵裂期胚胎移植组,差异均有统计学意义（49.58% vs.23.00%,χ2=24.567,P＜0.001;53.41% vs.34.15%,χ2=7.805,P=0.005）;囊胚移植组胚胎种植率高于卵裂期胚胎移植组,差异有统计学意义（46.88% vs.23.00%,χ2=8.214,P=0.004）;3组间多胎发生率差异无统计学意义（χ2=2.231,P=0.328）.结论：进行融合期胚胎或囊胚移植可获得较高的胚胎种植率和周期移植妊娠率,降低多胎率,尤其应用于单胚胎移植有重要意义.     

多囊卵巢综合征妇女体外成熟卵母细胞胚胎慢速冷冻复苏移植结局分析

目的评价未成熟卵母细胞体外成熟（IVM）后形成的卵裂期胚胎经慢速冷冻一解冻后的发育能力。方法将2006年1月至2010年12月北京大学第三医院因多囊卵巢综合征（PCOS）合并不孕症行卵裂期胚胎复苏移植的385例患者分为两组：复苏胚胎来源于体外成熟的卵母细胞组（IVM组,46例）和复苏胚胎来源于常规体内成熟的卵母细胞组（IVF组,339例）。采用慢冻速溶法解冻移植后比较两组患者的临床结局。结果IVM组复苏胚胎243枚,复苏后存活162枚,复苏率为66．67％;IVF组复苏胚胎1605枚,复苏后存活1082枚,复苏率为67．41％,两组比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。IVM组患者的临床妊娠率和着床率分别为19．30％（11／57）和10．61％（14／132）,明显低于IvF组临床妊娠率（45．45％,175／385）和着床率（26．14％,240／918;P均〈O．05）。结论体外成熟卵母细胞发育形成的卵裂期胚胎慢速冷冻后临床结局欠佳,可能与冻融前胚胎自身的发育潜力有关。     

新鲜周期选择性移植单个囊胚对降低多胎妊娠风险的作用

目的:探讨新鲜周期选择性移植单个囊胚(elective single blastocyst transfer,eSBT)对降低多胎妊娠风险的作用。方法:回顾性分析新鲜囊胚移植患者的病历资料,其中可供移植的囊胚数≥2个的患者中,选择性单个囊胚移植周期159个(eSBT组),双囊胚移植周期118个(double blastocysttransfer,DBT组),分析比较eSBT组与DBT组患者的一般情况、超促排卵情况、胚胎发育情况和妊娠结局。结果:①采用序贯囊胚培养法,共培养优质胚胎1 040枚,形成囊胚781枚,囊胚形成率75.09%。②患者一般情况、超促排卵和胚胎发育情况组间均无统计学差异(P>0.05),eSBT组与DBT组临床妊娠率(52.83%vs 57.63%)、流产率(4.76%vs 10.29%)未见明显差异(P>0.05),eSBT组种植率显著高于DBT组(54.09%vs 37.71%,P<0.01),多胎率显著低于DBT组(2.38%vs 30.88%,P<0.01)。③按年龄<30岁、30～34岁、35～38岁分段后,eSBT组各年龄段间临床妊娠率均无明显降低(P>0.05),多胎率均显著降低(P<0.01)。结论:新鲜囊胚移植患者选择性单个囊胚移植能在保证较高临床妊娠率的同时,有效降低多胎妊娠的风险。     

Retrospective clinical analysis of two artificial shrinkage methods applied prior to blastocyst vitrification on the outcome of frozen embryo transfer

Purpose

Vitrification significantly improves the rates of blastocyst survival and clinical pregnancy following frozen embryo transfer (FET). However, ice crystal formation during the freezing process reduces the blastocyst survival rate. Artificial shrinkage (AS) prior to blastocyst vitrification decreases the formation of ice crystals, increasing the blastocyst survival rate. The aim of this study was to identify an efficient AS method to improve blastocyst survival rates following vitrification.

Method

Use of the 29-gauge needle AS and Laser pulse AS methods prior to vitrification was compared in terms of the impacts on the rates of blastocyst survival in FET cycles, blastocyst hatching, clinical pregnancy after transfer, embryo implantation, abortion, gestational duration and birth weight.

Result

In total, 438 blastocysts in 219 cycles were thawed, resulting in survival of 407 (92.9 %). Of these, 213 cycles were transferred, resulting in 129 clinical pregnancies (60.6 %) and 140 successful births. There were no differences between the two methods in the rates of blastocyst survival, clinical pregnancy, embryo implantation and abortion. However, the 29-gauge needle AS group was associated with a significantly lower blastocyst hatching rate (83.6 % vs. 91.2 %), shorter average gestational duration (37.36 ± 2.34 vs. 38.06 ± 1.76), and higher premature birth rate (40.00 % vs. 21.15 %) compared with Laser pulse AS group.

Conclusion

No significant differences in the effectiveness of the two methods applied prior to blastocyst vitrification were observed before birth, while after birth, a significantly improved clinical outcome was obtained with laser pulse AS indicating that this is a more effective pre-processing method for blastocyst vitrification.     

冻融胚胎移植术用于补救卵胞浆内单精子注射治疗周期的临床价值

目的：探讨冻融胚胎移植在补救卵胞浆内单精子注射（ICSI）治疗周期中的临床价值。方法：回顾分析常规体外受精完全失败的306个周期,根据补救ICSI的时间不同分为6～8h补救ICSI组（A组）和18～20h补救ICSI组（B组）,其中行新鲜胚胎移植且有胚胎冷冻的分别记为AI组（n=108）和BI组（n=51）,随后行冻融胚胎移植的分别记为AⅡ组（n：74）和BⅡ组（n=46）,观察各组的妊娠结局。结果：A组正常受精率、卵裂率、优质胚胎率和临床妊娠率均明显高于B组（P〈0．05）;BⅡ组临床妊娠率和胚胎种植率明显高于BI组（32．61％VS11．76％,15．08％VS5．04％,P〈0．05）;AII组临床妊娠率和胚胎种植率较AI组高（44．59％VS34．26％,21．86％VS19．40％）,但无明显的统计学差异（P〉0．05）。结论：合理的补救时间是影响补救ICSI结局的关键因素,进一步的冻融胚胎移植可以改善补救ICSI治疗周期的妊娠结局。     

两种子宫内膜准备方案对冷冻胚胎移植妊娠结局影响的临床随机对照研究

目的：比较月经规律患者冷冻胚胎移植周期两种子宫内膜准备方案对妊娠结局的影响。方法：采用单盲、前瞻性临床随机对照研究方法,选取2010年1月到2012年2月于中山大学孙逸仙纪念医院生殖中心行冷冻胚胎移植的月经规律、年龄≤40岁,可利用冷冻胚胎数≥3的139例患者。将患者随机分为自然周期组（NC组,70例）和激素替代周期组（HRT组,69例）,其中NC组中62例、HRT组中56例完成了冷冻胚胎移植。比较两组患者的内膜厚度、ET日的E2水平、周期取消率、着床率、妊娠率、临床妊娠率、继续妊娠率和早期自然流产率。结果：NC组和HRT组的周期取消率分别为11.43%和18.84%,着床率为16.97%和15.89%,妊娠率为38.70%和35.71%,临床妊娠率为35.48%和30.36%,继续妊娠率为29.03%和28.57%,早期自然流产率为13.64%和5.88%,两组比较均无显著差异（P〉0.05）。NC组的内膜厚度[（10.16±2.30）mm]厚于HRT组[（8.84±1.26）mm],胚胎移植日的E2水平[（157.48±88.46）ng/L]低于HRT组[（273.57±284.76）ng/L],均有显著差异（P〈0.05）。结论：NC与HRT准备子宫内膜对冷冻胚胎移植的妊娠结局无影响。     

IVF/ICSI-ET技术中单卵双胎的发生及其相关因素

目的:探讨潜在的可能导致体外授精/卵胞质内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSIET)技术单卵双胎(MZT)高发生率的因素及其可能机制。方法:回顾性分析行IVF/ICSI-ET的2 885个周期,其中新鲜胚胎移植2 184个周期(常规IVF-ET周期1 473个,ICSI周期711个)和冻融胚胎移植(FET)周期701个,统计各个周期MZT妊娠的发生率,并分析可能影响其发生的相关因素。结果:在2 885个周期中临床妊娠1 102例,多胎妊娠的发生率为20.78%(229/1 102),其中MZT(双绒毛膜双胎及单绒毛膜双胎)妊娠20例,占临床妊娠的1.81%(20/1 102),占多胎的8.73%(20/229)。MZT中单卵双绒毛膜双胎5例,占MZT的25%(5/20),单卵单绒毛膜双胎15例,占MZT的75%(15/20)。ICSI中MZT的发生率为1.76%(5/284),高于常规IVF-ET周期(1.56%,9/575),但无统计学差异(P0.05)。FET组701个周期中临床妊娠243个周期,多胎34例,MZT 6例,占多胎发生率的17.65%(6/34);新鲜移植的2 184个周期中临床妊娠859个周期,多胎195例,MZT 14个周期,占多胎发生的7.18%(14/195),FET组和新鲜周期移植组间多胎率有统计学差异(P0.05)。囊胚移植204个周期中妊娠95例,多胎12例,MZT3例,占多胎发生的25%(3/12),非囊胚移植2 681个周期中妊娠1 007例,多胎217例,MZT 17例,占多胎发生的7.83%(17/217),囊胚移植组与非囊胚移植组间多胎率有统计学差异(P0.05)。冻融囊胚移植发生MZT的几率显著高于冻融非囊胚移植(P0.05)。IVF-ET中MZT妊娠与非MZT妊娠患者的年龄、促排卵方案、促排卵天数、促性腺激素(Gn)剂量与时间、优质胚胎数、移植胚胎数之间均无统计学差异(P0.05)。结论:MZT的发生率IVF/ICSI-ET明显高于自然妊娠;冻融囊胚移植明显高于冻融非囊胚移植,这可能与体外培养条件和冷冻复苏技术的应用有关,使其透明带硬度有所增加,致使囊胚在孵出时较易嵌顿,从而导致了MZT的发生。单纯显微授精技术不会明显增加MZT的发生率。     

Chemical removal of zona pellucida versus laser assisted hatching after repeated failures of assisted reproductive technology

Background and Aims:  To evaluate outcomes after zona pellucida removal by pronase or laser assisted hatching in women with repeated assisted reproduction failures.
Methods:  Of 389 procedures (January 2004 to November 2005), 203 control cycles had an intact zona, 116 cycles had chemical removal of the zona and 70 cycles had laser assisted hatching. Rates of pregnancy, implantation and abortion were compared, and pregnancy rate was secondarily evaluated for fresh or frozen-thawed blastocysts.
Results:  Pregnancy rates were 33.5% (68/203) for controls, 29.3% (34/116) for chemical removal and 30.0% (21/70) for laser. Implantation rates were 24.8% (68/274) for controls, 21.8% (34/156) for chemical removal and 30.0% (21/105) for laser. There were no significant differences among groups. Abortion rates were 15.6% (10/64) for controls, 13.9% (5/36) for chemical removal and 14.3% (3/21) for laser. No difference was observed by blastocyst type for control or laser assisted hatching cycles. In the chemical removal group, both pregnancy and implantation rates were higher for frozen-thawed blastocysts than for fresh blastocysts. (41.5% vs 13.2% and 30.7% vs 11.1%, respectively).
Conclusions:  Assisted hatching did not show a significant benefit. Chemical zona pellucida removal might increase pregnancy rates for frozen-thawed blastocysts. (Reprod Med Biol 2006; 5: 263–267)     

玻璃化冷冻法和程序化冷冻法对人卵裂期胚胎冷冻复苏效果的比较

目的:比较辅助生殖技术中玻璃化和程序化2种冷冻方法对卵裂期胚胎的冷冻复苏效果。方法:对265个玻璃化冷冻周期和276个程序化冷冻周期的相关资料进行回顾性统计学分析,比较冷冻胚胎复苏后的胚胎存活率、胚胎种植率和临床妊娠率等指标。结果:玻璃化冷冻复苏265个周期,解冻809个胚胎,存活710个(87.8%),移植259个周期,临床妊娠98个周期(37.8%),其中双胎妊娠26例,三胎妊娠3例。程序冷冻复苏276个周期,解冻968个胚胎,存活532个(55.0%),移植246个周期,临床妊娠70例(28.5%),其中双胎妊娠4例,三胎妊娠1例。玻璃化冷冻后的胚胎存活率和完整性胚胎存活率均显著高于程序化冷冻,复苏周期移植取消率显著低于程序化冷冻,而临床妊娠率则明显高于程序化冷冻,差异均有统计学意义(P<0.05)。但2种方法的胚胎种植率无统计学差异(P>0.05)。结论:玻璃化法能够较好地避免冷冻引起的损伤,适用于卵裂期胚胎的冷冻保存。